检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2012年第8期34卷 715-718页

作者：齐爱萍何超夏建霞张丹陈芳阎洁胡志安第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的探讨内嗅皮层注射Orexin-A对Sprague-dawley(SD)大鼠睡眠-觉醒周期以及对空间记忆的影响。方法选用健康成年雄性SD大鼠45只,体质量250～300 g,采用同步记录大鼠脑电和肌电活动,观察Orexin-A及Orexin1受体阻断剂SB-334867内侧内嗅皮... 详细信息

目的探讨内嗅皮层注射Orexin-A对Sprague-dawley(SD)大鼠睡眠-觉醒周期以及对空间记忆的影响。方法选用健康成年雄性SD大鼠45只,体质量250～300 g,采用同步记录大鼠脑电和肌电活动,观察Orexin-A及Orexin1受体阻断剂SB-334867内侧内嗅皮层微注射后大鼠睡眠-觉醒周期变化。采用T-迷宫交替选择次数,观察SB-334867内侧内嗅皮层微注射后大鼠T-迷宫选择正确率的变化。结果以人工脑脊液(ACSF)、二甲亚砜(DMSO)自身对照相比,分别给予大鼠内侧内嗅皮层双侧微注射Orexin A及SB-334867 0.5μl后3 h(11:00-12:00、12:00-13:00、13:00-14:00)觉醒周期时间无影响(P>0.05),给药后24 h觉醒周期时间也无显著差异(P>0.05)。微量注射药物后,Orexin-A(0.1 nmol/0.5μl)及SB-733467(6 mmol/0.5μl)在11:00-14:00 3 h内对觉醒时间、NREM时间及REM时间均无影响(P>0.05),即对3 h内(11:00-14:00)大鼠总睡眠觉醒时间无显著性差异(P>0.05)。与DMSO组比较大鼠内侧内嗅皮层双侧微注射SB-334867 0.5μl后,T-迷宫交替选择正确次数明显减少,正确率下降,有显著性差异(P<0.001)。结论内侧内嗅皮层Orexin系统的支配可能参与了空间记忆,而不参与睡眠-觉醒周期调节。

关键词： Orexin—A 内侧内嗅皮层空间记忆

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腺苷对小鼠前额叶皮质锥体细胞超极化激活阳离子电流的影响

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第三军医大学学报 2008年第10期30卷 903-905页

作者：闫洁陈芳贾晓军李博谌小维胡志安第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的应用膜片钳全细胞记录技术,探讨腺苷对小鼠前额叶皮质锥体细胞的超极化激活阳离子电流(hyper-polarization-activated cation current,IH)的影响。方法制备小鼠前额叶皮质脑片,在膜片钳全细胞记录模式下,观察腺苷对锥体细胞IH的调... 详细信息

目的应用膜片钳全细胞记录技术,探讨腺苷对小鼠前额叶皮质锥体细胞的超极化激活阳离子电流(hyper-polarization-activated cation current,IH)的影响。方法制备小鼠前额叶皮质脑片,在膜片钳全细胞记录模式下,观察腺苷对锥体细胞IH的调节作用。结果记录的43个细胞中有41个观察到IH;腺苷能够使该电流幅度减小,并使I-V曲线显著下移(P<0.01,P<0.05),此效应呈剂量依赖性(P<0.05)。结论腺苷具有抑制前额叶皮质锥体细胞IH的作用。

关键词：前额叶皮质腺苷超极化激活阳离子电流

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P物质对脊髓星形胶质细胞活化和炎性因子IL-1β、TNF-α分泌的影响

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第三军医大学学报 2006年第7期28卷 681-684页

作者：张恒周占松刘丽梅杨忠宋波第三军医大学西南医院全军泌尿外科中心第三军医大学西南医院病理学研究所第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的探讨P物质（P substance,SP）对脊髓星形胶质细胞活化和分泌炎性因子TNF-α、IL-1β的影响.方法体外培养脊髓星形胶质细胞,施加SP刺激后分别应用RT-PCR和Western blot测定胶质原纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFA... 详细信息

目的探讨P物质（P substance,SP）对脊髓星形胶质细胞活化和分泌炎性因子TNF-α、IL-1β的影响.方法体外培养脊髓星形胶质细胞,施加SP刺激后分别应用RT-PCR和Western blot测定胶质原纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）mRNA和蛋白的表达,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）分泌的变化.结果10^-7mol/L SP的作用下,星形胶质细胞GFAP mRNA和蛋白的表达在0～72 h逐渐升高,与正常对照组相比差异显著（P＜0.01）;SP在10^-9～10^-6mol/L浓度范围内呈浓度依赖性促进星形胶质细胞分泌TNF-α、IL-1β（12 h）,与对照组有显著差异（P＜0.01,P＜0.05）,但IL-1β在SP 10^-6mol/L作用组下降,与对照组无明显差异（P＞0.05）.结论 SP刺激下脊髓星形胶质细胞明显活化,分泌炎性致痛因子TNF-α、IL-1β增多,表明周围慢性疼痛可能通过致痛递质SP介导下星形胶质细胞的活化引起脊髓中枢神经炎性痛.

关键词：星形胶质细胞慢性疼痛 SP IL-1β TNF-α

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脉冲电磁场诱导小鼠胚胎干细胞向成骨细胞分化

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第三军医大学学报 2009年第9期31卷 772-775页

作者：曹炜鹏周强徐海伟吴雪晖刘涌宋磊唐军杨丽第三军医大学西南医院骨科全军矫形外科中心重庆400038 第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的观察脉冲电磁场对小鼠胚胎干细胞向成骨细胞分化的影响。方法将小鼠4d龄胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)衍生的胚胎体单细胞按5×104ml-1接种到细胞培养板,在DMEM基础培养液中使胚胎体单细胞贴壁培养。于第14～21天时,... 详细信息

目的观察脉冲电磁场对小鼠胚胎干细胞向成骨细胞分化的影响。方法将小鼠4d龄胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)衍生的胚胎体单细胞按5×104ml-1接种到细胞培养板,在DMEM基础培养液中使胚胎体单细胞贴壁培养。于第14～21天时,分别给予脉冲电磁场、化学诱导剂以及联合刺激。采用茜素红染色、骨钙素免疫组织化学染色成骨分化关键因子Osterix和Cbfa-1/Runx-2的相对定量RT-PCR检测等方法观测成骨分化情况。结果茜素红染色和RT-PCR结果均显示:脉冲电磁场组、化学诱导组以及联合培养组的成骨诱导效果均比空白对照组显著增加,其中又以联合培养组成骨诱导效果最明显。骨钙素免疫组化染色也显示:联合培养组中骨钙素分泌最多。结论脉冲电磁场可以促进小鼠胚胎干细胞向成骨细胞分化,而且脉冲电磁场和常规化学诱导剂联合应用会产生协同效应,其成骨诱导效果优于两者单独应用。

关键词：脉冲电磁场胚胎干细胞成骨细胞定向诱导骨组织工程

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脑片盲法全细胞记录技术的应用

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第三军医大学学报 1999年第12期21卷 933-935页

作者：胡志安李思本黎海蒂第三军医大学基础医学部生理学教研室重庆400038 南京铁道医学院科学研究所南京200037

目的：阐明脑片全细胞记录技术的原理，介绍获得满意封接的条件和程序。方法：采用国内数据采样分析系统，进行微电极定位。常规膜片钳方法进行全细胞记录。结果：在脑片上成功记录出双向的全细胞电流。突触前施加电刺激，可在突触后记... 详细信息

目的：阐明脑片全细胞记录技术的原理，介绍获得满意封接的条件和程序。方法：采用国内数据采样分析系统，进行微电极定位。常规膜片钳方法进行全细胞记录。结果：在脑片上成功记录出双向的全细胞电流。突触前施加电刺激，可在突触后记录出兴奋性电流。结论：通过提高微电极定位准确率，可有效增加盲法技术的封接成功率。

关键词：脑片电生理记录技术全细胞记录技术盲法

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脉冲微交流电刺激促进体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌分化

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第三军医大学学报 2008年第5期30卷 410-413页

作者：姚青宋治远马显光第三军医大学西南医院心血管内科重庆市介入心脏病学研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部物理学教研室重庆400038

目的探讨脉冲微交流电刺激对体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的作用。方法常规方法分离培养鼠骨髓间充质干细胞,取P3细胞进行5-氮胞苷诱导,诱导后以是否给予脉冲微交流电刺激分为两组,观察各组细胞生长情况、细胞形态学... 详细信息

目的探讨脉冲微交流电刺激对体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的作用。方法常规方法分离培养鼠骨髓间充质干细胞,取P3细胞进行5-氮胞苷诱导,诱导后以是否给予脉冲微交流电刺激分为两组,观察各组细胞生长情况、细胞形态学及超微结构改变,免疫细胞化学方法检测α-actin、cTnT、Cx43的表达。结果脉冲微交流电刺激组细胞较非刺激组生长良好,更早出现心肌样细胞改变,诱导后1周可观察到胞内肌丝形成及α-actin、cTnT、Cx43的表达,且在随后的相同时相点(诱导后2、3、4周),α-actin、cTnT、Cx43表达水平明显高于非刺激组,胞内肌丝也由杂乱分布逐渐成束,部分细胞可观察到肌节。结论模拟心脏跳动的脉冲微交流电刺激有助于经5-氮胞苷诱导的骨髓间充质干细胞在体外分化为功能完备的心肌样细胞。

关键词：电刺激骨髓间充质干细胞心肌样细胞

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过表达长链非编码RNA H19促进miR-124-3p表达抑制肝癌细胞增殖

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第三军医大学学报 2016年第6期38卷 554-559页

作者：吕细林黄刚肖曼刘孟刚陈玥琦张楠张艳何凤田第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038 海南医学院理学院生物化学与分子生物学教研室海口570102 第三军医大学大坪医院野战外科研究所肝胆外科重庆400042 第三军医大学学员旅15营重庆400038

目的探讨长链非编码RNA H19(long non-coding RNA H19,lncRNA H19)对miR-124-3p表达的影响及在肝癌细胞增殖中的作用。方法 Real-time PCR检测肝癌细胞系及临床标本中lncRNA H19和miR-124-3p的表达;在肝癌细胞系Hep G2和SMMC7721中过表达lncRNA H19,Real-time PCR检测miR-124-3p及其靶基因cyclin D1的表达;Western blot检测cyclin D1蛋白表达水平;CCK-8法检测lncRNA H19对细胞增殖的影响;过表达lncRNA H19同时加入antagomiR-124-3p后,检测miR-124-3p及其靶基因表达情况及细胞增殖情况。结果 lncRNA H19和miR-124-3p在肝癌细胞系及肝癌组织中均低表达(P<0.05);过表达lncRNA H19后miR-124-3p表达显著增加(P<0.05),miR-124-3p的靶基因cyclin D1蛋白和mRNA表达明显下降(P<0.05),细胞增殖受到抑制(P<0.05);过表达lncRNA H19同时干扰miR-124-3p后,细胞增殖抑制作用减弱(P<0.05)。结论长链非编码RNA H19通过促进miR-124-3p表达,进而抑制其靶基因cyclin D1表达而抑制肝癌细胞增殖。

关键词： lncRNA H19 miR-124-3p cyclin D1 肝癌细胞增殖

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利用DNA免疫技术制备抗登革2型病毒NS2B蛋白多克隆抗体

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第三军医大学学报 2010年第4期32卷 327-330页

作者：刘丽梅陈宗涛高娜田衍平陈炜张俊磊王嘉丽安静第三军医大学西南医院病理学研究所重庆400038 第三军医大学基础医学部微生物学教研室、重庆市微生物工程实验室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室、重庆市神经科学研究所重庆400038 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染... 详细信息

目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染Vero细胞,检测目标蛋白的表达。用该表达质粒免疫BALB/c小鼠,制备抗NS2B抗血清。结果成功构建真核表达重组质粒pCAGGS-P7/NS2B,该重组质粒具有良好的免疫原性,免疫小鼠后所获的抗血清,抗体效价达1∶3200,Western blot和间接免疫荧光证实抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。结论通过DNA免疫所制备小鼠抗DV2-NS2B抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。

关键词：登革热病毒病毒非结构蛋白质类 NS2B 小鼠近交BALBC

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不同分化程度胶质瘤细胞增殖和凋亡相关差异表达基因的鉴定(英文)

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中国临床康复 2006年第24期10卷 170-172,F0003页

作者：郭德玉杨忠曹健王志成解放军第三军医大学西南医院病理学研究所重庆市400038 解放军第三军医大学基础医学部神经生物学教研室重庆市400038 解放军第三军医大学新桥医院药剂科重庆市400038

背景:胶质瘤的发生、发展不仅涉及细胞周期调控基因,也涉及到细胞侵袭、转移和细胞凋亡的调节基因。目的:用基因芯片技术分析不同分化程度的胶质瘤细胞增殖和凋亡相关的差异表达基因,为进一步研究胶质瘤细胞的增殖和凋亡机制奠定基础。... 详细信息

背景:胶质瘤的发生、发展不仅涉及细胞周期调控基因,也涉及到细胞侵袭、转移和细胞凋亡的调节基因。目的:用基因芯片技术分析不同分化程度的胶质瘤细胞增殖和凋亡相关的差异表达基因,为进一步研究胶质瘤细胞的增殖和凋亡机制奠定基础。设计:开放性实验。单位:解放军第三军医大学,西南医院病理学研究所,基础医学部神经生物学教研室,新桥医院药剂科。材料:人脑恶性胶质瘤细胞系CHG-5(WHO分级为Ⅱ级)由本实验室建立并保存培养;SHG-44(WHO分级为Ⅳ级),由苏州医学院附属二院脑肿瘤研究室提供,小牛血清由杭州四季青生物材料研究所生产并提供。实验中还采用了RPMI-1640培养基(Gibco)、Trizol试剂盒(Gibco-BRL)、RNAsecureTM溶液(Ambion,Austin,Texas)、光度适应计(Eppendorf,Hamburg,Germany)。基因芯片含9,984个人类cDNA片段,由香港城市大学准备和提供(UniGEMV2cloneset已知的基因和ESTs购自Incyte公司),SuperscriptⅡ反转录酶由Gibco-BRL公司提供,荧光染料Cy3&Cy5为AmershamPharmacia公司产品。方法:实验于2001/2003在重庆第三军医大学和香港城市大学完成。用Trizol试剂盒抽提总RNA,用SuperscriptⅡ反转录酶进行反转录聚合酶链反应,并用荧光染料Cy3&Cy5标记cDNA产物,然后进行芯片杂交,检测人胶质瘤细胞系CHG-5和SHG-44瘤细胞基因表达的差异,特别是与细胞增殖和凋亡相关基因表达的差异,并用Northernblot杂交来验证芯片结果。主要观察指标:不同分化程度的人胶质瘤细胞基因表达的差异;Northern杂交结果与相应基因芯片结果的比较。结果:①与CHG-5相比,SHG-44细胞中检测到了有120个基因表达明显上调和22个基因表达明显下调,这些差异表达基因的种类很多,其中凋亡类相关基因共6个,上调基因有3个,下调基因3个;细胞周期与增殖类相关基因共12个,上调基因有5个,下调基因7个。②芯片结果进一步得到Northernblot杂交结果的支持。结论:初步揭示了胶质瘤进展的差异表达基因,特别是与细胞增殖和凋亡相关的差异表达基因。

关键词：肿瘤细胞,培养的基因表达脱噬作用遗传学技术

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26例健康汉族人线粒体DNA region V 9 bp缺失多态性的检测

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第三军医大学学报 2007年第3期29卷 191-192页

作者：罗勇军高文祥高钰琪陈建谭小玲刘昕第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室全军高原医学重点实验室重庆400038 第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

目的测定中国汉族人线粒体DNAregionV9bp缺失多态性频率。方法抽取26例健康无血缘关系汉族人静脉血,提取总DNA,扩增线粒体DNAregionV,并测序,测序结果与剑桥修正序列比对。结果中国汉族人线粒体DNAregionV9bp缺失多态性出现频率为19.23... 详细信息

目的测定中国汉族人线粒体DNAregionV9bp缺失多态性频率。方法抽取26例健康无血缘关系汉族人静脉血,提取总DNA,扩增线粒体DNAregionV,并测序,测序结果与剑桥修正序列比对。结果中国汉族人线粒体DNAregionV9bp缺失多态性出现频率为19.23%。结论汉族人线粒体DNAregionV9bp缺失多态性出现频率高于文献报道的维吾尔族人和蒙古族人该多态性出现频率。

关键词：中国汉族人线粒体DNA 多态性缺失

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