检索结果-内蒙古大学图书馆

成都医学院学报 2009年第2期4卷 86-90页

作者：潘渠胡福泉陈恬邱岳王广科李晋川成都医学院病原教研室成都610083 第三军医大学基础部微生物学教研室重庆400038

目的在大肠杆菌中诱导表达以嗜酸乳杆菌克隆β-半乳糖苷酶基因lacZ,为研究其酶学特性做准备。方法从嗜酸乳杆菌ATCC4356中克隆lacZ基因,并构建表达载体pET22b-lacZ-H、pQE31-H-lacZ和pQE31-lacZ,然后在大肠杆菌中诱导表达,并测定表达产... 详细信息

目的在大肠杆菌中诱导表达以嗜酸乳杆菌克隆β-半乳糖苷酶基因lacZ,为研究其酶学特性做准备。方法从嗜酸乳杆菌ATCC4356中克隆lacZ基因,并构建表达载体pET22b-lacZ-H、pQE31-H-lacZ和pQE31-lacZ,然后在大肠杆菌中诱导表达,并测定表达产物的β-半乳糖苷酶活性。结果无标签的重组嗜酸乳杆菌β-半乳糖苷酶LacZ获得了功能性表达,表达量可达2.28kU/L.而融合His-Tag的重组嗜酸乳杆菌LacZ却失去了β-半乳糖苷酶活性,即使复性也不能恢复。结论克隆表达的成功为该酶的酶学性质研究和可能的应用打下了基础。

关键词：嗜酸乳杆菌 β-半乳糖苷酶克隆表达 His-Tag 复性

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2007-2008年北京地区CA16VP1区系统进化分析

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第三军医大学学报 2009年第23期31卷 2342-2346页

作者：王娟罗珍范东瀛高娜朱俊萍安静首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069 首都医科大学附属北京儿童医院皮肤科北京100045 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的了解2007-2008年北京地区柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)流行情况及其种系进化规律和基因分型。方法收集北京地区2007-2008年133例手足口病病例临床标本,从中筛选CA16毒株,扩增部分毒株VP1区并进行序列测定和分析。结... 详细信息

目的了解2007-2008年北京地区柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)流行情况及其种系进化规律和基因分型。方法收集北京地区2007-2008年133例手足口病病例临床标本,从中筛选CA16毒株,扩增部分毒株VP1区并进行序列测定和分析。结果共筛选得到39例45份CA16阳性标本,测定其中16株病毒的VP1区核苷酸序列,其同源性为91.43%～98.65%,氨基酸同源性为97.98%～100%。该16株病毒与GenBank中选取的24株CA16参考株的核苷酸同源性为78.13%～98.65%,氨基酸同源性为89.9%～100%。16株北京分离株中的9株与近年多数中国大陆分离株形成进化树上亲缘关系较近的一群,其余7株与我国台湾及周边国家的一系列分离株亲缘关系较近。结论CA16为北京地区手足口病的主要致病原之一,本地区毒株同源性较高,同GenBank中24株CA16参比毒株序列进行系统进化分析显示其属于B基因群,16株北京分离株在系统进化树上有分别归属于两支的趋势。

关键词：柯萨奇病毒A组16型手足口病系统进化分析

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一个植物乳杆菌隐蔽质粒的测序和注释

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成都医学院学报 2009年第1期4卷 17-20页

作者：潘渠胡袁邓林雷舜胡晓梅胡福泉第三军医大学基础部微生物学教研室重庆400038 成都医学院病原教研室成都610083 第三军医大学 2005级生物技术班重庆400038

在植物乳杆菌(Lactobacillus plantarumCICC 6002)中发现了1个隐蔽质粒(pLP2111),并将其克隆到pUC 18质粒上进行测序。序列分析表明pLP2111大小为2 111 bp;仅有1个ORF,编码1个37.0 kDa的复制蛋白;有1个17 bp的重复序列重复了13次。BLAS... 详细信息

在植物乳杆菌(Lactobacillus plantarumCICC 6002)中发现了1个隐蔽质粒(pLP2111),并将其克隆到pUC 18质粒上进行测序。序列分析表明pLP2111大小为2 111 bp;仅有1个ORF,编码1个37.0 kDa的复制蛋白;有1个17 bp的重复序列重复了13次。BLAST结果显示pLp 2111和植物乳杆菌CCM1904菌株的pLP1质粒相似性最高,为99%,pLP2111比pLP1大18 ***2111可能构建为良好的乳杆菌或乳球菌异源蛋白表达载体。

关键词：植物乳杆菌隐蔽质粒测序注释

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结核抗原特异性CD4^＋中央型记忆T细胞的检测及分布特性研究

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第三军医大学学报 2009年第16期31卷 1549-1551页

作者：牛翰婕程小星王心静曹志红董梅佟爱华第三军医大学基础医学部微生物学教研室、重庆市微生物工程实验室重庆400038 解放军总医院第二附属医院结核病研究室北京100091 解放军总医院第二附属医院检验科北京100091

目的比较活动期肺结核患者和纯蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)试验阳性健康人记忆T细胞的产生和分布特性。方法取乙二胺四乙酸(ethylene diaminete traacetic acid,EDTA)抗凝静脉血,Ficoll进行密度梯度离心获取PBMCs。采... 详细信息

目的比较活动期肺结核患者和纯蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)试验阳性健康人记忆T细胞的产生和分布特性。方法取乙二胺四乙酸(ethylene diaminete traacetic acid,EDTA)抗凝静脉血,Ficoll进行密度梯度离心获取PBMCs。采用卡介苗刺激后,通过CD4、CD154、CCR7、CD45RA4种抗体共染色,用流式细胞仪检测结核抗原特异性CD4+记忆T细胞。结果以CD4+CD154+双阳性区设门,研究结核抗原特异性CD4+记忆T细胞,结果显示,肺结核患者CD4+CD154+CD45RA-CCR7+中央型T淋巴细胞亚群分布频率显著降低(P<0.05),CD4+CD154+CD45RA+CCR7+初始T细胞亚群的比例明显增高(P<0.05)。结论肺结核患者CD4+中央型记忆T淋巴细胞亚群的产生存在异常,可能与免疫功能低下和结核病发病密切相关。

关键词：结核免疫 CD4^+T细胞记忆T细胞

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利用DNA免疫制备登革2型病毒NS2B多克隆抗体

利用DNA免疫制备登革2型病毒NS2B多克隆抗体

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全军免疫学第七届学术交流会暨免疫学新进展主题论坛

作者：刘丽梅陈宗涛高娜田衍平陈炜张俊磊王嘉丽安静第三军医大学西南医院病理学研究所第三军医大学基础部医学微生物教研室第三军医大学基础部组织胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的：构建登革2型病毒(DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。意义为研究NS2B在登革病毒感染中的作用提供研究工具。方法：PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P... 详细信息

目的：构建登革2型病毒(DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。意义为研究NS2B在登革病毒感染中的作用提供研究工具。方法：PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染Vero细胞,检测目标蛋白的表达。用该表达质粒免疫BALB/c小鼠,制备抗NS2B抗血清。结果：成功构建真核表达重组质粒pCAGGS-P7/NS2B,该重组质粒具有良好的免疫原性,免疫小鼠后所获的抗血清,抗体效价达1∶3200,Western blot和间接免疫荧光证实抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。结论：本研究通过DNA免疫所制备小鼠抗DV2-NS2B抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白,为进一步研究DV感染过程中NS2B的作用奠定了基础。

关键词：登革病毒 NS2B DNA免疫多克隆抗体

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革兰阴性菌基因敲除载体的构建及其应用

革兰阴性菌基因敲除载体的构建及其应用

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重庆微生物学会第九届会员代表大会暨学术年会

作者：王景穆媛媛黎庶陈志瑾熊坤丛延广第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室遵义医学院研究生院

目的构建1个适用于革兰阴性菌的精确基因敲除载体并证明其有效性。方法构建的载体主要包括以下成分:π蛋白依赖性复制起点ori R6K;接合转移基因mob,使载体可以通过简单的接合方式实现转移;多克隆位点序列:EcoRⅠ-XbaⅠ-ApaⅠ-SfiⅠ-Sac... 详细信息

目的构建1个适用于革兰阴性菌的精确基因敲除载体并证明其有效性。方法构建的载体主要包括以下成分:π蛋白依赖性复制起点ori R6K;接合转移基因mob,使载体可以通过简单的接合方式实现转移;多克隆位点序列:EcoRⅠ-XbaⅠ-ApaⅠ-SfiⅠ-SacⅠ-NotⅠ-SpeⅠ-NdeⅠ-SacⅡ-BglⅡ;反向选择标志SacB;正向选择标志卡那霉素抗性片段。载体构建完成后,采用该载体对弗氏枸橼酸杆菌的yeeZ基因进行框架内敲除,以验证其有效性。结果成功构建了敲除载体,命名为pYG4,并对yeeZ基因进行了框架内精确敲除获得突变株。结论本研究构建的载体适用于对革兰阴性菌进行目的基因的精确敲除,将在细菌基因功能研究中得到广泛的应用。

关键词：敲除载体构建突变株基因功能

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医学微生物学多媒体教学的几点体会

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中国科教创新导刊 2009年第7期 139-139页

作者：张俊磊韩俊峰蹇锐陈炜第三军医大学基础医学部微生物学教研室第三军医大学基础医学部微生物学免疫学教研室重庆400038

多媒体教学作为一种新型的教学手段有传统教学手段不可比拟的优越性,对提高医学微生物学课堂教学质量与教师备课效率起着积极作用。但在教学过程中,必须遵循教学规律,充分发挥教师的主导作用和学生的主体作用,使多媒体更好地为教学服务。

关键词：医学微生物学多媒体教学多媒体课件

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如何培养青年科研工作者的创新能力

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中国科教创新导刊 2009年第17期 78-78页

作者：蹇锐王嘉丽胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室

创新是科学研究的灵魂,年轻科研工作者是创新的源泉和主体。如何尽快地培养年轻科研工作者的创新意识和精神,提升他们的创新能力则事关科学研究持续健康的发展。

关键词：科研课题年轻科研工作者创新

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医学教育中的全程无菌观念培养

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局解手术学杂志 2009年第1期18卷 51-51页

作者：陈炜肖卫东安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 第三军医大学附属新桥医院普通外科重庆400037 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

良好的无菌观念和无菌操作技术是合格的医务工作者必须具备的基本素质,然而随着各种新型消毒剂及先进仪器设备的应用,部分医务工作者出现了对消毒用品的依赖和盲目信任,忽视了无菌观念的培养及坚持,违反无菌操作规范的事件频频出现。这... 详细信息

良好的无菌观念和无菌操作技术是合格的医务工作者必须具备的基本素质,然而随着各种新型消毒剂及先进仪器设备的应用,部分医务工作者出现了对消毒用品的依赖和盲目信任,忽视了无菌观念的培养及坚持,违反无菌操作规范的事件频频出现。这就要求我们从医学生入校开始至其踏人工作岗位,进行包括基础教育阶段、实习阶段、工作阶段的全程无菌观念的培养、灌输与强化。[第一段]

关键词：无菌技术医学教学

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一种新型教学法在八年制医学生普通外科见习的应用

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局解手术学杂志 2009年第1期18卷 49-49页

作者：肖卫东陈炜杨桦第三军医大学附属新桥医院普通外科重庆400038 第三军医大学基础医学部医学微生物学教研室重庆400038

八年制医学教育与其它类型的高等教育相比,具有专业化程度高、实践性强、成本昂贵、培养周期长、社会期望值高等特点。我科在八年制临床见习中,以培养高年资住院医师为目标,制定了以症状为出发点,以疾病为导向的“空降兵”教学法,取得... 详细信息

八年制医学教育与其它类型的高等教育相比,具有专业化程度高、实践性强、成本昂贵、培养周期长、社会期望值高等特点。我科在八年制临床见习中,以培养高年资住院医师为目标,制定了以症状为出发点,以疾病为导向的“空降兵”教学法,取得了较好的教学效果。[第一段]

关键词：普通外科教学法八年制教学

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