检索结果-内蒙古大学图书馆

论医学院校实行本科生导师制的重要性

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时代教育 2008年第10期 154-154页

作者：韩俊峰张俊磊徐小峰第三军医大学基础医学部免疫学教研室第三军医大学基础医学部微生物学教研室第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室

当今我国医学教育在培养医学生的科研能力方面存在不足,影响了学生的综合素质,也一定程度上限制了他们的发展。鉴于此,在医学院推行本科生导师制可能有助于解决医学本科生教育中存在的系列问题。

关键词：医学院校本科生导师制

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转座突变株插入位点侧翼序列的研究

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免疫学杂志 2007年第5期23卷 518-520页

作者：陈志瑾朱军民饶贤才丛延广第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

目的比较用于扩增弗氏枸橼酸杆菌转座突变株插入位点侧翼序列的3种PCR方法,以选择最有效、最简便的扩增方法进行转座突变基因的分析。方法分别采用step-outPCR、随机引物巢式PCR和反向PCR对弗氏枸橼酸杆菌转座突变株基因组中插入位点的... 详细信息

目的比较用于扩增弗氏枸橼酸杆菌转座突变株插入位点侧翼序列的3种PCR方法,以选择最有效、最简便的扩增方法进行转座突变基因的分析。方法分别采用step-outPCR、随机引物巢式PCR和反向PCR对弗氏枸橼酸杆菌转座突变株基因组中插入位点的侧翼序列进行扩增,并取产物进行直接测序,以对方法的有效性进行比较。结果随机引物巢式PCR方法简便,但扩增产物的条带较多,不利于后续的测序操作。Step-outPCR产物中非特异性片段更多,方法不可取,反向PCR法最为简便有效。结论反向PCR法适宜用于扩增弗氏枸橼酸杆菌转座突变株插入位点的侧翼序列,可以对突变基因进行定位。

关键词：转座突变株 PCR 弗氏枸橼酸杆菌

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猪链球菌2型溶血素sly基因的表达及其产物的纯化和活性研究

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中华流行病学杂志 2007年第12期28卷 1198-1202页

作者：刘丽娜胡福泉朱军民赵岩潘渠李明唐家琪第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 南京军区军事医学研究所

目的克隆并表达猪链球菌2型(SS2)溶血素基因(sly),为筛选SS2疫苗保护性抗原奠定基础。方法用PCR方法从SS2临床分离株05ZYH33的基因组DNA中扩增出溶血素基因片段,将目的基因插入表达载体pET-30b(+)中,构建重组表达载体pET30b-sly。重组... 详细信息

目的克隆并表达猪链球菌2型(SS2)溶血素基因(sly),为筛选SS2疫苗保护性抗原奠定基础。方法用PCR方法从SS2临床分离株05ZYH33的基因组DNA中扩增出溶血素基因片段,将目的基因插入表达载体pET-30b(+)中,构建重组表达载体pET30b-sly。重组载体经限制性内切酶酶切和DNA测序鉴定后,转化大肠埃希菌(*** Rosetta)。IPTG诱导表达,镍离子亲和层析纯化重组蛋白,鉴定目的蛋白的免疫学活性以及溶血活性。结果PCR扩增的sly基因长度约为1500 bp,经测序分析,插入载体的sly基因序列准确并保持了正确的读框。经IPTG诱导的目的蛋白表达量约占总蛋白的30%,亲和层析纯化后,蛋白纯度达80%以上。Western blot检测证实该蛋白能与感染SS2的人血清发生特异性结合。溶血试验表明重组蛋白溶血素能使猪红细胞发生溶解,溶血价为256。结论成功构建了表达载体pET30b-sly,该载体可在大肠埃希菌中表达,表达蛋白具有免疫反应原性及溶血活性。

关键词：猪链球菌2型 sly基因表达活性研究

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重组人可溶性补体受体1型SCR15-18片段表达纯化及生物活性鉴定

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第三军医大学学报 2007年第10期29卷 892-895页

作者：谭兵张德纯汪正清第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室

目的获得高表达、高纯度和高活性的可溶性补体受体1型SCR15-18(sCR1-SCR15-18)蛋白。方法重组原核表达载体pET32a-sCR1-SCR15-18在大肠杆菌BL21中经不同IPTG浓度、诱导时间和温度诱导表达,超声破菌,提取包含体,经Ni2+-NTA亲和层析后,选... 详细信息

目的获得高表达、高纯度和高活性的可溶性补体受体1型SCR15-18(sCR1-SCR15-18)蛋白。方法重组原核表达载体pET32a-sCR1-SCR15-18在大肠杆菌BL21中经不同IPTG浓度、诱导时间和温度诱导表达,超声破菌,提取包含体,经Ni2+-NTA亲和层析后,选择不同氧化还原条件进行复性,进而检测其生物学活性。结果得到了有较高表达量、较高纯度和较好生物学活性的sCR1-SCR-15-18蛋白。结论优化了sCR1-SCR15-18蛋白的表达、纯化和复性的参数,所获结果为进一步动物体内保护实验研究奠定了基础。

关键词：可溶性补体1型受体表达包含体纯化复性

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宏基因组学:基本策略及在医学研究领域中的可能应用

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生命的化学 2007年第1期27卷 10-11页

作者：丛延广胡福泉解放军第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038

宏基因组学(metagenomics)的提出是分子生物学领域的一个重要进展。在自然生境中有大量不可培养微生物的存在,无法通过培养法进行研究,而宏基因组学的策略则突破了这一束缚。宏基因组学是从生境中取得全部微生物的基因组,并进行系统研... 详细信息

宏基因组学(metagenomics)的提出是分子生物学领域的一个重要进展。在自然生境中有大量不可培养微生物的存在,无法通过培养法进行研究,而宏基因组学的策略则突破了这一束缚。宏基因组学是从生境中取得全部微生物的基因组,并进行系统研究的方法。该文介绍宏基因组学的基本情况,并着重探讨其在医学研究领域中的可能应用。

关键词：宏基因组学宏基因组医学研究微生物

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痢疾杆菌侵袭HeLa细胞基因表达谱的研究

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微生物学报 2007年第5期47卷 810-816页

作者：黄留玉史兆兴袁静胡福泉军事医学科学院疾病预防控制研究所北京100071 第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038

采用cDNA微阵列技术检测了HeLa细胞被痢疾杆菌侵袭1h和3h后的基因表达变化,共发现2倍以上差异表达基因752个,上调基因有509个,下调基因有306个,并初步推测HeLa细胞通过激活某些信号通路,诱导表达多个基因,产生整体的细胞效应,以对抗痢... 详细信息

采用cDNA微阵列技术检测了HeLa细胞被痢疾杆菌侵袭1h和3h后的基因表达变化,共发现2倍以上差异表达基因752个,上调基因有509个,下调基因有306个,并初步推测HeLa细胞通过激活某些信号通路,诱导表达多个基因,产生整体的细胞效应,以对抗痢疾杆菌的侵袭。对显著差异表达的两个基因TNFR 1B和ERBB2,在痢疾杆菌侵袭HeLa细胞1h和3h后的表达量经荧光实时定量PCR验证,确定这两个基因的确在痢疾杆菌侵袭期间高表达,它们在细胞对痢疾杆菌2457T侵袭反应中起重要的作用。这些结果促进了对痢疾杆菌分子致病机理的认识,也为形成预防和治疗痢疾的策略提供了理论基础。

关键词：痢疾杆菌福氏2a HeLa细胞 cDNA微阵列技术荧光实时定量PCR 信号通路

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肠出血性大肠杆菌O157∶H7 TccP基因克隆、表达及其抗原性鉴定

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中国人兽共患病学报 2007年第4期23卷 319-322页

作者：杨琴顾江毛旭虎邹全明宋方洲丁红雷王庆旭重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫教研室

目的克隆表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7 Tir细胞骨架偶联蛋白(TccP)基因,并研究其抗原性。方法采用PCR法自EHEC O157∶H7 Sakai菌株基因组扩增TccP基因,构建TccP原核表达载体并在大肠杆菌中诱导表达。表达产物经初步纯化后,免疫... 详细信息

目的克隆表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7 Tir细胞骨架偶联蛋白(TccP)基因,并研究其抗原性。方法采用PCR法自EHEC O157∶H7 Sakai菌株基因组扩增TccP基因,构建TccP原核表达载体并在大肠杆菌中诱导表达。表达产物经初步纯化后,免疫新西兰白兔,制备兔抗TccP多克隆抗体。抗体效价及特异性用ELISA法和Western blotting法进行测定和分析。结果从EHEC O157∶H7 Sakai菌株中克隆出了1014bp的TccP基因。构建的重组质粒pET28a-TccP在大肠杆菌中获得了高效表达;以TccP免疫家兔获得了高效价多克隆抗体,Western blotting分析此抗体能与TccP发生特异性抗原抗体反应。结论在大肠杆菌中成功克隆表达了TccP基因,所获TccP具有良好的抗原性,为进一步研究TccP在EHEC O157∶H7致病机制中的作用奠定基础。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 Tir-细胞骨架偶联蛋白基因表达多克隆抗体

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登革病毒及其E蛋白和NS3蛋白对HepG2细胞中GSH水平的影响

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第三军医大学学报 2007年第24期29卷 2311-2314页

作者：江雯田衍平刘丽梅陈炜陈宗涛高娜徐小峰安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室西南医院病理学研究所重庆400038 第三军医大学西南医院病理学研究所

目的通过对登革病毒感染后不同时相点以及稳定表达登革病毒E蛋白和NS3蛋白的HepG2细胞中GSH水平的测定,确定登革病毒感染后细胞内GSH水平的变化规律,以及登革病毒蛋白的表达对HepG2细胞内GSH水平的影响。方法用分光光度计比色定量检测... 详细信息

目的通过对登革病毒感染后不同时相点以及稳定表达登革病毒E蛋白和NS3蛋白的HepG2细胞中GSH水平的测定,确定登革病毒感染后细胞内GSH水平的变化规律,以及登革病毒蛋白的表达对HepG2细胞内GSH水平的影响。方法用分光光度计比色定量检测登革病毒2型感染后不同时相点以及稳定表达登革病毒E蛋白和NS3蛋白的HepG2细胞中GSH水平的变化。结果总体来说,登革病毒2型感染后48h内,HepG2细胞内GSH的水平呈下降趋势,其中以感染后的30min、2h和24h细胞内GSH变化最为明显,与模拟感染组和其他时相点比较,均有显著差异;而稳定表达登革病毒E蛋白和NS3蛋白的HepG2细胞内GSH的水平也均较空质粒对照组降低。结论登革病毒2型感染HepG2细胞,可使细胞内的GSH下降,且呈现阶段性,推测可能与病毒的吸附、穿入、蛋白质合成、释放等过程有关,且登革病毒E蛋白和NS3蛋白在细胞内的表达也能一定程度地降低其GSH水平。

关键词：登革病毒 HepG2细胞 GSH

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结核分枝杆菌PstS1-U1融合抗原的表达、纯化及其免疫活性测定

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第三军医大学学报 2007年第15期29卷 1473-1476页

作者：丛延广刘利陈志瑾饶贤才胡晓梅李明胡勇胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038 解放军324医院检验科重庆400020

目的为获得一种适于本地结核病临床诊断用抗原,将结核分枝杆菌38×103抗原——即磷酸盐传送蛋白1(phosphate transport system protein l,PstS1)和尿蛋白1(urine protein1,U1)进行融合表达、纯化并测定其抗原活性。方法用基因拼接... 详细信息

目的为获得一种适于本地结核病临床诊断用抗原,将结核分枝杆菌38×103抗原——即磷酸盐传送蛋白1(phosphate transport system protein l,PstS1)和尿蛋白1(urine protein1,U1)进行融合表达、纯化并测定其抗原活性。方法用基因拼接法将结核分枝杆菌编码PstS1和U1蛋白的基因拼接在一起,克隆到原核表达载体pET28a中,通过IPTG诱导实现其高效表达,采用亲和层析纯化表达产物。用纯化的融合抗原免疫家兔获得抗血清,用该血清以及活动性肺结核患者血清对纯化产物的抗原活性进行测定。结果成功构建了原核表达质粒,对表达产物进行亲和层析纯化,获得相对分子质量为57×103的目的蛋白。经Western blot检测融合抗原能够与活动性肺结核患者血清中的抗体发生结合。结论本研究表达并纯化出PstS1-U1融合抗原,为进一步的应用奠定基础。

关键词：结核分枝杆菌融合抗原原核表达

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环境条件对猪链球菌2型电转化效率的影响

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中国人兽共患病学报 2007年第8期23卷 760-763页

作者：李明胡福泉王长军郑峰董亚青潘秀珍唐家琪第三军医大学基础医学部微生物学教研室南京军区军事医学研究所南京军区军事医学研究所南京210002

目的探讨环境条件对猪链球菌2型强毒株05ZYH33电转化效率的影响。方法采用电穿孔的方法对05ZYH33强毒株进行外源DNA的转化,通过调整参数,对影响电转化效率的主要因素进行探索。结果电穿孔法可以成功地转化猪链球菌2型强毒株05ZYH33,转... 详细信息

目的探讨环境条件对猪链球菌2型强毒株05ZYH33电转化效率的影响。方法采用电穿孔的方法对05ZYH33强毒株进行外源DNA的转化,通过调整参数,对影响电转化效率的主要因素进行探索。结果电穿孔法可以成功地转化猪链球菌2型强毒株05ZYH33,转化效率最高可达107/μg质粒DNA。结论猪链球菌2型强毒株05ZYH33高效电转化方法的建立,为深入研究该病原菌的功能基因组学奠定了基础。

关键词：猪链球菌2型电转化转化效率

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