检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2016年第6期38卷 657-662页

作者：蔡鹏仲伟天彭岩贾敏王燕白云王旭开第三军医大学大坪医院野战外科研究所心血管内科重庆400042 第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

目的探索重庆地区汉族人群中成纤维细胞生长因子23（FGF23）基因多态性同冠心病发病的相关性。方法筛选2014年5月至2015年3月在我科接受冠脉造影检查的重庆汉族人群431例,其中冠心病（CHD）组231例与对照组200例。提取血液DNA样本后采用... 详细信息

目的探索重庆地区汉族人群中成纤维细胞生长因子23（FGF23）基因多态性同冠心病发病的相关性。方法筛选2014年5月至2015年3月在我科接受冠脉造影检查的重庆汉族人群431例,其中冠心病（CHD）组231例与对照组200例。提取血液DNA样本后采用Sequenom Massarray系统对于rs7955866、rs13312756、rs3812822这3个FGF23基因Tag SNP位点进行基因分型,对其等位基因、基因型及单体型的组间分布进行统计学分析。结果 CHD组rs7955866 A等位基因和rs3812822 C等位基因频率明显高于对照组（P〈0.001）,两位点组间基因型分布也存在明显差异（P〈0.01）。单因素Logistic回归分析示rs7955866 GA基因型携带者患病风险为GG基因型的2.146倍,具有统计学意义（P=0.01,OR=2.146,95%CI[1.393~3.306]）,rs3812822 CT基因型与TT基因型携带者患病风险亦具有统计学差异（P=0.01,OR=2.010,95%CI[1.327~3.046]）。多因素非条件Logistic回归分析调整性别、年龄、BMI、吸烟饮酒史、高血压病史、高胆固醇血症等混杂因素后,结果显示rs7955866及rs3812822位点均与CHD发病独立相关（P〈0.001,OR=2.478,95%CI[1.613~3.806];P〈0.001,OR=2.123,95%CI[1.439~3.132]）。单体型rs7955866-rs13312756-rs3812822统计学分析结果显示,单体型ACC具有增加冠心病患病风险的作用（P〈0.001;OR=2.074,95%CI[1.391~3.091]）。结论重庆汉族人群FGF23基因多态性及与冠心病患病风险相关。

关键词：成纤维细胞生长因子23 单核苷酸多态性冠心病动脉粥样硬化

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组蛋白去乙酰化酶基因RNAi抑制大鼠血管平滑肌细胞的增殖与迁移

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中华高血压杂志 2009年第5期17卷 444-449页

作者：王燕章波傅春江曾春雨张烨王旭开基础医学部医学遗传学教研室重庆400038 第三军医大学大坪医院心血管内科重庆400042

目的探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及迁移的影响。方法采用DNA重组技术构建抑制HDAC基因RNAi载体,将其转染到分离培养的Wistar大鼠VSMC中抑制其表达,并检测其细胞生物学改变。结果测序结果表明所构建的RNA... 详细信息

目的探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及迁移的影响。方法采用DNA重组技术构建抑制HDAC基因RNAi载体,将其转染到分离培养的Wistar大鼠VSMC中抑制其表达,并检测其细胞生物学改变。结果测序结果表明所构建的RNAi载体包含有正确的片段插入。将该载体转染VSMC后,经荧光定量PCR、免疫印迹检测其HDAC1基因表达受到明显抑制,最大抑制效率为55%,且组蛋白H3乙酰化水平明显升高。RNAi抑制HDAC1蛋白表达后,VSMC倍增时间增加、细胞迁移率下降。结论HDAC基因RNAi抑制大鼠VSMC的增殖与迁移,提示组蛋白去乙酰化在VSMC的增殖与迁移中发挥重要的作用。

关键词：组蛋白去乙酰化酶血管平滑肌细胞 RNAi

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儿童革兰阴性杆菌耐药状况及ampC基因的检测与分析

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第三军医大学学报 2004年第21期26卷 1957-1960页

作者：蔡瑜娇刘岚刘昌林刘昕黄正根高玉梅第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重医儿童医院检验科细菌室

目的　了解某儿童医院 2 2 2株革兰阴性杆菌的耐药现状及ampC基因的分布情况。方法　采用Microscanwalkaway 4 0鉴定 2 2 2株革兰阴性杆菌的药敏情况 ,行PCR扩增检测 2 2 2株革兰阴性杆菌中ampC基因。结果　 2 2 2株菌对IPM、AK、CIP、... 详细信息

目的　了解某儿童医院 2 2 2株革兰阴性杆菌的耐药现状及ampC基因的分布情况。方法　采用Microscanwalkaway 4 0鉴定 2 2 2株革兰阴性杆菌的药敏情况 ,行PCR扩增检测 2 2 2株革兰阴性杆菌中ampC基因。结果　 2 2 2株菌对IPM、AK、CIP、FEP、CAZ、ATM、CRO、CN、SXT、PIP的药物敏感率从高到低依次为 :IPM 90 5 %、AK 79 3 %、CIP 68%、FEP5 0 9%、CAZ 46 4%、ATM 43 2 %、CRO 41 1%、CN 3 7%、SXT 3 5 5 %、PIP 2 0 7%。 15 4株细菌ampC基因阳性 (占 69 4% ) ,对所检测的各药物的敏感率从高到低依次为 :IPM 92 9%、AK 81 1%、CIP 69 5 %、FEP 5 5 2 %、CN 45 5 %、CAZ 41 6%、ATM3 7%、CRO 3 4 4%、SXT 3 3 8%、PIP 13 6%。在革兰阴性杆菌中对PIP的耐药性与ampC基因的分布有关。结论　革兰阴性杆菌的耐药状况严重 ,明确ampC基因的分布状况有助于临床抗菌药物的选用。

关键词： ampC PCR 耐药性 β-内酰胺酶革兰阴性杆菌

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p65 DNA结合域的克隆、表达及其酵母双杂交自身激活作用检测

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第三军医大学学报 2003年第2期25卷 123-126页

作者：徐祥梁华平刘昕代佳平刘琛罗艳王正国第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所第一研究室重庆400042 第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

目的　获得NF κBp65亚基DNA结合域cDNA及构建酵母双杂交系统中的靶基因 ,并检测靶基因的表达和自身激活活性。方法　利用引物二聚体搭桥技术 ,扩增p65亚基DNA结合域基因片段 ,并将其克隆入酵母双杂交载体pG BKT7DNA BD。应用醋酸锂法... 详细信息

目的　获得NF κBp65亚基DNA结合域cDNA及构建酵母双杂交系统中的靶基因 ,并检测靶基因的表达和自身激活活性。方法　利用引物二聚体搭桥技术 ,扩增p65亚基DNA结合域基因片段 ,并将其克隆入酵母双杂交载体pG BKT7DNA BD。应用醋酸锂法转化酵母细胞AH10 9,在SD Trp选择培养基上培养 ,观察转化株的生长情况。按尿素 SDS法抽提酵母蛋白 ,用SDS PAGE电泳和Western blot鉴定靶蛋白在酵母细胞中的表达。利用液相法和平板法检测阳性转化株 β 半乳糖苷酶的活性。结果　获得p65DNA结合域基因片段 ,并成功构建酵母双杂交系统中的靶基因。靶基因能在酵母细胞中表达 ,对酵母细胞无毒性作用 ,无自身激活活性。结论　NF κBp65亚基DNA结合域可作为酵母双杂合系统中的靶基因 ,用于肽库筛选。

关键词： p65 DNA结合域克隆核因子κB 酵母双杂交自身激活作用酵母表达炎症反应

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应用于PCR及实时荧光定量PCR的细菌DNA提取方法

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第三军医大学学报 2006年第7期28卷 734-735页

作者：胡晓红刘昕黄正根彭惠民袁科程英高云重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

目的建立特异灵敏的适应于PCR及实时荧光定量PCR的细菌DNA提取方法。方法于细菌样本离心所得沉淀中加入提取液(25%Chelex-100,0·5%NP40,TE配制,pH=9·0);56℃孵育30min;100℃水浴10min;离心后所得上清即为DNA。电泳、PCR及Real... 详细信息

目的建立特异灵敏的适应于PCR及实时荧光定量PCR的细菌DNA提取方法。方法于细菌样本离心所得沉淀中加入提取液(25%Chelex-100,0·5%NP40,TE配制,pH=9·0);56℃孵育30min;100℃水浴10min;离心后所得上清即为DNA。电泳、PCR及Real-time PCR扩增评价该方法的特异性及灵敏度。结果本方法所提细菌DNA电泳条带清晰,未见假阳性,D(260)/D(280)=(1·79±0·03);PCR及Real-time PCR扩增未见假阳性及假阴性,灵敏度达101/ml细菌浓度。结论本研究细菌DNA提取方法特异灵敏,适应于PCR及Real-time PCR。

关键词： PCR 实时荧光定量PCR DNA提取

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重庆地区脊髓小脑共济失调的临床特征分析与分子遗传学研究

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第三军医大学学报 2015年第7期37卷 693-697页

作者：张凤娟郭洪陈阳美宋敏白云重庆医科大学附属第二医院神经内科重庆400010 第三军医大学基础医学部医学遗传学教研室重庆400038

目的研究重庆地区遗传性脊髓小脑共济失调（spinocerebellar ataxia,SCA）的遗传学分型及临床表现。方法应用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）和琼脂糖凝胶电泳以及DNA测序技术,分析了10个常染色体显性脊髓小脑共济失... 详细信息

目的研究重庆地区遗传性脊髓小脑共济失调（spinocerebellar ataxia,SCA）的遗传学分型及临床表现。方法应用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）和琼脂糖凝胶电泳以及DNA测序技术,分析了10个常染色体显性脊髓小脑共济失调家系及9例散发小脑性共济失调患者的SCA1、SCA2、SCA3、SCA6、SCA7、SCA12、SCA17、齿状核红核苍白球路易体萎缩（dentatorubralpallidoluysian atrophy,DRPLA）的致病基因,并结合临床资料进行分析。结果其中8个家系分子遗传学检测明确为SCA3型,另外2个家系及散发患者均未明确其遗传学亚型。8个SCA3家系中,通过基因诊断确诊患者15例,CAG重复58~71次,症状前患者7例,CAG重复56～71次。SCA3临床表现以小脑共济失调及构音障碍为主,有典型的遗传早现现象,影像学表现为幕下脑萎缩。结论 SCA3是重庆地区最常见的脊髓小脑共济失调类型,主要表现为小脑共济失调、构音障碍及幕下脑萎缩。家族性SCA患者脑萎缩程度较散发患者轻,患者脑干萎缩程度与病程相关,病程越长,脑干萎缩越严重。

关键词：脊髓小脑性共济失调家系动态突变基因

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凝血栓蛋白1基因多态性与食管鳞癌易感性的关联研究

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重庆医学 2011年第19期40卷 1878-1880页

作者：唐胜军熊刚郭洪杨超白云重庆三峡中心医院胸心外科 404000 第三军医大学西南医院胸心外科重庆400038 第三军医大学基础部医学遗传学教研室重庆400038

目的探讨凝血栓蛋白1(THBS1)基因多态性与食管鳞状细胞癌(ESCC)易感性的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法进行基因分型,检测了183例ESCC患者以及171名健康人为对照组对THBS1基因的外显子编码区一个非... 详细信息

目的探讨凝血栓蛋白1(THBS1)基因多态性与食管鳞状细胞癌(ESCC)易感性的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法进行基因分型,检测了183例ESCC患者以及171名健康人为对照组对THBS1基因的外显子编码区一个非同义单核苷酸多态性(SNP)位点rs2292305的基因型分布情况,并进行统计学分析。结果 THBS1基因中该位点的3种基因型GG、AG和AA在ESCC患者组中的分布和对照组比较差异有统计学意义(P=0.008)。非条件Logis-tic回归分析发现,与AA基因型相比,GG基因型是ESCC易感的一种保护因素,比值比(OR)存在显著为0.30,95%可信区间(95%CI)为0.11～0.86(P=0.022)。结论 THBS1基因编码区非同义多态性位点rs2292305与重庆地区汉族人群ESCC患病风险有关。

关键词：多态性单核苷酸食管鳞癌 THBS1基因

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miRNAs与前列腺癌——靶向治疗新进展

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中国男科学杂志 2012年第9期26卷 63-64,72页

作者：段晨阳刘梦颖(综述) 王燕(审校) 解放军第三军医大学学员旅五队重庆400038 解放军第三军医大学学员旅二队解放军第三军医大学基础部医学遗传学教研室

前列腺癌是男性生殖系中最经常诊断的恶性肿瘤，并且在美国男性中是第二大死因，然而对于其发生和发展的机制却至今也不太清楚。随着新的高通量分子筛查技术如芯片技术的发展，人们发现一些异常表达的miRNA可能与前列腺癌的发生发展及... 详细信息

前列腺癌是男性生殖系中最经常诊断的恶性肿瘤，并且在美国男性中是第二大死因，然而对于其发生和发展的机制却至今也不太清楚。随着新的高通量分子筛查技术如芯片技术的发展，人们发现一些异常表达的miRNA可能与前列腺癌的发生发展及转移有关。早期诊断可以增加患者的生存率但目前对于前列腺癌的治疗还仍然局限于激素消融治疗和姑息治疗。因此，探索miRNA在前列腺癌发生发展中的作用机制能为前列腺癌的良好诊断和靶向治疗提供良好的前景。

关键词：微RNAs 前列腺肿瘤

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革兰阴性杆菌耐药与产AmpC酶的检测及其与耐药的关系分析

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第三军医大学学报 2005年第4期27卷 353-355页

作者：蔡瑜娇刘岚刘昌林刘昕黄正根高玉梅袁科第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038 重医儿童医院检验科细菌室重庆400014

目的　了解 2 74株革兰阴性杆菌的耐药现状及产AmpC酶与耐药的关系分析。方法　采用microscanwalkaway 4 0鉴定 2 74株革兰阴性杆菌的药敏情况 ,并用酶粗提物头孢西丁三维实验检测AmpC酶。结果　 3 2株细菌产AmpC酶 (占 11 7% ) ,其中... 详细信息

目的　了解 2 74株革兰阴性杆菌的耐药现状及产AmpC酶与耐药的关系分析。方法　采用microscanwalkaway 4 0鉴定 2 74株革兰阴性杆菌的药敏情况 ,并用酶粗提物头孢西丁三维实验检测AmpC酶。结果　 3 2株细菌产AmpC酶 (占 11 7% ) ,其中阴沟肠杆菌 13株 (占 3 0 2 % )、产气肠杆菌 2株 (占 2 2 2 % )、不动杆菌 6株 (占 2 1 4% )。 2 74株菌对IPM、AK、CIP、FEP、CN、SXT、CAZ、ATM、CRO、PIP的药物敏感率从高到低依次为 :89 4%、78 8%、 69 3 %、 5 5 5 %、45 9%、3 9 1%、3 6 9%、3 1 4%、3 0 3 %、18 2 %。结论　革兰阴性杆菌的耐药状况严重 ,检测AmpC酶有助于临床抗菌药物的选用。

关键词：耐药性 AmpC酶革兰阴性杆菌

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缺氧对Egr-1启动子辐射诱导活性的影响及机制的初步探讨

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第三军医大学学报 2004年第19期26卷 1708-1710页

作者：王卫东陈正堂李德志刘昕段玉忠第三军医大学新桥医院肿瘤科全军肿瘤诊治中心重庆市肿瘤生物技术研究所重庆400037 第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室重庆400038

目的　探明缺氧对早期生长反应基因 1(earlygrowthresponsegene 1,Egr 1)启动子辐射诱导活性的影响及机制。方法　利用基因重组构建Egr 1启动子调控的荧光素酶报告质粒 ,脂质体介导转染肺癌A5 49细胞 ,在 0 .1%、0 .5 %、1%、2 .5 %、... 详细信息

目的　探明缺氧对早期生长反应基因 1(earlygrowthresponsegene 1,Egr 1)启动子辐射诱导活性的影响及机制。方法　利用基因重组构建Egr 1启动子调控的荧光素酶报告质粒 ,脂质体介导转染肺癌A5 49细胞 ,在 0 .1%、0 .5 %、1%、2 .5 %、5 %等氧浓度下给转染细胞以 2、4、6、8、10Gyγ 线照射 ,观察照射后荧光素酶表达水平及过氧化氢产量变化 ;观察过氧化氢浓度对Egr 1启动子转录活性的影响。结果　成功构建了Egr 1启动子报告载体 ,转染A5 49细胞 ,发现当氧浓度 <2 .5 %时 ,Egr 1启动子活性明显低于常氧对照组 (P <0 .0 1) ,并随氧浓度的下降而降低。照射后的过氧化氢产量呈现类似的变化特征 ,结果还表明Egr 1启动子的活性与过氧化氢浓度密切相关。结论　缺氧 (O2 <2 .5 % )导致Egr 1启动子辐射诱导活性下降 ,可能与氧自由基产量减少有关。

关键词：缺氧 Egr-1 启动子辐射

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