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中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第六届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

作者：赵永聚孙新明李福兵魏泓西南大学动物科技学院第三军医大学基础部实验动物学教研室井冈山学院医学院解剖教研室

目的:研究山羊精子介导转染外源DNA的特点及影响因素,为建立高效的山羊精子载体转基因方法奠定基础。材料方法:选择体况、精子活力和精液品质综合指数相近的的川东白山羊南江黄羊、南江黄羊、波尔山羊、波尔山羊×南江黄羊杂交一代... 详细信息

目的:研究山羊精子介导转染外源DNA的特点及影响因素,为建立高效的山羊精子载体转基因方法奠定基础。材料方法:选择体况、精子活力和精液品质综合指数相近的的川东白山羊南江黄羊、南江黄羊、波尔山羊、波尔山羊×南江黄羊杂交一代四个品种的公羊共149只,应用正交设计优化固定的精子和外源DNA处理条件和检测方法,比较山羊品种、年龄的山羊精子结合外源DNA能力,分析精子结合内化外源DNA部位,探讨转染时间、精浆、精子致死等因素对精子转染率的影响,选择4头山羊,双侧睾丸注射不同剂量质粒DNA,注射后PCR和Southern杂交检测在精子中的整合。结果:山羊精子具有自发性结合外源DNA的能力,结合外源DNA具有位置专一性,结合位点集中位于精子核后帽区质膜,占全部阳性精子的80.90%。羊精浆和异种精浆都明显降低山羊精子结合外源基因的效率(P<0.01)。反复冻融致死山羊精子结合外源基因的效率为(43.63±10.92)%,但内化率显著降低至(4.08±1.45)%(P<0.01)。用3%NaCl致死的山羊精子几乎不能结合和内化外源基因(P<0.01)。转染用山羊精液的来源、精液品质和发育阶段等精子因素影响精子结合外源DNA的效率。实验山羊的精子结合外源DNA的能力有随着年龄的增长而减少的趋势,并表现出明显的品种间差异。川东白山羊1岁时的阳性精子率为(39.34±13.76)%,4岁时降为(23.40±19.37)%,与1岁和2岁时相比,差异显著(P<0.01和P<0.05);南江黄羊的阳性精子率最高,波尔山羊最低(P<0.01)。发现转染效率最高发生在睾丸注射后第40天,转染阳性率最高为81%;绿色荧光蛋白在精子及其体外受精的部分胚胎中表达,胚胎阳性率高达66.7%。结论:山羊精子具有自发性结合外源DNA的能力,结合外源DNA具有位置专一性;转染用山羊精液的来源、精液品质和发育阶段等精子因素影响精子结合外源DNA的效率。

关键词：山羊外源DNA 精子供体精子载体法

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贫铀经口慢性染毒对小鼠肠道菌群多样性的影响

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中国微生态学杂志 2011年第10期23卷 883-886页

作者：任泂唐欢魏泓郝玉徽刘晶李蓉粟永萍第三军医大学军事预防医学院复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038 第三军医大学基础部实验动物学教研室重庆400038

目的观察贫铀经口慢性染毒对小鼠肠道菌群多样性的影响。方法通过将不同剂量的贫铀混入饲料中饲养小鼠,以小鼠肝脏和肾脏铀含量作为判断贫铀在动物体内蓄积的指标,建立贫铀经口慢性染毒小鼠模型,观察各组小鼠之间的体重变化,对各组小鼠... 详细信息

目的观察贫铀经口慢性染毒对小鼠肠道菌群多样性的影响。方法通过将不同剂量的贫铀混入饲料中饲养小鼠,以小鼠肝脏和肾脏铀含量作为判断贫铀在动物体内蓄积的指标,建立贫铀经口慢性染毒小鼠模型,观察各组小鼠之间的体重变化,对各组小鼠进行基于细菌16S rRNA V6-V8区的PCR-DGGE分析。结果食入贫铀的各组小鼠肝脏和肾脏铀含量显著高于对照组(P<0.05),各组小鼠体重差异无统计学意义(P>0.05),各组小鼠V6-V8区DGGE图谱的丰富度和多样性指数差异均无统计学意义(P>0.05)。结论贫铀经口慢性染毒对小鼠肠道菌群多样性无显著影响。

关键词：贫铀慢性染毒肠道菌群多样性

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转基因小鼠模型环境释放安全性评价初步研究

转基因小鼠模型环境释放安全性评价初步研究

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第六次全国动物生物技术学术研讨会

作者：赵二虎王勇赵永聚张楠阳西南大学动物科技学院重庆北碚400716 第三军医大学基础部实验动物学教研室重庆沙坪坝400038

本研究选取全同胞小鼠、近交系小鼠和同等饲养水平同样环境下饲养，是为了最大程度上避免物种遗传上的差异和后天环境的影响。本研究中进行活菌计数的9种菌是小鼠肠道微生物菌群主要组成菌种，基本可以代表小鼠肠道微生物菌群结构和微... 详细信息

本研究选取全同胞小鼠、近交系小鼠和同等饲养水平同样环境下饲养，是为了最大程度上避免物种遗传上的差异和后天环境的影响。本研究中进行活菌计数的9种菌是小鼠肠道微生物菌群主要组成菌种，基本可以代表小鼠肠道微生物菌群结构和微生物环境。因而他们也可以作为转基因动物肠道微生物安全性评价的主要菌群，其中双歧杆菌、乳酸杆菌、拟(类)杆菌、梭菌、大肠杆菌和肠道球菌是哺乳动物消化管道内的优势菌群，而且这些菌群和哺乳动物的营养代谢具有密切的关系。因此，可以通过测定它们，反映出转基因动物体内的微生物菌落结构是否发生变化，进而推断转基因动物的安全性，故测定转基因动物肠道内这9种菌数是否发生变化是非常有意义的。

关键词：畜禽繁殖转基因技术环境安全评价方法

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FQ-PCR在转基因产品检测中的应用研究进展

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动物医学进展 2008年第11期29卷 55-59页

作者：宋勇涛王勇刘勤王露露刘昌峨魏泓西南大学生命科学学院重庆400716 第三军医大学实验动物学教研室重庆400038

实时荧光定量PCR(real-time fuorescent quantitative PCR,FQ-PCR)是近年来定量PCR技术中兴起的最新定量检测技术,因其具有灵敏性高、特异性强、结果精确、反应快速、安全可靠等优点,现已广泛应用于医学和生命科学的各个研究领域,论文... 详细信息

实时荧光定量PCR(real-time fuorescent quantitative PCR,FQ-PCR)是近年来定量PCR技术中兴起的最新定量检测技术,因其具有灵敏性高、特异性强、结果精确、反应快速、安全可靠等优点,现已广泛应用于医学和生命科学的各个研究领域,论文就实时荧光PCR技术的主要原理、分类方法以及在转基因产品检测中的应用等进行简要综述。

关键词：实时荧光定量PCR 转基因产品检测

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不同胎次的母羊超数排卵处理效果的比较

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中国草食动物 2005年第Z1期25卷 116-117页

作者：赵永聚孙新明何鹏赵伟魏泓第三军医大学基础部实验动物学教研室重庆沙坪坝400038 西南农业大学动物科技学院山东德州学院农学系

选择供体波尔山羊12只,按经产胎次不同分成2组,其中经产1胎7只,经产3～5胎次为5只,用FSH进行超数排卵,比较排卵点、冲出的和可用胚胎数.结果表明,经产一胎者母羊只均排卵点11.00枚±6.36枚,只均胚胎数4.00枚±3.03枚,只均可用... 详细信息

选择供体波尔山羊12只,按经产胎次不同分成2组,其中经产1胎7只,经产3～5胎次为5只,用FSH进行超数排卵,比较排卵点、冲出的和可用胚胎数.结果表明,经产一胎者母羊只均排卵点11.00枚±6.36枚,只均胚胎数4.00枚±3.03枚,只均可用胚胎数2.83枚±2.14枚;经产3～5胎次母羊分别12.80枚±5.67枚、5.80枚±4.60枚和4.00枚±3.80枚(P＞0.05).

关键词：山羊超数排卵胎次

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巴马香猪无细胞真皮与人无细胞真皮动物移植实验效果的比较

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重庆文理学院学报（自然科学版） 2007年第3期26卷 54-57页

作者：郑书全葛良鹏魏泓西南大学生命科学学院重庆北碚400715 第三军医大学基础部实验动物学教研室重庆沙坪坝400038

目的:比较辐照巴马香猪无细胞真皮与辐照人无细胞真皮移植动物实验效果.方法:以机械去表皮法制备无细胞真皮与人无细胞真皮辐照(剂量30 KGy)处理后移植于W istar大鼠全厚皮肤缺损创面进行比较.结果:辐照处理的巴马香猪无细胞真皮与人无... 详细信息

目的:比较辐照巴马香猪无细胞真皮与辐照人无细胞真皮移植动物实验效果.方法:以机械去表皮法制备无细胞真皮与人无细胞真皮辐照(剂量30 KGy)处理后移植于W istar大鼠全厚皮肤缺损创面进行比较.结果:辐照处理的巴马香猪无细胞真皮与人无细胞真皮在大鼠创面愈合过程相似,愈合后创面收缩率差异不显著.结论:辐照处理的巴马香猪无细胞真皮与辐照处理的人无细胞真皮移植于W istar大鼠全厚皮肤缺损创面恢复效果无显著差异,可作为人无细胞真皮的替代品进一步用于烧伤治疗的研究.

关键词：辐照处理巴马香猪无细胞真皮人无细胞真皮移植实验

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实验动物遗传工程——功能基因组时代的研究平台

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重庆文理学院学报（自然科学版） 2007年第3期26卷 61-65页

作者：倪勇王勇西南大学生命科学学院重庆北碚400715 第三军医大学基础部实验动物学教研室重庆沙坪坝400038

本文就实验动物遗传工程在研究基因功能及其表达调控、阐明疾病发生机理、寻找药物治疗靶点等方面的技术突破做了综述.

关键词：实验动物遗传工程转基因动物 RNAi

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实时荧光定量检测小型猪肝脏CYP3A29 mRNA表达水平

实时荧光定量检测小型猪肝脏CYP3A29 mRNA表达水平

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中国实验动物学会第七届学术年会

作者：杨家大商海涛魏泓杨婉身刘昕四川农业大学生命科学与理学院生物化学教研室第三军医大学基础部动物学教研室第三军医大学基础部动物学教研室四川农业大学生命科学与理学院生物化学教研室第三军医大学基础部分子遗传学教研室

CYP3A29是猪肝脏最重要的药物代谢关键酶,研究其mRNA在肝脏的表达特性对于将猪用于人CYP3A4介导的药理学研究及药物代谢动物模型提供重要支持。本研究以β-actin作校正,利用TaqMan绝对定量技术对巴马香猪、贵州小型香猪肝脏CYP3A29 mRN... 详细信息

CYP3A29是猪肝脏最重要的药物代谢关键酶,研究其mRNA在肝脏的表达特性对于将猪用于人CYP3A4介导的药理学研究及药物代谢动物模型提供重要支持。本研究以β-actin作校正,利用TaqMan绝对定量技术对巴马香猪、贵州小型香猪肝脏CYP3A29 mRNA表达水平进行检测,并以荣昌猪作为对照。结果表明,巴马香猪、贵州小型香猪、荣昌猪肝脏CYP3A29 mRNA表达水平与报道的人肝脏CYP3A4相接近;三品系(种)猪间肝脏CYP3A29 mRNA表达水平较为接近, 但品系(种)内个体间变异较大。

关键词：巴马香猪 CYP3A29 TaqMan定量

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C57BL6小鼠呼吸系统组织学特征研究

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局解手术学杂志 2012年第2期21卷 117-119页

作者：艾必燕陈俊颖邓玉江陈建康杨扬米本中黄文涛樵星芳重庆市中药研究院重庆400065 解放军第324医院重庆400020 第三军医大学基础部实验动物学教研室重庆400038

目的获取正常C57BL6小鼠的呼吸系统组织学图谱资料,并与人体呼吸系统的组织学特征进行比较。方法选取从南京大学模式动物研究所购得的C57BL/6J小鼠20只,在SPF级环境中用全价营养鼠饲料饲养,饲养到6周龄时将其处死。在1 h内对处死的小鼠... 详细信息

目的获取正常C57BL6小鼠的呼吸系统组织学图谱资料,并与人体呼吸系统的组织学特征进行比较。方法选取从南京大学模式动物研究所购得的C57BL/6J小鼠20只,在SPF级环境中用全价营养鼠饲料饲养,饲养到6周龄时将其处死。在1 h内对处死的小鼠进行组织解剖,取出呼吸系统器官和组织,于10%中性缓冲福尔马林固定;常规病理制片,HE染色;显微镜观察,照相机摄影,图像采集,用计算机对图像进行标注。结果对小鼠呼吸系统进行详细、系统的组织学观察,并发现人体与小鼠在呼吸系统的差异主要存在于气管腺,小鼠气管腺分3种:浆液腺、粘液腺及混合腺,主要分布于粘膜固有层;人的气管腺主要为混合腺,分布于粘膜下层。结论正常C57BL6小鼠的呼吸系统组织学图谱已基本建立,为利用该品系小鼠建立呼吸系统疾病遗传工程小鼠模型奠定了基础。

关键词：小鼠呼吸系统组织学

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益生菌株对HT-29细胞的粘附及对致病菌的粘附抑制性能研究

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中国药业 2006年第8期15卷 7-8页

作者：魏银萍王斌魏泓西南大学生命科学学院重庆400715 第三军医大学基础部动物学教研室重庆400038

目的研究培菲康微生态制剂中菌株的粘附性能及对致病菌的粘附抑制性能。方法以革兰氏染色法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法评价3株益生菌分别对HT-29细胞和粘蛋白的粘附性能,与益生菌共孵育后裂解细胞活菌计数法检测益生菌抑制致病菌对HT... 详细信息

目的研究培菲康微生态制剂中菌株的粘附性能及对致病菌的粘附抑制性能。方法以革兰氏染色法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法评价3株益生菌分别对HT-29细胞和粘蛋白的粘附性能,与益生菌共孵育后裂解细胞活菌计数法检测益生菌抑制致病菌对HT-29细胞的粘附性能。结果嗜酸乳杆菌、长双歧杆菌和粪肠球菌的粘附指数分别为501.33±38.18,440.67±60.93,163.33±4.16,并可以分别使致病性大肠杆菌粘附率由6.7%下降到2.85%,0.214%,1.9%;使伤寒沙门氏菌粘附率由32.49%下降到16.95%,12.93%,20.33%。结论培菲康微生态制剂中3株益生菌均有不同程度的粘附性能以及抑制致病菌对肠上皮细胞粘附的作用,其中嗜酸乳杆菌的粘附性能最好,而长双歧杆菌对致病菌的粘附抑制作用最好。

关键词：培菲康益生菌粘附致病菌粘附抑制

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