检索结果-内蒙古大学图书馆

中华放射医学与防护杂志 2006年第3期26卷 233-235页

作者：邓均周桃莉张春雷郑峻松李招权黄辉陈晓莉程平第三军医大学检验系临床检验学教研室重庆400038 基础部病原生物学教研室

目的探讨一氧化氮(NO)是否提高γ射线对L1210细胞的损伤效应及其机制。方法将L1210细胞加入隔离培养器内与3T3细胞共培养,收集经γ射线照射后12、24、48和72h各组L1210细胞,台盼蓝染色观察直接损伤作用,TUNNEL法观察诱导细胞凋亡的情况... 详细信息

目的探讨一氧化氮(NO)是否提高γ射线对L1210细胞的损伤效应及其机制。方法将L1210细胞加入隔离培养器内与3T3细胞共培养,收集经γ射线照射后12、24、48和72h各组L1210细胞,台盼蓝染色观察直接损伤作用,TUNNEL法观察诱导细胞凋亡的情况,流式细胞术检测细胞周期。结果γ射线照射后质粒转染组L1210细胞台盼蓝拒染率下降最快,12h后与空载体组比较差异有统计学意义(P<0·05),加DEVD-CHO后能够提高台盼蓝拒染率,24h后有显著的差异(P<0·05);γ射线照射后质粒转染组细胞凋亡率24h开始明显升高,与空载体组比较差异有统计学意义(P<0·05),加DEVD-CHO后细胞凋亡率下降,24h开始与单独质粒转染组比较差异有统计学意义(P<0·05);射线照射后质粒转染组细胞G1期快速上升,4h与空载体组差异有统计学意义(P<0·05),加DEVD-CHO后G1期上升较单纯质粒转染组慢,4h两组差异有统计学意义(P<0·01)。结论NO可增强γ射线对L1210细胞的直接损伤作用,出现细胞的G1阻滞,促进细胞凋亡。Caspase-3的活化参与上述作用。

关键词：一氧化氮细胞凋亡 L1210

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斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段的克隆和序列分析

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免疫学杂志 2004年第1期20卷 37-39,42页

作者：王英张锡林段建华张敬如徐文岳黄复生第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的　克隆斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,并对其进行测序和序列分析。方法　利用简并引物 ,进行RT PCR ,扩增斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段。TA克隆装入pUCm T载体 ,进行鉴定、测序 ;利用DNASIS程序推导其所编码的氨... 详细信息

目的　克隆斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,并对其进行测序和序列分析。方法　利用简并引物 ,进行RT PCR ,扩增斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段。TA克隆装入pUCm T载体 ,进行鉴定、测序 ;利用DNASIS程序推导其所编码的氨基酸序列 ,并与相关虫种半胱氨酸蛋白酶进行氨基酸序列的同源性分析。结果　RT PCR扩增出了一约5 0 0bp的cDNA片段 ,对阳性克隆测序后获得其核酸序列 ,长 4 95bp。将推导的氨基酸序列作同源性分析显示 ,该序列与相关虫种半胱氨酸蛋白酶存在着较高的同源性 ,组成半胱氨酸催化三联体的半胱氨酸、组胺酸和天冬酰胺残基高度保守。结论　克隆获得了斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,该片段包含了与半胱氨酸蛋白酶活性和空间结构相关的重要基因位点。

关键词：斯氏肺吸虫半胱氨酸蛋白酶 cDNA 克隆

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约氏疟原虫子孢子感染对大鼠腹腔巨噬细胞B7.1、B7.2分子表达的影响

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第三军医大学学报 2006年第20期28卷 2024-2026页

作者：宋蓓张锡林段建华吕杨第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的研究约氏疟原虫感染后协同刺激分子B7.1、B7.2在大鼠腹腔巨噬细胞的表达情况,探讨B7.1、B7.2分子在宿主抵抗疟原虫感染免疫中的作用。方法利用约氏疟原虫感染大鼠的动物模型,分别在感染约氏疟原虫子孢子后2、12、24、48、72h分离获... 详细信息

目的研究约氏疟原虫感染后协同刺激分子B7.1、B7.2在大鼠腹腔巨噬细胞的表达情况,探讨B7.1、B7.2分子在宿主抵抗疟原虫感染免疫中的作用。方法利用约氏疟原虫感染大鼠的动物模型,分别在感染约氏疟原虫子孢子后2、12、24、48、72h分离获得大鼠腹腔巨噬细胞,通过免疫荧光及激光扫描共聚焦显微镜技术定量分析B7.1、B7.2分子表达情况。结果在宿主感染约氏疟原虫后巨噬细胞B7.1、B7.2分子表达增加;B7.1上调较缓慢,并在72h后出现回落;B7.2上调非常迅速,在48h达到峰值,从72h开始略有下降;在所选时间范围内B7.2的表达水平始终高于B7.1(P<0.05)。结论疟原虫子孢子感染大鼠后,B7.1、B7.2分子表达水平发生改变,提示协同刺激因子参与了宿主免疫系统活化,推测该现象与受疟原虫感染哺乳动物机体的免疫防御、免疫调控密切相关。

关键词： B7.1 B7.2 约氏疟原虫抗原递呈细胞激光扫描共聚焦显微镜

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健康教育在整体护理病房的实施

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第三军医大学学报 2001年第A6期23卷 46-47页

作者：张敬如第三军医大学基础医学院病原生物学教研室，重庆400038

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双氯芬酸钾脂质体制剂的大鼠体内透皮研究

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第三军医大学学报 2004年第6期26卷 513-516页

作者：赵凯王昆张敬如蔡明志黄复生第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的　研究双氯芬酸钾 (DP)脂质体制剂体内经皮吸收和药物分布特点。方法　用SPE HPLC方法 ,研究在体条件下局部外用脂质体制剂和传统凝胶制剂后 ,DP在深层和浅层肌肉、血清、肝、胃等不同组织中的分布情况。结果　脂质体外用制剂于浅... 详细信息

目的　研究双氯芬酸钾 (DP)脂质体制剂体内经皮吸收和药物分布特点。方法　用SPE HPLC方法 ,研究在体条件下局部外用脂质体制剂和传统凝胶制剂后 ,DP在深层和浅层肌肉、血清、肝、胃等不同组织中的分布情况。结果　脂质体外用制剂于浅层肌肉、深层肌肉中的浓度峰值分别为 3 2 0 2 82ng g和 14 65 79ng g ,较凝胶外用制剂高 (P <0 0 1) ,且药物浓度维持时间长。结论　脂质体包封的双氯芬酸钾制剂能有效地渗透皮肤到达皮下组织 ,持续发挥局部药物作用。

关键词：脂质体双氯芬酸钾体内皮肤渗透

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日本血吸虫和斯氏并殖吸虫的rDNA-ITS2遗传多态性研究

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第三军医大学学报 2009年第21期31卷 2073-2077页

作者：何谐张锡林牛靖萱陈琳第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的分析日本血吸虫和斯氏并殖吸虫的核糖体DNA第二内转录间隔区(rDNA-ITS2)基因的遗传变异。方法采集2种吸虫成虫标本,提取其基因组DNA,PCR特异性扩增rDNA-ITS2基因并测序;Clusterx软件进行多序列对比;MEGA4软件计算遗传距离,NJ法和MP... 详细信息

目的分析日本血吸虫和斯氏并殖吸虫的核糖体DNA第二内转录间隔区(rDNA-ITS2)基因的遗传变异。方法采集2种吸虫成虫标本,提取其基因组DNA,PCR特异性扩增rDNA-ITS2基因并测序;Clusterx软件进行多序列对比;MEGA4软件计算遗传距离,NJ法和MP法构建系统进化树;DNAsis软件对rDNA-ITS2序列片段进行模序分析。结果2种方法构建的遗传系统进化树基本结构相似,日本血吸虫与斯氏并殖吸虫间存在较远的遗传距离,但二吸虫ITS2序列间有42.7%的相似性。利用DNAsis软件在日本血吸虫和斯氏并殖吸虫的rDNA-ITS2序列中发现AP_2_CS6、bHLH_CS和CAP_site3种相同的转录因子。结论日本血吸虫和斯氏并殖吸虫虽然在rDNA-ITS2基因水平上存在明显种间差异,但在rDNA-ITS2序列、转录因子方面具有重要的相似性。

关键词：日本血吸虫斯氏并殖吸虫 rDNA-ITS2 序列遗传多态性

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斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段的克隆和序列分析

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第三军医大学学报 2002年第9期24卷 1052-1055页

作者：王英张锡林段建华徐文岳第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的　克隆斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,获得其序列 ,并进行序列分析。方法　利用简并引物 ,进行RT PCR ,扩增斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段。TA克隆装入pUCm T载体 ,进行鉴定、测序 ;利用DNASIS程序推导其所编... 详细信息

目的　克隆斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,获得其序列 ,并进行序列分析。方法　利用简并引物 ,进行RT PCR ,扩增斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段。TA克隆装入pUCm T载体 ,进行鉴定、测序 ;利用DNASIS程序推导其所编码的氨基酸序列 ,并与相关虫种半胱氨酸蛋白酶进行氨基酸序列的同源性分析。结果　RT PCR扩增出了一 5 0 0bp左右的cDNA片段 ,对阳性克隆测序后获得其核酸序列 ,长 498bp。推导出的氨基酸序列长 166;氨基酸序列的同源性分析显示 ,该序列与相关虫种半胱氨酸蛋白酶存在着很高的同源性 ,组成半胱氨酸催化三联体的半胱氨酸、组胺酸和天冬酰胺残基高度保守。

关键词：斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶 cDNA片段克隆序列分析

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PPARγ对TGFβ/smad信号通路阻遏子c-Ski的上调作用

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生理学报 2011年第1期63卷 62-68页

作者：李工博李军曾益军钟丹吴庚泽付晓红何凤田戴双双第三军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室重庆400038 第三军医大学西南医院胸心外科重庆400038

本文旨在研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)形成中关键信号通路TGFβ/smad途径的阻遏子c-Ski的调控作用,探讨PPARγ抗AS的分子机制。通过高脂饮食制作大鼠AS模型,检测AS斑块中c-Ski的mRNA及蛋白的表达变化;在体外培养的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth musclecell,VSMC)中转染重组c-Ski质粒,并观察其对VSMC增殖及胶原分泌影响;采用real-timePCR和Western blot检测PPARγ激动剂和拮抗剂对c-Ski表达的调节,进而利用在线程序NUBIScan及荧光素酶报告基因检测明确PPARγ对c-Ski的调控机理。结果显示:AS大鼠动脉斑块中c-Skim RNA和蛋白表达显著降低;重组c-Ski转染显著抑制大鼠VSMC增殖及胶原分泌;PPARγ激动剂罗格列酮可明显上调大鼠VSMC中c-Ski表达,且这种上调可以被PPARγ拮抗剂GW9662所阻断。生物信息学分析表明c-Ski启动子区有可能的PPARγ结合位点,而罗格列酮也能显著上调转染了c-Ski的报告基因表达。以上结果表明c-Ski具有一定抗AS作用,其可能是PPARγ的又一靶基因,激活PPARγ可上调c-Ski而发挥抗AS作用。

关键词：氧化物酶体增殖物激活受体γ c-Ski 动脉粥样硬化血管平滑肌细胞

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大劣按蚊AdS7基因的克隆及分析

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第三军医大学学报 2004年第6期26卷 476-478页

作者：郝宏兴黄复生段建华况明书王英第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的　克隆AdS7基因cDNA序列 ,为大劣按蚊基因定量研究提供内参照。方法　采用RT PCR扩增、TA克隆技术获得AdS7cDNA部分序列 ,标记地高辛AdS7探针 ,从大劣按蚊cDNA文库中筛选得到AdS7全长克隆 ,以半定量RT PCR方法研究血餐和约氏疟原虫... 详细信息

目的　克隆AdS7基因cDNA序列 ,为大劣按蚊基因定量研究提供内参照。方法　采用RT PCR扩增、TA克隆技术获得AdS7cDNA部分序列 ,标记地高辛AdS7探针 ,从大劣按蚊cDNA文库中筛选得到AdS7全长克隆 ,以半定量RT PCR方法研究血餐和约氏疟原虫感染对其表达水平的影响。结果　从大劣按蚊cDNA克隆得到长 464bp的AdS7基因cD NA部分序列 ,从大劣按蚊cDNA文库筛选获得了长 871bp的AdS7基因全长克隆 ,大劣按蚊吸血和感染约氏疟原虫后 2 4h ,AdS7表达水平没有显著变化。

关键词： AdS7 基因克隆半定量RT-PCR

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约氏疟原虫卵囊黑化期间大劣按蚊血淋巴蛋白的分析

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第三军医大学学报 2001年第9期23卷 1098-1100页

作者：徐文岳黄复生况明书段建华第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的　初步探讨大劣按蚊 (Anophelesdirus)黑化包被约氏疟原虫 (Plasmodiumyoelii)卵囊相关蛋白。方法　挤压法分别收集血餐后第 1、3、4、5天时不吸血组、吸正常血组和感染组的雌大劣按蚊血淋巴 ,经SDS PAGE分离后 ,银染显色。同时 ,... 详细信息

目的　初步探讨大劣按蚊 (Anophelesdirus)黑化包被约氏疟原虫 (Plasmodiumyoelii)卵囊相关蛋白。方法　挤压法分别收集血餐后第 1、3、4、5天时不吸血组、吸正常血组和感染组的雌大劣按蚊血淋巴 ,经SDS PAGE分离后 ,银染显色。同时 ,用烟草天蛾 (ManducaSexta)前酚氧化酶 (Prophenoloxidase ,PPO)亚基 1IgG检测正常雌大劣按蚊血淋巴中的PPO。结果　SDS PAGE发现感染约氏疟原虫后 ,部分大劣按蚊的血淋巴蛋白带增强 ,而部分血淋巴蛋白带却减弱 ,免疫印迹发现大劣按蚊血淋巴PPO有 87× 10 3 、6 7× 10 3 、6 3× 10 53条蛋白带 ,而相应分子量的 3条蛋白带在约氏疟原虫感染后第 4、5天开始增强 ,其中尤以 87× 10 3 的增强最为明显。

关键词：纸氏疟原虫大劣按纹血淋巴黑化前酚氧化酶

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