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rhBMP-2和rhVEGF转染ADSCs后体外表达及诱导骨缺损成骨修复的实验研究

创伤外科杂志 2007年第4期9卷 296-300页

作者：杨在亮张波周继红黄宏张良刘大维第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400042

目的观察重组人骨形成蛋白2(rhBMP-2)和血管内皮生长因子(rhVEGF)转染脂肪源性干细胞(ADSCs)后的体外表达情况,并以含该转染体系的组织工程骨进行大动物负重骨缺损的修复研究。方法将外源性基因rhBMP-2和rhVEGF通过脂质体LipofectamineT... 详细信息

目的观察重组人骨形成蛋白2(rhBMP-2)和血管内皮生长因子(rhVEGF)转染脂肪源性干细胞(ADSCs)后的体外表达情况,并以含该转染体系的组织工程骨进行大动物负重骨缺损的修复研究。方法将外源性基因rhBMP-2和rhVEGF通过脂质体LipofectamineTM2000介导的方式转染第四代ADSCs,以G418筛选出阳性克隆并扩大培养后,用RT-PCR和SABC免疫组化法在转录和蛋白质水平观察其转染后第2天和第4周表达情况。建立小香猪自体前肢尺骨中段1.5cm骨缺损模型,分3组进行对比试验:(A组)转染了生物活性因子的ADSCs与脱细胞骨基质材料(ACBM)复合而成新型组织工程骨植入修复组;(B组)未转染生物活性因子的ADSCs复合ACBM植入修复组;(C组)未处理组。以X线和组织切片评价其修复效果。结果转基因ADSCs在转染后瞬时和4周时都可表达rhBMP-2和rhVEGF。大动物骨缺损修复实验中,前2周内3组动物均未出现明显的急性炎症反应;连续X线观察和骨切片显示:A组在术后第3个月已完全修复,且修复效果和进程明显优于B组,C组缺损则主要由纤维结缔充填。结论rhBMP2及rh-VEGF转染ADSCs后可获得4周内稳定的表达。携带该缓释体系的新型组织工程骨是一种具有显著成骨能力的优良骨缺损修复材料。

关键词：重组人骨形成蛋白2 血管内皮生长因子转染转染脂肪源性干细胞表达组织工程骨骨缺损修复

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缺氧诱导因子-1α对失血性休克血管反应性的调控作用及机制

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创伤外科杂志 2007年第6期9卷 552-556页

作者：张瑗刘良明林秀来李涛徐竞第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨失血性休克(hemorrhagic shock,HS)后大鼠肠系膜上动脉血管组织缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)表达变化规律及其调控血管低反应性发生的相关机制。方法取大鼠HS模型肠系膜上动脉(superior mensenteric... 详细信息

目的探讨失血性休克(hemorrhagic shock,HS)后大鼠肠系膜上动脉血管组织缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)表达变化规律及其调控血管低反应性发生的相关机制。方法取大鼠HS模型肠系膜上动脉(superior mensenteric artery,SMA),离体血管环技术检测SMA血管反应性,RT-PCR法分析HIF-1α及内皮型一氧化氮合酶(endothelial-nitro oxide nitroxide synthase,eNOS)和环氧合酶-2(cy-clooxygenase-2,COX-2)的mRNA表达变化规律。分别采用硝酸还原酶法和放射免疫法测定其血浆NO和PGI含量变化。结果与正常组相比,HS后HIF-1α、eNOS和COX-2 mRNA表达及其相应血浆产物NO和PGI含量显著增加。血管反应性表现为早期增高、晚期降低的双相变化。寡霉素处理可使eNOS和COX-2mRNA及其产物NO和PGI表达表现不同程度受抑,对血管反应性表现为对早期的升高趋势的部分抑制和晚期低反应性的改善作用。结论HIF-1α可能通过对eNOS-NO和COX-2-PGI通路,在休克后血管反应性双相向变化的形成中发挥重要调节作用。

关键词：缺氧诱导因子失血性休克血管反应性

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内毒素休克后家兔血管低反应性的变化规律及其与血流动力学变化的关系

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重庆医学 2007年第22期36卷 2254-2256页

作者：陈玮李涛杨光明徐竞刘良明第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的了解内毒素休克后血管反应性的变化规律及其与血流动力学变化的关系。方法将10只家兔用于测定内毒素休克后的血流动力学变化,另外48只随机分为6组,依次为正常对照组、给LPS后0.5、1、2、4、6h组,分别测定各组肠系膜上动脉(SMA)离体... 详细信息

目的了解内毒素休克后血管反应性的变化规律及其与血流动力学变化的关系。方法将10只家兔用于测定内毒素休克后的血流动力学变化,另外48只随机分为6组,依次为正常对照组、给LPS后0.5、1、2、4、6h组,分别测定各组肠系膜上动脉(SMA)离体血管环对NE、Ach的收缩和舒张反应性。结果家兔LPS(1mg/kg)静注后,MAP在静注LPS后早期就迅速下降,继而保持平缓的下降趋势;反映心肌收缩功能的左室最大收缩压(LVSP)、左室内压最大上升速率(+dp/dt max)及下降速率(-dp/dt max)等指标先迅速下降然后有一定的回升继而再平稳下降,而左室舒张末压(LVEDP)则没有明显变化;SMA血管环对NE的反应性在早期无显著变化,晚期显著降低;SMA血管环对Ach的反应性在早期升高,晚期下降。结论内毒素休克血管反应性呈现早期高舒张反应、晚期低收缩反应的规律。早期心肌收缩功能的显著下降和血管的高舒张反应可能共同参与了早期MAP的迅速下降;晚期的低收缩反应可能参与了晚期持续性低血压的发生。

关键词：内毒素休克脓毒性休克血流动力学血管反应性

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周围神经组织工程中种子细胞的最新研究进展

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中华神经医学杂志 2007年第5期6卷 528-530页

作者：矫树生李兵仓第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

典型的组织工程化人工神经主要包括种子细胞、支架材料以及有助于细胞生长、分化的细胞外基质，其中数量足够、不引起免疫排斥且有再生活力的种子细胞是其前提和基础。目前常用的种子细胞有雪旺氏细胞（SCs）、嗅球成鞘细胞（OECs）、... 详细信息

典型的组织工程化人工神经主要包括种子细胞、支架材料以及有助于细胞生长、分化的细胞外基质，其中数量足够、不引起免疫排斥且有再生活力的种子细胞是其前提和基础。目前常用的种子细胞有雪旺氏细胞（SCs）、嗅球成鞘细胞（OECs）、骨髓基质细胞（BMSCs）和神经干细胞（NSCs）等。SCs一直是周围神经损伤修复研究领域的热点，OECs、BMSCs和NSCs修复周同神经损伤也在起步中。本文从组织工程方面就上述四种细胞的最新研究进展进行综述，同时就存在的问题进行讨论。

关键词：人工神经雪旺氏细胞嗅球成鞘细胞骨髓基质细胞神经干细胞

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水下冲击伤伤情特点的实验研究

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创伤外科杂志 2007年第6期9卷 540-543页

作者：王峰周继红杨志焕王正国李晓炎宁心张波刘大维严军董蕻张良杨在亮杨列第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨水下冲击伤的伤情特点。方法成年杂种犬19只,布放于离爆心10.36、12.79、15.25m,1.019kg和1.020kg TNT水下3m爆炸,PCB压力传感器测定冲击波物理参数,观察现场至伤后20-28小时动物存活情况和大体形态学改变。结果犬死亡率为31.58... 详细信息

目的探讨水下冲击伤的伤情特点。方法成年杂种犬19只,布放于离爆心10.36、12.79、15.25m,1.019kg和1.020kg TNT水下3m爆炸,PCB压力传感器测定冲击波物理参数,观察现场至伤后20-28小时动物存活情况和大体形态学改变。结果犬死亡率为31.58%（6/19）。形态学观察发现肺损伤发生率最高（100%）,主要表现为不同程度的肺出血和肺水肿;其次为肠道损伤（26.32%）,主要表现为浆膜下出血,浆肌层撕裂和浆膜下血肿;部分可见肝脾轻微的包膜下出血和血肿。1例出现膀胱浆膜和黏膜下出血,体表未见损伤。结论水下冲击伤具有死亡率高,肺损伤发生率高、肠道损伤发生率较高、肝脾等实质脏器损伤轻微,胆囊、膀胱等含液脏器和体表很少发生损伤等特点。

关键词：水下爆炸冲击波冲击伤伤情特点

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两种复苏措施对犬弹烧复合伤海水浸泡后血气及酸碱平衡的影响

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中华航海医学与高气压医学杂志 2007年第4期14卷 193-195页

作者：陈强赖西南葛衡江第三军医大学大坪医院野战外科研究所麻醉科重庆400042 第三军医大学创伤烧伤复合伤国家重点实验室战伤基础实验室第六研究室

目的比较Parkland公式复苏与改良液体复苏对犬弹烧复合伤海水浸泡后血气及酸碱平衡的影响。方法成功建立海水浸泡弹烧复合伤模型后,依模型将20只成年杂种犬随机分为海水浸泡弹烧复合伤组(对照组,n=8)、标准Parkland公式复苏组(标准组,n... 详细信息

目的比较Parkland公式复苏与改良液体复苏对犬弹烧复合伤海水浸泡后血气及酸碱平衡的影响。方法成功建立海水浸泡弹烧复合伤模型后,依模型将20只成年杂种犬随机分为海水浸泡弹烧复合伤组(对照组,n=8)、标准Parkland公式复苏组(标准组,n=6)与改良液体复苏组(改良组,n =6),动态监测伤前、伤后4、7、10、20、28h血气及酸碱水平的变化。结果Parkland公式复苏在一定程度上改善了浸泡后代谢性酸中毒,但改善作用弱、持续时间短;改良组纠正酸中毒作用稳定、持久。结论以Parkland公式为参照进行常规复苏时有一定的局限性,不适合该类复合伤的早期救治;而以Parkland公式复苏为基础的改良方案具有较好的复苏价值。

关键词：海水浸泡弹烧复合伤动脉血气酸碱平衡

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参芪扶正注射液对心肌挫伤后家兔心肌细胞凋亡的影响

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第三军医大学学报 2007年第7期29卷 588-591页

作者：吴正国梁贵友李正勋刘日辉牛义民周继红遵义医学院第一附属医院胸心外科遵义563003 湖北省仙桃市第一人民医院胸心外科仙桃433000 湖北省襄樊市中心医院胸心外科襄樊441000 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨参芪扶正注射液对心肌挫伤后家兔心肌细胞凋亡及其Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法健康家兔50只,简单随机化摸球法分为4组,参考组(Reference,n=20)、对照组(Control,n=10)、参芪扶正注射液治疗组(Sen,n=10)和心肌挫伤组(MC,n=10... 详细信息

目的探讨参芪扶正注射液对心肌挫伤后家兔心肌细胞凋亡及其Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法健康家兔50只,简单随机化摸球法分为4组,参考组(Reference,n=20)、对照组(Control,n=10)、参芪扶正注射液治疗组(Sen,n=10)和心肌挫伤组(MC,n=10)。利用BIM-Ⅱ型生物撞击机制备心肌挫伤模型,应用ELISA法测定心肌肌钙蛋白I(cTnI),应用TUNEL法并结合流式细胞术观察心肌细胞凋亡发生的情况,应用免疫组化SABC法观察Bcl-2和Bax蛋白的表达。对照组除不撞击胸部外,余处理均同MC组。结果MC组与Sen组在伤后4h血清cTnI含量均高于各自伤前及对照组相应时相点(P<0.05);对照组未见TUNEL阳性细胞,MC组和Sen组心肌细胞凋亡指数(AI)分别为(15.6860±0.6887)%和(5.5790±0.1917)%(P<0.05),凋亡率分别为(6.9320±0.6380)%和(3.0210±0.2540)%(P<0.05);与对照组比较,MC组的Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达光密度值均明显增高(P<0.05);而Sen组的Bcl-2蛋白表达光密度值高于MC组(P<0.05),Bax蛋白表达光密度值低于MC组(P<0.05)。结论参芪扶正注射液能有效的减少或抑制钝性心肌挫伤家兔心肌细胞的凋亡,对钝性心肌挫伤具有一定的保护作用,其抑制凋亡可能是通过上调Bcl-2蛋白表达和下调Bax蛋白表达来实现的。

关键词：参芪扶正注射液心肌挫伤细胞凋亡 Bcl-2蛋白 Bax蛋白 cTnI

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嗅鞘细胞复合PLGA导管修复周围神经缺损的研究

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现代生物医学进展 2007年第4期7卷 494-498,503页

作者：矫树生陈建梅游华李兵仓第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 南京军区福州总医院福州350001

探讨嗅鞘细胞(OECs)复合聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA)导管对大鼠坐骨神经缺损的修复作用。方法:SD大鼠80只,随机分成4组,切除右侧部分神经干造成10mm的神经缺损。OECs+PLGA组用充满细胞外基质凝胶和OECs悬液(CM-DiI预标记)的PLGA导管... 详细信息

探讨嗅鞘细胞(OECs)复合聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA)导管对大鼠坐骨神经缺损的修复作用。方法:SD大鼠80只,随机分成4组,切除右侧部分神经干造成10mm的神经缺损。OECs+PLGA组用充满细胞外基质凝胶和OECs悬液(CM-DiI预标记)的PLGA导管桥接坐骨神经缺损;OECs+硅胶管组用含相同内容物的硅胶管桥接;PLGA组和硅胶管组则分别用充满细胞外基质凝胶和DMEM/F12培养基的PLGA导管和硅胶管桥接。术后每周进行感觉运动功能检测,8周时行腓肠肌湿重恢复率、乙酰胆碱脂酶(AChE)染色、电生理和组织形态学分析等检测,同时移植细胞的两组每周进行细胞示踪观察。结果:移植细胞沿神经纵轴分布;除坐骨神经功能指数(SFI)指标外,OECs+PLGA组的各项再生功能指标均优于其它三组。结论:OECs复合PLGA导管能够促进再生神经的成熟和靶组织功能的恢复,二者联合移植是一种有效的周围神经缺损修复方法。

关键词：嗅鞘细胞聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物周围神经缺损

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PTEN对脂多糖攻击RAW264．7细胞核因子-κB转录活性的影响及其意义

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创伤外科杂志 2007年第1期9卷 68-71页

作者：尹华华夏浩朱京慈程晓刚徐祥袁科 Qi Wan 李磊第三军医大学大坪医院野战外科研究所一室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 第三军医大学护理系重庆400038 成都医学院病原学教研室成都610083 Toronto Western Research Institute University of Toronto Canada

目的探讨PTEN(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten)全县对脂多糖(IYS)攻击RAW264．7细胞核因子-κB转录活性的影响。方法NF-κB-LUC质粒与PTEN质粒或其突变质粒分别共转染RAW264．7细胞,通过检测NF-κB反应性荧光素酶报告基因表达,观察PTEN在LPS攻击巨噬细胞时对NF-κB转录激活的影响。结果野生型PTEN过表达可促进LPS诱导的NF-κB活性增强,而突变型PTEN则没有明显作用。结论PTEN可正性调控LPS诱导的NF-κB转录因子的激活,从而有可能在内毒素所诱导的炎症反应中发挥重要的调控作用。

关键词： PTEN基因巨噬细胞细胞核因子-κB 脂多糖

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创伤后并发症及死亡结局的预测研究进展

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中华创伤杂志 2006年第4期22卷 310-312页

作者：梁华平王正国第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第一研究室重庆400042 第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第四研究室重庆400042

尽管严重创伤后常见并发症的早期诊断和早期治疗已取得进展,但创伤后并发症如感染/脓毒症、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、多器官功能障碍综合征(MODS)等的发生率及其引发的病死率仍居高不下.其主要原因为上述并发症的发作凶险、发展极快,... 详细信息

尽管严重创伤后常见并发症的早期诊断和早期治疗已取得进展,但创伤后并发症如感染/脓毒症、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、多器官功能障碍综合征(MODS)等的发生率及其引发的病死率仍居高不下.其主要原因为上述并发症的发作凶险、发展极快,一经明确诊断,即使采用目前最先进的治疗手段与治疗措施也难以遏制其发展进程.如能早期预测创伤后并发症及死亡结局,并对高危创伤患者实施早期干预措施,则可有效降低创伤后并发症的发生率及病死率.由于颅脑损伤后其预后判定有其特殊性,笔者着重对非颅脑损伤后并发症及死亡结局的预测研究进展进行综述。

关键词：后并发症早期预测创伤后急性呼吸窘迫综合征(ARDS) 多器官功能障碍综合征早期干预措施早期诊断常见并发症颅脑损伤后非颅脑损伤

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