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第三军医大学学报 2005年第8期27卷 703-706页

作者：贾后军刘宝华童卫东张连阳文亚渊刘韧第三军医大学大坪医院野战外科研究所普通外科重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的　观察Cajal间质细胞在BALB c小鼠小肠中的分布及c kitmRNA表达的研究。方法　选取成年BALB c小鼠,采用免疫组化法鉴定Cajal间质细胞,采用RT PCR及mRNA提取法检测c kitmRNA的表达情况。结果　Cajal间质细胞主要分布在小肠环肌层纵... 详细信息

目的　观察Cajal间质细胞在BALB c小鼠小肠中的分布及c kitmRNA表达的研究。方法　选取成年BALB c小鼠,采用免疫组化法鉴定Cajal间质细胞,采用RT PCR及mRNA提取法检测c kitmRNA的表达情况。结果　Cajal间质细胞主要分布在小肠环肌层纵肌层间以及浆膜下区,小肠肌条中c kitmRNA表达量很低,需经过mRNA提取后方能检测出。结论　明确了Cajal间质细胞在BALB c小鼠小肠中的分布,探讨了c kitmRNA表达情况并进一步提出了研究c kitmRNA表达的方法,为更深入研究Cajal间质细胞奠定了基础。

关键词： Cajal间质细胞 c—kit BALB/c小鼠

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PKA信号通路调控体外培养大鼠脑片的CRHmRNA表达的研究

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第三军医大学学报 2005年第10期27卷 964-967页

作者：陈立朝许民辉周继红第三军医大学大坪医院野战外科研究所神经外科重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的　探讨大鼠下丘脑神经元表达促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)mRNA的蛋白激酶A (PKA)信号调控机制。方法　通过大鼠下丘脑脑片实验模型,运用Westernblot及逆转录多聚合酶链反应(RT PCR)技术,观察CRH激活下丘脑促肾上腺皮质激素释放激... 详细信息

目的　探讨大鼠下丘脑神经元表达促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)mRNA的蛋白激酶A (PKA)信号调控机制。方法　通过大鼠下丘脑脑片实验模型,运用Westernblot及逆转录多聚合酶链反应(RT PCR)技术,观察CRH激活下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素Ⅰ型受体(CRH1R)后PKA信号通路的活性变化,及其与CRHmRNA表达的关系。结果　CRH可引起下丘脑脑片磷酸化PKA、磷酸化环腺苷一磷酸反应元件结合蛋白(CREB)及CRHmRNA含量明显增加,而CP 15 45 2 6、H89可显著抑制磷酸化PKA、磷酸化CREB及CRHmRNA含量的增加。结论　在下丘脑离体脑片培养条件下,CRH可通过PKA途径实现对下丘脑神经元CRHmRNA的表达的超短正反馈调节。

关键词：应激反应下丘脑脑片促肾上腺皮质激素释放激素mRNA 促肾上腺皮质激素释放激素受体

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Smad3与创伤愈合

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中华创伤杂志 2005年第2期21卷 151-154页

作者：李平周元国第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第七研究室重庆400042

创伤愈合是一个非常复杂的过程,包括止血、炎性反应、新生组织形成及组织重塑等一系列病理生理过程[1].从细胞水平上看,创伤愈合是修复细胞增殖的过程,细胞周期加快,凋亡下降;从分子水平上看,在创伤愈合过程中有许多细胞参与,每种细胞... 详细信息

创伤愈合是一个非常复杂的过程,包括止血、炎性反应、新生组织形成及组织重塑等一系列病理生理过程[1].从细胞水平上看,创伤愈合是修复细胞增殖的过程,细胞周期加快,凋亡下降;从分子水平上看,在创伤愈合过程中有许多细胞参与,每种细胞又分泌多种细胞因子,这些细胞之间、细胞因子之间、细胞和因子之间相互作用形成复杂网络.除细胞周期、凋亡外、炎症反应、细胞分化及迁移、胶原合成等都影响伤口的愈合。

关键词： Smad3 创伤愈合炎性反应细胞周期细胞凋亡

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神经肽SP在胎兔皮肤无瘢痕愈合中的作用

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第三军医大学学报 2005年第3期27卷 213-216页

作者：谢江赖西南王正国王丽丽向德兵黄晖陈辉第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所病理科重庆400042

目的　探讨神经肽SP在胎兔皮肤无瘢痕愈合中的作用。方法　建立胎兔背部皮肤全层切割伤模型 ,观察胎兔背部皮肤伤口愈合状况及神经肽SP在无瘢痕愈合中的变化特点。并应用外源性的SP ,观察胎兔伤口愈合情况及神经纤维增生情况。结果　胎... 详细信息

目的　探讨神经肽SP在胎兔皮肤无瘢痕愈合中的作用。方法　建立胎兔背部皮肤全层切割伤模型 ,观察胎兔背部皮肤伤口愈合状况及神经肽SP在无瘢痕愈合中的变化特点。并应用外源性的SP ,观察胎兔伤口愈合情况及神经纤维增生情况。结果　胎兔皮肤愈合快 ,在伤后 3～ 5d所有创伤完全无瘢痕愈合。胎兔皮肤伤后神经肽SP阳性表达降低 ,第 2天最明显 ,为正常胎兔皮肤的 75 % ,然后逐渐恢复正常。成兔皮肤伤后SP表达第 1天明显降低 ,为正常成兔的60 % ,以后明显增加 ,第 7天达峰值 ,为正常成兔的 168% ,其后下降 ,到第 14天与正常成兔基本相似。外源性SP应用后 ,致伤胎兔皮肤瘢痕形成。结论　神经肽SP的低表达是胎兔皮肤无瘢痕愈合机制之一 ;外源性SP可导致胎兔皮肤瘢痕愈合 ,其机制可能与其引起急性神经源性炎症反应和神经纤维的增生有关。

关键词：创伤无瘢痕愈合神经肽 P物质

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人脐血单个核细胞中Nestin阳性细胞表达及其临床意义

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第三军医大学学报 2005年第8期27卷 773-775页

作者：周毅王景周周萍王昌铭第三军医大学大坪医院野战外科研究所神经内科重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第七研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的　观察脐血单个核细胞是否表达nestin抗原及表达量的多少;探讨人脐血单个核细胞(humancordbloodmononuclearcells ,HCMNCs)对神经系统疾病治疗的潜能。方法　采集正常分娩胎儿的脐血。以淋巴细胞密度梯度离心法分离人脐血细胞(human... 详细信息

目的　观察脐血单个核细胞是否表达nestin抗原及表达量的多少;探讨人脐血单个核细胞(humancordbloodmononuclearcells ,HCMNCs)对神经系统疾病治疗的潜能。方法　采集正常分娩胎儿的脐血。以淋巴细胞密度梯度离心法分离人脐血细胞(humancordbloodcells ,HUCBCs)。用免疫组化法测定HCMNCs及外周血细胞(humanperipheralbloodcells ,HPBCs)中nestin阳性细胞;流式细胞仪(flowcytometer,FCM)分析HCMNCs中nestin阳性细胞的比例及细胞周期。结果　脐血中有nestin阳性细胞,约占HCMNCs的(4 3 2±0 66) %。HCMNCs的G1 0期细胞显著少于外周血而S期细胞则显著多于外周血,G2 M期细胞无显著差异。结论　人脐血单个核细胞确能表达nestin抗原。这将为HCMNCs在神经系统应用提供一定的理论依据。

关键词：脐血单个核细胞 nestin 细胞周期流式细胞术

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甘草酸18α体调节梗阻性肾病大鼠肾间质中CTGF和TGF-β1表达的实验研究

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第三军医大学学报 2005年第4期27卷 323-326页

作者：李开龙张建国王慧民陈菁第三军医大学大坪医院野战外科研究所肾内科重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的　探讨甘草酸 18α体对梗阻性肾病大鼠肾间质中CTGF和TGF β1蛋白表达的影响。方法　 10 0只Wistar大鼠数字表法随机分成实验组 (甘草酸预防组、甘草酸治疗组、生理盐水组 )和对照组 (假手术组 )。实验组大鼠结扎单侧输尿管建立梗... 详细信息

目的　探讨甘草酸 18α体对梗阻性肾病大鼠肾间质中CTGF和TGF β1蛋白表达的影响。方法　 10 0只Wistar大鼠数字表法随机分成实验组 (甘草酸预防组、甘草酸治疗组、生理盐水组 )和对照组 (假手术组 )。实验组大鼠结扎单侧输尿管建立梗阻性肾病模型。分别于术后 7、14、2 8和 5 6d处死实验动物 ,切取肾皮质部位组织 ,用光镜、电镜观察肾间质的病理形态学变化 ;用免疫组织化学染色检测肾间质中CTGF、TGF β1蛋白和Ⅲ型胶原蛋白的表达 ,并用EIG综合图象分析系统对其表达进行半定量分析。结果　模型显示肾间质呈进行性纤维化。半定量分析发现 ,手术后 7d ,甘草酸治疗组和预防组与假手术组相比较 ,肾间质中CTGF、TGF β1和Ⅲ型胶原蛋白表达呈进行性显著增多 (P <0 0 1) ,与生理盐水组相比较呈进行性显著减少 (P <0 0 1) ,但甘草酸治疗组和预防组之间无明显差异 (P >0 0 5 )。相关分析发现 ,肾间质中CTGF的表达量与TGF β1和Ⅲ型胶原的表达呈显著性正相关 (r =0 63和 0 6g ,P <0 0 1)。结论　甘草酸可能通过下调梗阻性肾病大鼠肾间质CTGF和TGF β1的表达 ,抑制肾间质纤维化的发生。

关键词：甘草酸18α体梗阻性肾病肾问质 CTGF TGF—β1

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髓样分化蛋白2在内毒素/脂多糖激活人脐静脉内皮细胞中作用的实验研究

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中华烧伤杂志 2005年第2期21卷 97-99页

作者：熊建琼朱佩芳王正国蒋建新第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第四研究室第三军医大学西南医院急诊科 400038

目的　探讨髓样分化蛋白2(MD- 2)在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的表达及其在内毒素/脂多糖(LPS)激活HUVEC中的作用。　方法　分离、培养HUVEC,采用逆转录聚合酶链反应(RT- PCR)和蛋白免疫印迹(Westernblot)方法,检测LPS刺激前后HUVEC的MD... 详细信息

目的　探讨髓样分化蛋白2(MD- 2)在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的表达及其在内毒素/脂多糖(LPS)激活HUVEC中的作用。　方法　分离、培养HUVEC,采用逆转录聚合酶链反应(RT- PCR)和蛋白免疫印迹(Westernblot)方法,检测LPS刺激前后HUVEC的MD- 2mRNA及其蛋白表达水平,用目的条带吸光度(A)值表示;HUVEC转染0. 5、1. 0、2. 0μgMD 2突变质粒(MD 2C95Y)及2. 0μgpEF BOS空载体质粒、2. 0μgMD 2质粒后, 观察LPS刺激对HUVEC核因子(NF)κB活性和其分泌白细胞介素(IL)8能力的影响, NF κB的测定值用A450nm表示。　结果　LPS刺激前, HU VECMD 2mRNA及蛋白有表达, LPS能明显上调其表达水平, 并呈一定的时间和剂量依赖性。LPS刺激前MD- 2蛋白A值为25 196±1 723,明显低于0. 01mg/LLPS刺激6h的A值(58 817±3 241,P<0. 01);转染MD 2C95Y能明显抑制LPS对HUVECNF- κB的激活和IL 8的分泌。　结论　M-D 2在LPS激活/损伤HUVEC效应中具有重要的地位。

关键词：人脐静脉内皮细胞内毒素激活实验研究髓样蛋白2 逆转录聚合酶链反应脂多糖(LPS) 培养HUVEC 蛋白免疫印迹蛋白表达水平 MD-2蛋白白细胞介素剂量依赖性 NF-κB 分化蛋白载体质粒 IL-8 表达及吸光度 BOS 核因子

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三羟异黄酮对失血性休克大鼠肠系膜上动脉收缩反应性的影响

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中国药理学通报 2005年第6期21卷 675-680页

作者：周荣刘良明胡德耀曾晓荣第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室·创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 泸州医学院心肌生理教研室四川泸州646000

目的研究三羟异黄酮(genistein,GST)对失血性休克大鼠肠系膜上动脉收缩反应性的影响及其可能机制。方法建立大鼠失血性休克(3.9kPa,2h)模型。采用离体血管环张力测定实验,观察三羟异黄酮及酪氨酸蛋白磷酸酶抑制剂钒酸钠(sodiumorthovann... 详细信息

目的研究三羟异黄酮(genistein,GST)对失血性休克大鼠肠系膜上动脉收缩反应性的影响及其可能机制。方法建立大鼠失血性休克(3.9kPa,2h)模型。采用离体血管环张力测定实验,观察三羟异黄酮及酪氨酸蛋白磷酸酶抑制剂钒酸钠(sodiumorthovannadate,Na3VO4)对休克大鼠肠系膜上动脉血管收缩反应性的影响;采用细胞贴附式膜片钳记录技术,观察三羟异黄酮及钒酸钠对休克大鼠肠系膜上动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(largeconductancecalciumactivatedpotassiumchannel,BKCa)活动的影响。结果失血性休克导致大鼠肠系膜上动脉对去甲肾上腺素(noradrenine,NE)的收缩反应性降低,三羟异黄酮可在一定的剂量范围内明显改善失血性休克引起的血管低反应性;钒酸钠则可引起休克血管收缩反应性的进一步降低,且该作用可被0.1mmol·L-1TEA部分阻断;进一步的研究显示,失血性休克可引起大鼠肠系膜上动脉血管平滑肌细胞BKCa通道活动的增强,三羟异黄酮可抑制休克血管平滑肌细胞BKCa通道活动,且该作用可被钒酸钠逆转。结论三羟异黄酮可通过干预由PTK介导的酪氨酸蛋白磷酸化,防止失血性休克血管平滑肌细胞BKCa通道活动的增强,从而有效恢复失血性休克大鼠肠系膜上动脉对NE的收缩反应性。

关键词：三羟异黄酮失血性休克血管低反应性钙激活钾通道膜片钳

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多发伤患者血清降钙素原的变化

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中华创伤杂志 2005年第10期21卷 725-728页

作者：费军余洪俊周健黄显凯梁华平蒋耀光第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所创伤科重庆400040 第三军医大学附属西南医院康复理疗科第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第一研究室重庆400040

目的研究多发伤患者血清降钙素原的变化,并探讨其与损伤严重度、感染及多器官功能障碍综合征(MODS)的关系。方法测定33例多发伤患者伤后第1天、第3天、第7天血清降钙素原水平,同时评定损伤严重度评分(ISS)值、急性病生理学和长期健康评... 详细信息

目的研究多发伤患者血清降钙素原的变化,并探讨其与损伤严重度、感染及多器官功能障碍综合征(MODS)的关系。方法测定33例多发伤患者伤后第1天、第3天、第7天血清降钙素原水平,同时评定损伤严重度评分(ISS)值、急性病生理学和长期健康评价(APACHE)Ⅱ计分及记录血常规、血糖、感染、MODS情况。结果伤后24h,3,7d多发伤患者血清降钙素原水平显著高于正常对照组(P<0.01),伤后24h内降钙素原水平与APACHEⅡ计分呈正相关(rs=0.601,P<0.05),发生MODS组降钙素原、白细胞计数、血糖及APACHEⅡ值均明显高于脏器功能正常组(P<0.05);发生感染前后,降钙素原差异有统计学意义(P<0.01)。结论多发伤可引起降钙素原升高,且与损伤严重程度和中性粒细胞、血糖相关;检测降钙素原变化有助于及早发现感染,并可预警MODS的发生。

关键词：降钙素多处创伤损伤严重度评分急性病生理学和长期健康评价多器官功能不全综合征血清降钙素原多发伤伤患者 APACHEⅡ计分多器官功能障碍综合征

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小鼠肺泡巨噬细胞清道夫受体和CD14表达与肺损伤的相关性研究(英文)

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中国临床康复 2005年第6期9卷 222-224页

作者：杨策蒋建新朱佩芳解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆市400042

背景:清道夫受体(scavengerreceptor,SR)和CD14与内毒素性肺损伤密切相关,进一步揭示其表达变化规律及其与肺损伤的关系,有助于深入阐明创伤、感染后肺脏炎症反应失衡的受体机制。目的:探讨创伤及合并内毒素攻击时肺泡巨噬细胞CD14和SR... 详细信息

背景:清道夫受体(scavengerreceptor,SR)和CD14与内毒素性肺损伤密切相关,进一步揭示其表达变化规律及其与肺损伤的关系,有助于深入阐明创伤、感染后肺脏炎症反应失衡的受体机制。目的:探讨创伤及合并内毒素攻击时肺泡巨噬细胞CD14和SR的表达及其效应。设计:随机对照的实验研究。单位:解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室。材料:实验于2001-08/11在第三军医大学野战外科研究所(国家重点实验室)完成。选用63只昆明种小鼠及其肺泡巨噬细胞。方法:实验动物随机分为对照组、创伤组和创伤合并内毒素组。采用双侧股骨骨折合并内毒素攻击小鼠模型,内毒素(5mg/kg)于骨折后1h经小鼠尾静脉注入,检测创伤及合并内毒素攻击后小鼠肺泡巨噬细胞CD14和SR的表达变化。结果:创伤后6h,肺泡巨噬细胞CD14和SR分别呈上调和下调表达,合并内毒素攻击后CD14和SR进一步发生显著的上调和下调性改变。相关分析显示肺泡巨噬细胞CD14和SR呈负相关关系。结论:创伤及合并内毒素攻击后肺泡巨噬细胞CD14和SR的双向调变可能与肺脏炎症反应由“自控”向“失控”转化有关,有效拮抗CD14和SR的双向调变策略,有助于进一步认识肺损伤及其修复机制。

关键词：抗原内毒素血症巨噬细胞创伤和损伤

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