检索结果-内蒙古大学图书馆

中华危重病急救医学 2015年第2期27卷 110-114页

作者：刘政侯凤艳靳贺肖雅范霞杨雪严军梁华平第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨胍丁胺对创伤小鼠炎症反应及脾细胞免疫功能的影响。方法将48只成年雄性C57BId6小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组（双后肢骨折＋失血35％）和胍丁胺组（创伤／失血＋胍丁胺200mg／kg），每组16只。各组分别于制模后3h、... 详细信息

目的探讨胍丁胺对创伤小鼠炎症反应及脾细胞免疫功能的影响。方法将48只成年雄性C57BId6小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组（双后肢骨折＋失血35％）和胍丁胺组（创伤／失血＋胍丁胺200mg／kg），每组16只。各组分别于制模后3h、24h处死8只小鼠，采集血、脾脏及肝脏。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清和肝组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL-6、IL-1β）含量，用全自动生化分析仪测定血清天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）及乳酸脱氢酶（LOI~）水平，采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测刀豆蛋白A（ConA）刺激的脾细胞增殖反应，用ELISA法检测ConA刺激脾细胞分泌γ-干扰素（IFN-γ）与IL-2的能力。结果与对照组比较，模型组创伤后3h血清TNF—α、IL-6、IL-1β水平均显著升高[TNF—α（ng／L）：145．38±31．50比23．06±11．14；IL-6（ng/L）：496．94±50．76比47．13±17．47；IL-18（ng／L）：321．31±43．02比29．25±16．24；均P〈O．01]，胍丁胺治疗能明显抑制创伤诱导的血清炎症因子TNF-α（ng／L：111．56±25．47比145．38±31．50）、IL-6（ng／L：412．56±44．33比496．94±50．76）、IL-1β（ng/L：273．38±45．25比321．31±43．02）的升高（P〈0．05或P〈0．01）；创伤后24h，模型组和胍丁胺组血清炎症因子均恢复至对照组水平。创伤后3h，各组肝组织TNF—α、IL-6水平无明显差异；创伤后24h，模型组肝组织TNF-β、IL-6水平均较对照组显著升高[TNF-α（ng／mg）：32．93±4．90比26．58±2．33；IL-6（ng／mg）：11．20±1．66比8．38±0．89；均P〈0．01]，胍丁胺治疗能抑制创伤引起的肝组织TNF—α（ng／mg：28．92±3．16比32．93±4．90）、IL-6（ng／mg：9．03±1．28比11．20±1．66）水平升高（P〈0．05和P〈O．01）。创伤后24h，模型组和胍丁胺组血清AST、ALT、LDH均较对照组明显升高[AST（U／L）：405．9±31．2、245．7±22．1比128．2±15．9；ALT（U／L）：92．1±6．3、51．6±5．0比30．1±3．2；LDH（U／L）：606．7±36．3、478．7±25．3比384．0±16．6；均P〈0．01]；但胍丁胺治疗能明显减少创伤后血清肝酶的活性（均P〈O．01）。创伤后24h，模型组ConA刺激脾细胞增殖能力及其分泌IFN-1与IL-2的能力均较对照组明显降低[增殖率：（40．97±4．13）％比（89．99±7．76）％；IFN-γ（ng／L）：91．6±12．3比353．2±21．5；IL-2（ng／L）：53．4±6．4比91．0±12．2；均P〈0．01]，胍丁胺治疗能明显增强创伤后ConA刺激脾细胞的增殖能力[增殖率：（74．86±5．75）％比（40．97±4．13）％，P〈O．01]，提高脾细胞分泌1FN-γ与IL-2的能力[IFN-γ（ng／L）：327．8±23．6比91．6±12．3；IL-2（ng／L）：74．8±10．4比53．4±6．4；均P〈0．01]。结论胍丁胺能显著改善创伤诱导的脾细胞免疫功能抑制，减轻过度炎症反应和器官功能损害。

关键词：胍丁胺创伤炎症反应免疫调节

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人类人工染色体作为转基因载体的应用前景

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遗传 2005年第6期27卷 995-1000页

作者：左国伟吕凤林第三军医大学大坪医院野战外科研究所感染与免疫研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

自1997年首次成功构建人类人工染色体(human artificial chromosome,HAC)以来,对其理论、方法学问题的研究一直就是人们关注的焦点,并引起了科学家们的极大兴趣,目前已能采用不同的方法获得多种类型的HAC。与酵母人工染色体(YAC)、细菌... 详细信息

自1997年首次成功构建人类人工染色体(human artificial chromosome,HAC)以来,对其理论、方法学问题的研究一直就是人们关注的焦点,并引起了科学家们的极大兴趣,目前已能采用不同的方法获得多种类型的HAC。与酵母人工染色体(YAC)、细菌人工染色体(BAC)等相比,HAC不整合到细胞的基因组中,以一个独立的功能性染色体单位而存在,并在细胞中进行正常的有丝分裂和减数分裂。迄今的研究表明:HAC可以携带大片段基因组DNA,是研究人类基因表达和调控、染色体功能基本单元的重要工具,也是建立HAC动物模型的重要手段。在未来的基因治疗方面有着广阔的应用前景。

关键词：人类人工染色体基因载体基因表达基因治疗

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大鼠Ⅰ型肺泡上皮细胞的分离、培养及生物学特性研究

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解放军医学杂志 2014年第5期39卷 374-378页

作者：李勇杜娟余静王海燕岳彩黎曾灵蒋建新第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的改良细胞分离方法,得到高纯度的原代Ⅰ型肺泡上皮细胞(ATⅠ)并进行培养,初步观察其生物学特性。方法采用SPF级SD大鼠,通过酶消化法、IgG贴壁法和免疫磁珠法获得高纯度ATⅠ并进行培养,采用台盼蓝染色计算细胞活力,免疫荧光DAPI法鉴... 详细信息

目的改良细胞分离方法,得到高纯度的原代Ⅰ型肺泡上皮细胞(ATⅠ)并进行培养,初步观察其生物学特性。方法采用SPF级SD大鼠,通过酶消化法、IgG贴壁法和免疫磁珠法获得高纯度ATⅠ并进行培养,采用台盼蓝染色计算细胞活力,免疫荧光DAPI法鉴定细胞纯度和表型,倒置显微镜观察细胞生长规律,计数法绘制细胞生长曲线。结果每只体重120g左右的SD大鼠可获得(2.1±0.5)×106个ATⅠ,细胞活力为93.8%±1.6%,细胞纯度为91.0%±0.6%。培养3d后细胞完全黏附、伸展,培养7d后汇合形成单层扁平状。免疫荧光检测显示,培养的原代细胞水通道蛋白5(AQP5)和小窝蛋白1(Cav-1)呈阳性表达,表面活性蛋白C前体(pro-SPC)呈阴性表达。获取的ATⅠ可在体外增殖,生长曲线显示原代ATⅠ在对数增长期的倍增时间约为66h。结论改良细胞分离方法可以得到高纯度的ATⅠ,培养后细胞生长良好,可为研究以ATⅠ损伤为特征的肺部疾病提供可靠的体外模型。

关键词：肺泡上皮细胞,Ⅰ型细胞分离细胞培养技术

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严重多发伤患者外周血清对巨噬细胞核因子-KB的激活作用及其与预后的关系

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中华外科杂志 2009年第1期47卷 54-57页

作者：梁华平徐祥夏浩费军吴丹王正国第三军医大学大坪医院野战外科研究所一室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨严重多发伤患者伤后24h外周血清对巨噬细胞核因子-KB（NF—KB）的激活作用及其与预后的关系。方法收集47例严重多发伤患者及24名健康体检者的外周血清。将带有荧光素酶报告基因的NF—KB重组质粒转染至巨噬细胞（RAW264．7），24... 详细信息

目的探讨严重多发伤患者伤后24h外周血清对巨噬细胞核因子-KB（NF—KB）的激活作用及其与预后的关系。方法收集47例严重多发伤患者及24名健康体检者的外周血清。将带有荧光素酶报告基因的NF—KB重组质粒转染至巨噬细胞（RAW264．7），24h后用不同的血清刺激该细胞6h。检测荧光素酶活性以反映血清对***的激活作用强度，同时以ELISA法测定血清中白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（（TNF—α）、白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-1（IL-1）受体拮抗剂（IL-1Ra）、可溶性肿瘤坏死因子受体I（sTNFRI）水平。结果创伤血清组对巨噬细胞NF—KB的激活作用显著高于正常血清组，且创伤后MODS组、死亡组值分别显著高于无MODS组及存活组。该变化与APACHEⅡ评分呈明显的正相关，但与血清中各细胞因子水平无明显相关性。NF—KB活性在判定MODS及死亡结局的受试者作业特征曲线（ROC）下面积显著大于APACHEⅡ评分的ROC下面积。结论早期测定严重多发伤患者外周血清对巨噬细胞NF—KB的激活作用对MODS及死亡结局的判定具有参考价值。

关键词：多处创伤 NF-KB 巨噬细胞预后

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树突状细胞在介导创伤后迟发型超敏反应受抑中的作用

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中国医学科学院学报 2007年第4期29卷 501-505页

作者：王震平梁华平第三军医大学大坪医院野战外科研究所一室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨失血合并闭合性骨折对小鼠迟发型超敏(DTH)反应的影响。方法致伤后分别用2,4-二硝基氟苯(DNFB)和异硫氰酸荧光素(FITC)涂抹小鼠腹部诱导DTH反应,用流式细胞术分析腹股沟淋巴结内FITC阳性细胞和树突状细胞(DC),并测定DNFB致敏24... 详细信息

目的探讨失血合并闭合性骨折对小鼠迟发型超敏(DTH)反应的影响。方法致伤后分别用2,4-二硝基氟苯(DNFB)和异硫氰酸荧光素(FITC)涂抹小鼠腹部诱导DTH反应,用流式细胞术分析腹股沟淋巴结内FITC阳性细胞和树突状细胞(DC),并测定DNFB致敏24h后淋巴结细胞过继性转移DTH反应的能力。结果创伤小鼠的DTH反应显著低于正常小鼠(P<0.01)。流式细胞分析表明,创伤小鼠腹股沟淋巴结中的FITC阳性细胞、携带FITC的DC以及携带FITC的成熟DC的百分含量均显著低于正常小鼠(P<0.01)。DNFB致敏24h后淋巴结细胞过继性转移DTH反应的能力显著降低(P<0.01)。结论失血合并闭合性骨折导致小鼠DTH反应低下,这与创伤后DC向引流淋巴结内细胞递呈抗原的能力显著下降密切相关。

关键词：创伤迟发型超敏反应树突状细胞流式细胞分析

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预处理对失血性休克大鼠肠系膜上动脉收缩反应性的影响

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中国危重病急救医学 2007年第5期19卷 261-265页

作者：周荣刘良明第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的评价不同条件预处理对失血性休克血管功能的保护作用机制。方法采用大鼠失血性休克模型，观察不同条件预处理（失血预处理及吡哪地尔预处理）对由激动剂[去甲肾上腺素（NE）]诱导在体大鼠肠系膜上动脉（SMA）收缩反应性的影响。结果... 详细信息

目的评价不同条件预处理对失血性休克血管功能的保护作用机制。方法采用大鼠失血性休克模型，观察不同条件预处理（失血预处理及吡哪地尔预处理）对由激动剂[去甲肾上腺素（NE）]诱导在体大鼠肠系膜上动脉（SMA）收缩反应性的影响。结果5％～10％失血预处理对休克大鼠存活率无显著改善，而吡哪地尔可明显改善休克后120min的大鼠存活率。5％失血预处理30min可上调大鼠休克后0min使用NE前后的股动脉压变化，而预处理24h可降低大鼠休克前股动脉压变化，但对休克后使用NE前后的股动脉压变化无明显影响；吡哪地尔预处理1h可降低大鼠休克前使用NE前后的股动脉压变化，而预处理24h对大鼠休克后的股动脉压变化均无影响。5％失血预处理24h可改善休克后120min大鼠SMA对NE的收缩反应性，使用NE后的管径变化显著增加（P〈0．01）；吡哪地尔预处理1h和24h可明显降低大鼠休克前SMA对NE的收缩反应性，使用NE后的管径变化显著降低（P均〈0．05），但吡哪地尔预处理（1h和24h）均可改善休克后120min大鼠SMA对NE的收缩反应性，使用NE后的管径变化显著增加（P均〈0．05）；而格列苯脲可部分取消吡哪地尔的这一作用。结论吡哪地尔预处理24h可降低休克前大鼠SMA对NE的收缩反应性，并可改善休克后120min大鼠SMA对NE的收缩反应性，且使休克大鼠存活率明显提高。吡哪地尔预处理24h对失血性休克大鼠血管功能的保护作用可能与ATP敏感性钾通道有关。

关键词：休克血管低反应性预处理吡哪地尔 ATP敏感性钾通道

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缺氧诱导因子-1α对缺氧所致血管平滑肌细胞收缩反应的调控作用

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中国危重病急救医学 2007年第11期19卷 647-651页

作者：张瑗刘良明明佳杨光明陈玮第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）对缺氧所致血管平滑肌细胞（VSMC）收缩反应的调控作用及其相关机制。方法实验分为正常组、缺氧组和给药组（寡霉素,Oligomycin）。建立Transwell内皮细胞和平滑肌细胞双室联合共培养模型,分别于缺... 详细信息

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）对缺氧所致血管平滑肌细胞（VSMC）收缩反应的调控作用及其相关机制。方法实验分为正常组、缺氧组和给药组（寡霉素,Oligomycin）。建立Transwell内皮细胞和平滑肌细胞双室联合共培养模型,分别于缺氧后不同时间点（0、0.5、1、2、3、4和6h）测定Transwell各下腔荧光渗透率以反映VSMC对去甲肾上腺素（NE）的收缩反应性;同时利用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分析HIF-1α及其可能相关下游分子如内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、诱生型一氧化氮合酶（iNOS）、环氧化酶-2（COX-2）、血红素氧化酶-1（HO-1）的mRNA表达变化规律。结果缺氧后VSMC对NE的收缩反应性变化表现为双相变化：早期代偿性增高,于0.5h达高峰,为正常组的1.53倍（P〈0.01）;至缺氧晚期则呈进行性降低,其6h收缩性较正常组降低30%（P〈0.05）。寡霉素处理可完全抑制早期反应性的升高趋势,其0.5h收缩变化为缺氧组同时间点的38.3%,但可不同程度地提高晚期反应性,其6h收缩变化较缺氧组同时间点增加12.8%（P〈0.05）。常氧状态下,联合培养内皮细胞和平滑肌细胞可稳定表达HIF-1α及其相关分子,缺氧后HIF-1αmRNA表达显著增加,于4-6h达到峰值,为正常组的1.62倍（P〈0.01）。iNOS、COX-2及HO-1的mRNA表达亦呈递增并表现为先后激活顺序、分别于2、3和4h达峰值,为正常组的3.23、2.26和2.86倍（P均〈0.01）;给药组则表现为各分子的表达维持在正常范围（P均〉0.05）。结论缺氧应激可引起VSMC对NE收缩反应性双相变化：即早期代偿性增高,晚期进行性下降;阻断HIF-1α可明显削弱该双相变化的幅度。HIF-1α可能通过对eNOS、iNOS、COX-2及HO-1的选择性作用,在缺氧后VSMC收缩反应性的双相变化中发挥重要作用。

关键词：缺氧诱导因子-1α 血管平滑肌细胞血管反应性

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一种抗干扰穿戴式血氧饱和度监测仪的研制

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传感技术学报 2012年第1期25卷 6-10页

作者：龚渝顺吴宝明高丹丹闫庆广冯正权第三军医大学大坪医院野战外科研究所第五研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

为实现动态环境下人体血氧饱和度的实时监测,研制了一种穿戴式血氧监测仪。采用D/A数模转换控制LED双光源交替发光,以光频转换接收头作为传感器,将光强信号转换为频率信号,直接送入单片机采集;根据反射式原理计算得到结果,通过无线方式... 详细信息

为实现动态环境下人体血氧饱和度的实时监测,研制了一种穿戴式血氧监测仪。采用D/A数模转换控制LED双光源交替发光,以光频转换接收头作为传感器,将光强信号转换为频率信号,直接送入单片机采集;根据反射式原理计算得到结果,通过无线方式发送数据。针对动态环境下获取的光电容积脉搏波中掺杂的运动干扰,提出了血氧干扰分离自适应对消算法,以消除运动干扰对计算结果的影响。设计实现了设备的小型化,提高了其可穿戴性,具有抗运动干扰的能力,能准确的获取血氧信息,适合在日常动态环境下的实时监测。

关键词：血氧饱和度反射式运动干扰动态监测

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P物质在表皮干细胞向毛囊迁移分化中的作用

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中华烧伤杂志 2007年第3期23卷 204-207页

作者：朱剑武赖西南王正国黄晖王丽丽甯交琳第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的了解P物质(SP)在表皮干细胞(ESC)向毛囊迁移分化中的作用并探讨其机制。方法将体外培养的ESC以角蛋白19(K19)及β1整合素免疫染色法确认其为所需的ESC。采用5-溴-2-尿嘧啶脱氧核苷(BrdU)标记ESC,将SP加入已标记的ESC培养液中,根据所... 详细信息

目的了解P物质(SP)在表皮干细胞(ESC)向毛囊迁移分化中的作用并探讨其机制。方法将体外培养的ESC以角蛋白19(K19)及β1整合素免疫染色法确认其为所需的ESC。采用5-溴-2-尿嘧啶脱氧核苷(BrdU)标记ESC,将SP加入已标记的ESC培养液中,根据所加SP的浓度分为10^(-5)mol/L SP组、10^(-6)mol/L SP组、10^(-7)mol/L SP组。并将加入SP的各组ESC悬液0.3 ml注射到裸鼠背部真皮内,于首次注射后4、7、10、14 d分别再注射1次,剂量、部位同前。对照组除不使用SP外,其余处理相同。各组于首次注射后28 d在无菌条件下取注射区皮肤及远离注射区的正常皮肤组织,行免疫组织化学染色,电子显微镜下观察裸鼠皮肤组织学特点,行皮肤毛囊计数。结果注射后,10^(-5)mol/L SP组可见散在的毛囊,部分毛囊发育不全。10^(-6)mol/L SP组、10^(-7)mol/L SP组真皮深层及皮下组织中,可见大量的组织结构清晰的毛囊,部分毛囊的毛根部位可见棕黄色BrdU阳性颗粒,多数毛囊的外毛根鞘部位可见棕黄色β连环蛋白阳性颗粒以及极少量发育不全的毛囊,毛囊计数[(1.9±1.2)、(1.3±0.8)个]均少于对照组[(10.5±1.2)个,P<0.01]。对照组真皮深层和皮下组织的毛囊发育不全,表皮层中可见棕黄色BrdU阳性颗粒和β连环蛋白阳性颗粒。结论SP可诱导基底层的ESC向毛囊迁移,其诱导效应与SP浓度有关,并促使ESC内β连环蛋白的表达增高,诱导其向毛囊分化。

关键词： P物质干细胞毛囊细胞分化

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精氨酸血管加压素恢复失血性休克大鼠血管反应性和钙敏感性与蛋白激酶C亚型的关系

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中国危重病急救医学 2008年第3期20卷 139-143页

作者：杨光明李涛徐竞明佳刘良明第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨精氨酸血管加压素（AVP）对失血性休克大鼠血管反应性和钙敏感性的恢复作用与蛋白激酶C（PKC）亚型的关系。方法取失血性休克大鼠肠系膜上动脉（SMA）并去除内皮，利用离体血管环张力测定技术，观察了AVP（5×10^-11、5... 详细信息

目的探讨精氨酸血管加压素（AVP）对失血性休克大鼠血管反应性和钙敏感性的恢复作用与蛋白激酶C（PKC）亚型的关系。方法取失血性休克大鼠肠系膜上动脉（SMA）并去除内皮，利用离体血管环张力测定技术，观察了AVP（5×10^-11、5×10^-10和5×10^-9mol／L）调节对休克SMA对去甲肾上腺素（NE）反应性和钙敏感性的作用及其与PKCα、δ亚型的关系。结果AVP（5×10^-11、5×10^-10和5×10^-9mol／L）可明显恢复休克后的血管反应性和钙敏感性，使SMA对NE和Ca^2＋的量-效曲线明显左移，血管环产生的最大收缩张力（Emax）升高（P均〈0.01），且呈一定的剂量依赖关系，各剂量组间比较差异均有统计学意义（P均〈0.05）。而特异性的PKCα、δ亚型抑制剂Gǒ6976（5×10^-6mol／L）和Rottlerin（10^-5mol／L）均可拮抗AVP（5×10^-10mol／L）诱导的休克后血管反应性和钙敏感性升高，抵消了AVP诱导的NE和Ca^2＋的量-效曲线左移，使NE的Emax明显降低（P〈0.05或P〈0．01）。结论AVP能剂量依赖性地升高失血性休克大鼠的血管反应性和血管平滑肌钙敏感性，其机制可能与PKCα、δ亚型激活有关。

关键词：失血性休克精氨酸血管加压素蛋白激酶血管反应性钙敏感性

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