检索结果-内蒙古大学图书馆

创伤/烧伤对T淋巴细胞的影响研究进展

创伤/烧伤对T淋巴细胞的影响研究进展

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2015第十一届全国中西医结合灾害医学大会、江苏省中西医结合学会第二届灾害医学学术会议、中华卫生应急电子杂志第二届编委会会议暨2015江苏国际医疗器械科技博览会

作者：余静严军梁华平第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室

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PQ401抑制脂多糖诱导的小鼠体内外炎症反应

PQ401抑制脂多糖诱导的小鼠体内外炎症反应

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作者：朱俊宇郑志华范霞严军梁华平第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室

目的:观察PQ401对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠体内外炎症反应的保护作用,并研究其作用机制。方法:将50只成年C57BL/6小鼠随机分为对照组(10只,腹腔注射DMSO)、模型组(10只,腹腔注射LPS 10mg/kg+DMSO)和PQ401组(30只,腹腔... 详细信息

目的:观察PQ401对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠体内外炎症反应的保护作用,并研究其作用机制。方法:将50只成年C57BL/6小鼠随机分为对照组(10只,腹腔注射DMSO)、模型组(10只,腹腔注射LPS 10mg/kg+DMSO)和PQ401组(30只,腹腔注射LPS 10mg/kg+PQ401 25、50、1OOmg/kg),于给药12h后采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-1β、IL-6、IL-10)的含量。将RAW264.7细胞铺于二十四孔板,分为对照组(8孔,有血清培养基)、模型组(8孔,LPS 10μg/m1)、PQ401组(24孔,LPS 10μg/ml和PQ401 0.1、1、10μM),药物作用6、12、24h后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-1β、IL-6、IL-10)的含量。采用慢病毒干扰载体(IGF-1Rα/βshRNA)感染的RAW264.7细胞,PQ401 10μM作用后同样检测上述指标。采用蛋白质免疫印迹试验(Western bloting)检测PQ401 10μM作用的RAW264.7细胞NF-κB信号通路相关蛋白p-IKκ/IKκ、p-IκB/IκB、p-P65/P65的变化情况。结果:注射LPS 12h后PQ401组小鼠精神状态、活动均好于LPS组。PQ401治疗后能有效降低小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6含量,增加IL-10含量。在药物作用6、12、24h后,PQ401均能以浓度依赖性地降低RAW264.7细胞上清中TNF-α、IL-1β3、IL-6、IL-10含量。慢病毒干扰IGF-1Rα/β的细胞,不影响PQ401作用后的各炎症因子的分泌。PQ401不影响NF-κB信号通路相关蛋白表达。结论:在小鼠体内外,PQ401通过降低炎症因子合成,缓解LPS诱导的炎症反应。其作用机制与IGF-1R和NF-κB信号通路无关。

关键词： LPS 炎症反应 PQ401 体内外相关蛋白模型组

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PQ401的体内外抗炎效应研究

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第三军医大学学报 2015年第14期37卷 1466-1470页

作者：郑志华范霞李炫飞朱俊宇马娓梁华平李梨重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 第三军医大学大坪医院野战外科研究所一室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 重庆医科大学附属第二医院肝胆外科重庆400010

目的研究胰岛素样生长因子-1受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF-1R)的选择性抑制剂PQ401在体内外的抗炎效应。方法体外实验:小鼠RAW264.7细胞株经0.1、1、10μmol/L PQ401预作用1 h后,加入10μg/m L脂多糖(LPS)作用12 h,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-1β、IL-6)的含量。另将小鼠RAW264.7细胞株经10μmol/L PQ401预作用1 h后,加入10μg/m L LPS作用6、12、24 h后再次检测以上指标的变化。体内实验:将50只成年雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组和不同剂量PQ401组,每组10只。腹腔注射LPS 10 mg/kg制备急性炎症反应小鼠模型,对照组腹腔注射等量二甲基亚砜(DMSO),PQ401组分别腹腔注射LPS 10 mg/kg和PQ401 25、50、100 mg/kg。于给药12 h后通过ELISA检测血清和肝组织中TNF-α、IL-1β、IL-6的含量;用全自动生化分析仪测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)及总胆红素(TBil)水平;采用Western blot检测肝细胞核内核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的含量。结果与LPS单独作用组相比,PQ401呈浓度和时间依赖性降低RAW264.7细胞上清中TNF-α、IL-1β、IL-6的水平。在LPS诱导的小鼠急性腹膜炎模型中,小鼠经LPS注射12 h后表现为精神萎靡、活动减少,而PQ401组小鼠的精神状态、活动均好于模型组。PQ401治疗后能有效降低LPS所致急性腹膜炎小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6的含量,降低肝组织TNF-α、IL-1β的水平和NF-κB p65的含量。结论 PQ401在体内外对LPS诱导的炎症因子分泌具有明显的抑制效应。

关键词： PQ401 脂多糖急性炎症细胞因子

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创伤性凝血功能障碍的早期诊断和20AA复方氨基酸联用大剂量维生素B_6新疗法应用

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中华卫生应急电子杂志 2015年第1期1卷 4-7页

作者：岳茂兴周培根梁华平李瑛卞晓星江苏大学附属武进医院常州213002 重庆市第三军医大学大坪医院野战外科研究所一室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室400042

创伤性凝血及凝血病是世界性的治疗难题,笔者探讨创伤性凝血功能障碍的早期诊断及救治。介绍目前国内外对创伤性凝血障碍及凝血病的综合治疗措施,在综合治疗的基础上,采用复方氨基酸（20AA）联用大剂量Vit B6新疗法救治创伤性凝血障碍... 详细信息

创伤性凝血及凝血病是世界性的治疗难题,笔者探讨创伤性凝血功能障碍的早期诊断及救治。介绍目前国内外对创伤性凝血障碍及凝血病的综合治疗措施,在综合治疗的基础上,采用复方氨基酸（20AA）联用大剂量Vit B6新疗法救治创伤性凝血障碍及凝血病患者能取得了比较好的效果。

关键词：凝血功能障碍复方氨基酸早期诊断创伤性大剂量维生素B6 疗法应用

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大鼠Ⅰ型肺泡上皮细胞的分离、培养及生物学特性研究

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解放军医学杂志 2014年第5期39卷 374-378页

作者：李勇杜娟余静王海燕岳彩黎曾灵蒋建新第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的改良细胞分离方法,得到高纯度的原代Ⅰ型肺泡上皮细胞(ATⅠ)并进行培养,初步观察其生物学特性。方法采用SPF级SD大鼠,通过酶消化法、IgG贴壁法和免疫磁珠法获得高纯度ATⅠ并进行培养,采用台盼蓝染色计算细胞活力,免疫荧光DAPI法鉴... 详细信息

目的改良细胞分离方法,得到高纯度的原代Ⅰ型肺泡上皮细胞(ATⅠ)并进行培养,初步观察其生物学特性。方法采用SPF级SD大鼠,通过酶消化法、IgG贴壁法和免疫磁珠法获得高纯度ATⅠ并进行培养,采用台盼蓝染色计算细胞活力,免疫荧光DAPI法鉴定细胞纯度和表型,倒置显微镜观察细胞生长规律,计数法绘制细胞生长曲线。结果每只体重120g左右的SD大鼠可获得(2.1±0.5)×106个ATⅠ,细胞活力为93.8%±1.6%,细胞纯度为91.0%±0.6%。培养3d后细胞完全黏附、伸展,培养7d后汇合形成单层扁平状。免疫荧光检测显示,培养的原代细胞水通道蛋白5(AQP5)和小窝蛋白1(Cav-1)呈阳性表达,表面活性蛋白C前体(pro-SPC)呈阴性表达。获取的ATⅠ可在体外增殖,生长曲线显示原代ATⅠ在对数增长期的倍增时间约为66h。结论改良细胞分离方法可以得到高纯度的ATⅠ,培养后细胞生长良好,可为研究以ATⅠ损伤为特征的肺部疾病提供可靠的体外模型。

关键词：肺泡上皮细胞,Ⅰ型细胞分离细胞培养技术

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利用改进的聚合酶链反应方法鉴定芳香烃受体敲除小鼠

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第三军医大学学报 2014年第16期36卷 1761-1763页

作者：唐婉琦杨雪张醇范霞严军梁华平第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室、创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的改进常规的基因分型技术,以更准确、直观地鉴定芳香烃受体敲除(aryl hydrocarbon receptor knockout,AhR KO,AhR-/-)小鼠。方法剪取AhR杂合子(heterozygous,+/-)后代仔鼠脚趾,常规提取基因组脱氧核糖核酸,分别采用传统和改进的PCR... 详细信息

目的改进常规的基因分型技术,以更准确、直观地鉴定芳香烃受体敲除(aryl hydrocarbon receptor knockout,AhR KO,AhR-/-)小鼠。方法剪取AhR杂合子(heterozygous,+/-)后代仔鼠脚趾,常规提取基因组脱氧核糖核酸,分别采用传统和改进的PCR方法对其基因型进行鉴定,并对结果进行比较,同时分析在试剂总量不变的情况下两种方法获得的基因分型结果的准确性和直观性。结果在反应体系调整为10μL、退火温度和时间改为65.5℃40 s、其余PCR参数(预变性温度和时间为94℃3 min;变性和延伸温度及时间分别为94℃30 s,72℃1 min,该步骤循环35次;最后一步延伸温度和时间为72℃5 min;样本保存温度为4℃)不变的情况下,采用双体系运转的改进PCR法结果比传统PCR法直观,而且总的试剂用量与传统PCR法相等。结论改进的PCR法可以更好地鉴定AhR KO小鼠表型,适合在基因分型工作中推广。

关键词：芳香烃受体敲除小鼠基因分型

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159242例颅脑交通伤流行病学分析

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中华创伤杂志 2014年第12期30卷 1215-1218页

作者：张溢华邱俊周继红徐伦山许民辉第三军医大学大坪医院野战外科研究所神经外科创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室

目的回顾分析颅脑交通伤住院患者流行病学特点,为颅脑交通伤的防治提供流行病学依据.方法从“中华创伤数据库”中提取2001-2007年210家医院收治的159 242例颅脑交通伤患者住院信息,分析患者年龄、性别、时间分布、住院天数、伤情、治... 详细信息

目的回顾分析颅脑交通伤住院患者流行病学特点,为颅脑交通伤的防治提供流行病学依据.方法从“中华创伤数据库”中提取2001-2007年210家医院收治的159 242例颅脑交通伤患者住院信息,分析患者年龄、性别、时间分布、住院天数、伤情、治疗结果等特点.结果颅脑交通伤患者年龄（33.01 ±15.20）岁,男女比为2.39：1.患者主要集中于21 ～ 50岁,其中31～40岁最易发生颅脑交通伤.患者年平均增长率为3.92％.7～12月患者数占54.10％,其中10月份住院总人数达到峰值.患者平均住院20.20 d,其中≥90岁组最多,≤10岁组最少.患者住院平均费用为13 689.8元,其中≤10岁组最低,51～ 60岁组最高.总体治愈率为66.92％,死亡率为4.22％.随着年龄的增加,重型颅脑交通伤的比例增加,治愈率呈下降趋势.男性患者的死亡率高于女性患者,但治愈率低于女性.结论颅脑交通伤多发于中青年,主要集中在下半年.应加强对老年人群和男性颅脑交通伤患者的关注.分别建立不同的预防和救治措施将可能会对颅脑交通伤防治产生较好的效果.

关键词：事故,交通颅脑损伤流行病学回顾性分析

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4-苯基丁酸对创伤失血性休克大鼠的保护作用及与改善血管功能的关系

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第三军医大学学报 2014年第17期36卷 1771-1774页

作者：彭小勇李涛刘良明徐竞田昆仑陈向云杨光明第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室、创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨4-苯基丁酸（4-phenylbutyrate,PBA）对创伤失血性休克大鼠的保护作用及对血管反应性的影响。方法 SD大鼠192只（雌雄各半,12~14周龄,体质量180~220 g）,分为正常对照组,休克对照组,乳酸林格氏液（LR）组,PBA 5、20、50 mg/kg... 详细信息

目的探讨4-苯基丁酸（4-phenylbutyrate,PBA）对创伤失血性休克大鼠的保护作用及对血管反应性的影响。方法 SD大鼠192只（雌雄各半,12~14周龄,体质量180~220 g）,分为正常对照组,休克对照组,乳酸林格氏液（LR）组,PBA 5、20、50 mg/kg组,复制大鼠创伤失血性休克模型,观察不同剂量PBA对休克大鼠存活情况、血流动力学、血气指标及血管反应性的影响。结果 PBA能够改善创伤失血性休克大鼠的存活情况,使休克动物的24 h存活率从休克组的0、LR组的19%提高至PBA 20 mg/kg组的75%,动物存活时间从休克组的3.2 h、LR组的10.8 h延长至PBA 20 mg/kg组的19.9 h。PBA 20 mg/kg输注后血流动力学指标和血气指标明显优于单用LR复苏（P〈0.05,P〈0.01）。同时,PBA输注后血管收缩和舒张功能也明显升高,血管收缩反应性和舒张反应性从LR组的63.3%、73.3%分别恢复至PBA 20 mg/kg组的80.2%、93.1%（P〈0.01）。结论 PBA能改善休克后血管功能,稳定血流动力学,发挥对创伤失血性休克大鼠的保护作用。

关键词： 4-苯基丁酸创伤失血性休克血流动力学血管低反应性

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表皮神经嵴干细胞修复脊髓损伤的研究进展

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中华创伤杂志 2014年第7期30卷 746-748页

作者：张洁元段朝霞李兵仓第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所第六研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

近年来,脊髓损伤的临床治疗策略有了很大程度的改进,但仍不能达到完全治愈的效果.未来研究的重点倾向于联合多种治疗方法共同促进脊髓损伤修复.细胞基础治疗是目前最有前景的方法,国内外研究均证实,不同类型的干细胞或体外前体细胞可以... 详细信息

近年来,脊髓损伤的临床治疗策略有了很大程度的改进,但仍不能达到完全治愈的效果.未来研究的重点倾向于联合多种治疗方法共同促进脊髓损伤修复.细胞基础治疗是目前最有前景的方法,国内外研究均证实,不同类型的干细胞或体外前体细胞可以对感觉和运动功能有不同程度的改善[1-2].在神经损伤修复后细胞替代疗法中,神经干细胞是所有成熟干细胞中与脊髓最为相关的候选者.然而,由于神经干细胞的来源限制,自体移植是不能实现的,而其他细胞类型包括胚胎干细胞或诱导性多能干细胞都存在免疫排斥反应或肿瘤形成等问题.

关键词：脊髓损伤修复干细胞修复神经嵴神经干细胞表皮细胞替代疗法免疫排斥反应多能干细胞

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BMSCs膜受体CXCR4和CXCR7表达及其在骨创伤修复中的作用

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中华创伤杂志 2014年第12期30卷 1225-1229页

作者：李芳菲张波刘苹翁土军罗刚邓蔓菁第三军医大学大坪医院野战外科研究所口腔科重庆400042 第三军医大学大坪医院第四研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室

目的探讨BMSCs膜表面受体CXCR4和CXCR7的表达及其在BMSCs迁移中的作用,为骨创伤修复提供理论依据.方法选择C57BL/6小鼠经贴壁法培养获得第2代BMSCs,免疫荧光染色法和流式细胞技术检测BMSCs膜表面受体CXCR4和CXCR7的表达.趋化因子CXCL1... 详细信息

目的探讨BMSCs膜表面受体CXCR4和CXCR7的表达及其在BMSCs迁移中的作用,为骨创伤修复提供理论依据.方法选择C57BL/6小鼠经贴壁法培养获得第2代BMSCs,免疫荧光染色法和流式细胞技术检测BMSCs膜表面受体CXCR4和CXCR7的表达.趋化因子CXCL12诱导BMSCs迁移实验分为对照组（无血清培养基诱导BMSCs迁移）、CXCL12组（含CXCL12无血清培养基诱导BMSCs迁移）和CXCR4阻断组（含CXCL12无血清培养基诱导阻断膜受体CXCR4后BMSCs迁移）,统计BMSCs迁移数量,观察CXCR4和CXCR7趋化BMSCs迁移的作用.采用Western blot检测阻断膜表面受体CXCR4后CXCR7蛋白的表达.结果免疫荧光结果显示大量BMSCs膜表面表达CXCR4和CXCR7.流式细胞仪检测结果显示BMSCs膜表面分子CXCR4的阳性率为96.4％,CXCR7的阳性率为97.3％.细胞迁移结果显示,CXCL12组BMSCs迁移量最高,CXCR4阻断组BMSCs迁移量显著低于CXCL12组但迁移量仍高于对照组（P＜0.01）,而阻断XCCR4后CXCR7蛋白表达升高.结论 CXCR4和CXCR7受体均表达于BMSCs膜表面,在CXCL12调节BMSCs迁移至骨创伤创面过程中CXCR4发挥主要作用.

关键词：创伤和损伤间质干细胞自体受体

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