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第三军医大学学报 2010年第19期32卷 2045-2048页

作者：张子焕许民辉赖西南王丽丽许明伟崔红第三军医大学大坪医院野战外科研究所神经外科重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的观察爆炸致舱内大鼠高加速度负载时脑损伤的病理特点,探讨其相关机制。方法引爆密闭舱室下方聚能盘内点爆源,模拟装甲车触雷爆炸,制作爆炸致舱内大鼠(坐姿)高加速度负载时脑损伤模型;48只SD雄性大鼠随机分为对照组、400mgTNT爆炸当... 详细信息

目的观察爆炸致舱内大鼠高加速度负载时脑损伤的病理特点,探讨其相关机制。方法引爆密闭舱室下方聚能盘内点爆源,模拟装甲车触雷爆炸,制作爆炸致舱内大鼠(坐姿)高加速度负载时脑损伤模型;48只SD雄性大鼠随机分为对照组、400mgTNT爆炸当量致伤组(400mg组)及800mgTNT爆炸当量致伤组(800mg组),每组16只,其中8只用于测量舱室内座位与大鼠头颅的加速度峰值(PA)及持续作用时间(TD),于伤后6h处死,取脑、脊髓组织行病理检查,对海马CA1区正常锥体细胞记数及组织损伤分级,另8只行Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆功能。结果 400mg组PA座位为(5745±1036)g,TD座位为(6.87±0.58)ms,PA头颅为(701±309)g,TD头颅为(1.00±0.14)ms;800mg组PA座位为(13109±1167)g,TD座位为(11.08±1.43)ms,PA头颅为(3383±935)g,TD头颅为(1.32±0.18)ms,两组数据对应参数之间差异显著(P<0.01)。伤后6h大鼠大体解剖无明显异常,但光镜下大脑、脊髓存在神经元急性损伤改变,800mg组电镜下还见大脑毛细血管、轴索损伤。海马CA1组织学损伤分级:800mg组>400mg组>对照组;神经元密度:800mg组<400mg组<对照组(P<0.01)。与对照组比较,第1～4天800mg组逃避潜伏期延长(P<0.05),学习记忆曲线右移,延后1d趋于稳定,经过平台次数及跨越目标象限时间减少(P<0.05);400mg组介于两者之间。结论爆炸致舱内大鼠高加速度负载时大鼠可出现轻度弥漫性脑损伤,可能产生相应的早期症状或晚期后遗症,可推得装甲车辆触雷爆炸底板未击穿、变形小时乘员存在脑损伤可能。

关键词：密闭舱室加速度脑损伤病理特点

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复合海绵的细胞毒性及生物相容性研究

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中国生化药物杂志 2010年第4期31卷 221-224页

作者：刁俊林刘建仓李东红创伤烧伤复合伤国家重点实验室第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室重庆400042

目的评价复合海绵的细胞毒性及生物相容性。方法采用MTT实验考察复合海绵浸提液对L929细胞增殖的抑制作用;扫描电镜观察L929细胞在海绵表面的生长情况;利用分光光度法测定其对鼠抗凝血的溶血作用;在鼠肝脏造成活性出血创面,用复合海绵... 详细信息

目的评价复合海绵的细胞毒性及生物相容性。方法采用MTT实验考察复合海绵浸提液对L929细胞增殖的抑制作用;扫描电镜观察L929细胞在海绵表面的生长情况;利用分光光度法测定其对鼠抗凝血的溶血作用;在鼠肝脏造成活性出血创面,用复合海绵或明胶海绵止血后,光镜观察海绵与肝脏组织的相容性。结果复合海绵浸提液对L929细胞增殖无抑制作用,该细胞可在海绵表面正常生长;无溶血作用,组织相容性较好。结论复合海绵无细胞毒性,且具有良好的生物相容性。

关键词：壳聚糖复合海绵细胞毒性血液相容性组织相容性

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汶川地震899例颅脑损伤伤情及救治分析

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重庆医学 2010年第24期39卷 3373-3374,3377页

作者：袁丹凤邱俊周继红张良第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室/创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨汶川地震住院患者颅脑伤伤情特点,为地震所致颅脑伤救治提供参考。方法利用《创伤数据库系统》V3.0软件系统对颅脑伤患者的病历资料进行汇总分析。结果颅脑伤患者899例。致伤原因以钝器伤为主。损伤部位以头皮为主(72.56%)。颅... 详细信息

目的探讨汶川地震住院患者颅脑伤伤情特点,为地震所致颅脑伤救治提供参考。方法利用《创伤数据库系统》V3.0软件系统对颅脑伤患者的病历资料进行汇总分析。结果颅脑伤患者899例。致伤原因以钝器伤为主。损伤部位以头皮为主(72.56%)。颅脑AIS评分1分者624例。合并其他部位损伤711例次,以胫骨骨折为主。手术治疗198例,以头皮清创缝合术最多。结论颅脑伤多以轻度损伤为主,可能是由于大批重症颅脑伤员现场死亡或因救治不及时死亡,应提高地震所致颅脑伤的早期救治水平和加强灾害的早期预防。

关键词：地震颅脑伤伤情

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脑源性神经营养因子基因转染修复大鼠坐骨神经损伤的组织学观察及功能评价

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第三军医大学学报 2010年第22期32卷 2383-2388页

作者：李培建李兵仓北京军区总医院神经外科北京100700 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的观察重组腺病毒载体AxCA-BDNF转染大鼠损伤坐骨神经后的脊髓前角运动神经元存活、神经生长和功能恢复情况。方法将90只成年Wistar大鼠分成3组,AxCA-BDNF转染组(硅胶管内置AxCA-BDNF原液)、BDNF组(硅胶管内置BDNF溶液)和对照组(硅胶... 详细信息

目的观察重组腺病毒载体AxCA-BDNF转染大鼠损伤坐骨神经后的脊髓前角运动神经元存活、神经生长和功能恢复情况。方法将90只成年Wistar大鼠分成3组,AxCA-BDNF转染组(硅胶管内置AxCA-BDNF原液)、BDNF组(硅胶管内置BDNF溶液)和对照组(硅胶管内置空白病毒稀释液),每组30只,另取5只Wistar大鼠作为正常组。应用组织学图像分析技术对脊髓前角运动神经元和新生神经纤维进行计数,对新生神经髓鞘厚度进行测量分析;应用足印分析和电生理检查技术,从功能角度判定BDNF基因转移的生物效应。结果在3、7、14d及1个月4个时相点,光镜、电镜病理组织学检查和图像分析证实,AxCA-BDNF转染组和BDNF组脊髓前角运动神经元存活的数量、新生神经纤维数目及其髓鞘厚度均明显优于对照组(P<0.01);HRP逆行示踪也证实神经联接的再形成优于对照组(P<0.01);在坐骨神经功能指数测定、神经传导速度和复合肌肉动作电位振幅等神经功能恢复指标上,AxCA-BDNF转染组和BDNF组均优于对照组(P<0.01)。结论应用腺病毒介导的BDNF基因转移,不仅能促进损伤神经纤维再生,也能保护损伤的脊髓神经元,大鼠的神经功能得到了明显改善。

关键词：坐骨神经损伤重组腺病毒脑源性神经营养因子基因转染免疫组织化学坐骨神经功能指数

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人pri-miR-155重组腺病毒的制备及其表达与活性鉴定

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免疫学杂志 2010年第3期26卷 246-250,254页

作者：黄钢王海燕王凯蒋建新白云第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室全军交通医学研究所全军交通伤重点实验室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 第三军医大学基础部医学遗传教研室重庆400042

目的制备表达人成熟miR-155的重组腺病毒,检测该免疫调控分子在肺癌细胞A549的表达及其生物学活性。方法以正常人基因组DNA为模板,PCR扩增约1000bp完整的pri-miR-155基因序列,克隆到T载体pTA2上,测序证实后,正向亚克隆入腺病毒穿梭载体p... 详细信息

目的制备表达人成熟miR-155的重组腺病毒,检测该免疫调控分子在肺癌细胞A549的表达及其生物学活性。方法以正常人基因组DNA为模板,PCR扩增约1000bp完整的pri-miR-155基因序列,克隆到T载体pTA2上,测序证实后,正向亚克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建pAdTrack-CMV/pri-miR-155重组质粒,与pAdEasy-1腺病毒骨架质粒重组并扩增后转染293FT细胞,进行重组腺病毒的包装、扩增,对其进行安全性、滴度的测定。用此腺病毒感染A549细胞,采用RT-PCR法检测成熟miR-155的表达,双报告基因法检测其干扰活性。结果构建的人pAdTrack-CMV/pri-miR-155重组质粒经酶切及测序鉴定正确;用此腺病毒感染A549细胞后,RT-PCR检测成熟miR-155表达较无关序列病毒感染对照组显著增强。腺病毒感染A549细胞后,通过转染后双报告基因检测相对萤光素酶活性较对照组降低,显示此腺病毒感染A549细胞后,可有效表达成熟miR-155,并具有生物学活性。结论成功制备人pri-miR-155重组腺病毒,并在感染肺腺癌细胞A549后高效表达成熟有活性miR-155。

关键词： miR-155 重组腺病毒免疫调控

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体外LPS诱导血管内皮细胞通透性改变及其与连接蛋白43的关系

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第三军医大学学报 2010年第24期32卷 2582-2585页

作者：明佳袁侨英周艳苟元彬刘良明第三军医大学西南医院乳腺疾病中心重庆400038 第三军医大学西南医院老年科重庆400038 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的研究缝隙连接蛋白(connexin,Cx)43在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠血管内皮细胞(vascular endothelial cell,VEC)通透性中的表达变化及其意义。方法以1、2、3、4μg/ml LPS刺激原代培养的大鼠VEC,观察作用15、30 min,1、2、3、4、5、6、7 h后VEC增殖活力和通透性的变化;2μg/ml LPS刺激VEC后,采用RT-PCR和Western blot等方法检测Cx43的表达变化;分析VEC通透性和Cx43表达之间的相关性。结果 1、2μg/ml的LPS对VEC增殖活力无明显影响,3、4μg/ml的LPS明显降低了VEC的增殖(P<0.01);2μg/ml的LPS能够较好地模拟脓毒性休克的血管高通透性(P<0.01);用此浓度的LPS刺激VEC后Cx43的mRNA和蛋白表达均逐渐降低(P<0.01);Cx43的表达与LPS引起的VEC通透性改变呈负相关关系(r=-0.877,P<0.01)。结论 Cx43可能参与了脓毒性休克后VEC通透性的调节;Cx43可能具有抑制脓毒性休克后血管内膜通透性的作用。[关键词]脓毒性休克;脂多糖;血管通透性;血管内皮细胞;

关键词：脓毒性休克脂多糖血管通透性血管内皮细胞连接蛋白43

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大鼠坐骨神经缺损后组织工程人工神经对外周靶器官及脊髓神经元的保护作用

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中华创伤杂志 2010年第3期26卷 265-269页

作者：游华矫树生冯帅南陈建梅李兵仓第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所第六研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 南京军区福州总医院骨科

目的研究嗅球成鞘细胞（olfactory ensheathing cell,OEC）-雪旺细胞（Schwann cell,SC）-细胞外基质成分（extracellular matrix,ECM）-聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物[poly（DLlactide-co-glycolide acid）,PLGA]桥接体对大鼠坐骨神经缺损后外周靶器官及脊髓神经元的保护作用.方法建立SD大鼠右侧坐骨神经15 mm缺损模型后,用OEC、SC、ECM以及自行制备的PLGA导管,构成OEC-SC-ECM-PLGA桥接体进行修复,同时设OEC-ECM-PLGA组、SC-ECM-PLGA组、ECM-PLGA组、PLGA组和自体神经移植对照组.在术后1,3,6,9周行腓肠肌湿重恢复率及运动终板检测,并于术后9周行CM-Dil和霍乱毒素B亚单位-辣根过氧化物酶（CB-HRP）逆行示踪检测.结果术后各组动物术侧腓肠肌湿莺和运动终板数量下降,3周后除ECM-PLGA组和PLGA组外,腓肠肌湿重和运动终板数量逐渐增加.9周时OEC-SC-ECM-PLGA组腓肠肌湿重、运动终板数量及运动终板长轴长度与自体神经移植组差异无统计学意义（P＞0.05）.9周时CM-DiI和CB-HRP逆行示踪结果显示,OEC-SC-ECM-PLGA组标记的脊髓前角运动神经元数量与自体神经移植组差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 OEC-SC-ECM-PLGA桥接体对大鼠坐骨神经缺损后的外周靶器官及脊髓神经元具有一定的保护作用.

关键词：创伤和损伤周围神经组织工程

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大鼠骨髓间充质干细胞体外培养条件的优化及生物学特性

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第三军医大学学报 2010年第20期32卷 2163-2167页

作者：赵玉金李瑶琛赖洁娟王海燕黄苏娜蒋建新第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室、创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 第三军医大学西南医院全军眼科中心重庆400038 第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所重庆400038

目的建立一种新的高效体外骨髓间充质干细胞纯化培养方法,并对所获得细胞进行生物学行为研究。方法采用全骨髓培养获得原代骨髓间充质干细胞,经体外成脂、成骨诱导分化并检测细胞表面分子表达对所获得干细胞进行鉴定,传代后低密度接种(3... 详细信息

目的建立一种新的高效体外骨髓间充质干细胞纯化培养方法,并对所获得细胞进行生物学行为研究。方法采用全骨髓培养获得原代骨髓间充质干细胞,经体外成脂、成骨诱导分化并检测细胞表面分子表达对所获得干细胞进行鉴定,传代后低密度接种(3×103/cm2)结合机械擦除对所培养细胞进行纯化,并对未纯化及纯化细胞分别进行集落形成单位实验、生长曲线及细胞周期分析来研究其生物学特性。结果全骨髓贴壁法可以成功培养出骨髓间充质干细胞,细胞呈现干细胞特性生长;可在体外成功地进行成脂、成骨分化;阴性表面标记分子CD34、CD45表达率均小于2%,阳性表面标记CD73、CD90表达率均高于95%。经纯化后的细胞具有更优的生物学行为,表现在:克隆形成率达到(28.80±5.00)%(P<0.01);培养12d后细胞数量增加(26.18±4.80)倍(P<0.05);处于S+G2/M期的细胞比例达到(45.98±1.60)%(P<0.01)。结论低密度接种结合机械擦除方法可以获得高纯度骨髓间充质干细胞,且该细胞具有更佳的生物学特性。

关键词：骨髓间充质干细胞细胞生物学行为细胞培养条件优化

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珊瑚姜油对常见耐药菌的抑菌作用及急性毒性实验

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第三军医大学学报 2010年第2期32卷 111-114页

作者：周琳琳杨策王海燕黄苏娜刘庆胡德耀胡仕林李廷荣陈岩冰蒋建新第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室全军交通医学研究所重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 重庆市日用化学工业研究所重庆400065

目的研究珊瑚姜油(Zingiber corallinum Hanceoil)对耐药菌的作用以及珊瑚姜油的急性毒性,以确定珊瑚姜油的抗菌作用和安全性。方法纸片法药敏实验,探讨珊瑚姜油对耐药菌的抑菌作用。通过空腹灌胃法,观察珊瑚姜油对小鼠毒性反应,测定半... 详细信息

目的研究珊瑚姜油(Zingiber corallinum Hanceoil)对耐药菌的作用以及珊瑚姜油的急性毒性,以确定珊瑚姜油的抗菌作用和安全性。方法纸片法药敏实验,探讨珊瑚姜油对耐药菌的抑菌作用。通过空腹灌胃法,观察珊瑚姜油对小鼠毒性反应,测定半数致死剂量(LD50)。结果珊瑚姜油对耐药革兰阴性大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟杆菌、鲍曼不动杆菌有明显的抑菌作用(P<0.05),对铜绿假单胞菌的抑菌作用不明显,但与对照组比较差异仍有统计学意义(P<0.05);对耐药革兰阳性菌金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血性葡萄球菌也有一定的抑菌作用(P<0.05)。松油烯-4-醇含量为79%的珊瑚姜油的抑菌作用明显好于含量为34%的珊瑚姜油(P<0.05)。珊瑚姜油LD50为1 790.427 mg/kg。结论珊瑚姜油为低毒性药物,对耐药菌有明显的抑菌作用,松油烯-4-醇是其主要的抑菌成分。

关键词：珊瑚姜油松油烯-4-醇半数致死剂量耐药菌

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新型阳离子卟啉的设计合成与抗微生物活性

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第三军医大学学报 2010年第1期32卷 41-45页

作者：于克贵李东红周成合刁俊林第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 西南大学化学化工学院重庆400715

目的探讨新型阳离子卟啉化合物及其金属络合物的合成及光动力抗菌活性。方法由缩合反应得到的四吡啶卟啉与一系列苄卤反应得到10个新型的阳离子卟啉化合物;采用琼脂双倍稀释法考查上述化合物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和白... 详细信息

目的探讨新型阳离子卟啉化合物及其金属络合物的合成及光动力抗菌活性。方法由缩合反应得到的四吡啶卟啉与一系列苄卤反应得到10个新型的阳离子卟啉化合物;采用琼脂双倍稀释法考查上述化合物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和白色念珠菌的光动力抑菌活性。结果合成得到10个新的阳离子卟啉化合物对革兰阳性金黄色葡萄球菌均表现出显著的光抑制作用,尤其是化合物3a、4a的MIC80分别为2μg/ml和0.5μg/ml;对真菌白色念珠菌也有一定的抑菌活性;而对革兰阴性大肠杆菌的抑制作用较低,绿脓杆菌则表现出对所有化合物的耐药性。阳离子卟啉的光抑菌活性随苯环上取代基吸电子能力的增强而降低。结论新型阳离子卟啉化合物对金黄色葡萄球菌有良好的光抑制活性。

关键词：阳离子卟啉合成抗微生物活性革兰阳性菌革兰阴性菌真菌

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