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第一届长三角地区创伤学术会议

作者：梁华平徐祥夏浩费军吴丹王正国重庆市第三军医大学大坪医院野战外科研究所一室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室

目的探讨严重多发伤患者伤后24小时外周血清对巨噬细胞核因子-κB的激活作用及其与预后的关系。方法将带有荧光素酶报告基因的NF-κB重组质粒转染至巨噬细胞(RAW264.7),24h后用不同的血清刺激该细胞6h。检测荧光素酶活性以反映血清对核... 详细信息

目的探讨严重多发伤患者伤后24小时外周血清对巨噬细胞核因子-κB的激活作用及其与预后的关系。方法将带有荧光素酶报告基因的NF-κB重组质粒转染至巨噬细胞(RAW264.7),24h后用不同的血清刺激该细胞6h。检测荧光素酶活性以反映血清对核因子-κB的激活作用强度,同时以ELISA法测定血清中白细胞介素-1?、肿瘤坏死因子?、白细胞介素-10、白细胞介素-1受体拮抗剂、可溶性肿瘤坏死因子受体I

关键词：多发伤患者巨噬细胞核因子-κ 激活作用外周血

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树突状细胞在介导创伤后迟发型超敏反应受抑中的作用

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中国医学科学院学报 2007年第4期29卷 501-505页

作者：王震平梁华平第三军医大学大坪医院野战外科研究所一室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨失血合并闭合性骨折对小鼠迟发型超敏(DTH)反应的影响。方法致伤后分别用2,4-二硝基氟苯(DNFB)和异硫氰酸荧光素(FITC)涂抹小鼠腹部诱导DTH反应,用流式细胞术分析腹股沟淋巴结内FITC阳性细胞和树突状细胞(DC),并测定DNFB致敏24... 详细信息

目的探讨失血合并闭合性骨折对小鼠迟发型超敏(DTH)反应的影响。方法致伤后分别用2,4-二硝基氟苯(DNFB)和异硫氰酸荧光素(FITC)涂抹小鼠腹部诱导DTH反应,用流式细胞术分析腹股沟淋巴结内FITC阳性细胞和树突状细胞(DC),并测定DNFB致敏24h后淋巴结细胞过继性转移DTH反应的能力。结果创伤小鼠的DTH反应显著低于正常小鼠(P<0.01)。流式细胞分析表明,创伤小鼠腹股沟淋巴结中的FITC阳性细胞、携带FITC的DC以及携带FITC的成熟DC的百分含量均显著低于正常小鼠(P<0.01)。DNFB致敏24h后淋巴结细胞过继性转移DTH反应的能力显著降低(P<0.01)。结论失血合并闭合性骨折导致小鼠DTH反应低下,这与创伤后DC向引流淋巴结内细胞递呈抗原的能力显著下降密切相关。

关键词：创伤迟发型超敏反应树突状细胞流式细胞分析

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预处理对失血性休克大鼠肠系膜上动脉收缩反应性的影响

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中国危重病急救医学 2007年第5期19卷 261-265页

作者：周荣刘良明第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的评价不同条件预处理对失血性休克血管功能的保护作用机制。方法采用大鼠失血性休克模型，观察不同条件预处理（失血预处理及吡哪地尔预处理）对由激动剂[去甲肾上腺素（NE）]诱导在体大鼠肠系膜上动脉（SMA）收缩反应性的影响。结果... 详细信息

目的评价不同条件预处理对失血性休克血管功能的保护作用机制。方法采用大鼠失血性休克模型，观察不同条件预处理（失血预处理及吡哪地尔预处理）对由激动剂[去甲肾上腺素（NE）]诱导在体大鼠肠系膜上动脉（SMA）收缩反应性的影响。结果5％～10％失血预处理对休克大鼠存活率无显著改善，而吡哪地尔可明显改善休克后120min的大鼠存活率。5％失血预处理30min可上调大鼠休克后0min使用NE前后的股动脉压变化，而预处理24h可降低大鼠休克前股动脉压变化，但对休克后使用NE前后的股动脉压变化无明显影响；吡哪地尔预处理1h可降低大鼠休克前使用NE前后的股动脉压变化，而预处理24h对大鼠休克后的股动脉压变化均无影响。5％失血预处理24h可改善休克后120min大鼠SMA对NE的收缩反应性，使用NE后的管径变化显著增加（P〈0．01）；吡哪地尔预处理1h和24h可明显降低大鼠休克前SMA对NE的收缩反应性，使用NE后的管径变化显著降低（P均〈0．05），但吡哪地尔预处理（1h和24h）均可改善休克后120min大鼠SMA对NE的收缩反应性，使用NE后的管径变化显著增加（P均〈0．05）；而格列苯脲可部分取消吡哪地尔的这一作用。结论吡哪地尔预处理24h可降低休克前大鼠SMA对NE的收缩反应性，并可改善休克后120min大鼠SMA对NE的收缩反应性，且使休克大鼠存活率明显提高。吡哪地尔预处理24h对失血性休克大鼠血管功能的保护作用可能与ATP敏感性钾通道有关。

关键词：休克血管低反应性预处理吡哪地尔 ATP敏感性钾通道

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缺氧诱导因子-1α对缺氧所致血管平滑肌细胞收缩反应的调控作用

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中国危重病急救医学 2007年第11期19卷 647-651页

作者：张瑗刘良明明佳杨光明陈玮第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）对缺氧所致血管平滑肌细胞（VSMC）收缩反应的调控作用及其相关机制。方法实验分为正常组、缺氧组和给药组（寡霉素,Oligomycin）。建立Transwell内皮细胞和平滑肌细胞双室联合共培养模型,分别于缺... 详细信息

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）对缺氧所致血管平滑肌细胞（VSMC）收缩反应的调控作用及其相关机制。方法实验分为正常组、缺氧组和给药组（寡霉素,Oligomycin）。建立Transwell内皮细胞和平滑肌细胞双室联合共培养模型,分别于缺氧后不同时间点（0、0.5、1、2、3、4和6h）测定Transwell各下腔荧光渗透率以反映VSMC对去甲肾上腺素（NE）的收缩反应性;同时利用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分析HIF-1α及其可能相关下游分子如内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、诱生型一氧化氮合酶（iNOS）、环氧化酶-2（COX-2）、血红素氧化酶-1（HO-1）的mRNA表达变化规律。结果缺氧后VSMC对NE的收缩反应性变化表现为双相变化：早期代偿性增高,于0.5h达高峰,为正常组的1.53倍（P〈0.01）;至缺氧晚期则呈进行性降低,其6h收缩性较正常组降低30%（P〈0.05）。寡霉素处理可完全抑制早期反应性的升高趋势,其0.5h收缩变化为缺氧组同时间点的38.3%,但可不同程度地提高晚期反应性,其6h收缩变化较缺氧组同时间点增加12.8%（P〈0.05）。常氧状态下,联合培养内皮细胞和平滑肌细胞可稳定表达HIF-1α及其相关分子,缺氧后HIF-1αmRNA表达显著增加,于4-6h达到峰值,为正常组的1.62倍（P〈0.01）。iNOS、COX-2及HO-1的mRNA表达亦呈递增并表现为先后激活顺序、分别于2、3和4h达峰值,为正常组的3.23、2.26和2.86倍（P均〈0.01）;给药组则表现为各分子的表达维持在正常范围（P均〉0.05）。结论缺氧应激可引起VSMC对NE收缩反应性双相变化：即早期代偿性增高,晚期进行性下降;阻断HIF-1α可明显削弱该双相变化的幅度。HIF-1α可能通过对eNOS、iNOS、COX-2及HO-1的选择性作用,在缺氧后VSMC收缩反应性的双相变化中发挥重要作用。

关键词：缺氧诱导因子-1α 血管平滑肌细胞血管反应性

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P物质在表皮干细胞向毛囊迁移分化中的作用

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中华烧伤杂志 2007年第3期23卷 204-207页

作者：朱剑武赖西南王正国黄晖王丽丽甯交琳第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的了解P物质(SP)在表皮干细胞(ESC)向毛囊迁移分化中的作用并探讨其机制。方法将体外培养的ESC以角蛋白19(K19)及β1整合素免疫染色法确认其为所需的ESC。采用5-溴-2-尿嘧啶脱氧核苷(BrdU)标记ESC,将SP加入已标记的ESC培养液中,根据所... 详细信息

目的了解P物质(SP)在表皮干细胞(ESC)向毛囊迁移分化中的作用并探讨其机制。方法将体外培养的ESC以角蛋白19(K19)及β1整合素免疫染色法确认其为所需的ESC。采用5-溴-2-尿嘧啶脱氧核苷(BrdU)标记ESC,将SP加入已标记的ESC培养液中,根据所加SP的浓度分为10^(-5)mol/L SP组、10^(-6)mol/L SP组、10^(-7)mol/L SP组。并将加入SP的各组ESC悬液0.3 ml注射到裸鼠背部真皮内,于首次注射后4、7、10、14 d分别再注射1次,剂量、部位同前。对照组除不使用SP外,其余处理相同。各组于首次注射后28 d在无菌条件下取注射区皮肤及远离注射区的正常皮肤组织,行免疫组织化学染色,电子显微镜下观察裸鼠皮肤组织学特点,行皮肤毛囊计数。结果注射后,10^(-5)mol/L SP组可见散在的毛囊,部分毛囊发育不全。10^(-6)mol/L SP组、10^(-7)mol/L SP组真皮深层及皮下组织中,可见大量的组织结构清晰的毛囊,部分毛囊的毛根部位可见棕黄色BrdU阳性颗粒,多数毛囊的外毛根鞘部位可见棕黄色β连环蛋白阳性颗粒以及极少量发育不全的毛囊,毛囊计数[(1.9±1.2)、(1.3±0.8)个]均少于对照组[(10.5±1.2)个,P<0.01]。对照组真皮深层和皮下组织的毛囊发育不全,表皮层中可见棕黄色BrdU阳性颗粒和β连环蛋白阳性颗粒。结论SP可诱导基底层的ESC向毛囊迁移,其诱导效应与SP浓度有关,并促使ESC内β连环蛋白的表达增高,诱导其向毛囊分化。

关键词： P物质干细胞毛囊细胞分化

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原浆型和纤维型星形胶质细胞的分离、培养和鉴定

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第三军医大学学报 2007年第16期29卷 1632-1633页

作者：李民曾琳刘媛龙在云李书林伍亚民第三军医大学大坪医院野战外科研究所第三研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的从新生鼠皮层中分离、培养并鉴定原浆型星形胶质细胞(protoplasmic astrocyte,PAS)和纤维型星形胶质细胞(fibrous astrocyte,FAS)。方法新生大鼠皮层分离的混合星形胶质细胞,经差速振荡法得到纯化的PAS和FAS;用免疫组化法分别对两... 详细信息

目的从新生鼠皮层中分离、培养并鉴定原浆型星形胶质细胞(protoplasmic astrocyte,PAS)和纤维型星形胶质细胞(fibrous astrocyte,FAS)。方法新生大鼠皮层分离的混合星形胶质细胞,经差速振荡法得到纯化的PAS和FAS;用免疫组化法分别对两种细胞进行鉴定。结果观察到两种细胞均特异性的标记为阳性。PAS外观扁平似圆盘状,细胞体较大,突起宽而扁,分支少,均匀排列生长;FAS细胞体较小,呈圆形、卵圆形或多角形,突起较多,细长并有分支,呈交错生长。结论采用差速振荡法体外纯化培养两种AS,方法可行、有效,同时纯度达95%以上。

关键词：原浆型星形胶质细胞纤维型星形胶质细胞星形胶质细胞分离鉴定

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控制性低温对大鼠肢体爆炸伤后继发肺损伤的作用

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第三军医大学学报 2007年第17期29卷 1666-1669页

作者：莫立稳赖西南甯交琳朱剑武王丽丽第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的观察早期全身和局部控制性低温对大鼠肢体爆炸伤后继发肺损伤的作用,探讨控制性低温在肢体爆炸伤后继发肺损伤防治中的临床应用价值。方法采用大鼠肢体爆炸伤模型,动物按随机数字表法分为4组(每组8只):正常对照组(C)、单纯致伤组(Ⅰ... 详细信息

目的观察早期全身和局部控制性低温对大鼠肢体爆炸伤后继发肺损伤的作用,探讨控制性低温在肢体爆炸伤后继发肺损伤防治中的临床应用价值。方法采用大鼠肢体爆炸伤模型,动物按随机数字表法分为4组(每组8只):正常对照组(C)、单纯致伤组(Ⅰ:致伤)、全身低温组(Ⅱ:致伤+全身低温6h)和局部低温组(Ⅲ:致伤+局部低温6h);各组分别于致伤后6h取标本。测定肺TNF-α、IL-6、IL-10和MDA浓度;观察肺脏病理学变化。结果大鼠致伤6h后肺TNF-α、IL-6、IL-10和MDA浓度显著升高(P<0.01);肺脏充血水肿和炎细胞浸润明显;致伤大鼠经全身低温或局部低温处理6h后肺、IL-6、IL-10及MDA浓度均明显降低(P<0.05);肺脏充血水肿和炎细胞浸润程度明显减轻。结论早期全身或局部控制性低温可明显抑制肢体爆炸伤大鼠肺脏的炎性损伤和氧化损伤,减轻肺脏充血水肿和炎细胞浸润程度,有利于减轻爆炸伤后继发性肺损伤。

关键词：肢体爆炸伤控制性低温肺损伤

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兔正碰交通伤的实验研究

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第三军医大学学报 2007年第17期29卷 1657-1659页

作者：赵辉尹志勇王正国杨志焕蒋建新宁心李晓炎陈海斌杨光瑜第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的研究家兔正碰交通伤的损伤机制和伤情特点。方法30只家兔根据碰撞初速度不同分为3组,Ⅰ组(30km/h),Ⅱ组(40km/h),Ⅲ组(50km/h)。以坐姿固定家兔于动物固定台车上,按预先设置速度和加速度启动动力牵引系统开始致伤过程。用激光测速... 详细信息

目的研究家兔正碰交通伤的损伤机制和伤情特点。方法30只家兔根据碰撞初速度不同分为3组,Ⅰ组(30km/h),Ⅱ组(40km/h),Ⅲ组(50km/h)。以坐姿固定家兔于动物固定台车上,按预先设置速度和加速度启动动力牵引系统开始致伤过程。用激光测速系统和高速摄像系统测量和分析碰撞瞬间动物固定台车的速度和减速度。观察致伤后动物的伤情特点,对家兔作大体解剖并进行AIS-ISS评分。结果伤后1h内Ⅱ组死亡1只兔子,Ⅲ组死亡3只兔子,其余动物均存活。Ⅰ组未见明显脏器损伤,Ⅱ、Ⅲ组家兔损伤部位为胸腹部,AIS(MAIS)和ISS评分分别是(2.30±0.65)、(14.50±2.10)、(4.20±0.70)、(36.40±4.58)。结论碰撞初速度和减速度对动物的伤情有影响,胸腹部是兔正碰交通伤的主要损伤部位。

关键词：正碰交通伤速度减速度

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MD-2基因启动子区-1064、-1625 SNP对启动子活性的影响

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第三军医大学学报 2007年第3期29卷 185-187页

作者：单佑安刘庆董蕻顾玮蒋建新第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨MD-2基因启动子区-1064、-1625 SNP位点碱基变异对启动子活性的影响.方法通过PCR和定点突变技术,构建了含MD-2基因基础启动子及-1625 G和-1064 G突变启动子,以双荧光素酶报告系统观察SNP对MD-2基因启动子活性的影响.结果化... 详细信息

目的探讨MD-2基因启动子区-1064、-1625 SNP位点碱基变异对启动子活性的影响.方法通过PCR和定点突变技术,构建了含MD-2基因基础启动子及-1625 G和-1064 G突变启动子,以双荧光素酶报告系统观察SNP对MD-2基因启动子活性的影响.结果化学发光结果显示,在U937细胞中,-1625 G突变启动子活性比MD-2基础启动子活性高11.4%,差异显著.而-1064 G 突变启动子与MD-2基础启动子活性无明显差异.结论 -1625 C→G碱基变异可增强MD-2基因启动子活性,但-1064 SNP对靶基因启动子活性无明显影响.

关键词： MD-2 启动子单核苷酸多态性

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细胞移植示踪技术的研究进展

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中华实验外科杂志 2007年第12期24卷 1609-1610页

作者：矫树生李兵仓第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

细胞移植替代疗法已成为现代医学中发展最为迅速的领域之一，移植细胞在宿主体内的存活、增殖、迁移和分布也自然受到人们的极大关注。目前移植细胞的示踪方法可归纳为5类：（1）利用荧光染料标记细胞，

关键词：细胞移植替代疗法示踪技术移植细胞现代医学标记细胞荧光染料示踪方法

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