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第三军医大学学报 2008年第2期30卷 120-123页

作者：周建云蒋建新杨策严军王海燕刘庆程英第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室全军交通医学研究所全军交通伤重点实验室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的进一步明确天然糖皮质激素对巨噬细胞免疫功能的影响及其时效和量效关系。方法收集大鼠腹腔巨噬细胞，分别用10～1000ng／ml的皮质酮（corticosterone，CORT）刺激，检测细胞的黏附、趋化和吞噬功能；使用ELISA试剂盒检测细胞培养... 详细信息

目的进一步明确天然糖皮质激素对巨噬细胞免疫功能的影响及其时效和量效关系。方法收集大鼠腹腔巨噬细胞，分别用10～1000ng／ml的皮质酮（corticosterone，CORT）刺激，检测细胞的黏附、趋化和吞噬功能；使用ELISA试剂盒检测细胞培养上清中TNF-α的含量。结果50ng／ml的皮质酮显著增强巨噬细胞的黏附功能（P〈0．05），10ng／ml和50ng／ml的皮质酮刺激细胞后，其趋化功能均显著增加（P〈0．05）。同时，50ng／ml的皮质酮还可显著增强巨噬细胞的吞噬功能（P〈0．05）和促进巨噬细胞分泌TNF-α（P〈0．01），而使用高浓度皮质酮（500ng／ml和1000ng／m1）处理时，巨噬细胞的上述功能增强趋势减弱或无增强；在0．5—5h范围内，皮质酮处理1h时细胞的吞噬功能和分泌TNF-α的功能增强最明显，刺激更长时间后其功能的增强趋势逐渐减弱。结论一定剂量的天然糖皮质激素急性刺激可明显增强免疫功能。

关键词：皮质酮巨噬细胞免疫

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羟乙基淀粉对失血性休克大鼠复苏效果的影响

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第三军医大学学报 2008年第14期30卷 1319-1321页

作者：李涛方玉强刘良明杨成民天津协和生物科技发展研究所天津310045 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的比较不同相对分子质量的6%羟乙基淀粉(hydroxyethyl starch,HES)/0.9%NaCl溶液对大鼠失血性休克的复苏效果。方法SD大鼠制作45%放血失血性休克模型,观察相对分子质量为40、130、200的HES40、HES130、HES200对休克动物平均动脉血压(m... 详细信息

目的比较不同相对分子质量的6%羟乙基淀粉(hydroxyethyl starch,HES)/0.9%NaCl溶液对大鼠失血性休克的复苏效果。方法SD大鼠制作45%放血失血性休克模型,观察相对分子质量为40、130、200的HES40、HES130、HES200对休克动物平均动脉血压(mean arterial blood pressure,MAP)、血流动力学和血气指标的影响,同时观察存活时间和24h存活率,并以万汶和贺斯作为对照组。结果自制不同相对分子质量HES可以改善MAP、左心室收缩压(left in-traventricular systolic pressure,LVSP)、左心室压力上升或下降的最大速率(maximal change rate of left intraventricular pres-sure,±dp/dtmax)等血流动力学指标,效果与血气贺斯组相当,HES130和HES200组动物存活时间略高于HES40,其中以HES200效果最好,与万汶和贺斯效果相当。结论3种不同相对分子质量的HES均具有明显抗失血性休克作用,其中以HES200效果更明显。

关键词：失血性休克羟乙基淀粉万汶贺斯

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嗅鞘细胞与聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物材料的细胞相容性研究

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第三军医大学学报 2008年第5期30卷 370-373页

作者：矫树生李兵仓陈建梅游华第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 南京军区福州总医院骨科福州350001

目的探讨嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)与聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物[poly(DL-lactide-co-gly-colide),PLGA]材料的细胞相容性。方法将新鲜分离的OECs细胞悬液接种于PLGA膜上,然后用倒置相差显微镜、扫描电镜观察细胞生长... 详细信息

目的探讨嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)与聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物[poly(DL-lactide-co-gly-colide),PLGA]材料的细胞相容性。方法将新鲜分离的OECs细胞悬液接种于PLGA膜上,然后用倒置相差显微镜、扫描电镜观察细胞生长及细胞与材料的附着情况;MTT、流式细胞术等方法测定OECs的细胞增殖和细胞周期变化。结果PLGA膜上培养OECs的形态特征、增殖能力、细胞周期及倍体水平等与正常培养的OECs相比,均无显著性差异(P>0.05)。结论PLGA生物材料与OECs相容性好,适于构建组织工程化人工神经。

关键词：嗅鞘细胞聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物细胞相容性人工神经

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Rho激酶调节缺氧处理VSMC收缩反应性与MLC20磷酸化的关系

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中国急救医学 2008年第1期28卷 34-38页

作者：李涛刘良明刘建仓解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所二室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的观察Rho激酶调节缺氧处理的VSMC收缩反应性与MLC20磷酸化的关系。方法取肠系膜动脉VSMC,观察缺氧不同时间VSMC收缩反应性变化及Rho激酶活性调节剂对VSMC收缩反应性的影响。同时观察Rho激酶的激动剂和抑制剂对缺氧VSMCMLC20磷酸化水... 详细信息

目的观察Rho激酶调节缺氧处理的VSMC收缩反应性与MLC20磷酸化的关系。方法取肠系膜动脉VSMC,观察缺氧不同时间VSMC收缩反应性变化及Rho激酶活性调节剂对VSMC收缩反应性的影响。同时观察Rho激酶的激动剂和抑制剂对缺氧VSMCMLC20磷酸化水平以及MLCP和MLCK活性的影响。结果缺氧后,VSMC收缩反应性发生明显变化,缺氧10min时VSMC收缩反应性有所升高,缺氧60、90以及120min后,VSMC收缩反应性明显降低。Rho激酶激动剂Ang-Ⅱ(10-9mol/L)可升高缺氧90minVSMC收缩反应性,Y-27632拮抗Ang-Ⅱ的作用增强。缺氧后VSMCMLC20磷酸化水平明显降低,MLCP活性明显升高,MLCK活性明显降低,Rho激酶激动剂Ang-Ⅱ(10-9mol/L)可使缺氧引起的降低的MLC20磷酸化水平升高,使增高的MLCP活性降低,Y-27632(10-5mol/L)可拮抗Ang-Ⅱ的这一作用。Ang-Ⅱ和Y-27632对缺氧后VSMCMLCK活性无明显影响。结论MLC20磷酸化在Rho激酶调节缺氧VSMC收缩反应性变化中具有重要作用,Rho激酶可通过调节MLCP的活性来调节休克MLC20磷酸化水平,MLCK在Rho激酶调节休克MLC20磷酸化中无明显作用。

关键词： Rho激酶血管平滑肌细胞肌球蛋白轻链(MLC20) 肌球蛋白轻链磷酸酶(MLCP) 肌球蛋白轻链激酶(MLCK)

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复苏压力对大鼠未控制出血性休克早期复苏效果的影响

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第三军医大学学报 2008年第3期30卷 203-206页

作者：林秀来刘良明刁有芳廖自福王丽婷李素芝第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 西藏军区总医院创伤科全军高原战创伤救治中心拉萨850007

目的比较不同的复苏压力对大鼠未控制出血性休克（uncontrolled hemorrhagic shock，UHS）早期复苏效果的影响。方法采用脾脏损伤的未控制出血性休克模型。48只SD大鼠根据早期复苏压力的不同分为6组：不复苏组（对照）和40、50、60、70... 详细信息

目的比较不同的复苏压力对大鼠未控制出血性休克（uncontrolled hemorrhagic shock，UHS）早期复苏效果的影响。方法采用脾脏损伤的未控制出血性休克模型。48只SD大鼠根据早期复苏压力的不同分为6组：不复苏组（对照）和40、50、60、70、80mmHg复苏组，每组8只。伤后平均动脉压（mean arterial pressure，MAP）降至40mmHg时开始低压复苏，用乳酸林格液加羟乙基淀粉（2：1比例）复苏，使MAP维持在各组设定的水平，持续1h，对照组此期不输注任何液体，然后结扎脾动脉止血，各组均行充分复苏2h。记录各组血流动力学、失血量、血细胞比容、血气、肝功及存活时间。结果60、70、80mmHg复苏组的出血量显著高于另3组（P〈0．05），50mmHg复苏组的存活时间显著长于对照组和80mmHg复苏组（P〈0．05）。40mmHg复苏组和80mmHg复苏组的血流动力学指标显著低于50、60、70mmHg复苏组（P〈0．05）。70、80mmHg复苏组的酸中毒显著轻于40mmHg复苏组（P〈0．05）。40～60mmHg复苏组的血细胞比容显著高于80mmHg复苏组（P〈0．05）。40mmHg复苏组的肝功指标显著高于50、60、70mmHg复苏组（P〈0．05）。结论未控制出血性休克的早期复苏中，血压过高会增加出血量，缩短存活时问；血压过低则抑制心功能，加重肝功能损害。血压在50～60mmHg较为合适。

关键词：未控制出血性休克低压复苏

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水通道蛋白4 RNA干扰对爆炸伤后脑水肿的影响

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第三军医大学学报 2008年第8期30卷 709-713页

作者：楚燕飞李兵仓陈菁王建民高春芳郑鲁第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 解放军150医院神经外科河南洛阳471031

目的研究水通道蛋白4 RNA干扰(aquaporin4 RNA interference,AQP4 RNAi)对爆炸伤后脑水肿的影响。方法Wistar成年大鼠150只,按随机数字表法分为爆炸伤组、爆炸伤前RNAi组、爆炸伤后RNAi组、单纯RNAi组、假手术组(n=30)。构建特异性抑制A... 详细信息

目的研究水通道蛋白4 RNA干扰(aquaporin4 RNA interference,AQP4 RNAi)对爆炸伤后脑水肿的影响。方法Wistar成年大鼠150只,按随机数字表法分为爆炸伤组、爆炸伤前RNAi组、爆炸伤后RNAi组、单纯RNAi组、假手术组(n=30)。构建特异性抑制AQP4表达的短发夹环质粒载体AQP4 RNAi pGenSil-2,分别在伤前7 d和伤后1 h采用右侧脑室给药的方法抑制AQP4的表达,右侧颞顶部开直径为1 cm的骨窗后用80 mg TNT当量电雷管在5 cm垂直距离爆炸,分别于伤后4、12 h,1、2、5、7 d对损伤区脑组织光、电镜病理形态、AQP4 mRNA和蛋白表达水平以及脑含水量进行比较。结果爆炸伤前RNAi组、爆炸伤后RNAi组大鼠星形胶质细胞和神经元水肿的范围和程度均低于爆炸伤组;在爆炸伤后4 h,爆炸伤组、伤前RNAi组和伤后RNAi组相比,损伤区脑含水量差异不显著(P>0.05);12 h至7 d,同一时间点爆炸伤前、后进行AQP4 RNAi组大鼠脑含水量均明显低于只行爆炸致伤而未进行AQP4 RNAi组大鼠(P<0.01)。伤前RNAi组损伤区脑含水量在伤后12 h达高峰,伤后RNAi组损伤区脑含水量伤后1 d达高峰,爆炸伤组脑含水量于伤后2 d达高峰。伤前和伤后RNAi组最高脑含水量明显低于爆炸伤组最高脑含水量(P<0.01)。伤前RNAi组最高脑含水量低于伤后RNAi组最高脑含水量(P<0.01)。结论采用AQP4 RNAi的方法可明显减轻爆炸伤后脑水肿。AQP4可能对爆炸伤早期(4 h内)脑水肿的形成过程影响较小,而后期的脑水肿加重过程可能和AQP4表达增高有关。

关键词：水通道蛋白4 RNA干扰爆炸伤脑水肿

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BMP-4基因／TGF—β1对兔火器性股骨缺损的治疗作用

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中华创伤杂志 2008年第4期24卷 289-293页

作者：李兵仓张建军第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 邯郸解放军第二八五医院药剂科 056001

目的观察BMP-4基因联合TGF—β1对火器性股骨缺损的修复作用。方法用火器性钢珠造成兔股骨中段缺损，伤后2周于骨缺损上、下端和中部注射经体外鉴定的BMP-4基因和TGF—β1。用RT—PCR和Western blot检测BMP-4 mRNA与蛋自在体内的表达，... 详细信息

目的观察BMP-4基因联合TGF—β1对火器性股骨缺损的修复作用。方法用火器性钢珠造成兔股骨中段缺损，伤后2周于骨缺损上、下端和中部注射经体外鉴定的BMP-4基因和TGF—β1。用RT—PCR和Western blot检测BMP-4 mRNA与蛋自在体内的表达，用碱性磷酸酶（ALP）活性和钙含量检测局部组织的成骨能力，用病理学和X线检查成骨过程和质量。结果注射后BMP-4 mRNA和蛋白可在体内表达6周。实验组AIJP活性伤后8周时增加到（13．17±0．51）U／100ml，显著高于对照组的（8．77±0．44）U／100ml，提示实验组的成骨能力增强，钙含量检测与此相符。病理学和X线检查证明实验组成骨过程加快，成骨质量提高。结论BMP-4基因／TGF—β1对火器性骨缺损有明显的促修复作用。

关键词：骨形态发生蛋白-4 转化生长因子-β1 创伤撞击骨缺损

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锌指蛋白A20基因沉默载体制备及初步应用

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中华创伤杂志 2008年第4期24卷 294-297页

作者：吴丽娟陈萍康格非蒋建新朱佩芳第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所检验科重庆400042 重庆医科大学医学检验系第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所第四研究室全军交通医学研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室

目的设计并制备有效干扰细胞内锌指蛋白A20（简称A20）表达的基因沉默载体，初步用于观察A20基因沉默对细胞炎症应答的影响。方法人工设计并合成A20特异性RNA干扰寡核苷酸片段（ASRF），构建A20基因沉默载体pSUPER～EGFP—A20 siRNA。... 详细信息

目的设计并制备有效干扰细胞内锌指蛋白A20（简称A20）表达的基因沉默载体，初步用于观察A20基因沉默对细胞炎症应答的影响。方法人工设计并合成A20特异性RNA干扰寡核苷酸片段（ASRF），构建A20基因沉默载体pSUPER～EGFP—A20 siRNA。采用基因转染技术使人单核细胞株THP1感染pSUPER—EGFP—A20 siRNA，用适时荧光定量PCR技术鉴定转染细胞A20基因的沉默率；用ELISA测定细胞核内NF—κB活性及培养上清液中的TNF—α水平。结果在设计的2条ASRF中，以M59465—385R／F对细胞A20表达的抑制效果最佳，基因沉默率达83．86％。初步应用表明，A20基因沉默后THP1内NF—κB活性水平增加了78．13％，释放的TNF—α增加了49．30％。结论成功得到了高效A20基因沉默载体，初步应用研究提示A20表达的意义在于下调细胞炎症应答程度。

关键词：锌指内毒素类基因沉默适时荧光定量PCR

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IGF-1对大鼠坐骨神经再生早期的影响

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第三军医大学学报 2008年第11期30卷 1025-1027页

作者：李光振朱刚陈菁冯华王宪荣第三军医大学西南医院神经外科全军神经系统疾病微创诊治专科中心重庆400038 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨胰岛素样生长因子-1对大鼠坐骨神经再生早期的影响。方法建立大鼠坐骨神经切割伤模型,通过硅胶管进行桥接,实验组于再生室内注入胰岛素样生长因子-1,对照组注入等量生理盐水,于术后3、5、7、9、11d取材,用SABC免疫组化法检测轴... 详细信息

目的探讨胰岛素样生长因子-1对大鼠坐骨神经再生早期的影响。方法建立大鼠坐骨神经切割伤模型,通过硅胶管进行桥接,实验组于再生室内注入胰岛素样生长因子-1,对照组注入等量生理盐水,于术后3、5、7、9、11d取材,用SABC免疫组化法检测轴突再生情况以及雪旺细胞数目、形态和排列方式的变化。结果①雪旺细胞:在对照组,术后3d,断端间隙内仅可见少量雪旺细胞,术后7d,雪旺细胞数量明显增多,术后11d,整个间隙内的雪旺细胞排列呈有序的条索状。在实验组,术后3d,雪旺细胞即明显增多,以后各相同时相点雪旺细胞数目均明显高于对照组。②再生轴突:在对照组,术后5d,轴突开始长出,术后7d轴突快速增长,至第11天,再生的轴突已长过5mm的间隙到达神经远端。在实验组,术后3d轴突即开始长出,9d就快到达远端。结论胰岛素样生长因子-1能促进轴突延伸和雪旺细胞增殖,明显促进坐骨神经再生。

关键词：坐骨神经再生胰岛素样生长因子-1

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64层螺旋CT在兔坠落式颅脑减速伤中的应用

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第三军医大学学报 2008年第21期30卷 2020-2023页

作者：陈蓉张绍祥尹志勇赵辉张伟国陈金华第三军医大学大坪医院野战外科研究所放射科重庆400042 第三军医大学基础医学部人体解剖学教研室重庆市计算医学研究所重庆400038 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室车辆/生物碰撞安全重庆市市级重点实验室重庆400042

目的应用64层螺旋CT研究兔坠落式颅脑减速伤的伤情特点。方法实验用兔36只,包括对照组(6只)和致伤组(30只)。采用自行设计的减速伤致伤装置复制兔坠落式颅脑减速性损伤,致伤组根据不同致伤高度分为Ⅰ组(2.5m)、Ⅱ组(3.5m)和Ⅲ组(7m)。... 详细信息

目的应用64层螺旋CT研究兔坠落式颅脑减速伤的伤情特点。方法实验用兔36只,包括对照组(6只)和致伤组(30只)。采用自行设计的减速伤致伤装置复制兔坠落式颅脑减速性损伤,致伤组根据不同致伤高度分为Ⅰ组(2.5m)、Ⅱ组(3.5m)和Ⅲ组(7m)。于致伤后3～4h行64层螺旋CT平扫,观察兔颅脑减速伤的CT表现,并与大体和显微解剖学观察结果、高速摄像系统所见进行对照。结果坠落高度越高,兔颅脑损伤越严重;蛛网膜下腔出血是最常见的颅内病灶;脑挫裂伤位于撞击处及对冲部位,以对冲部位更严重;颅底骨折均位于对冲部位。CT平扫可准确显示颅骨骨折,且与高速摄像系统所记录的兔颅脑撞击部位一致。对兔颅脑损伤严重的Ⅲ组,CT平扫基本上显示了所有颅脑损伤情况;Ⅱ组轻度损伤者CT扫描呈假阴性;Ⅰ组颅脑CT表现均为阴性。结论64层螺旋CT平扫可显示重度及部分中度兔坠落式颅脑减速伤的伤情特点,能为颅脑损伤机制的基础研究提供有价值的信息。

关键词： CT 颅脑损伤坠落伤减速度动物模型

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