检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2017年第2期39卷 163-168页

作者：陈浩范霞孙宇余静罗莉唐婉琦马娓杨雪梁华平龚建平重庆医科大学附属第二医院肝胆外科重庆400010 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室、创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对酵母多糖(zymosan,ZYM)诱导的小鼠腹膜炎中炎症反应及中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophil,PMN)浸润的影响。方法将54只成年雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组和EVO治疗组... 详细信息

目的探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对酵母多糖(zymosan,ZYM)诱导的小鼠腹膜炎中炎症反应及中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophil,PMN)浸润的影响。方法将54只成年雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组和EVO治疗组。模型组腹腔注射1 mg/m L ZYM溶液(1 m L)建立急性腹膜炎小鼠模型,EVO治疗组则同时腹腔注射10 mg/kg EVO及1 mg/m L ZYM溶液,正常对照组腹腔注射等量磷酸盐缓冲液。各组处理后2、6、12 h处死6只小鼠,收集眼眶血及腹腔灌洗液。采用酶联免疫吸附法检测血清及腹腔灌洗液中白介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、角化细胞来源趋化因子(keratinocyte-derived chemokine,KC)及巨噬细胞炎性蛋白2(macrophage inflammatory protein 2,MIP-2)的含量;通过血细胞计数板计数腹腔灌洗液中混合细胞总数;利用流式细胞仪检测腹腔灌洗液中PMN比例及PMN中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;采用Western blot检测6 h时腹腔灌洗液混合细胞中核转录因子-k B(nuclear factor-κB,NF-κB)p65入核情况。结果建模后2、6、12 h,模型组血清及腹腔灌洗液中IL-6、TNF-α、KC及MIP-2含量均高于正常对照组(P<0.05),EVO治疗组上述指标均较模型组明显降低(P<0.05),其中,血清中IL-6、KC及MIP-2均于2 h达高峰,随后逐渐下降,而TNF-α在2 h逐渐上升,6 h达到高峰,随后逐渐下降;腹腔灌洗液中TNF-α、KC及MIP-2均于2 h达高峰,随后逐渐下降,而IL-6在2 h逐渐上升,6 h达到高峰,随后逐渐下降。制模后6 h,EVO治疗组可显著降低腹腔混合细胞数与PMN数及其百分比(P<0.05),且PMN中ROS显著降低(P<0.05)。另EVO治疗可显著降低腹腔混合细胞中细胞核的NF-κB p65表达(P<0.05)。结论 EVO可抑制ZYM诱导急性小鼠腹膜炎模型中血清及腹腔灌洗液中炎症因子及趋化因子的分泌,减轻腹腔PMN的浸润,并抑制PMN中ROS的产生,该作用可能是通过抑制NF-k B p65入核实现的。

关键词：吴茱萸碱急性腹膜炎酵母多糖中性粒细胞浸润

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创伤脓毒症风险预警诊断和预后评估模型建立与评价

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中华创伤杂志 2017年第5期33卷 447-452页

作者：杨建华王旭张安强黄宏曾灵王枭陆红祥文大林蒋建新温州医科大学附属第一医院急诊科 325000 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室

目的联合临床常用的检测指标和生物评分构建脓毒症早期预警诊断和预后评估模型，并探讨模型预警及预后评估的价值。方法采用回顾性对照研究分析2010年1月-2016年5月收治的209例严重创伤患者的临床资料，采集入院当天、伤后3，5，7d患者... 详细信息

目的联合临床常用的检测指标和生物评分构建脓毒症早期预警诊断和预后评估模型，并探讨模型预警及预后评估的价值。方法采用回顾性对照研究分析2010年1月-2016年5月收治的209例严重创伤患者的临床资料，采集入院当天、伤后3，5，7d患者的白细胞计数、淋巴细胞计数及百分数、单核细胞计数及百分数、中性粒细胞计数及百分数、中性粒细胞计数与淋巴细胞计数的比值（N／L）以及入院当天的急性生理和慢性健康评估Ⅱ（APACHEⅡ）评分、感染相关序贯性脏器功能衰竭评分（SOFA）和改良早期预警评分（MEWS）、格拉斯哥昏迷评分（GCS）、多器官功能障碍综合征（MODS）评分、乳酸（LAC）等数据，构建早期预警的加权模型和预后评估的生物评分模型，并应用受试者工作特征（ROC）计算曲线下面积（AUC），评价其在脓毒症预警诊断和预后评估中的效果。结果人院当天，由APACHEⅡ评分、SOFA和MEWS联合的加权模型AUC为0．729。伤后3d炎性细胞联合加权诊断模型AUC为0．680，生物评分AUC为0．800，差异有统计学意义（P〈0．05）。伤后5d炎性细胞联合加权诊断模型AUC为0．789，生物评分AUC为0．812，差异有统计学意义（P〈0．05）。伤后7d炎性细胞联合加权诊断模型AUC为0．706，生物评分AUC为0．713，差异无统计学意义（P〉0．05）。伤后3，5d的生物评分AUC差异有统计学意义（P〈0．05）。由APACHEⅡ评分、MODS评分、GCS和LAC联合的加权模型应用于脓毒症预后评估时，入院当天的AUC为0．838，伤后3d的AUC为0．878，伤后5d的AUC为0．947，伤后7d的AUC为0．936。人院当天、伤后3，5，7d的AUC差异有统计学意义（P〈0．05）。结论伤后3d的生物评分对脓毒症有较好的早期预警效果。伤后5d由APACHEⅡ评分、MODS评分、GCS和LAC联合的加权模型能有效预测脓毒症患者的预后。

关键词：脓毒症诊断,鉴别预后

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肌萎缩侧索硬化发病机制的研究进展

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中国康复理论与实践 2017年第6期23卷 685-689页

作者：郭永强李森张海鸿伍亚民第三军医大学大坪医院野战外科研究所三室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆市400042 兰州大学第二医院骨科甘肃兰州市730030

肌萎缩侧索硬化(ALS)是最常见的一种运动神经元疾病,分为家族性和散发性。一般认为,ALS的发病机制主要包括基因突变、氧化应激、兴奋毒性、线粒体异常和免疫炎症反应等。这些发病机制之间相互联系,相互影响,最终引起了以运动神经系统为... 详细信息

肌萎缩侧索硬化(ALS)是最常见的一种运动神经元疾病,分为家族性和散发性。一般认为,ALS的发病机制主要包括基因突变、氧化应激、兴奋毒性、线粒体异常和免疫炎症反应等。这些发病机制之间相互联系,相互影响,最终引起了以运动神经系统为主的多系统病变。

关键词：肌萎缩侧索硬化发病机制基因突变氧化应激兴奋毒性线粒体异常免疫炎症反应综述

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Mibefradil通过下调FoxO1表达改善HepG2细胞的胰岛素抵抗

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第三军医大学学报 2017年第20期39卷 1973-1979页

作者：马欢严军张克斌徐梓辉第三军医大学新桥医院内分泌科重庆400037 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 第三军医大学新桥医院中心实验室重庆400037 第三军医大学新桥医院中西医结合科重庆400037

目的探索Mibefradil在体外对胰岛素抵抗HepG2细胞的作用。方法将HepG2细胞分为对照组、棕榈酸盐(Palmitate,PA)诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗模型组、药物溶剂(DMSO)组、低剂量(0.025μmol/L)Mibefradil组、高剂量(0.05μmol/L)Mibefradil组,通过检测各组糖原合成及葡萄糖消耗,观察Mibefradil对胰岛素抵抗HepG2细胞的改善作用。用qRT-PCR、Western blot检测各组Fox O1,糖异生、糖原分解限速酶,即:磷酸烯醇式丙酮酸羧基激酶(PEPCK)、葡萄糖-6-磷酸激酶(G6Pase)的mRNA、蛋白相对表达量,明确转录因子Fox O1及其靶基因的表达水平。结果相比于对照组,HepG2细胞胰岛素抵抗模型组的糖原合成量[(3.28±0.74)μg/μL vs(9.14±0.33)μg/μL,P<0.01]及葡萄糖消耗量[(1.31±0.49)nmol/μg vs(5.87±2.26)nmol/μg,P<0.01]明显下降;经Mibefradil干预后,胰岛素抵抗HepG2细胞的糖原合成及葡萄糖消耗得到明显改善,且高剂量组的糖原合成[(7.09±0.60)μg/μL vs(5.73±0.16)μg/μL,P<0.01)]及葡萄糖消耗[(6.45±0.02)nmol/μg vs(5.61±0.29)nmol/μg,P<0.01]显著高于低剂量组,表明Mibefradil可改善HepG2细胞的胰岛素抵抗。qRT-PCR及Western blot检测结果表明,胰岛素抵抗HepG2细胞的Fox O1、PEPCK、G6Pase的表达量均显著增加(P<0.01);经Mibefradil干预后,其表达量呈剂量依赖性下降(P<0.05)。结论Mibefradil对胰岛素抵抗HepG2细胞具有改善作用,此作用可能与下调Fox O1的表达有关。

关键词： Mibefradil 胰岛素抵抗 HepG2细胞 FoxO1

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过表达KLF4对小鼠成骨细胞成骨分化的影响

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第三军医大学学报 2017年第7期39卷 628-634页

作者：杨佳佳刘苹徐倩刘志华李晓明汪超张波邓蔓菁第三军医大学大坪医院野战外科研究所口腔科重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 重庆医科大学附属儿童医院重症医学科儿童发育疾病研究教育部重点实验室重庆400014

目的探讨重组腺病毒介导的肠富集Krüppel样因子(Krüppel like factor 4,KLF4)基因转染后对小鼠成骨细胞成骨分化的影响。方法采用酶消化法分离培养小鼠原代成骨细胞,经成骨诱导培养21 d后行茜素红染色。利用pHBAd-EF1-MCS-GF... 详细信息

目的探讨重组腺病毒介导的肠富集Krüppel样因子(Krüppel like factor 4,KLF4)基因转染后对小鼠成骨细胞成骨分化的影响。方法采用酶消化法分离培养小鼠原代成骨细胞,经成骨诱导培养21 d后行茜素红染色。利用pHBAd-EF1-MCS-GFP系统构建携有KLF4的重组腺病毒载体(Ad-KLF4)。不同感染复数(multiplicity of infection,MOI)Ad-KLF4转染成骨细胞后流式细胞仪检测转染效率。将成骨细胞随机分为对照组(未转染组)、KLF4组(Ad-KLF4转染)和GFP组(Ad-GFP转染)。Western blot检测小鼠成骨细胞中KLF4蛋白的表达;MTT检测细胞增殖;Real-time PCR检测成骨相关基因碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)、核心蛋白结合因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)的表达。结果倒置显微镜下可见成骨细胞呈多边形、立方形等,茜素红染色示大量红色钙化结节的形成。经酶切鉴定、基因测序成功构建携带KLF4基因的重组腺病毒载体(Ad-KLF4)。成骨细胞经最佳MOI(100 PFU/m L)处理后,与对照组及GFP组比较,KLF4组可检测到KLF4蛋白及mRNA水平显著上升(P<0.01);成骨细胞增殖明显上升(P<0.05,P<0.01);成骨分化相关基因ALP、RUNX2、BSP的表达显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论腺病毒介导的KLF4基因转染成骨细胞后可促进成骨细胞增殖,抑制其成骨分化,从而抑制骨形成。

关键词： KLF4 过表达腺病毒载体成骨细胞小鼠

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Ski在大鼠活化星形胶质细胞中表达的变化

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中国病理生理杂志 2017年第6期33卷 968-974页

作者：赵鑫寇江力郭永强蒲彦川周开升南伟汪静伍亚民张海鸿兰州大学第二医院骨科甘肃兰州730030 兰州大学第二医院甘肃省骨关节疾病研究重点实验室甘肃兰州730030 第三军医大学大坪医院野战外科研究所三室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的:探究Ski在大鼠正常及活化星形胶质细胞中的表达及随时间变化的规律。方法:提取大鼠大脑皮质,分离星形胶质细胞,体外培养。采用LPS刺激和细胞划痕损伤2种方法活化星形胶质细胞,均采用Western blot法检测各个时点2种活化星形胶质细胞... 详细信息

目的:探究Ski在大鼠正常及活化星形胶质细胞中的表达及随时间变化的规律。方法:提取大鼠大脑皮质,分离星形胶质细胞,体外培养。采用LPS刺激和细胞划痕损伤2种方法活化星形胶质细胞,均采用Western blot法检测各个时点2种活化星形胶质细胞中Ski和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)蛋白表达情况,利用间接免疫荧光法检测Ski蛋白在星形胶质细胞中的表达定位。结果:GFAP蛋白在星形胶质细胞中固有表达,LPS活化和划痕损伤后表达均上调。Ski在正常星形胶质细胞中呈低表达状态,1 mg/L LPS活化星形胶质细胞后,Ski表达开始增加,4 d时表达量最高(P<0.05),6 d时开始下降,但仍高于未活化组;细胞划痕损伤后Ski蛋白表达情况与上述情况高度一致。Ski在正常及LPS活化6 d星形胶质细胞中表达主要集中在胞核,LPS活化后2和4 d时在胞质中出现明确的Ski表达。结论:Ski蛋白表达于星形胶质细胞,并在活化星形胶质细胞中表达上调。由此,我们推测Ski蛋白可能调控星形胶质细胞的活化、增殖等过程。

关键词： Ski 胶质纤维酸性蛋白星形胶质细胞胶质瘢痕

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小香猪放射性创面模型的制备

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中华创伤杂志 2017年第4期33卷 362-367页

作者：李晓明刘苹汪超杨佳佳张波第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室第四研究室重庆400042 重庆医科大学附属儿童重症医学科、儿童发育疾病研究教育部重点实验室

目的制备一种小香猪放射性创面的动物实验模型并观察病理变化，以期用于开展放射性创面相关疾病的在体研究。方法选取8头成年巴马小香猪，按随机数字表法均分为正常对照组、实验组，实验组又分为10，20及30Gy组，每组16个创面。实验组采... 详细信息

目的制备一种小香猪放射性创面的动物实验模型并观察病理变化，以期用于开展放射性创面相关疾病的在体研究。方法选取8头成年巴马小香猪，按随机数字表法均分为正常对照组、实验组，实验组又分为10，20及30Gy组，每组16个创面。实验组采用X射线直线加速器进行照射，并在照射部位使用打孔器制备边长4cm的全层皮肤缺损，制备小香猪放射性创面模型。每隔1周观察创面愈合情况；采用RT-PCR检测35d各组创面组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和转化生长因子-β（TGF-β）的表达变化；Westernblot方法检测35d后各组创面组织血小板-内皮细胞黏附分子（CD31）和Ⅰ型胶原的表达变化；HE染色观察35d后各组创面组织病理学变化。结果正常皮肤创面在35d达到愈合状态，但20Gy组和30Gy组在63d仍未愈合，随着射线剂量增加创面愈合程度逐渐减弱。RT—PCR检测结果显示，TNF-αmRNA表达水平正常对照组为0．315±0．007，10Gy组为0．984±0．211，20Gy组为1．140±0．088，30Cy组为0．471±0．030；TGF-βmRNA表达水平正常对照组为0．402±0．018，10Gy组为1．707±0．147，20Gy组为1．933±0．078，30Gy组为0．968±0．084。与正常对照组比较，20Gy组TNF-α和TGF-βmRNA表达水平明显升高（P〈0．05）。Westernblot检测结果显示，20Gy组与正常对照组比较，CD31和Ⅰ型胶原的表达均受到抑制（P〈0．05）。HE染色结果显示，35d后20Gy组创面组织上皮化和肉芽组织再生受到影响。结论经过20GyX射线局部照射后制备的小香猪皮肤全层缺损创面能真实有效地模拟放射性创面，可开展放射性创面相关疾病病理生理及治疗干预的在体实验研究。

关键词：辐射损伤实验性溃疡模型动物

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沉默ski基因对大鼠星形胶质细胞迁移的影响

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中国康复理论与实践 2017年第8期23卷 905-911页

作者：赵鑫王兴文寇江力李忠浩郭永强伍亚民张海鸿兰州大学第二医院骨科甘肃兰州市730030 甘肃省骨关节疾病研究重点实验室甘肃兰州市730030 第三军医大学大坪医院野战外科研究所三室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆市400042

目的研究ski基因在大鼠星形胶质细胞迁移过程中的作用。方法分离大鼠脑皮质星形胶质细胞,体外培养。合成ski基因和阴性对照小干扰片段。设置ski-siRNA转染组、阴性对照组和空白对照组。采用脂质体法将特异性针对ski基因的siRNA和阴性对... 详细信息

目的研究ski基因在大鼠星形胶质细胞迁移过程中的作用。方法分离大鼠脑皮质星形胶质细胞,体外培养。合成ski基因和阴性对照小干扰片段。设置ski-siRNA转染组、阴性对照组和空白对照组。采用脂质体法将特异性针对ski基因的siRNA和阴性对照siRNA转入大鼠星形胶质细胞。采用Western blotting检测各组ski蛋白的表达水平;采用Transwell细胞迁移实验和细胞划痕实验检测ski-siRNA转染后星形胶质细胞迁移能力的变化。结果与空白对照组和阴性对照组比较,ski-siRNA转染组细胞内ski蛋白的相对表达水平显著降低(F=132.957,P<0.001)。Transwell细胞迁移实验发现,ski-siRNA转染组每孔迁移细胞数少于空白对照组和阴性对照组(F>47.197,P<0.05)。细胞划痕实验显示,转染组细胞1~5 d的划痕愈合率均明显低于对照组(F>69.187,P<0.01)。结论沉默ski基因能显著抑制星形胶质细胞的迁移能力,ski可能参与星形胶质细胞的转移过程,进而调控胶质瘢痕的形成。

关键词： ski RNA干扰星形胶质细胞 Transwell细胞迁移实验划痕实验大鼠

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大鼠脊髓损伤后ski相关蛋白表达的时空变化规律及作用

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中国康复理论与实践 2017年第8期23卷 912-918页

作者：朱彦东周开升郭永强江龙郑利强汪静李森龙在云伍亚民张海鸿兰州大学第二医院骨科甘肃兰州市730030 甘肃省骨关节疾病研究重点实验室甘肃兰州市730030 第三军医大学大坪医院野战外科研究所三室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆市400042

目的探究大鼠脊髓损伤后ski相关蛋白(SKIP)的表达及其变化规律。方法 60只成年雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(n=30)和打击组(n=30),每组分为1 d、3 d、5 d、7 d、14 d五个时间点,各6只。打击组用Allen法制作T10打击损伤模型,... 详细信息

目的探究大鼠脊髓损伤后ski相关蛋白(SKIP)的表达及其变化规律。方法 60只成年雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(n=30)和打击组(n=30),每组分为1 d、3 d、5 d、7 d、14 d五个时间点,各6只。打击组用Allen法制作T10打击损伤模型,假手术组只咬开椎板。采用BBB评分评价后肢运动功能;尼氏染色观察损伤后脊髓神经元的病理变化;免疫荧光染色观察损伤脊髓SKIP的表达情况。结果打击组各时间点BBB评分均显著低于假手术组(t>48.267,P<0.001)。与假手术组相比,打击组5 d脊髓神经元胞浆中尼氏小体开始崩解、凝聚,分布不规则,神经元变性坏死,14 d时损伤加重。免疫荧光染色显示,SKIP主要在脊髓灰质中表达,白质中极少表达;损伤后SKIP表达逐渐上升,5 d时达到高峰(t=-17.035,P<0.001),14 d时明显降低(t=3.853,P<0.05)。结论 SKIP可能是一种作用于神经元并影响其凋亡的新的信号分子。

关键词：脊髓损伤 ski相关蛋白神经元凋亡大鼠

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脂多糖对大鼠星形胶质细胞Ski蛋白表达的影响

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中国康复理论与实践 2017年第5期23卷 514-519页

作者：赵鑫郭永强王明陈铁戈伍亚民张海鸿兰州大学第二医院骨科甘肃兰州市730030 甘肃省骨关节疾病研究重点实验室甘肃兰州市730030 第三军医大学大坪医院野战外科研究所二三室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆市400042

目的探讨内毒素脂多糖对大鼠星形胶质细胞ski蛋白表达规律及胞定位的影响。方法新生3 d内Sprague-Dawley大鼠,取大脑皮质分离星形胶质细胞,体外培养。采用0μg/ml、0.001μg/ml、0.01μg/ml、0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml... 详细信息

目的探讨内毒素脂多糖对大鼠星形胶质细胞ski蛋白表达规律及胞定位的影响。方法新生3 d内Sprague-Dawley大鼠,取大脑皮质分离星形胶质细胞,体外培养。采用0μg/ml、0.001μg/ml、0.01μg/ml、0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml脂多糖诱导6 h;采用0.1μg/ml脂多糖诱导0 d、2 d、4 d、6 d、8 d。Western blotting法检测星形胶质细胞中ski蛋白的表达,间接免疫荧光双标法检测ski在星形胶质细胞中的定位。结果 0.1μg/ml脂多糖诱导下,ski蛋白表达最高(F=46.656,P<0.001)。0.1μg/ml脂多糖诱导4 d时最高,6 d时逐渐降低。在无脂多糖诱导及脂多糖诱导6 d时,ski蛋白主要表达于细胞核;脂多糖诱导2 d、4 d时,细胞质中出现ski表达。结论脂多糖可诱导星形胶质细胞ski蛋白表达,可能参与炎症反应。

关键词： ski蛋白脂多糖炎症星形胶质细胞大鼠

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