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2013中国医师协会中西医结合医师大会

作者：严军杨雪范霞唐婉琦梁华平第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆 400042

目的吴茱萸是一种传统中药,用于头痛、腹痛、呕吐、产后失血等的治疗.吴茱萸碱(Evodiamine,EVO)是从吴茱萸中提取的生物碱成分之一,具有多种生物学活性.近年来,国内外一些研究表明它具有明显的抗炎和抗肿瘤活性.调节性T细胞(regulatory... 详细信息

目的吴茱萸是一种传统中药,用于头痛、腹痛、呕吐、产后失血等的治疗.吴茱萸碱(Evodiamine,EVO)是从吴茱萸中提取的生物碱成分之一,具有多种生物学活性.近年来,国内外一些研究表明它具有明显的抗炎和抗肿瘤活性.调节性T细胞(regulatory T cell)是一群具有负调节机体免疫反应的淋巴细胞,通常起着维持自身耐受和避免免疫反应过度损伤机体的重要作用.然而,目前还不清楚EVO的抗炎作用是否和Treg相关.因此,我们以C57BL/6背景的Treg荧光单标小鼠为实验动物,对酵母多糖(Zymosan,Zym)致炎条件下EVO药效和Treg的关系进行了初步研究.方法 Treg荧光单标小鼠(即C57BL/6背景的Foxp3-GFPKI小鼠)由美国哈佛大学医学院高闻达教授馈赠,引进后按照无特定病原体动物(special pathogen free,SPF)级动物饲养标准进行.取6只成年B6KI雄性小鼠共分为6组：对照组、Zym致炎组和Zym致炎复合Evo治疗组,致炎后12h、 24h取材,每组1只.(Zym腹腔注射剂量600mg/kg;Evo腹腔注射剂量10mg/kg).在相应时间点,将小鼠全身肝素化后取全血、周围淋巴结和脾脏,全血用红细胞裂解液裂解血细胞,周围淋巴结和脾脏碾磨后取细胞,分别用PE-antimouse CD4、PECY5-antimouse CD8a及其各自同型对照染色后进行流式细胞检测.结果用SPSS13.0软件采用单因素方差分析方法进行统计学分析.结果各组别全血CD4+ Treg的变化趋势基本一致,即Zym only组和Zym+ Evo组均明显低于对照组(P＜0.05),但Zym+Evo组又稍高于Zym only组;而且CD4+Treg的数量百分比均显著高于相应组别的CD8a+Treg(P＜0.05).各组Zym only组和Zym+Evo组均高于对照组,其中Zym+Evo组又稍高于Zym only组;而且CD4+Treg的数量百分比均显著高于相应组别的CD8a+Treg(P＜0.05).结论可以初步认为,Zym介导的炎症反应发生12h和24h过程中Treg的消炎作用被抑制.全血和LN+SP在致炎后12h,各实验组Treg数量百分数均小于对照组,但LN+SP淋巴细胞的差异不如全血明显,可能因为炎症反应的过程首先是通过血液循环来进行的.另一方面,致炎24h后各组全血的结果与12h相似,但致炎组和治疗组LN+SP中CD4+Treg比例明显高于对照组,说明Treg先是聚集在周围淋巴结发挥作用,其入血还需要一个过程.

关键词：炎症吴茱萸碱调节性T细胞

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新型评分公式在预测创伤后脓毒症和多器官功能衰竭发生中的应用

新型评分公式在预测创伤后脓毒症和多器官功能衰竭发生中的应用

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2013中国医师协会中西医结合医师大会

作者：肖雅刘政靳贺范霞杨雪严军梁华平第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆 400042

目的基于本团队前期回顾性研究所得创伤后病人的损伤严重度评分(injury severity score,ISS)和新的损伤严重度评分(new injury severity score,NISS)的LD50(致所研究人群半数死亡的值),研究在新型公式中应用ISS/LD50、NISS/LD50及全身... 详细信息

目的基于本团队前期回顾性研究所得创伤后病人的损伤严重度评分(injury severity score,ISS)和新的损伤严重度评分(new injury severity score,NISS)的LD50(致所研究人群半数死亡的值),研究在新型公式中应用ISS/LD50、NISS/LD50及全身炎症反应综合征(SIRS)评分预测创伤后脓毒症和多器官功能衰竭发生中的应用价值.方法收集2011年1月-2013年6月重庆市大坪医院ICU及创伤科713例创伤患者临床病历资料,计算病人的ISS,NISS及SIRS评分.并按16-44、46-64和≥65岁三个年龄段及不同性别间的ISS和NISS的LD50,分别计算ISS/LD50和NISS/LD50.分别应用ISS、NISS、ISS/LD50、NISS/LD50、ISS*SIRS评分、NISS*SIRS评分、ISS/LD50*SIRS评分和NISS/LD50*SIRS评分对创伤后脓毒症和多器官功能衰竭的发生进行预测.采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)评价各评分公式预测的准确性.结果在对创伤后脓毒症发生的预测上,ISS、ISS*SIRS评分、ISS/LD50和ISS/LD50*SIRS评分的ROC曲线下面积分别为：0.818,0.896,0.813和***、NISS*SIRS评分、NISS/LD50和NISS/LD50*SIRS评分的ROC曲线下面积分别为：0.821、0.896、0.820和0.895.其中,ISS/LD50*SIRS评分优于ISS(P＜0.0001);ISS*SIRS评分优于ISS(P＜0.0001);ISS/LD50*SIRS评分优于ISS/LD50(P＜0.0001);NISS/LD50*SIRS评分优于NISS(P＜0.0001);NISS*SIRS评分优于NISS(P＜ 0.0001);NISS/LD50*SIRS评分优于NISS/LD50(P＜0.0001).在对创伤后多器官功能衰竭发生的预测上,ISS、ISS*SIRS评分、ISS/LD50和ISS/LD50*SIRS评分的ROC曲线下面积分别为：0.875、0.880、0.881和***、NISS*SIRS评分、NISS/LD50和NISS/LD50*SIRS评分的ROC曲线下面积分别为：0.876、0.878、0.884和0.881.其中,NISS/LD50优于NISS(P=0.0203);ISS/LD50*SIRS评分优于ISS*SIRS评分(P=0.0284);NISS/LD50*SIRS评分优于NISS*SIRS评分(P=0.0044). 结论对于各种评分公式(ISS、NISS、ISS/LD50、NISS/LD50、ISS*SIRS评分、NISS*SIRS评分、ISS/LD50*SIRS评分和NISS/LD50*SIRS评分),在预测创伤后脓毒症的发生上,评分公式中SIRS评分的应用可提高预测的准确性;在预测创伤后多器官功能衰竭的发生上,评分公式中LD50的应用可提高预测的准确性.

关键词：评分公式创伤脓毒症多器官功能衰竭

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芳香烃受体对RAW264.7巨噬细胞活化的影响

芳香烃受体对RAW264.7巨噬细胞活化的影响

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2013中国医师协会中西医结合医师大会

作者：范霞杨雪严军梁华平第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆 400042

目的研究芳香烃受体(Aryl hydrocarbon receptor,AhR)低表达时对巨噬细胞活化的影响. 方法通过AhR-shRNA慢病毒载体转染RAW264.7巨噬细胞,建立AhR基因沉默的稳转细胞株,并将细胞分为三组：慢病毒转染组、空载质粒组以及空白对照组.然... 详细信息

目的研究芳香烃受体(Aryl hydrocarbon receptor,AhR)低表达时对巨噬细胞活化的影响. 方法通过AhR-shRNA慢病毒载体转染RAW264.7巨噬细胞,建立AhR基因沉默的稳转细胞株,并将细胞分为三组：慢病毒转染组、空载质粒组以及空白对照组.然后向此三组细胞中加入10μg/ml LPS或100μg/ml酵母多糖,作用1h、6h、12h以及24h后,通过ELISA方法检测细胞核中NF-κB P65的DNA结合活性以及细胞培养上清中TNF-α和IL-6的含量,实时定量PCR检测TNF-α和IL-6 mRNA的表达. 结果当RAW264.7巨噬细胞中AhR基因被沉默后,LPS或酵母多糖所诱发的P65的DNA结合活性显著高于阴性对照组,但是TNF-α和IL-6无论是在蛋白水平或是mRNA水平却显著低于阴性对照组. 结论 AhR在巨噬细胞的活化过程中对TNF-a和IL-6的表达具有正向调节作用,但对NF-κB P65的DNA结合活性具有负向调节作用,推测AhR可能参与了NF-κB以外的其它信号通路的调节.

关键词：芳香烃受体巨噬细胞活化

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新型光敏剂Ⅰ对头颈部肿瘤细胞的光动力活性

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中国耳鼻咽喉颅底外科杂志 2013年第1期19卷 38-42,47页

作者：李东红李鹏熙蒋宗林郭林峰创伤烧伤复合伤国家重点实验室第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室重庆400042 西华师范大学化学系四川南充637002

目的在光敏剂卟吩分子中通过PEG链引入靶向基团-叶酸,构建了一个新型的光敏剂Ⅰ,并评价光敏剂Ⅰ对喉癌Hep-2细胞和鼻咽癌CNE细胞的肿瘤靶向性和光动力活性。方法利用West-ern blot实验检测Hep-2细胞和CNE细胞的叶酸受体表达;采用荧光测... 详细信息

目的在光敏剂卟吩分子中通过PEG链引入靶向基团-叶酸,构建了一个新型的光敏剂Ⅰ,并评价光敏剂Ⅰ对喉癌Hep-2细胞和鼻咽癌CNE细胞的肿瘤靶向性和光动力活性。方法利用West-ern blot实验检测Hep-2细胞和CNE细胞的叶酸受体表达;采用荧光测定法评价两种细胞在有或无过量叶酸存在时对光敏剂Ⅰ的吞噬作用;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)试验检测光敏剂Ⅰ在有或无光照条件下对Hep-2细胞和CNE细胞的细胞毒性,以及光敏剂浓度和光照剂量对细胞存活率的影响。结果 West-ern blot实验结果表明Hep-2细胞有较强的叶酸受体表达,而CNE细胞则为叶酸受体低表达。两种细胞对光敏剂I的摄取均随光敏剂浓度的增加而增强,但Hep-2细胞的摄取能力明显强于CNE细胞(P<0.01),且过量自由叶酸的存在可竞争性地抑制Hep-2细胞对光敏剂I的摄取(P<0.01)。MTT实验结果显示在光照时,光敏剂I对Hep-2细胞和CNE细胞均有显著的光毒性,且其光动力活性与光敏剂浓度和光照剂量呈正相关性。结论光敏剂I对叶酸受体阳性表达的喉癌Hep-2细胞有明显的靶向性和光动力活性。

关键词：光敏剂Ⅰ Hep-2细胞 CNE细胞肿瘤靶向性光动力活性

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新型靶向光敏剂Ⅰ对Hep-2细胞的光动力抑瘤活性

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肿瘤研究与临床 2013年第1期25卷 1-4页

作者：李东红李鹏熙蒋宗林郭林峰创伤、烧伤、复合伤国家重点实验室第三军医大学大坪医院野战外科研究所二室重庆400042 华西师范大学化学系

目的评价新型靶向性光敏剂Ⅰ（PSⅠ）对喉癌Hep-2细胞的靶向性和光动力活性。方法采用bleaching实验评价PSⅠ的稳定性；荧光测定法观察Hep-2细胞对PSⅠ的摄取能力；四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测PSⅠ浓度、光照剂量及光照时间点... 详细信息

目的评价新型靶向性光敏剂Ⅰ（PSⅠ）对喉癌Hep-2细胞的靶向性和光动力活性。方法采用bleaching实验评价PSⅠ的稳定性；荧光测定法观察Hep-2细胞对PSⅠ的摄取能力；四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测PSⅠ浓度、光照剂量及光照时间点对Hep-2细胞存活率的影响。结果在光照50 min后，PSⅠ的吸光度（A）值仅降低了11 %，表明其稳定性可满足光动力治疗的需要；Hep-2细胞对PSⅠ的摄取随PSⅠ浓度的增加而增加，但过量叶酸的存在可明显抑制Hep-2细胞对PSⅠ的摄取（t值分别为5.96，4.89，均P＜0.01）；MTT实验结果表明Hep-2细胞的存活率与PSⅠ浓度和光照剂量呈负相关（r＝-0.763，P＝0.017； r＝-0.946，P＝0.001）。当PSⅠ浓度为14 μmol／L、光照剂量为18 J／cm2时，Hep-2细胞的存活率仅为34 %，而在无光照时即使光敏剂浓度升至110 μmol／L，Hep-2细胞的存活率仍为100 %；给予PSⅠ 24 h后再进行光动力治疗（PDT）可有效地抑制Hep-2细胞的生长，其存活率只有32 %。结论 PSⅠ拥有满意的光稳定性和低的暗毒性，对Hep-2细胞有很好的靶向性和光动力活性。

关键词：光敏剂Ⅰ Hep-2细胞肿瘤靶向性光动力活性

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叶酸受体介导靶向药物载体的研究进展

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现代肿瘤医学 2013年第5期21卷 1128-1131页

作者：郭林峰蒋宗林李东红第三军医大学大坪医院野战外科研究所二室创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400042 西华师范大学化学系四川南充637002

利用叶酸受体在肿瘤细胞(高表达)和正常细胞(低表达)上表达的差异性及叶酸受体与叶酸和叶酸类似物结合的高特异性、高亲和性,可望实现肿瘤的靶向性治疗。而叶酸修饰的药物载体不仅可实现难溶或不稳定药物的体内输送,减少体内酶对药物的... 详细信息

利用叶酸受体在肿瘤细胞(高表达)和正常细胞(低表达)上表达的差异性及叶酸受体与叶酸和叶酸类似物结合的高特异性、高亲和性,可望实现肿瘤的靶向性治疗。而叶酸修饰的药物载体不仅可实现难溶或不稳定药物的体内输送,减少体内酶对药物的降解,提高其生物利用率,同时还可有效地提高药物在肿瘤组织中的浓度,降低对正常组织的毒副作用。本文就近年来叶酸化药物载体的研究进展做一简要综述,旨在为肿瘤的靶向性治疗提供参考。

关键词：叶酸叶酸受体纳米粒子脂质体树状大分子

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一种抗干扰穿戴式血氧饱和度监测仪的研制

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传感技术学报 2012年第1期25卷 6-10页

作者：龚渝顺吴宝明高丹丹闫庆广冯正权第三军医大学大坪医院野战外科研究所第五研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

为实现动态环境下人体血氧饱和度的实时监测,研制了一种穿戴式血氧监测仪。采用D/A数模转换控制LED双光源交替发光,以光频转换接收头作为传感器,将光强信号转换为频率信号,直接送入单片机采集;根据反射式原理计算得到结果,通过无线方式... 详细信息

为实现动态环境下人体血氧饱和度的实时监测,研制了一种穿戴式血氧监测仪。采用D/A数模转换控制LED双光源交替发光,以光频转换接收头作为传感器,将光强信号转换为频率信号,直接送入单片机采集;根据反射式原理计算得到结果,通过无线方式发送数据。针对动态环境下获取的光电容积脉搏波中掺杂的运动干扰,提出了血氧干扰分离自适应对消算法,以消除运动干扰对计算结果的影响。设计实现了设备的小型化,提高了其可穿戴性,具有抗运动干扰的能力,能准确的获取血氧信息,适合在日常动态环境下的实时监测。

关键词：血氧饱和度反射式运动干扰动态监测

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创伤后腹腔高压症/腹腔间隙综合征诊治规范

创伤后腹腔高压症/腹腔间隙综合征诊治规范

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中华医学会急诊医学分会第十六次全国急诊医学学术年会

作者：张连阳白祥军周健孙士锦李幼生张茂第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军战创伤中心创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室武汉华中科技大学同济医学院附属同济医院南京军区南京总医院浙江医科大学附属第二医院

严重创伤性失血性休克、烧伤、腹部创伤等在救治过程中常出现腹腔高压症(intra-abdominal hypertension,IAH),甚至发生腹腔间隙综合征(abdominalcompartment syndrome,ACS),出现多脏器功能障碍。在ICU中,IAH和ACS的发生率分别为35%及5%,ACS死亡率为38%～72%。本规范参照世界ACS协会(world society of the ACS,WSACS)的共识意见,综合近年来进展撰写,适用于严重创伤后IAH/ACS的患者,

关键词：高压症创伤后 ACS IAH 后腹腔综合征

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Akt-eNOS-NO信号途径介导了Ang-1和Ang-2对大鼠失血性休克早期血管高反应性的调节作用

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中国病理生理杂志 2012年第9期28卷 1554-1558页

作者：徐竞蓝丹杨光明李涛刘良明第三军医大学大坪医院野战外科研究所二室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的:观察内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)在血管生成素1(angiopoi-etin-1,Ang-1)和血管生成素2(angiopoietin-2,Ang-2)调节失血性休克大鼠血管反应性双相变化中的作用及其机制。方法:采用Western blotting技术观察失血性休克后不同时点肠系膜上动脉(superior mesenteric artery,SMA)中eNOS蛋白表达变化,采用离体微血管环张力测定技术观察eNOS抑制剂对Ang-1和Ang-2调节缺氧早期和晚期血管反应性作用的影响,并观察给予Ang-1、Ang-2以及Tie-2、Akt、p38 MAPK、ERK抑制剂后缺氧血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)和血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)混合培养物中eNOS蛋白表达和培养上清一氧化氮(nitric oxide,NO)含量的影响。结果:(1)eNOS在正常SMA中表达很低,失血性休克后逐渐增高,休克10 min、30 min、1 h、2 h和4 h时分别增高至正常对照的1.95、2.10、3.01、3.42和3.57倍(P<0.01)。(2)eNOS抑制剂可显著抑制缺氧10 min的血管高反应性,去甲肾上腺素(NE)的Emax由13.479mN降低至9.043 mN(P<0.01),也可以显著抑制Ang-1对缺氧10 min血管高反应性的维持作用,NE的Emax由15.283 mN降低至11.219 mN(P<0.01),但不改变Ang-2降低缺氧10 min血管高反应性作用,也不改变缺氧4 h的血管低反应性和Ang-1、Ang-2对缺氧4 h血管反应性的调节作用。(3)缺氧10 min的eNOS表达较正常对照增高,Ang-2和Tie-2、Akt抑制剂可抑制其增高(P<0.01),p38 MAPK、ERK抑制剂对其无显著影响。(4)NO含量在缺氧10 min显著增高,Ang-2和Tie-2、Akt、eNOS抑制剂可抑制其增高(P<0.01),p38 MAPK、ERK抑制剂对其无显著影响。结论:失血性休克早期,Ang-1和Ang-2通过Akt-eNOS-NO途径来调节血管高反应性。

关键词：失血性休克血管反应性双相变化血管生成素1 血管生成素2 内皮型一氧化氮合酶

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严重创伤输血专家共识

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中华创伤杂志 2013年第8期29卷 706-710页

作者：文爱清张连阳蒋东坡周健蒋建新田兆嵩汪德清骆群李碧娟李志强郝一文张茂白祥军都定元陈允震第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所输血科重庆400042 全军战创伤中心创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室广州市血液中心解放军总医院输血科解放军第三○七医院输血科中南大学湘雅医院输血科上海市第六人民医院输血科中国医科大学第一附属医院输血科浙江医科大学附属第二医院急诊医学科华中科技大学同济医学院附属同济医院创伤科重庆市医疗急救中心山东大学齐鲁医院骨创科

创伤在世界范围内仍是致死、致残的主要原因，而出血是创伤致死的首要原因。创伤后早期（24h内）死亡的患者中，30％～40％死于难以控制的出血。外科止血、液体复苏及输血是创伤患者的主要救治措施，但目前国内还没有一部比较系统化的... 详细信息

创伤在世界范围内仍是致死、致残的主要原因，而出血是创伤致死的首要原因。创伤后早期（24h内）死亡的患者中，30％～40％死于难以控制的出血。外科止血、液体复苏及输血是创伤患者的主要救治措施，但目前国内还没有一部比较系统化的专门针对严重创伤患者的输血指南。

关键词：严重创伤输血指南专家创伤患者世界范围外科止血液体复苏创伤后

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