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第三军医大学学报 2008年第10期30卷 953-956页

作者：林爽李力刘媛第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第三研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的研究钾通道阻断剂四氨基吡啶(4-amino-pynidine,4-AP)对宫颈癌HeLa细胞中子照射的影响。方法宫颈癌HeLa细胞分别设不同浓度(0、1、5、10、20mmol/L)4-AP组,0.67Gy252Cf中子照射后48h,用MTT法和流式细胞仪检测各组细胞活性、凋亡率。... 详细信息

目的研究钾通道阻断剂四氨基吡啶(4-amino-pynidine,4-AP)对宫颈癌HeLa细胞中子照射的影响。方法宫颈癌HeLa细胞分别设不同浓度(0、1、5、10、20mmol/L)4-AP组,0.67Gy252Cf中子照射后48h,用MTT法和流式细胞仪检测各组细胞活性、凋亡率。0、20mmol/L4-AP组自照射后24、48、72h分别用RT-PCR法、Western blot法检测HIF-1αmRNA及蛋白表达情况。结果在中子照射48h后,4-AP浓度为0、1、5、10、20mmol/L时,对HeLa细胞增殖的抑制率分别为0、(38.81±3.45)%、(46.63±3.88)%、(63.58±6.19)%、(77.51±8.87)%,凋亡率(%)分别为(3.15±0.85)%、(8.01±1.19)%、(16.00±1.58)%、(47.20±3.18)%、(62.56±4.27)%,差异有统计学意义(P<0.05)。说明4-AP能抑制HeLa细胞的增殖,诱导凋亡,并呈现明显的剂量依赖性。当4-AP浓度大于5mmol/L时,其作用明显(P<0.01)。0.67Gy252Cf中子照射0、24、48、72h后,4-AP浓度为0mmol/L组,HIF-1αmRNA/β-actin值分别为(0.423±0.116)、(0.464±0.111)、(0.487±0.121)、(0.415±0.099),Western blot灰度扫描结果HIF-1α/β-actin分别为(0.723±0.116)、(0.664±0.111)、(0.617±0.121)、(0.515±0.099),HIF-1αmRNA及蛋白表达均无明显降低,差异均无统计学意义(P>0.05)。4-AP浓度为20mmol/L组,HIF-1αmRNA/β-actin值分别为(0.401±0.121)、(0.364±0.142)、(0.257±0.137)、(0.165±0.099),Western blot灰度扫描结果HIF-1αmRNA/β-actin分别为(0.879±0.117)、(0.645±0.115)、(0.312±0.114)、(0.130±0.118),HIF-1αmRNA及蛋白表达均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论钾通道阻断剂4-AP能降低中子放射治疗后缺氧诱导因子(HIF-1α)表达,降低HeLa细胞增殖,促进凋亡,提高HeLa细胞中子射线的敏感性。

关键词：钾通道阻滞剂四氨基吡啶宫颈癌 ^252Cf中子照射

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舱内腹部爆炸伤大鼠血清及肠道组织MDA含量和SOD、GSH-Px活力变化及意义

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第三军医大学学报 2008年第10期30卷 910-913页

作者：聂海黄显凯赖西南王丽丽康建毅赖军第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军战创伤中心重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨舱内爆炸致大鼠腹部损伤后血清及肠道组织MDA含量及SOD、GSH-Px活力的动态变化规律。方法120只SD大鼠完全随机分为舱内组、舱外组,各60只,采用DDNP纸质点爆源在模拟装甲舱室和舱外开阔地爆炸建立腹部爆炸伤模型;另设立正常对照... 详细信息

目的探讨舱内爆炸致大鼠腹部损伤后血清及肠道组织MDA含量及SOD、GSH-Px活力的动态变化规律。方法120只SD大鼠完全随机分为舱内组、舱外组,各60只,采用DDNP纸质点爆源在模拟装甲舱室和舱外开阔地爆炸建立腹部爆炸伤模型;另设立正常对照组(10只)。爆炸后0.5h内、3、8、24、48h和72h采集血液和肠道组织标本,检测MDA含量和SOD、GSH-Px活性。结果大鼠爆炸后血清和肠道组织内MDA水平持续升高,伤后0.5h内升高显著(P<0.05),3～8h上升最快,24h达峰值;舱内组较舱外组升高显著(P<0.05)。SOD、GSH-Px活性在伤后早期略有升高,继而进行性下降,24h达最低值;舱内组下降速度较舱外组快(P<0.05)。MDA水平达峰值及SOD、GSH-Px活性达低谷后逐渐恢复,舱内组恢复较慢。血清和肠道组织MDA含量及GSH-Px活力呈正相关(P<0.01)。结论大鼠舱室爆炸致腹部损伤后氧化应激反应较开阔地爆炸出现早、强度大且持续时间长,氧化应激可能参与了大鼠腹部爆炸伤后肠道的继发性损害。检测血清MDA含量和GSH-Px活性可作为伤后肠道组织过氧化损伤的诊断指标之一。

关键词：创伤与损伤冲击波腹部损伤氧化应激大鼠

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人重组TGF-β RⅡ亲和核酸筛选方法的建立

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第三军医大学学报 2008年第23期30卷 2168-2171页

作者：谢琳刘韧朱旭东贺翔鸽陈彩宇第三军医大学大坪医院野战外科研究所眼科重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的通过筛选转化生长因子-β受体Ⅱ(TGF-βRⅡ)亲和核酸,探寻拮抗TGF-β活性的新方法。方法以ssDNA5′-TAATACGACTCACTATAGGGAGGACGATGCGG-N60-CAGACGACTCGCCCGA-3′为模板,体外转录获取初始RNA随机库;以人体外重组TGF-βRⅡ为靶目标蛋白行SELEX实验,共进行8轮循环筛选。通过膜结合实验监测筛选所得RNA富集库对TGF-βRⅡ亲和性的进化状态,凝胶阻滞实验检测亲和核酸序列与TGF-βRⅡ的结合强度。结果随着筛选进行,RNA富集库沿着与靶蛋白TGF-βRⅡ亲和性加强的方向进化;从第8轮富集库中分离出两类优势序列,序列A和序列B。膜结合实验显示序列A、B对TGF-βRⅡ有明显的亲和性,但凝胶阻滞实验显示序列A、B均无与蛋白结合的阻滞带出现。结论筛选所得序列A及B与靶蛋白TGF-βRⅡ的亲和性及特异性还不理想,但先导序列A及B的获得为通过后SELEX技术进一步寻找最佳结合序列奠定了基础。

关键词： SELEX 人重组TGF-βRⅡ 先导序列

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脑红蛋白对大鼠局灶性脑缺血组织的保护作用

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第三军医大学学报 2008年第23期30卷 2180-2182页

作者：刘娟姚国恩蒋晓江陈星云第三军医大学大坪医院野战外科研究所脑三科重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第七研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨增加脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)表达对大鼠在体局灶性脑缺血组织保护作用的影响。方法采用Hemin诱导脑红蛋白表达的方法,将SD大鼠随机分为5组,分别为假手术对照组、手术组、术后1h Hemin干预组、术后2h Hemin干预组、术后6h He... 详细信息

目的探讨增加脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)表达对大鼠在体局灶性脑缺血组织保护作用的影响。方法采用Hemin诱导脑红蛋白表达的方法,将SD大鼠随机分为5组,分别为假手术对照组、手术组、术后1h Hemin干预组、术后2h Hemin干预组、术后6h Hemin干预组。5组大鼠于术后24h检测脑梗死体积比,通过免疫组织化学及Western blot分析脑红蛋白表达情况。结果术后各时相点Hemin干预组脑梗死体积比较手术组有显著性差异(P<0.05);各干预组间比较,术后1h Hemin干预组脑梗死体积比较术后2h、术后6h Hemin干预组显著缩小(P<0.05)。免疫组化分析,各时相点Hemin干预组Ngb阳性神经元数量较手术组增多,以术后1h Hemin干预组最明显。Western blot分析提示手术组、各时相点Hemin干预组Ngb表达均有非常显著升高(P<0.01)。与手术组比较,术后1h Hemin干预组升高非常显著(P<0.01),术后2h Hemin干预组升高显著(P<0.05),术后6h组无明显差异(P>0.05)。Ngb表达与脑梗死体积比呈负相关。结论大鼠急性局灶性脑缺血后增加脑红蛋白表达可以减轻缺血脑组织损伤。

关键词：氯化血红素局灶性脑缺血脑红蛋白

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超声波对正常皮肤作用的组织学观察

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第三军医大学学报 2008年第19期30卷 1802-1802,1806页

作者：黄宏朱方强许川王丽丽赖西南第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 第三军医大学大坪医院泌尿外科重庆400042

尽早实施彻底清创是防止或减少创伤后感染和死亡发生的关键。20世纪80年代以来,国内外已有研制和应用超声波射流冲洗系统的报告,即利用超声波的“空化”效应产生强大的机械力将创面上的细菌、污染物、破碎的坏死组织剥离下来,达到有效... 详细信息

尽早实施彻底清创是防止或减少创伤后感染和死亡发生的关键。20世纪80年代以来,国内外已有研制和应用超声波射流冲洗系统的报告,即利用超声波的“空化”效应产生强大的机械力将创面上的细菌、污染物、破碎的坏死组织剥离下来,达到有效地清洗创面的目的;而超声波也能引起生物组织损伤效应,其损伤程度与频率和功率有关。[第一段]

关键词：超声波正常皮肤

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创伤患者外周血单核细胞自噬变化的研究

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第三军医大学学报 2008年第21期30卷 1994-1997页

作者：余剑曹红卫梁华平张连阳第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军战创伤中心重庆400042 第三军医大学西南医院中心实验室重庆400038 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的研究创伤患者外周血单核细胞的自噬变化。方法①根据损伤严重度评分(injury severity score,ISS)或简明损伤定级标准(abbreviated injury scale,AIS)将创伤患者分为轻度创伤组、中度创伤组、严重创伤组,同时设立健康对照组,分别于... 详细信息

目的研究创伤患者外周血单核细胞的自噬变化。方法①根据损伤严重度评分(injury severity score,ISS)或简明损伤定级标准(abbreviated injury scale,AIS)将创伤患者分为轻度创伤组、中度创伤组、严重创伤组,同时设立健康对照组,分别于创伤后24h、3、5、10d采集外周血,采用密度梯度离心结合贴壁分离法分离创伤患者外周血单核细胞,应用激光共聚焦显微镜和透射电镜观察细胞自噬现象。②将分离得到的单核细胞进行MDC染色并裂解,应用荧光分光光度计(激发光波长380nm、发射光波长525nm)测定荧光强度进行定量分析。③于创伤后24h、3、5d检测患者血糖水平,分析创伤后自噬与血糖的相关性。结果与健康对照组相比,创伤患者外周血单核细胞自噬水平明显升高(P<0.01),创伤后外周血单核细胞自噬水平与创伤程度成正比,与创伤后血糖呈正相关(轻度创伤组:r=0.962,中度创伤组:r=0.928,重度创伤组:r=0.973,P<0.05)。结论创伤后通过调节单核细胞自噬水平,使机体免疫功能得到恢复,从而改善预后。

关键词：自噬创伤单核细胞糖代谢

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肾上腺切除大鼠冲击伤后天然免疫功能的变化及其与模式识别受体的关系

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第三军医大学学报 2008年第21期30卷 1988-1993页

作者：杨策周琳琳严军王海燕周建云刘庆程英崔莉蒋建新第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室全军交通医学研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的下丘脑-垂体-肾上腺轴分泌的神经内分泌激素对天然免疫功能具有重要调控作用。本研究通过切除大鼠双侧肾上腺,观察冲击伤对大鼠主要天然免疫学指标的影响及其与模式识别受体表达的关系。方法Sprague-Dawley成年大鼠在肾上腺切除7d... 详细信息

目的下丘脑-垂体-肾上腺轴分泌的神经内分泌激素对天然免疫功能具有重要调控作用。本研究通过切除大鼠双侧肾上腺,观察冲击伤对大鼠主要天然免疫学指标的影响及其与模式识别受体表达的关系。方法Sprague-Dawley成年大鼠在肾上腺切除7d后遭受中度冲击伤,观察外周血白细胞数目,腹腔巨噬细胞吞噬大肠杆菌功能、肝脏、肺脏和肠系膜淋巴结细菌移位以及肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化,进而检测肺组织SR-A、CD14、TLR4mRNA的表达。结果肾上腺切除抑制冲击伤后外周血白细胞减少,腹腔巨噬细胞吞噬功能减弱,肝、肺、肠系膜淋巴结细菌移位以及肺组织TNF-α分泌在肾上腺切除后也进一步增强。肺组织SR-A、CD14、TLR4mRNA在肾上腺切除后减少,并伴有显著的炎症反应和组织损伤。结论肾上腺激素能增强创伤后机体的天然免疫反应,且与SR-A、CD14、TLR4介导密切有关。

关键词：肾上腺切除激素模式识别受体内毒素创伤和损伤

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β-地中海贫血与先天性软骨发育不全诊断性基因芯片的构建

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第三军医大学学报 2008年第3期30卷 210-212页

作者：胡章雪李力肖梦周元国李华强顾大勇易萍第三军医大学大坪医院野战外科研究所儿科重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科重庆400042 基础医学部生物化学教研室重庆400038 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第七研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的建立一种能同时快速、准确地检测β-地中海贫血与先天性软骨发育不全常见基因突变的技术。方法将针对2种疾病常见突变的特异性氨基修饰寡核苷酸探针点样于醛基修饰的玻片上,制成基因芯片,对β-地中海贫血、先天性软骨发育不全的病... 详细信息

目的建立一种能同时快速、准确地检测β-地中海贫血与先天性软骨发育不全常见基因突变的技术。方法将针对2种疾病常见突变的特异性氨基修饰寡核苷酸探针点样于醛基修饰的玻片上,制成基因芯片,对β-地中海贫血、先天性软骨发育不全的病例和正常样本进行基因诊断。结果该基因芯片成功检测到相应的突变位点。结论该芯片制作成本低,重复性好,特异性高,能满足临床标本检测的要求,具有良好的临床应用前景。

关键词： DNA芯片基因芯片 β-地中海贫血先天性软骨发育不全生物素

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Claudin-3在前列腺癌中的表达及其意义探讨

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中国男科学杂志 2008年第5期22卷 14-16,21页

作者：毕罡靳风烁吴刚熊仁平李黔生孙中义第三军医大学大坪医院暨野战外科研究所泌尿外科重庆400042 第七研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室

提要目的探讨Claudin-3在前列腺癌组织中的表达及其意义。方法用免疫组化法半定量测定前列腺癌80例、前列腺增生组织20例中Claudin-3的表达;用蛋白印迹结合图像分析法定量测定前列腺癌和前列腺增生组织的Claudin-3的表达。结果免疫组化... 详细信息

提要目的探讨Claudin-3在前列腺癌组织中的表达及其意义。方法用免疫组化法半定量测定前列腺癌80例、前列腺增生组织20例中Claudin-3的表达;用蛋白印迹结合图像分析法定量测定前列腺癌和前列腺增生组织的Claudin-3的表达。结果免疫组化及蛋白印迹均示前列腺癌组织中Claudin-3的表达显著高于良性前列腺增生组(P<0.01)。结论Claudin-3蛋白在前列腺癌组织中表达较前列腺增生组织中的表达明显上调,Claudin-3可能成为诊断前列腺癌的候选癌标。

关键词：前列腺肿瘤前列腺增生 Claudin3

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国家重点基础研究发展规划(973计划)创伤项目研究进展

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第三军医大学学报 2008年第21期30卷 1969-1971页

作者：王正国第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室全军交通医学研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

国家重点基础研究发展规划(973计划)是国家于1997年6月4日正式决定制定和实施的基础科学规划,其总体目标是面向21世纪初叶我国经济建设和科学技术发展的重大需求,开展多学科综合性研究,提出解决重大关键问题的理论依据和形成未来重大新... 详细信息

国家重点基础研究发展规划(973计划)是国家于1997年6月4日正式决定制定和实施的基础科学规划,其总体目标是面向21世纪初叶我国经济建设和科学技术发展的重大需求,开展多学科综合性研究,提出解决重大关键问题的理论依据和形成未来重大新技术的科学基础,提高科技持续创新能力,力争在国际上占有一定地位的重点领域取得突破性的进展。973计划的指导思想为“统观全局,突出重点,有所为有所不为”,“公平、公开、公正”和“客观、合理、科学”的原则。[第一段]

关键词：创伤救治组织修复国家重点基础研究发展规划(973计划)

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