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2014第十届全国中西医结合灾害医学学术大会江苏省中西医结合学会灾害医学、重症医学专业委员会成立大会暨健康产业成果展示洽谈会

作者：范霞杨雪唐婉琦严军梁华平第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室

目的体外研究吴茱萸碱的抗炎效应及其作用机制。方法本研究先用酵母多糖刺激RAW264.7细胞株。细胞经不同浓度的吴茱萸碱(25μM,50μM,100μM)预作用1h后,加入100μg/ml酵母多糖并作用6h。分别通过荧光定量PCR和ELISA方法检测炎症因子IL-... 详细信息

目的体外研究吴茱萸碱的抗炎效应及其作用机制。方法本研究先用酵母多糖刺激RAW264.7细胞株。细胞经不同浓度的吴茱萸碱(25μM,50μM,100μM)预作用1h后,加入100μg/ml酵母多糖并作用6h。分别通过荧光定量PCR和ELISA方法检测炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β的mRNA以及蛋白水平。为了进一步探究吴茱萸碱的分子作用机制,收集酵母多糖与吴茱萸碱联合作用1h的细胞团块,并通过ELISA和Western blot方法检测NF-κB p65的DNA结合活性以及NF-κB相关信号通路分子的蛋白表达水平,同时利用免疫荧光检测NF-κB p65入核情况。结果与酵母多糖单独处理组相比,吴茱萸碱能够有效降低IL-6、TNF-α和IL-1β的mRNA和蛋白水平(P<0.01),并且呈现浓度梯度依赖性;在1h时,吴茱萸碱能显著下调NF-κB p65的DNA结合能力(P<0.05)。Western blot和免疫荧光结果显示吴茱萸碱并不能抑制MAPKs家族(ERK,JNK,p38)的活化,但是可显著降低胞核中p65的含量及其磷酸化水平,同时吴茱萸碱对IκBα蛋白的降解以及IκBα磷酸化具有抑制作用。结论吴茱萸碱具有明显的抗炎效应,而此作用是通过下调IκBα磷酸化水平,阻止IκBα蛋白的降解,进而阻抑NF-κB p65入核来实现的。

关键词：吴茱萸碱抗炎效应酵母多糖抗炎机制磷酸化水平初步研究

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胍丁胺对脂多糖诱导的急性肝损伤的保护作用

胍丁胺对脂多糖诱导的急性肝损伤的保护作用

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2014第十届全国中西医结合灾害医学学术大会江苏省中西医结合学会灾害医学、重症医学专业委员会成立大会暨健康产业成果展示洽谈会

作者：李炫飞范霞郑志华杨雪刘政龚建平梁华平第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室

目的研究胍丁胺(agmatine,AGM)对脂多糖(1ipopolysaccharide,LPS)诱导肝损伤的保护作用,并探讨其相应的分子机制。方法将60只成年C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(20只,腹腔注射磷酸盐缓冲液)、LPS模型组(20只,腹腔注射LPS10mg/kg)和AGM... 详细信息

目的研究胍丁胺(agmatine,AGM)对脂多糖(1ipopolysaccharide,LPS)诱导肝损伤的保护作用,并探讨其相应的分子机制。方法将60只成年C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(20只,腹腔注射磷酸盐缓冲液)、LPS模型组(20只,腹腔注射LPS10mg/kg)和AGM治疗组(20只,腹腔注射LPS10mg/kg和AGM200mg/kg),各组于注射后6h和24h处死,每组每时相点10只,采集血和肝组织标本。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清和肝组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6)的含量,全自动生化分析仪测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平,Western Blot检测肝组织匀浆中核转录因子-κB p65(NF-κB p65)在细胞核内的含量,并观察肝组织病理变化。结果 LPS注射6h各组小鼠均表现为精神萎靡、蜷缩少动、禁饮食水,但其中AGM治疗组小鼠精神和活动明显好于LPS模型组。AGM治疗后能有效降低LPS所致小鼠外周血中ALT(U/L:107.9±8.5比189.9±13.6,P<0.05)、AST(U/L:347.4±24.9比716.8±60.4,P<0.05)、TBIL(μmol/L:8.3±1.9比10.6±2.5,P<0.05)和炎症因子TNF-α(ng/ml:296.3±42.5比627.2±81.3,P<0.05)、IL-1β(ng/ml:109±12.3比264±18.8,P<0.05)、IL-6(μg/ml:11.4±1.9比23-6±2.5,P<0.05)的含量,减少肝脏组织匀浆中TNF-α(ng/g:287.4±32.5比461±31.4,P<0.05)、IL-1β(pg/g:146±13.5比351±28.7,P<0.05)和NF-κB p65入核蛋白水平(NF-κB/核内参灰度值比值:0.54比0.85,P<0.05)。另外,LPS注射后24h肝脏出现明显病理改变,如肝细胞肿胀、坏死、充血和炎性细胞浸润等,但AGM治疗后肝组织损伤明显缓解。结论胍丁胺可能通过抑制LPS诱导的NF-κB入核,减少炎症因子的合成和释放,进而减轻小鼠肝组织的损伤。

关键词：胍丁胺 LPS 急性肝损伤白细胞介素

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外周胆碱酯酶抑制剂对严重创伤小鼠的保护作用

外周胆碱酯酶抑制剂对严重创伤小鼠的保护作用

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2014第十届全国中西医结合灾害医学学术大会江苏省中西医结合学会灾害医学、重症医学专业委员会成立大会暨健康产业成果展示洽谈会

作者：刘政肖雅靳贺范霞杨雪唐婉琦严军梁华平第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室

目的探讨外周胆碱酯酶抑制剂新斯的明对严重创伤小鼠的保护作用。方法采用随机数字表法将18只体重18～19g的雌性C57BL/6小鼠随机分为3组,脂多糖对照组,2次打击模型组和新斯的明干预组(0.14mg/kg),每组6只。通过双后肢骨折并去眼球放血以... 详细信息

目的探讨外周胆碱酯酶抑制剂新斯的明对严重创伤小鼠的保护作用。方法采用随机数字表法将18只体重18～19g的雌性C57BL/6小鼠随机分为3组,脂多糖对照组,2次打击模型组和新斯的明干预组(0.14mg/kg),每组6只。通过双后肢骨折并去眼球放血以及48h后注射脂多糖,构建"2次打击"小鼠模型模拟严重创伤并发院内感染。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)的水平。生化分析仪测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)含量。另70只雌性C57BL/6小鼠构建2次打击模型后,随机分为生理盐水对照组(34只)和新斯的明干预组(36只),观察生存情况。结果较脂多糖对照组,2次打击模型组内毒素休克反应更为迅速、强烈,表现为明显湿冷、腹泻、萎靡、寒颤等。新斯的明下调2次打击小鼠血清TNF-α、IL-6水平,而不影响IL-10的表达。与模型组相较,新斯的明干预组血清ALT、AST和LDH含量显著降低。严重创伤后注射新斯的明似乎可以降低2次打击小鼠病死率(22.22%vs 41.18%),但差异无统计学意义(p=0.083)。结论外周胆碱酯酶抑制剂新斯的明能显著减轻严重创伤并发感染小鼠炎症反应,保护肝脏功能,但未能明显改善生存率。

关键词：创伤感染出血胆碱酯酶抑制剂

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应重视战伤批量伤员各阶梯抗感染策略研究

应重视战伤批量伤员各阶梯抗感染策略研究

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2014第十届全国中西医结合灾害医学学术大会江苏省中西医结合学会灾害医学、重症医学专业委员会成立大会暨健康产业成果展示洽谈会

作者：梁华平王正国第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室

业已证明,战伤感染是仅次于休克的致死原因,已成为并仍是野战外科学领域亟需解决的关键科学问题。现代战争中,由于战伤防护装备(如头盔、防弹衣)、急救技术前伸(前线机动手术队+损伤控制技术)以及快速后送工具的应用使得早期被抢救成功... 详细信息

业已证明,战伤感染是仅次于休克的致死原因,已成为并仍是野战外科学领域亟需解决的关键科学问题。现代战争中,由于战伤防护装备(如头盔、防弹衣)、急救技术前伸(前线机动手术队+损伤控制技术)以及快速后送工具的应用使得早期被抢救成功的重伤伤员数量明显增多,但此类伤员是后续感染的高危人群。即使是在清创术、组织修复术和抗生素应

关键词：批量伤员多器官功能障碍综合征抗感染战创伤凝血功能障碍策略研究

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创伤后脓毒症新型预测公式的建立及与生物标志物PCT预测能力的比较

创伤后脓毒症新型预测公式的建立及与生物标志物PCT预测能力的比较

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2014第十届全国中西医结合灾害医学学术大会江苏省中西医结合学会灾害医学、重症医学专业委员会成立大会暨健康产业成果展示洽谈会

作者：靳贺邱俊马迪辉刘政肖雅周继红易东严军梁华平第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第三军医大学军事预防医学院卫生统计学教研室

目的建立新型的创伤后脓毒症预测公式,并与生物标志物PCT的预测能力进行比较。方法利用中华创伤数据库中6542例创伤患者的临床资料计算出适用于中国人的损伤严重度计分（injury severity score,ISS）和新损伤严重度计分（new injury sev... 详细信息

目的建立新型的创伤后脓毒症预测公式,并与生物标志物PCT的预测能力进行比较。方法利用中华创伤数据库中6542例创伤患者的临床资料计算出适用于中国人的损伤严重度计分（injury severity score,ISS）和新损伤严重度计分（new injury severity score,NISS）的半数致死量(Lethal Dose 50,LD)。回顾性分析2010年1月—2013年12月重庆市大坪医院收入的105例伤后24h内入院且ICU时间大于48h的创伤患者临床资料。利用ISS,NISS,LD以及全身炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome,SIRS）计分建立不同的公式。采用建立的公式及入院第一天所测血液中降钙素原（procalcitonin,PCT）浓度分别对创伤患者的脓毒症发生进行预测,根据受试者特征曲线（receiver operating characteristic curve,ROC）比较其预测能力的大小。结果 ISS的LD在16～44岁,45～64岁和大于65岁三个年龄段的值分别为男性:54,50和31;女性:60,47和39。NISS的LD在16-44岁,45-64岁和大于65岁三个年龄段的值分别为男性:62,56和42;女性:65,53和48。在十三种公式中(ISS,NISS,SIRS计分,ISS/LD,NISS/LD,ISS×SIRS计分,NISS×SIRS计分,ISS/LD×SIRS计分,NISS/LD×SIRS计分,ISS+SIRS计分,NISS+SIRS计分,ISS/LD+SIRS计分和NISS/LD+SIRS计分),公式NISS/LDSIRS计分具有最大的ROC曲线下面积（area under curve,AUC）,为0.812,其预测能力最大。公式NISS/LD+SIRS计分与PCT进行比较（AUC:0.812 vs 0.631,P<0.01）,NISS/LD+SIRS计分预测能力优于PCT。采用公式NISS/LD+SIRS计分预测创伤后脓毒症的发生,其临界值（cut-off value）为2.46,灵敏度（sensitivity,Sen）为85.51%,特异度（specificity,Spe）为69.44%,阳性预测值（positive predict value,PV）为84.29%阴性预测值（negative predict value,PV）为71.43%,阳性似然比positive likelihood ratio,LR)为2.80,阴性似然比（negative likelihood ratio,LR）为0.21,Youden指数（Youden index,YI）为0.55,比值比（odds ratio,0R）为13.41,正确度（accuracy,Acc）为0.8。结论 NISS/LD+SIRS计分可作为创伤后脓毒症发生的新型预测公式,且其预测能力优于PCT

关键词： PCT 创伤后生物标志物预测能力

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P13ⅣAKT／mToR信号通路介导黄芩苷抑制增生性瘢痕组织成纤维细胞的增殖

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中国生物化学与分子生物学报 2014年第1期30卷 60-67页

作者：吴登艳邓娅郝进徐祥重庆医科大学附属第二医院皮肤科第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室

黄芩苷作为一种黄酮类成分可通过抑制细胞增殖、促进凋亡发挥抗肿瘤作用，但它是否对异常增生的瘢痕具有抑制增生的作用尚不清楚．本研究探讨黄芩苷抑制人增生性瘢痕组织成纤维细胞增殖的分子机制．采用MTT比色法检测不同浓度的黄芩苷（... 详细信息

黄芩苷作为一种黄酮类成分可通过抑制细胞增殖、促进凋亡发挥抗肿瘤作用，但它是否对异常增生的瘢痕具有抑制增生的作用尚不清楚．本研究探讨黄芩苷抑制人增生性瘢痕组织成纤维细胞增殖的分子机制．采用MTT比色法检测不同浓度的黄芩苷（2．24×10^-2～2．24×10^2mmol／L）对体外培养的增生性瘢痕组织成纤维细胞增殖的抑制作用．发现浓度为2．24×10^0～2．24×10^2mmol／L黄芩苷处理组明显抑制增生性瘢痕组织成纤维细胞的增殖（P〈0．05）．转染后的荧光素酶报告基因活性检测、RT—PCR及Western印迹分析技术检测其mRNA水平及细胞的帽状依赖翻译的表达．2．24×10^2mmol／L黄芩苷处理后，黄芩苷作用组的mRNA水平并无明显差异（P〉0．05）；增生性瘢痕成纤维细胞的帽状依赖结构的翻译明显被黄芩苷所抑制．采用Western印迹分析检测被黄芩苷干预的增生性瘢痕组织成纤维细胞的增殖相关的蛋白的表达；m^7GTP琼脂糖殊沉淀结合蛋白4E—BPl与elF4E的变化．发现增殖相关的蛋白mTOR、p70S6K、S6、4EBPl、elF4E及其上游的AKT表达明显下调（P〈0．05），而PTEN表达明显上调．p-AKT（Ser473）、p-mTOR（Ser2448）、p．S6（Ser235／236）、p4EBPl（Thr37／46）、p-PTEN（T380／S382／383）磷酸化水平下降（P〈0．05）．在黄芩苷作用下的增生性成纤维细胞中的游离的4E。BPl明显减少（P〈0．05），而与eIF4E结合的***明显增加（P〈0．05）黄芩苷诱导游离的4E—BP1与eIF4E结合，从而抑制帽状依赖蛋白翻译．以上结果说明，黄芩苷可通过抑制P13K／AKT／mTOR信号通路抑制人增生性瘢痕组织成纤维细胞的增殖．

关键词：黄芩苷人增生性瘢痕组织成纤维细胞增殖 P13K AKT mTOR信号通路

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芳香烃受体敲除小鼠的培育和生物学特征及其在严重创伤动物模型中的应用

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中国急救复苏与灾害医学杂志 2014年第8期9卷 687-691页

作者：杨雪唐婉琦范霞严军梁华平中国人民解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨芳香烃受体敲除（AhRKO，AhR-／-）小鼠的饲养、繁育、基因分型和生物学特征，并初步应用于严重创伤研究。方法引进C57BU6背景的AhR杂合子（＋／-）小鼠；配对繁殖后提取仔鼠脚趾基因组脱氧核糖核酸（DNA），通过聚合酶链反应... 详细信息

目的探讨芳香烃受体敲除（AhRKO，AhR-／-）小鼠的饲养、繁育、基因分型和生物学特征，并初步应用于严重创伤研究。方法引进C57BU6背景的AhR杂合子（＋／-）小鼠；配对繁殖后提取仔鼠脚趾基因组脱氧核糖核酸（DNA），通过聚合酶链反应对仔鼠基因型进行鉴定；观察不同基因型仔鼠的生活状态、存活率和体重变化差异等生物学特征；制备AhR-／-和AhR野生型（WT，＋／＋）小鼠“骨折佚血”模型并收集骨髓细胞，采用粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）体外诱导培养骨髓来源树突状细胞（BMDC）7d，脂多糖（LPS）刺激24h后ELISA检测不同品系来源BMDC炎性因子分泌水平的差异。结果AhR-／-小鼠的饲养和繁殖均获得成功，子代小鼠基因型分布符合孟德尔分离定律；相对AhR＋／＋小鼠而言，AhR-／-小鼠发育迟缓，体型小，体重轻（P〈0．05），生活状态差，存活率偏低（P〈0．05）；严重创伤后AhR-／-小鼠来源的成熟BMDC分泌α型肿瘤坏死因子（TNFa）和白细胞介素（IL）-6的能力高于AhR＋／＋，（P〈0．05），而IL-10的分泌水平则低于AhR＋／＋（P〈0．05）。结论通过AhR＋／-繁育和适当的基因分型技术是获得表型稳定的AhR-／-的有效方法；严重创伤后AhR-／-来源的BMDC分泌炎性细胞因子的水平与AhR＋／＋来源BMDC存在显著差异，提示AhR与严重创伤后机体的炎性反应有关。

关键词：芳香烃受体敲除小鼠培育基因分型生物学特征严重创伤

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过氧化氢酶基因rs208679在重庆汉族人群中的分布及其与噪声性耳聋的关联性

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中华创伤杂志 2014年第3期30卷 250-254页

作者：杨俊慧王小明王朝永陈继川钱宇段朝霞第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所耳鼻咽喉一头颈外科重庆400042 重庆市涪陵区疾病预防控制中心职业病防治科重庆市涪陵区中心医院耳鼻咽喉科第六研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室

目的探讨过氧化氢酶（catalase，CAT）基因5’区-6411A／G（rs208679）多态性在重庆汉族人群中的分布及其与噪声性耳聋（noise—inducedhearingloss，NIHL）的关联研究。方法以重庆地区汉族无血缘关系的健康自愿者225例（健康对照组）... 详细信息

目的探讨过氧化氢酶（catalase，CAT）基因5’区-6411A／G（rs208679）多态性在重庆汉族人群中的分布及其与噪声性耳聋（noise—inducedhearingloss，NIHL）的关联研究。方法以重庆地区汉族无血缘关系的健康自愿者225例（健康对照组）、噪声接触者237例（噪声接触组）作为研究对象。噪声接触组根据有无NIHL又分为无耳聋组170例和耳聋组67例。采用iMLDR“分型技术，分别检测各组CAT基因5’区rs208679多态的基因型，并比较组间基因型、等位基因频率分布及临床耳聋发生率间的差异。结果在研究人群中检测到rs208679多态的3种基因型AA、AG和GG，两组人群的A等位基因频率均为0．76，G等位基因频率为0．24，健康对照组和噪声接触组基因型频率分布符合Hardy—Weinberg遗传平衡定律（P〉0．05）。健康对照组与噪声接触组、无耳聋组与耳聋组间，多态基因型（AA、AG及GG）和等位基因（A、G）频率分布差异均无统计学意义（P〉0．05）；但无耳聋组与耳聋组的隐性分析GG：AG＋AA差异有统计学意义（P〈0．05）。结论rs208679是NIHL的易感基因，可作为N1HL易感性的生物标志。

关键词：噪声听觉丧失过氧化氢酶单核苷酸多态性

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应激模型的生理学基础及其比较研究进展

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现代生物医学进展 2014年第21期14卷 4160-4163页

作者：高文婷杨策王海燕杜娟蒋建新第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室/全军交通医学研究所/全军交通伤重点实验室/创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 内蒙古科技大学第一附属医院内蒙古包头014010

各种外界因素如创伤、手术、感染、缺氧、强光、噪音等通过一定强度作用于机体可以引起机体特异性和非特异性反应,非特异性反应与刺激因素性质无直接关系,称为应激(stress)。近年来,随着社会的发展,生活节奏的加快、自然环境和生活环境... 详细信息

各种外界因素如创伤、手术、感染、缺氧、强光、噪音等通过一定强度作用于机体可以引起机体特异性和非特异性反应,非特异性反应与刺激因素性质无直接关系,称为应激(stress)。近年来,随着社会的发展,生活节奏的加快、自然环境和生活环境的恶化,应激已经成为威胁人类健康的重要因素,有关应激影响机体健康的研究备受国内外学者的重视,而合适的应激动物模型的建立对应激研究的顺利开展有着重要意义。本文就目前应激动物模型的病理生理特点、种类、制作和评价方法等进行综述,旨在为应激研究提供参考。

关键词：应激下丘脑肾上腺动物模型

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基于光流法和运动边界识别的超声弹性成像

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清华大学学报（自然科学版） 2013年第9期53卷 1339-1342,1346页

作者：朱新建邵金华白净清华大学生物医学工程系北京100084 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第五研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

Sand光流法是目前超声弹性成像中常用的运动估计方法。但Sand光流法中的局部平滑系数对弹性成像不能充分发挥作用,而全局平滑系数又是固定不变的,从而影响估计的准确性。为此,该文提出了先利用初步应变估计结果进行小波分析得到运动边... 详细信息

Sand光流法是目前超声弹性成像中常用的运动估计方法。但Sand光流法中的局部平滑系数对弹性成像不能充分发挥作用,而全局平滑系数又是固定不变的,从而影响估计的准确性。为此,该文提出了先利用初步应变估计结果进行小波分析得到运动边界分布,根据运动边界分布构造非边界平滑系数,从而将边界信息反馈回原先光流估计算法、优化参数及算法结构的思路,再重新进行位移和应变的估计方法。模拟数据的分析结果表明:对于组织中存在运动边界的位移场和应变场估计,通过非边界平滑系数的构造,改进的Sand光流法算法比原方法在精度上提高了1.39%,证明了算法的有效性。

关键词：超声弹性成像光流法运动边界

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