检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2004年第18期26卷 1667-1669页

作者：冯凯刘兴蒋建新第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室

目的　调查CD14 ( 2 60 )多态性在重庆地区汉族中的分布特征 ,及检验该随机样本遗传学研究的可靠性。方法　对 110名重庆汉族个体 ,采用降落式PCR和限制性片段长度多态性法 (RFLP)进行基因型分析。结果　重庆地区汉族CD14 ( 2 60 )多... 详细信息

目的　调查CD14 ( 2 60 )多态性在重庆地区汉族中的分布特征 ,及检验该随机样本遗传学研究的可靠性。方法　对 110名重庆汉族个体 ,采用降落式PCR和限制性片段长度多态性法 (RFLP)进行基因型分析。结果　重庆地区汉族CD14 ( 2 60 )多态性TT、TC、CC 3种基因型频率分别为 43 6%、3 9 1%和 17 3 %;样本分布符合Hardy Weinberg平衡。结论　重庆汉族CD14 ( 2 60 )多态性基因型分布特征与白种人存在明显差异。样本为H W平衡群体。

关键词：降落式PCR(TD—PCR) 限制性片段长度多态性(RFLP) CD14

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介绍一种从全血中抽提DNA的方法

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第三军医大学学报 2004年第4期26卷 368-369页

作者：冯凯刘兴蒋建新第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室

在分子生物学实验中,DNA样本的质量往往是决定实验是否成功的关键因素.很多实验手册中都介绍过DNA抽提法[1,2],而且目前市场上有多家生物公司生产DNA抽提试剂盒.

关键词： DNA抽提 ACD抗凝剂

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下丘脑-垂体-甲状腺轴内分泌激素的变化及其临床意义

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第三军医大学学报 2004年第4期26卷 367-368页

作者：黄文朱佩芳王正国第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室

脑梗死 (cerebralinfarction)的发病与多种因素相关 ,已有报道提示脑梗死病人中存在甲状腺功能异常[1 ,2 ] ,但大多数研究局限于对脑梗死患者的甲状腺功能变化 ,本研究将脑梗死高危者纳入了研究范围 ,初步探讨了下丘脑垂体甲状腺轴内... 详细信息

脑梗死 (cerebralinfarction)的发病与多种因素相关 ,已有报道提示脑梗死病人中存在甲状腺功能异常[1 ,2 ] ,但大多数研究局限于对脑梗死患者的甲状腺功能变化 ,本研究将脑梗死高危者纳入了研究范围 ,初步探讨了下丘脑垂体甲状腺轴内分泌激素在急性脑梗死发病中病理生理意义 ,现报告如下。1　资料与方法1 1　对象与分组　　研究对象按是否患病和是否患有脑梗死危险因素分为 3组 :脑梗死组、脑梗死高危组 ,正常对照组。脑梗死组为本科急性脑梗死住院病人 ,收集时间为 2 0 0 0年 4月到 2 0 0 1年 4月 ,共168例 ,其中脑血栓形成为 12 6例 (椎基底

关键词：下丘脑-垂体-甲状腺轴急性脑梗死危险因素

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两系创伤反应明显差异小鼠肺血管通透性及Scyb15基因基础表达量的比较研究

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第三军医大学学报 2004年第16期26卷 1442-1445页

作者：黄文朱佩芳王正国李晓炎宁心杨志焕第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室

目的　通过对两系创伤反应明显差异小鼠伤前、伤后肺血管通透性的及生理状态下Scyb15基因的比较研究 ,初步探讨创伤反应差异的相关解剖结构基础 ,为创伤相关基因背景的研究提供实验和理论依据。方法　以对创伤反应有明显差异的两系近交... 详细信息

目的　通过对两系创伤反应明显差异小鼠伤前、伤后肺血管通透性的及生理状态下Scyb15基因的比较研究 ,初步探讨创伤反应差异的相关解剖结构基础 ,为创伤相关基因背景的研究提供实验和理论依据。方法　以对创伤反应有明显差异的两系近交系小鼠为研究对象 ,采用BST Ⅰ型生物激波管致伤模型 ,利用荧光分光光度计测定肺组织在伤前伤后荧光素钠的含量 ,以此定量反映肺血管通透性的变化 ;采用荧光定量PCR技术 ,对Scyb15基因在生理状态下的表达进行定量。结果　两系小鼠间比较 ,在伤后 1h及伤后 4h ,肺血管通透性有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;同系小鼠伤前和伤后比较 ,BALB c在伤后 3 0min ,其血管通透性已显示出明显差异 (P <0 .0 5 ) ,而C5 7BL 6在伤后 1h才显示出差异 (P <0 .0 5 ) ;不管是伤前伤后 ,在同一时间点 ,BALB c小鼠的血管通透性均有较C5 7BL 6增高的趋势 ;伤后 4h内 ,两系小鼠的血管通透性呈现持续升高 ;生理状态下 ,Scyb15基因在C5 7BL 6小鼠中的表达量较在BALB c小鼠中的表达量低 ,且二者相比有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　BALB c小鼠和C5 7BL 6小鼠间Scyb15基因基础状态下及创伤后肺通透性变化的显著性不同可能是创伤反应差异的重要原因 ,这两系小鼠可能存在先天性 (遗传性 )肺血管结构上?

关键词：创伤反应差异肺血管通透性解剖结构基础荧光定量PCR Scyb15基因

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凝血酶敏感蛋白2在小鼠角膜碱烧伤后修复过程中的表达

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中华烧伤杂志 2005年第6期21卷 452-454页

作者：严军王正国朱佩芳第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室

目的观察小鼠角膜碱烧伤后修复过程中凝血酶敏感蛋白2(TSP2)的表达情况。方法制作小鼠角膜碱烧伤模型(实验组,35只)。采用HE染色、免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法,观察对照组(正常小鼠5只)及实验组小鼠碱烧伤后3、6、1... 详细信息

目的观察小鼠角膜碱烧伤后修复过程中凝血酶敏感蛋白2(TSP2)的表达情况。方法制作小鼠角膜碱烧伤模型(实验组,35只)。采用HE染色、免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法,观察对照组(正常小鼠5只)及实验组小鼠碱烧伤后3、6、12、24、48、96、192h(每时相点5只)角膜组织的形态学改变和TSP2、tsp2的表达情况。结果HE染色显示,实验组小鼠伤后24h起角膜内有明显的血管生成。免疫组织化学和RT-PCR检测结果一致显示,TSP2及tsp2在对照组及实验组小鼠角膜组织中均有表达,多见于上皮层的基底层。与对照组的TSP2表达水平(0.48±0.15)比较,实验组小鼠伤后3h TSP2的表达水平即上升(P<0.05),即6h达第1个峰值1.54±0.45,24h降至低谷0.73±0.19,随后又回升,96h时达第2个峰值1.79±0.63,此后下调,至伤后192h降至对照组水平(P>0.05).tsp2的表达趋势与之相似。结论小鼠角膜碱烧伤后TSP2的表达量随时相点的变化呈波动的趋势,这一变化可能属于应激条件下的代偿性增高。

关键词：凝血酶敏感蛋白类角膜烧伤化学修复

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用嗜热菌蛋白酶进行人肠上皮细胞分离培养

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第三军医大学学报 2004年第11期26卷 1016-1018页

作者：张道杰蒋建新陈永华熊健琼段朝霞朱佩芳第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室

目的　探讨人肠上皮细胞 (intestinalepithelialcell,IEC)的分离、培养及鉴定方法 ,为进一步研究IEC提供合适的细胞模型。方法　取 4～ 6个月合法引产胎儿小肠 ,用嗜热菌蛋白酶消化分离IEC ,接种于含多种促IEC生长的营养成分的DMEM培养... 详细信息

目的　探讨人肠上皮细胞 (intestinalepithelialcell,IEC)的分离、培养及鉴定方法 ,为进一步研究IEC提供合适的细胞模型。方法　取 4～ 6个月合法引产胎儿小肠 ,用嗜热菌蛋白酶消化分离IEC ,接种于含多种促IEC生长的营养成分的DMEM培养液内 ,根据IEC和成纤维细胞贴壁时间的差异来纯化IEC ,通过观察IEC生长状态、形态特征、超微结构及检测上皮细胞膜抗原对IEC进行鉴定。结果　嗜热菌蛋白酶消化 2h可分离出大量的健全绒毛隐窝单位 ,进一步培养获得的IEC ,上皮细胞膜抗原均呈阳性。结论　选用嗜热菌蛋白酶作为分离IEC的消化酶 ,可获得较纯的IEC ,完全可供相关实验研究之用。

关键词：嗜热菌蛋白酶肠上皮细胞原代培养

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小鼠组织中Cxcl15 mRNA表达及其在肺组织中的的定位特征

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第三军医大学学报 2005年第17期27卷 1719-1721页

作者：黄文朱佩芳王正国冯刚杨志焕第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室

目的观察Cxc l15(chemok ine,C-X-C motif,ligand 15)基因在小鼠体内的表达分布规律。方法采用North-ern,将小鼠Cxc l15基因与小鼠8种主要组织来源的Poly A+RNA印迹膜进行杂交,观察该基因在小鼠各种组织中的分布规律;采用原位杂交,观察... 详细信息

目的观察Cxc l15(chemok ine,C-X-C motif,ligand 15)基因在小鼠体内的表达分布规律。方法采用North-ern,将小鼠Cxc l15基因与小鼠8种主要组织来源的Poly A+RNA印迹膜进行杂交,观察该基因在小鼠各种组织中的分布规律;采用原位杂交,观察该基因在小鼠肺组织中的分布规律。结果Cxc l15基因主要在小鼠肺组织支气管上皮细胞胞浆中表达,并可能存在不同亚型。结论Cxc l15基因的表达存在组织特异性。

关键词： Cxcl15基因 Northern blotting 原位杂交创伤反应差异

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血管内皮生长因子在小鼠角膜碱烧伤后修复过程中的作用

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第三军医大学学报 2005年第19期27卷 1921-1923页

作者：严军王正国朱佩芳第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室

目的研究角膜碱烧伤后修复过程中血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的表达。方法在建立体内角膜碱烧伤模型的基础上,主要采用免疫组化和RT-PCR等方法以确定VEGF的表达规律。结果VEGF在正常角膜组织和伤后3h几乎... 详细信息

目的研究角膜碱烧伤后修复过程中血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的表达。方法在建立体内角膜碱烧伤模型的基础上,主要采用免疫组化和RT-PCR等方法以确定VEGF的表达规律。结果VEGF在正常角膜组织和伤后3h几乎无表达。碱烧伤后6h,VEGF开始有明显表达,到伤后12h达到峰值,然后有所下降,碱烧伤后24h和48h表达最低,之后又有一反弹过程,在伤后96h和192h达到最高。表达部位主要集中在基质层。结论VEGF在核酸和蛋白质水平上的表达相似,其表达量随时相点的变化呈波动性趋势。体内角膜组织VEGF的表达是网络调控的结果,与眼新生血管存在着时空对应关系。进一步研究角膜创伤后VEGF对其它抑血管因子的调控作用仍是必需的。

关键词：血管内皮生长因子角膜碱烧伤修复

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脂多糖上调CRH及其结构相关肽Ucn在大鼠腹腔巨噬细胞的表达

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第三军医大学学报 2008年第1期30卷 5-7页

作者：杨列周继红张岫竹刘大维孙巧玲蒋建新第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室

目的观察促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasing hormone,CRH)及其结构相关肽urocortin(Ucn)在大鼠腹腔巨噬细胞的表达及LPS对它们表达的影响。方法体外培养Wistar大鼠腹腔巨噬细胞,共收集脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)处理0、1、2、4、8h组细胞,每组含8份分别来自不同大鼠的细胞样本。收集细胞总mRNA(n=8)及总蛋白(n=6),利用RT-PCR及ELISA技术分别检测各组细胞CRH及Ucn mRNA转录水平及胞溶多肽含量。结果RT-PCR结果显示,正常大鼠腹腔巨噬细胞中即有一定水平的CRH及Ucn mRNA,LPS刺激后二者水平均显著增高,刺激4h二者均达峰值,约为对照组的2倍。ELISA结果显示,正常大鼠腹腔巨噬细胞即可表达CRH[(0.07±0.01)ng/107细胞]及Ucn[(1.00±0.48)ng/107细胞];LPS刺激促进了二者的表达,CRH水平在2h达高峰[(0.30±0.07)ng/107细胞],Ucn水平在8h达高峰[(8.68±1.25)ng/107细胞]。结论大鼠腹腔巨噬细胞同时表达CRH及Ucn,注适量LPS刺激后,两者表达水平均会显著上调,但Ucn多肽水平显著高于CRH。因此,炎症条件下的巨噬细胞可能是局部CRH家族特别是Ucn的潜在来源细胞。

关键词：腹腔巨噬细胞促肾上腺皮质激素释放激素 umcortin 脂多糖

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碱性成纤维细胞生长因子在P物质诱导肉芽组织成纤维细胞增殖中的作用

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第三军医大学学报 2004年第4期26卷 283-286页

作者：蒋伟王正国赖西南朱金明朱佩芳第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室

目的　探讨感觉神经肽P物质 (substanceP ,SP)对碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor ,bFGF)表达的调控作用及其在SP促离体培养的肉芽组织成纤维细胞增殖中的作用。方法　采用MTT法测定SP对原代培养的肉芽组织成纤维... 详细信息

目的　探讨感觉神经肽P物质 (substanceP ,SP)对碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor ,bFGF)表达的调控作用及其在SP促离体培养的肉芽组织成纤维细胞增殖中的作用。方法　采用MTT法测定SP对原代培养的肉芽组织成纤维细胞的促增殖作用 ;采用RT PCR和Westernblotting方法检测SP对成纤维细胞bFGF基因和蛋白表达的调控作用 ,观察时间及剂量效应关系。结果　 10 -9～ 10 -5mol/L的SP在体外对原代培养的肉芽组织成纤维细胞均具有明显的促增殖作用 (P <0 0 1) ,且具有明显的剂量依赖性 (r =0 5 94,P <0 0 1) ,bFGF抗体只能部分抑制这一作用 (与对照组比较 ,P <0 0 1;与 10 -7mol/LSP组比较 ,P <0 0 5 )。 10 -7mol/LSP可诱导成纤维细胞bFGFmRNA的表达 ,在作用后 3 ,6h与对照组相比 ,差异有非常显著性意义 (P <0 0 1) ;12h后可检测到bFGF蛋白明显表达增强 (P <0 0 1) ,2 4h达高峰 ,48h后逐渐有所回落。SP在 10 -9～ 10 -5mol/L范围内可显著促进成纤维细胞bFGFmRNA表达 ,在 10 -8～ 10 -5mol/L范围可诱导bFGF蛋白的表达 ,均在 10 -7mol/L剂量点达到峰值 (P <0 0 1)。结论　SP对肉芽组织成纤维细胞具有明显的促增殖作用。

关键词： P物质成纤维细胞生长因子碱性基因表达创伤愈合成纤维细胞

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