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冠心病患者冠状动脉病变程度及冠状动脉内皮细胞氧化损伤与血清AGEs的关系

第四届全国再生医学(干细胞与组织工程)学术研讨会暨全国人体干细胞移植技术临床应用管理高层研讨会、第一届中华医学会医学工程学分会干细胞工程专业委员会学术年会

作者：于世勇黄岚宋耀明李爱民覃军于学军耿召华赵刚宋明宝第三军医大学新桥医院全军心血管内科研究所重庆 400037

目的：近年来的研究发现晚期糖基化终末产物(AGEs)与冠心病的发生发展关系密切。本研究拟分析冠心病患者冠状动脉病变程度与血清AGEs含量的相关性,探讨AGEs在冠状动脉粥样硬化病变中的作用。同时测定冠状动脉内皮细胞内活性氧水平及冠... 详细信息

目的：近年来的研究发现晚期糖基化终末产物(AGEs)与冠心病的发生发展关系密切。本研究拟分析冠心病患者冠状动脉病变程度与血清AGEs含量的相关性,探讨AGEs在冠状动脉粥样硬化病变中的作用。同时测定冠状动脉内皮细胞内活性氧水平及冠脉循环血清一氧化氮含量,期望从内皮细胞氧化损伤角度揭示AGEs促冠状动脉粥样硬化过程中的可能机制。方法：对43例行冠状动脉介入治疗的患者,根据美国心脏病协会所规定的冠状动脉血管图像计分评价标准,对冠心病患者冠状动脉病变程度进行评定;ELISA法测定血清AGEs含量;应用冠状动脉内皮细胞活检技术,利用导丝获取冠状动脉内皮细胞,通过荧光染料2',7'-二氯二氢荧光素二乙酯测定细胞内ROS水平;采集冠状静脉窦血液标本,测定血清一氧化氮含量,以此反映冠状动脉内皮细胞功能。结果：患者Gensini总积分为56.5±41.1分,ELISA试剂盒测定血清AGEs浓度为62.3±14.9 U/mL,二者呈明显的正相关(γ=0.416,P<0.01);DCFH-DA进入细胞后,被ROS氧化,生成发荧光的DCF,其荧光强度可以代表细胞内ROS水平,荧光显微镜下观察可见活检冠状动脉内皮细胞内分布有弥漫的绿色荧光,分析其荧光强度为64.6±13.7,与血清AGEs呈明显的正相关(γ=0.588,P<0.01);冠状静脉窦血清NO浓度为57.0±5.6μmol/L,与血清AGEs呈明显的负相关(γ=0.608,P<0.01)。结论：AGEs可能通过内皮细胞氧化损伤途径参与动脉粥样硬化的发生和发展。

关键词：冠心病晚期糖基化终末产物动脉粥样硬化血管内皮细胞氧化应激血清一氧化氮

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血管内皮生长因子对内皮祖细胞生物学功能的影响及其机制初探

血管内皮生长因子对内皮祖细胞生物学功能的影响及其机制初探

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中华医学会心血管病学分会第十次全国心血管病学术会议

作者：崔斌黄岚谭虎赵刚赵晓辉于世勇第三军医大学新桥医院全军心血管内科研究所第三军医大学新桥医院麻醉科

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)对体外培养骨髓源性内皮祖细胞(EPC)数量及增殖、迁移、黏附功能的影响及机制初探。方法Ficoll密度梯度离心法收集白膜层的单个核细胞,接种于纤连蛋白包被的培养板中。在添加了青霉素100 U/ml、链霉素100... 详细信息

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)对体外培养骨髓源性内皮祖细胞(EPC)数量及增殖、迁移、黏附功能的影响及机制初探。方法Ficoll密度梯度离心法收集白膜层的单个核细胞,接种于纤连蛋白包被的培养板中。在添加了青霉素100 U/ml、链霉素100μg/ml、20%优质胎牛血清的M199培养液中培养4 d,PBS洗掉非贴壁细胞,更换培养液继续培养至7 d,贴壁细胞供实验用。对EPC进行FITC-荆豆凝集素

关键词：内皮祖细胞生物学功能内皮生长因子 EPC

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以血栓栓塞为主要表现的主动脉夹层5例

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实用医学杂志 2008年第7期24卷 1195-1196页

作者：周音频蒋红云黄岚宋耀明韩国华陈林第三军医大学新桥医院全军心血管内科研究所重庆市400037 解放军273医院内一科新疆库尔勒841000 第三军医大学新桥医院心血管外科重庆市400037

目的:加强对以肺栓塞为主要表现的主动脉夹层的认识。方法:回顾性分析5例以主动脉主要分支血栓栓塞为特殊表现的主动脉夹层患者的临床特征、治疗和预后转归情况。结果:本组5例中在初诊时有4例误诊。血栓栓塞部位为左锁骨下动脉和肱动脉... 详细信息

目的:加强对以肺栓塞为主要表现的主动脉夹层的认识。方法:回顾性分析5例以主动脉主要分支血栓栓塞为特殊表现的主动脉夹层患者的临床特征、治疗和预后转归情况。结果:本组5例中在初诊时有4例误诊。血栓栓塞部位为左锁骨下动脉和肱动脉各1例,右髂外动脉1例,左股动脉栓塞1例,肠系膜动脉栓塞1例。内科保守治疗2例,转外科治疗2例,血管内超声消融血栓加主动脉腔内覆膜支架置入术1例。转归为死亡2例,遗留功能障碍2例,痊愈1例。结论:以血栓栓塞为主要表现的主动脉夹层容易误诊,预后恶劣。应注意严格追溯病史和体检,选择多排CT、MRI和造影能尽快确诊,血栓栓塞部位缺血严重应尽量外科或介入治疗。

关键词：夹层动脉瘤主动脉血栓栓塞

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晚期糖基化终末产物刺激下内皮细胞活性氧的变化及来源分析

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中国动脉硬化杂志 2008年第11期16卷 857-860页

作者：于世勇黄岚宋明宝赵晓辉陈剑飞崔斌中国人民解放军第三军医大学新桥医院全军心血管内科研究所重庆市400037

目的探讨晚期糖基化终末产物刺激下内皮细胞活性氧的变化及来源。方法培养人脐静脉内皮细胞,观察不同浓度和不同作用时间晚期糖基化终末产物刺激下人脐静脉内皮细胞内活性氧的生成情况,进而分别应用线粒体呼吸链酶复合体、黄嘌呤氧化酶... 详细信息

目的探讨晚期糖基化终末产物刺激下内皮细胞活性氧的变化及来源。方法培养人脐静脉内皮细胞,观察不同浓度和不同作用时间晚期糖基化终末产物刺激下人脐静脉内皮细胞内活性氧的生成情况,进而分别应用线粒体呼吸链酶复合体、黄嘌呤氧化酶、一氧化氮合酶及NADPH氧化酶抑制剂,观察抑制相应氧化酶后细胞内活性氧的变化,分析各种氧化酶作用大小。结果晚期糖基化终末产物刺激后,内皮细胞内活性氧明显增加,并且随晚期糖基化终末产物浓度和孵育时间的增加而增加,NADPH氧化酶抑制剂二亚苯基碘几乎完全抑制了晚期糖基化终末产物刺激下细胞内活性氧的生成,线粒体呼吸链酶复合体I抑制剂鱼藤酮、线粒体呼吸链酶复合体Ⅱ抑制剂噻吩甲酰三氟丙酮、线粒体呼吸链酶复合体Ⅲ抑制剂抗霉素A、黄嘌呤氧化酶抑制剂别嘌醇对活性氧生成无明显影响,而一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯反而引起细胞内活性氧的轻度增加。结论NADPH氧化酶是晚期糖基化终末产物刺激下内皮细胞活性氧生成的主要来源,可能是晚期糖基化终末产物启动和加重动脉粥样硬化病理生理过程中的重要防治靶点。

关键词：病理学与病理生理学晚期糖基化终末产物内皮细胞活性氧

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不同严重程度心力衰竭患者心肌组织ACE和AngⅡ蛋白的表达

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第三军医大学学报 2007年第5期29卷 445-447页

作者：王江田颖聂凌宋熔李震魁谭红梅祝善俊第三军医大学新桥医院心血管内科全军心血管内科研究所重庆400037

目的了解不同程度心力衰竭患者心肌组织血管紧张素转换酶(angiotensin convering enzyme,ACE)和血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)蛋白表达与心肌重构和心功能的关系。方法通过手术取材,采用Western blot技术检测35例瓣膜病所致心力衰... 详细信息

目的了解不同程度心力衰竭患者心肌组织血管紧张素转换酶(angiotensin convering enzyme,ACE)和血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)蛋白表达与心肌重构和心功能的关系。方法通过手术取材,采用Western blot技术检测35例瓣膜病所致心力衰竭患者和5例正常人的心肌组织中ACE和AngⅡ蛋白表达,采用免疫组织化学方法检测ACE和AngⅡ在心力衰竭患者和正常人心肌组织中的表达部位。结果瓣膜病所致心力衰竭患者心肌组织呈心肌重构病理改变。轻度心力衰竭患者心肌组织ACE和AngⅡ蛋白表达较正常人增高,中重度心力衰竭患者AngⅡ增高更为显著,但ACE/AngⅡ比值随着心力衰竭程度加重逐渐下降。免疫组织化学染色显示ACE主要在心肌细胞膜表达,AngⅡ主要在心肌细胞细胞质表达。结论心力衰竭患者心肌组织ACE和AngⅡ蛋白表达量明显增加,直接参与心肌重构的发生发展。心衰时ACE/AngⅡ值下降,提示AngⅡ的生成与分解可能依赖非ACE的其他途径。

关键词：心力衰竭血管紧张素转换酶血管紧张素Ⅱ

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SDF-1对内皮祖细胞增殖迁移的影响及AMD3100对其的干预

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第三军医大学学报 2007年第6期29卷 475-478页

作者：尹扬光黄岚赵晓辉于世勇方玉强赵景红第三军医大学新桥医院心血管内科全军心血管内科研究所重庆400037 第三军医大学大坪医院野战外科研究所心血管内科重庆400042

目的探讨基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)对小鼠骨髓源性内皮祖细胞(endotheli-al progenitor cells,EPCs)增殖迁移的影响及AMD3100对其的干预效应。方法分别用不同浓度的SDF-1α刺激EPCs,观察SDF-1α的促增殖效应再用不同浓度的AMD3100干预5ng/ml SDF-1α的促增殖效应及单用AMD3100与EPCs孵育,观察AMD3100对EPCs增殖的影响。MTT比色法检测EPCs的增殖情况。用1、10ng/ml SDF-1α诱导EPCs迁移,或先用10ng/ml AMD3100与EPCs孵育,再做SDF-1α诱导的/无SDF-1α诱导的迁移实验。用改良的Boyden小室测定EPCs迁移能力。结果SDF-1α剂量依赖性增强EPCs增殖能力,10ng/ml AMD3100即完全阻断5ng/ml SDF-1α的促进EPCs增殖效应,单用AMD3100孵育可抑制EPCs增殖,与阴性对照组比较差异显著(P<0·01);单用AMD3100孵育抑制EPCs迁移,与阴性对照组比较差异显著(P<0·01)。结论SDF-1α可增强EPCs增殖迁移能力,AMD3100可完全阻断其促增殖和诱导迁移效应,单用AMD3100抑制EPCs增殖迁移。

关键词：内皮祖细胞基质细胞衍生因子-1 AMD3100 增殖迁移

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移植不同年龄大鼠骨髓EPCs对损伤内膜增殖的影响

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中国病理生理杂志 2007年第11期23卷 2274-2275页

作者：陈剑飞黄岚武晓静晋军赵晓晖赵谨红刘兰周健于世勇重庆第三军医大学附属新桥医院全军心血管内科研究所重庆400037

目的:观察移植不同年龄大鼠骨髓EPCs对损伤血管内膜增殖的影响。方法:选取4月龄SD雄性大鼠30只,建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,均分成接受4月龄大鼠骨髓EPCs移植组、接受18月龄大鼠骨髓EPCs移植组和对照组。于接受移植后14d处死大鼠,颈动... 详细信息

目的:观察移植不同年龄大鼠骨髓EPCs对损伤血管内膜增殖的影响。方法:选取4月龄SD雄性大鼠30只,建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,均分成接受4月龄大鼠骨髓EPCs移植组、接受18月龄大鼠骨髓EPCs移植组和对照组。于接受移植后14d处死大鼠,颈动脉切片观察不同年龄大鼠骨髓EPCs对损伤血管内膜增殖的影响。结果:接受EPCs移植的大鼠损伤内膜增殖少于非移植组,接受4月龄大鼠骨髓EPCs移植组较接受18月龄大鼠骨髓EPCs移植组内膜增殖也明显减轻。结论:外源性EPCs可减轻损伤血管内膜增殖,且供体年龄对EPCs功能有影响,随供体年龄增加,减弱损伤内膜增殖功能减退。

关键词：年龄因素内皮祖细胞骨髓血管内膜

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不同强度耐力训练对新兵自主神经调节功能的影响

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解放军预防医学杂志 2007年第4期25卷 242-246页

作者：田开新覃军黄岚隆敏于世勇喻杨第三军医大学新桥医院全军心血管内科研究所重庆400037

目的评价不同强度的耐力训练对新兵自主神经功能的影响,为优化军事训练提供科学的依据。方法72名健康男性新兵,随机分为现行军体训练组、有氧耐力组、无氧耐力组,进行连续8周训练。分别于训练前、训练末进行5 min心率变异性(HRV)分析、... 详细信息

目的评价不同强度的耐力训练对新兵自主神经功能的影响,为优化军事训练提供科学的依据。方法72名健康男性新兵,随机分为现行军体训练组、有氧耐力组、无氧耐力组,进行连续8周训练。分别于训练前、训练末进行5 min心率变异性(HRV)分析、冷加压试验(CPT)及血浆去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(EPI)、肾素活性(RA)及神经肽Y(NPY)检测。结果训练前各指标组间差异无显著性。训练8周末,现行训练组HFn(52±11)较训练前(59±12)显著降低(P<0.05),但LFn(43±12)、LF/HF(0.87±0.35)均较训练前(36±11)、(0.67±0.32)〕有显著增加(P<0.05);有氧耐力组HFn(62±11)均较训练前(53±14)显著增加(P<0.05),但LFn(36±8)、LF/HF(0.64±0.28)与训练前(39±12)、(0.77±0.33)相比呈下降趋势;无氧耐力组HRV无显著变化。训练8周末与静态时比较,无氧耐力组CPT中HR增加值〔(6.46±6.79)***-1〕显著低于现行训练组〔(24.00±22.64)***-1〕和有氧耐力组〔(17.11±15.22)***-1〕的增加值(P<0.05)。现行训练组的NE〔(152.17±31.51)***-1)〕显著高于有氧耐力组〔(109.31±18.77)***-1〕和无氧耐力组〔(104.92±19.36)***-1)〕(P<0.01)。现行训练组RA〔(4.33±2.08)***-1)〕显著高于有氧耐力组〔(1.97±1.79)***-1)〕和无氧耐力组〔(2.74±1.06)***-1)〕(P<0.01)。结论耐力训练对自主神经调节能力的影响主要取决于负荷强度,现行军体训练接近极限强度,其对机体有潜在危害,故应进行规范的有氧、无氧耐力训练。

关键词：耐力强度心率变异性自主神经系统

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大鼠肾小球内皮细胞培养及高糖对其分泌NO的影响

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免疫学杂志 2007年第1期23卷 13-15页

作者：赵景宏黄岚王军平晋军宋耀明方玉强崔斌于世勇第三军医大学附属新桥医院全军心血管内科研究所重庆400037 第三军医大学军事预防医学院全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的进行大鼠肾小球内皮细胞体外培养和鉴定,并观察高糖对其分泌一氧化氮(nitricoxide,NO)的影响。方法利用不同目数的筛网从大鼠肾皮质分离肾小球,Ⅳ型胶原酶消化后用内皮细胞培养液培养。待细胞自肾小球内长出,以套环或挑克隆的方法纯... 详细信息

目的进行大鼠肾小球内皮细胞体外培养和鉴定,并观察高糖对其分泌一氧化氮(nitricoxide,NO)的影响。方法利用不同目数的筛网从大鼠肾皮质分离肾小球,Ⅳ型胶原酶消化后用内皮细胞培养液培养。待细胞自肾小球内长出,以套环或挑克隆的方法纯化,在倒置显微镜下观察细胞形态,分别用Ⅷ因子相关抗原抗体和CD31荧光抗体对纯化后的细胞进行鉴定。不同浓度的高糖作用于培养的肾小球内皮细胞,Griess法检测各时相点培养液中NO的含量。结果倒置显微镜下观察纯化后的细胞为单层排列,似鹅卵石状,Ⅷ因子相关抗原抗体免疫组化染色和CD31荧光抗体染色阳性。高糖可以引起肾小球内皮细胞NO分泌减少,并呈浓度和时间依赖性。结论利用过筛法分离肾小球并在特定条件下进行培养、纯化,成功培养大鼠肾小球内皮细胞。高糖可以导致肾小球内皮细胞NO释放减少,这可能与糖尿病肾病的发生有关。

关键词：肾小球内皮细胞高糖一氧化氮

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不稳定型心绞痛患者心脏局部内皮祖细胞数量及功能的变化

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心脏杂志 2007年第2期19卷 135-138页

作者：刘兰黄岚陈剑飞晋军宋耀明李爱民于学军覃军耿昭华赵刚第三军医大学新桥医院全军心血管内科研究所

目的观察不稳定型心绞痛(UA)患者外周循环及心脏局部内皮祖细胞(EPCs)数量及功能的改变。方法27例UA患者均经冠状动脉造影(CAG)证实有明显冠状动脉狭窄,20例对照组患者经临床检查和CAG排除冠心病。密度梯度离心法从外周循环及冠状窦获... 详细信息

目的观察不稳定型心绞痛(UA)患者外周循环及心脏局部内皮祖细胞(EPCs)数量及功能的改变。方法27例UA患者均经冠状动脉造影(CAG)证实有明显冠状动脉狭窄,20例对照组患者经临床检查和CAG排除冠心病。密度梯度离心法从外周循环及冠状窦获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板,培养14 d后贴壁细胞进行细胞化学分析。激光共聚焦显微镜鉴定FITC-UEA-I和DiI-acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPCs。采用二苯基四氮唑嗅盐比色法、改良的Boyden小室和黏附能力测定实验观察EPCs的增殖能力、迁移能力和黏附能力。结果①与对照组比较,UA患者外周循环及心脏局部EPCs数量均明显减少,EPCs的黏附、迁移及增殖能力也显著受损(P<0.01)。②UA患者冠状窦EPCs的数量增加,黏附和增殖能力较外周循环有所下降(P<0.05),迁移能力无明显差别。结论UA患者心脏局部EPCs的数量下降和功能降低,提示冠状动脉内皮损伤后修复能力低下,可能与病情加重有关。

关键词：心绞痛,不稳定型内皮祖细胞冠脉循环

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