检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2009年第5期25卷 572-576,587页

作者：龙海霞万瑾王远强朱波倪兵吴玉章林治华重庆工学院生物工程学院分子设计实验室第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所第三军医大学基础部全军免疫学研究所

目的预测肿瘤抗原MAGE-A亚家族的B细胞表位,为基于多靶点的肿瘤疫苗设计提供依据。方法基于MAGE亚家族各成员蛋白质序列,采用Kyte-Doolittle的亲水性方案,Emini方案,Karplus方案和Jameson-wolf抗原指数方案,并辅以MAGE蛋白的二级结构柔... 详细信息

目的预测肿瘤抗原MAGE-A亚家族的B细胞表位,为基于多靶点的肿瘤疫苗设计提供依据。方法基于MAGE亚家族各成员蛋白质序列,采用Kyte-Doolittle的亲水性方案,Emini方案,Karplus方案和Jameson-wolf抗原指数方案,并辅以MAGE蛋白的二级结构柔性区域分析,预测MAGE基因家族的B细胞共同表位。结果共预测出了5条共同表位,且部分B细胞表位高度相似或一致。结论二级结构与B细胞表位相结合的预测方法为一种高效、准确的表位预测方法,可为肿瘤治疗性疫苗的设计提供实验依据。

关键词： MAGE-A亚家族二级结构 B细胞表位

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脂多糖结合蛋白／CD14结合位点的初步定位

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第三军医大学学报 2009年第7期31卷 565-568页

作者：徐智李琦冯起甲钱桂生徐顺贵李昆霖王兴胜吴国明第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所全军呼吸病研究重点实验室重庆400037 第三军医大学大坪医院野战外科研究所呼吸内科重庆400042

目的应用噬菌体随机12肽库、DNAStar分析软件、亲和实验及竞争抑制实验初步定位脂多糖结合蛋刍（lipopolysaccharide binding protein，LBP）与CD14的结合位点。方法以CD14为筛选分子，联合应用噬菌体肽库展示技术、噬菌体ELISA鉴定、LB... 详细信息

目的应用噬菌体随机12肽库、DNAStar分析软件、亲和实验及竞争抑制实验初步定位脂多糖结合蛋刍（lipopolysaccharide binding protein，LBP）与CD14的结合位点。方法以CD14为筛选分子，联合应用噬菌体肽库展示技术、噬菌体ELISA鉴定、LBP竞争抑制实验及DNA测序推导LBP／CD14结合位点的展示肽序列，采用DNAStar分析软件：E对所获展示肽序列与LBP一级结构，初步定位LBP／CD14结合位点并人工合成其模拟肽。采用ELISA检测该模拟肽与CD14的亲和力及与LBP的竞争抑制活性。结果DNAStar比对结果表明，经噬菌体肽库筛选获得的8条展示肽氨基酸序列与LBP第252～263位氨基酸有一定相似性。LBP第252～263位氨基酸具有结合位点的特性，即有良好的亲水性、可及性、可塑性及抗原性，该部位可能是LBP／CD14的结合位点。体外活性实验表明，模拟肽FHRNHRsPVTLL可与CD14有臭好的亲和力，有较强的与LBP竞争结合CD14的活性。结论LBP第252—263位氨基酸的模拟肽FHRNHRSPVTLL与CD14有良好的亲和力及有较强的与LBP竞争结合CD14的活性，具有LBP／CD14结合位点的生物学特性，LBP／CD14结合位点初步定位在该区域。

关键词：脂多糖结合蛋白 CD14 噬菌体肽库模拟肽内毒素

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重组Shh因子对海水浸泡肺微血管内皮细胞增殖和凋亡的影响研究

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第三军医大学学报 2009年第13期31卷 1268-1271页

作者：杨昱钱桂生王关嵩邓朝霞周长喜第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所全军呼吸病研究重点实验室

目的观察不同剂量重组Shh(recombinant sonic hedgehog,rShh)因子对海水浸泡肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cell,PMVEC)的促进增殖及抗凋亡作用。方法组织块法原代培养大鼠PMVEC,建立大鼠PMVEC海水浸泡模型,加入不同剂量重组Shh因子,采用TUNEL法检测PMVEC凋亡率。采用2,3-苯基溴化四唑(MTT)染色计数法测定细胞增殖活性。结果海水浸泡可导致PMVEC损伤,表现为PMVEC细胞增殖受到抑制以及凋亡发生率增加。重组Shh能降低海水所致PMVEC增殖抑制率和其凋亡率,在实验剂量范围内,其促增殖和抗凋亡作用呈剂量依赖性。结论重组Shh可促进海水浸泡PMVEC增殖和抑制其凋亡。

关键词： Shh 海水肺微血管内皮细胞急性肺损伤

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心肌致密化不全34例的超声诊断分析

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重庆医学 2009年第17期38卷 2231-2233页

作者：蒋瑶郑嘉蓉谭开彬第三军医大学新桥医院超声科重庆400037 重庆市西郊医院B超室 400050

目的研究心肌致密化不全的超声心动图诊断价值。方法采用GE VIVID 7型彩色多普勒超声诊断仪,M3S探头,频率3.5MHz,患者左侧卧位,取左室长轴、短轴和心尖四腔等多切面扫查。结果34例患者多有不同程度的心律失常。累及双心室1例;孤立累及左... 详细信息

目的研究心肌致密化不全的超声心动图诊断价值。方法采用GE VIVID 7型彩色多普勒超声诊断仪,M3S探头,频率3.5MHz,患者左侧卧位,取左室长轴、短轴和心尖四腔等多切面扫查。结果34例患者多有不同程度的心律失常。累及双心室1例;孤立累及左室32例,以左室心尖最为显著,肌小梁及海绵状心肌占据大部分心尖区心腔,其中2例累及室间隔与左室后壁的中下2/3,5例合并扩张性心肌病;孤立累及右心室1例。结论超声心动图是诊断心肌致密化不全的最佳选择。

关键词：心肌致密化不全超声心动图

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高血脂对大鼠血液流变特性和心肌肌钙蛋白的影响

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第三军医大学学报 2009年第22期31卷 2258-2261页

作者：滕丽新刘胜学何作云第三军医大学新桥医院心血管内科全军心血管病研究所重庆400037 第三军医大学军事预防医学系军事毒理学教研室重庆400038

目的观察高血脂大鼠早期血液流变特性的变化特点,探讨心肌缺血性损伤的发生机制。方法给予72只SD大鼠高胆固醇+猪油+猪胆盐饲喂,建立高血脂大鼠模型即高脂组(HC),与普通饲料饲喂的36只SD大鼠即正常对照组(NC)相比较,饲喂10～90d,每间隔1... 详细信息

目的观察高血脂大鼠早期血液流变特性的变化特点,探讨心肌缺血性损伤的发生机制。方法给予72只SD大鼠高胆固醇+猪油+猪胆盐饲喂,建立高血脂大鼠模型即高脂组(HC),与普通饲料饲喂的36只SD大鼠即正常对照组(NC)相比较,饲喂10～90d,每间隔10天为一取样时相点,测定9组高血脂大鼠的血脂、心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)和血液流变特性指标,并观察心肌及冠脉血管的病理变化。结果本实验模型主要表现为高胆固醇、高低密度脂蛋白血症(LDL),随高脂饲喂时间延长,血浆粘度逐渐升高,红细胞变形性下降。饲喂50d后cTnI升高,病理提示大鼠心肌出现局灶性缺血性损伤,相关分析表明高血脂大鼠心肌缺血性损伤的发生与血高胆固醇、高LDL密切相关。结论高胆固醇血症血液流变特性的异常改变,是早期心肌缺血性损伤发生的原因之一。

关键词：胆固醇心肌缺血红细胞变形性血浆粘度

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脂多糖下调过氧化物酶增殖体激活受体γ在大鼠原代肺泡Ⅱ型上皮细胞的表达

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第三军医大学学报 2009年第20期31卷 1960-1963页

作者：肖波王建春王关嵩邓朝霞徐静钱桂生第三军医大学新桥医院呼吸内科研究所全军呼吸病研究重点实验室重庆400037

目的观察脂多糖(lipopolysac charide,LPS)作用下大鼠肺泡Ⅱ型上皮(typeⅡalveol arepith elial,AT-Ⅱ)细胞过氧化物酶增殖体激活受体γ(PPARγ)的表达变化情况。方法通过酶消化分离和免疫黏附法纯化原代培养AT-Ⅱ细胞,并进行碱性磷酸... 详细信息

目的观察脂多糖(lipopolysac charide,LPS)作用下大鼠肺泡Ⅱ型上皮(typeⅡalveol arepith elial,AT-Ⅱ)细胞过氧化物酶增殖体激活受体γ(PPARγ)的表达变化情况。方法通过酶消化分离和免疫黏附法纯化原代培养AT-Ⅱ细胞,并进行碱性磷酸酶、肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)和电镜鉴定。采用RT-PCR法检测细胞经LPS作用后PPARγ、TNF-α、SP-AmRNA的改变,Westernblot法检测LPS作用后细胞PPARγ表达,ELISA法检测TNF-α蛋白表达。结果经碱性磷酸酶、SP-A和电镜鉴定,原代培养AT-Ⅱ细胞成功;在致炎因子LPS作用下,PPARγmRNA和蛋白表达均下降,这一变化伴随炎性因子TNF-α的升高。结论在LPS作用下,AT-Ⅱ细胞内PPARγ表达降低,提示PPARγ参与炎症反应。

关键词：过氧化物酶增殖体激活受体γ 肺泡Ⅱ型上皮细胞炎症

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推定铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶小亚单位的DNA结合能力检测

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第三军医大学学报 2009年第5期31卷 379-382页

作者：申晓冬张克斌李明胡晓梅周莹冰陈志瑾胡福泉第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室重庆400038 第三军医大学新桥医院医学实验技术中心重庆400037

目的检测理论推定的铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶小亚单位(pap3p01基因)编码蛋白对特异性DNA的结合能力。方法通过PCR从噬菌体PaP3基因组扩增出pap3p01基因,克隆至表达载体pQE31,转化入大肠杆菌JM109后,IPTG诱导表达目的蛋白,超声裂菌... 详细信息

目的检测理论推定的铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶小亚单位(pap3p01基因)编码蛋白对特异性DNA的结合能力。方法通过PCR从噬菌体PaP3基因组扩增出pap3p01基因,克隆至表达载体pQE31,转化入大肠杆菌JM109后,IPTG诱导表达目的蛋白,超声裂菌后发现目的蛋白质H6-PaP3P01存在于上清中,进而利用Ni-NTA亲合层析纯化蛋白。利用PCR与酶切方法获取可能含有末端酶小亚单位结合位点的DNA片段,并对其3′端进行生物素标记。最后采用凝胶迁移率改变实验检测H6-PaP3P01的DNA结合能力。结果成功构建了pQE-PaP3P01表达载体,获得的融合蛋白H6-PaP3P01表达量较高且全部存在于菌体超声后的上清中。经亲和层析初步纯化及脱盐处理后,H6-PaP3P01可与263 bp特异性DNA片段结合。结论成功构建并表达了推定的PaP3末端酶小亚单位重组蛋白H6-PaP3P01,并且检测到了该蛋白质对特异DNA的结合能力,初步证实了理论推定的正确性,为完善PaP3噬菌体包装机制的研究奠定了基础。

关键词：末端酶小亚单位噬菌体PaP3 EMSA 蛋白表达

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肺炎链球菌毒力蛋白DNA疫苗优势抗原组合筛选及鉴定

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第三军医大学学报 2009年第10期31卷 922-925页

作者：马千里张巧姚伟李琦王长征第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所全军呼吸病研究重点实验室重庆400037

目的探讨肺炎链球菌DNA疫苗候选抗原联合免疫的优势抗原组合方式。方法分子克隆肺炎链球菌表面蛋白A(PspA)N端及肺炎链球菌溶血素(Ply)基因序列,构建重组质粒pcDNA3.1-PspA’和pcDNA3.1-PBD(PBD为Ply点突变减毒体),免疫印迹(Westernblot... 详细信息

目的探讨肺炎链球菌DNA疫苗候选抗原联合免疫的优势抗原组合方式。方法分子克隆肺炎链球菌表面蛋白A(PspA)N端及肺炎链球菌溶血素(Ply)基因序列,构建重组质粒pcDNA3.1-PspA’和pcDNA3.1-PBD(PBD为Ply点突变减毒体),免疫印迹(Westernblot)检测重组质粒在哺乳动物BHK-21细胞中的表达(包括前期工作中构建的重组质粒pcDNA3.1-PsaA)。将3种重组基因疫苗以不同方式组合肌肉注射免疫150只BALB/c小鼠(B组:pcDNA3.1-PsaA+pcDNA3.1-PspA’,C组:pcDNA3.1-PsaA+pcDNA3.1-PBD,D组:pcDNA3.1-PspA’+pcDNA3.1-PBD,E组:pcDNA3.1-PsaA+pcDNA3.1-PspA’+pcDNA3.1-PBD),检测各组小鼠血清特异性抗体IgG水平,观察免疫小鼠鼻咽部肺炎链球菌D39携带改变和D39腹腔攻击小鼠21d生存情况。结果成功构建3种重组真核表达载体,ELISA检测结果显示B组小鼠血清特异性IgG抗体水平与E组相似(P>0.05),均明显高于A、C、D组[A组:对照空质粒组pcDNA3.1(+)]小鼠(P<0.01);免疫小鼠鼻咽部D39携带菌落计数提示B组小鼠相似于E组小鼠(P>0.05),并明显少于C、D组和阴性对照组(A组和PBS组,P<0.01),并且D39腹腔攻击小鼠21d生存时间分析亦提示其中位生存时间明显长于C组及阴性对照组(A组和PBS组,P<0.01)。结论PspA’联合PsaA的抗原组合方式具有高效的协同保护效能,可作为肺炎链球菌DNA疫苗的优势候选抗原组合。

关键词：肺炎链球菌肺炎链球菌表面黏附素A 肺炎链球菌表面蛋白A 肺炎链球菌溶菌酶基因疫苗

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1例废墟中掩埋170余小时患者急救的护理体会

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第三军医大学学报 2009年第4期31卷 344-344,348页

作者：黄敏刘玉馥褚玲玲第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所全军呼吸病研究重点实验室重庆400037

在5·12汶川大地震中,我院深入到震中汶川县映秀镇参加抗震救灾救治工作,现将我院在一线救治1例在废墟中掩埋178h 20min患者的护理体会报告如下。[第一段]

关键词：地震伤急救护理

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COPD急性加重时影响病死率危险因素的回顾性病例对照研究

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第三军医大学学报 2009年第14期31卷 1394-1396页

作者：刘双林李琦吴学玲徐智王长征第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所全军呼吸病研究重点实验室重庆400037

目的探讨影响慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)病死率的危险因素。方法选择我科2004年1月至2008年6月因慢性阻塞性肺病急性加重(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)病死的33例患者,及同期缓解出院的40例AECOPD患者为对照进行回顾性分析,研究影响其预后的危险因素。结果死亡组和对照组的一般情况大致相似,而且2组在氧合指数、发生酸碱失衡的病例数等方面也没有显著差异。在住院期间的最高PaCO2的水平以及使用机械通气、发生肺性脑病、消化道出血、肾功能衰竭、多器官功能不全的病例数等方面则有显著差异。经多重Logistic回归分析,消化道出血(OR值13.09,95%CI1.06～162.18)、无创(OR值9.19,95%CI2.15～39.42)和有创机械通气(OR值11.055;95%CI1.91～63.94)是预计AECOPD病死率的独立危险因素。由于对照组没有并发肾功能衰竭、多器官功能不全、弥漫性血管内凝血的病例,所以没进行多重回归分析。结论AECOPD时的低氧血症、酸碱失衡不是影响其病死率的重要危险因素。而合并多器官功能不全、肾功能衰竭、消化道出血等并发症以及需要机械通气治疗则是提示预后不良的重要指标。

关键词：慢性阻塞性肺疾病病死率危险因素多重Logistic回归

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