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中华高血压杂志 2008年第8期16卷 720-723页

作者：韩愈于长青黄河飞何多芬石伟彬傅春江杨成明王旭开黄岚周林曾春雨第三军医大学大坪医院(野战外科研究所)心内科心血管病研究室重庆400042 第三军医大学新桥医院心内科重庆400037

目的观察多巴胺 D_1类受体对血管平滑肌细胞胰岛素样生长因子1(IGF-1)受体的影响。方法以A10细胞为研究对象,免疫印迹观察刺激 D_1类受体对 IGF-1受体表达的影响,并初步探讨 D_1类受体对 IGF-1受体影响的机制。结果刺激 D_1类受体可降低... 详细信息

目的观察多巴胺 D_1类受体对血管平滑肌细胞胰岛素样生长因子1(IGF-1)受体的影响。方法以A10细胞为研究对象,免疫印迹观察刺激 D_1类受体对 IGF-1受体表达的影响,并初步探讨 D_1类受体对 IGF-1受体影响的机制。结果刺激 D_1类受体可降低 IGF-1受体的表达,D_1类受体阻断剂可完全阻断 D_1类受体激动剂Fenoldopam 对 IGF-1受体的影响,免疫印迹显示运用蛋白激酶 C(PKC)和促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)阻断剂后,IGF-1受体表达恢复,提示 PKC 和 MAPK 途径可能参与了 D_1类受体对血管平滑肌细胞 IGF-1受体的影响过程,在 Wistar-Kyoto(WKY)大鼠和自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞中 D_1类受体激动剂 Fenoldopam 对IGF-1受体表达具有抑制作用,但该抑制作用在 SHR 细胞明显低于 WKY 细胞。结论 D_1类受体对血管平滑肌细胞 IGF-1受体表达具有抑制作用,该作用可能通过 PKC 和 MAPK 途径发挥一系列生理效应。

关键词： D1类多巴胺受体胰岛素样生长因子1受体血管平滑肌细胞

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口腔崩解片崩解时限测定方法对比实验考察

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中国医院药学杂志 2008年第7期28卷 540-543页

作者：陈琳朱照静第三军医大学新桥医院药剂科重庆400037 重庆医科大学药剂教研室重庆400016

目的:考察不同方法测定3种不同崩解原理的口腔崩解片(oraldisintegratedtablets,ODT)的体外崩解时限,为国家药品标准制定部门制定口腔崩解片的质量标准提供参考。方法:采用溶出仪小杯法、量筒法、表面皿法、溶出仪改进法、崩解仪改进法... 详细信息

目的:考察不同方法测定3种不同崩解原理的口腔崩解片(oraldisintegratedtablets,ODT)的体外崩解时限,为国家药品标准制定部门制定口腔崩解片的质量标准提供参考。方法:采用溶出仪小杯法、量筒法、表面皿法、溶出仪改进法、崩解仪改进法对速崩型、速溶型、融蚀型口腔崩解片进行体外崩解时间测定,并与口腔内崩解行为对照,同时以结果判定难易、装置是否简单、分辨率高低、重复性、体内外相关性为考察指标筛选出不同崩解行为ODT体外评价方法。结果:速崩型、速溶型、融蚀型ODT的体内崩解时间分别为19.8,13.4,30.1s,不同方法测定同一类型的ODT具有不同的崩解时间,融蚀型ODT的体外崩解时间大于4min。相关性研究中,表面皿法测得4个处方的速溶型ODT体外崩解时间为12.5,19.7,24.0,30.7s,相应的体内崩解时间为13.6,21.0,25.4,31.3s;崩解仪器改进法测定速崩型ODT的体外崩解时间为19.5,26.5,14.3,37.0s,相应的体内崩解时间为20.2,28.4,15.2,39.5s。结论:表面皿法和崩解仪改进法可分别作为速溶型和速崩型ODT体外崩解时限的测定方法,目前尚无适宜的方法可准确测定融蚀型ODT的体外崩解时限。

关键词：口腔崩解片体内外相关性崩解时限

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高血压发生中多巴胺D4受体对肾脏近曲小管细胞血管紧张素Ⅱ1型受体的异常调控

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中华高血压杂志 2008年第8期16卷 724-727页

作者：邓昆黄河飞石伟彬何多芬杨成明王旭开黄岚曾春雨第三军医大学大坪医院(野战外科研究所)心内科心血管病研究室重庆400042 第三军医大学新桥医院心内科重庆400037

目的研究多巴胺 D_4受体对肾脏近曲小管上皮(RPT)细胞上血管紧张素Ⅱ1型受体(AT_1R)表达的异常调控在原发性高血压(EH)发生中的作用。方法以 Wistar-Kyoto(WKY)大鼠的 RPT 细胞株作为研究对象,采用免疫印迹法测定刺激 D_4受体后 AT_1R ... 详细信息

目的研究多巴胺 D_4受体对肾脏近曲小管上皮(RPT)细胞上血管紧张素Ⅱ1型受体(AT_1R)表达的异常调控在原发性高血压(EH)发生中的作用。方法以 Wistar-Kyoto(WKY)大鼠的 RPT 细胞株作为研究对象,采用免疫印迹法测定刺激 D_4受体后 AT_1R 的表达变化,并观察其作用机制及信号途径。结果 D_4受体激动剂PD168077(10^(-6)mol/L,24 h)刺激 D_4受体可明显抑制 WKY 大鼠 RPT 细胞 AT_1R 的表达,该作用呈现浓度和时间依赖性关系;PD168077对 AT_1R 表达的抑制作用可被 D_4受体特异性阻断剂 L745870(10^(-6)mol/L)所阻断;相反,在 EH 状态下这种作用受损,PD168077反而增加 AT_1R 的表达。在钙通道拮抗剂尼卡地平存在的情况下 D_4受体对 WKY 细胞 AT_1R 的抑制作用被阻断,提示 D_4受体对 AT_1R 的下调作用可能通过钙通道途径发生影响。结论D_4受体对 AT_1R 蛋白表达具有抑制作用,该作用受损可能在高血压的发生、发展过程中发挥一定作用。

关键词： D4多巴胺受体血管紧张素Ⅱ1型受体肾脏近曲小管上皮细胞原发性高血压

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内皮素B受体对自发性高血压大鼠肾脏近曲小管上皮细胞多巴胺D3受体的异常调节

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中华高血压杂志 2008年第7期16卷 617-620页

作者：石伟彬于长青杨剑何多芬傅春江杨成明王旭开黄岚周林曾春雨第三军医大学大坪医院(野战外科研究所)心内科心血管病研究室重庆400042 第三军医大学新桥医院心内科重庆400037

目的探讨内皮素 B(ETB)受体对肾脏近曲小管上皮细胞多巴胺 D_3受体表达的影响,以及其与高血压(EH)发生之间的关系。方法以 Wistar-Kyoto(WKY)大鼠和自发性高血压大鼠(SHR)肾脏近曲小管上皮细胞(RPT)株为研究对象,观察刺激 ETB 受体后 D_... 详细信息

目的探讨内皮素 B(ETB)受体对肾脏近曲小管上皮细胞多巴胺 D_3受体表达的影响,以及其与高血压(EH)发生之间的关系。方法以 Wistar-Kyoto(WKY)大鼠和自发性高血压大鼠(SHR)肾脏近曲小管上皮细胞(RPT)株为研究对象,观察刺激 ETB 受体后 D_3受体蛋白表达的变化,D_3受体的蛋白表达采用免疫印迹测定,ETB/D_3受体之间的连接采用免疫沉淀测定。结果 ETB 受体激动剂 BQ3020可增加 WKY 大鼠 RPT 细胞 D_3受体的蛋白表达,该作用呈现出时间依赖性和剂量依赖性关系,而且 BQ3020对 D_3受体蛋白表达的刺激作用可以被D_3受体拮抗剂 BQ788所抑制。在 SHR 细胞,ETB 受体激动剂 BQ3020并不能增加 RPT 细胞 D_3受体的蛋白表达,并且基础状态下 D_3受体的蛋白表达在 SHR 细胞明显低于 WKY 细胞。免疫共沉淀显示在 ETB/D_3受体之间存在同连接,刺激 ETB 受体可增加 ETB/D_3受体之间的连接程度,然而,在 SHR 细胞,不仅基础状态下 ETB/D_3受体之间的连接程度低,而且,刺激 ETB 受体对 ETB/D_3受体之间的连接程度无影响。结论 ETB 受体具有对 D_3受体蛋白表达的调节作用,ETB/D_3受体之间的异常调节可能参与了 EH 发生的发病机制。

关键词： D3受体内皮素B受体肾脏近曲小管上皮细胞高血压

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多巴胺D3受体对肾脏近曲小管上皮细胞D5受体的影响在高血压发生中的作用

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中华高血压杂志 2008年第9期16卷 802-806页

作者：黄河飞何多芬石伟彬于长青傅春江杨成明王旭开黄岚周林曾春雨第三军医大学大坪医院野战外科研究所心内科心血管病研究室重庆400042 第三军医大学新桥医院心内科重庆400037

目的观察多巴胺 D_3受体对肾脏近曲小管(RPT)上皮细胞上多巴胺 D_3受体表达和功能的影响。方法以 Wistar-Kyoto(WKY)大鼠与自发性高血压大鼠(SHR)为研究对象,利用免疫印迹法观察 D_3受体对 D_5受体蛋白表达的影响;并采用 Na^+-K^+-ATP ... 详细信息

目的观察多巴胺 D_3受体对肾脏近曲小管(RPT)上皮细胞上多巴胺 D_3受体表达和功能的影响。方法以 Wistar-Kyoto(WKY)大鼠与自发性高血压大鼠(SHR)为研究对象,利用免疫印迹法观察 D_3受体对 D_5受体蛋白表达的影响;并采用 Na^+-K^+-ATP 酶活性测定方法在转染 D_5受体的人胚肾293细胞(HEK293-D_5)上观察D_3受体对 D_5受体影响的病理生理学意义。结果刺激 D_3受体可增强 D_5受体的蛋白表达,该作用呈浓度和时间依赖性;同时能被 D_3受体特异性阻断剂所阻断;在高血压状态下,这种作用受损。刺激 D_5受体可抑制 Na^+-K^+-ATP 酶的活性,在预先刺激 D_3受体的情况下可使 D_5受体对 Na^+-K^+-ATP 酶活性的抑制作用进一步增强。结论D_3受体对肾脏近曲小管上皮细胞上 D_5受体的表达和功能具有促进作用,这种作用的受损可能在原发性高血压的发生发展中具有一定影响。

关键词：多巴胺受体肾脏近曲小管上皮细胞高血压肾脏

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肺炎链球菌黏附素A基因疫苗的构建及对小鼠鼻咽部肺炎链球菌携带的防御作用

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第三军医大学学报 2008年第8期30卷 739-742页

作者：张巧马千里李琦曾雪峰王长征第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所全军呼吸病研究重点实验室重庆400037

目的探讨肺炎链球菌表面黏附素A(PsaA)基因疫苗的免疫原性及其对小鼠鼻咽部肺炎链球菌携带的防御作用。方法PCR技术从肺炎链球菌R6标准株扩增PsaA基因,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1-PsaA,脂质体法转染BHK-21细胞,逆转录-聚合酶链反应(R... 详细信息

目的探讨肺炎链球菌表面黏附素A(PsaA)基因疫苗的免疫原性及其对小鼠鼻咽部肺炎链球菌携带的防御作用。方法PCR技术从肺炎链球菌R6标准株扩增PsaA基因,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1-PsaA,脂质体法转染BHK-21细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹(Western blot)检测重组质粒在BHK-21细胞中的转录和表达。应用PsaA基因疫苗肌肉注射免疫BABL/c小鼠,ELISA检测脾细胞上清IFN-γ分泌,特异性抗体IgG水平及其亚型分布(IgG1/IgG2a)。利用BABL/c小鼠肺炎链球菌D39株鼻咽部携带模型,鼻咽部灌洗液菌落计数观察免疫小鼠鼻咽部肺炎链球菌携带改变。结果RT-PCR及Western blot显示重组PsaA蛋白在BHK-21细胞瞬时表达,ELISA检测到免疫小鼠血清高水平的IFN-γ及特异性IgG抗体(IgG1/IgG2a<1),小鼠攻击实验证明PsaA基因疫苗免疫组小鼠D39携带菌落计数明显少于对照组(P<0.01)。结论肺炎链球菌表面毒力蛋白PsaA基因疫苗免疫小鼠激发了抗原特异性的细胞及体液免疫反应,显著减少了小鼠鼻咽部肺炎链球菌的携带,为肺炎链球菌DNA疫苗理想侯选抗原之一。

关键词：肺炎链球菌肺炎链球菌表面黏附素A 基因疫苗

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1，25-二羟维生素D3处理树突状细胞在过敏性气道炎症中的作用

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第三军医大学学报 2008年第8期30卷 743-745页

作者：夏俊波宋云熙曾雪峰王彦王长征第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所全军呼吸病研究重点实验室重庆400037

目的研究1,25-二羟维生素D3对树突状细胞(dendritic cells,DC)表型和功能的影响及其处理后DC在过敏性气道炎症中的作用。方法体外扩增小鼠骨髓来源的树突状细胞,采用流式细胞术和ELISA检测1,25-二羟维生素D3对DC表型和分泌细胞因子IL-10... 详细信息

目的研究1,25-二羟维生素D3对树突状细胞(dendritic cells,DC)表型和功能的影响及其处理后DC在过敏性气道炎症中的作用。方法体外扩增小鼠骨髓来源的树突状细胞,采用流式细胞术和ELISA检测1,25-二羟维生素D3对DC表型和分泌细胞因子IL-10和IL-12的影响;观察1,25-二羟维生素D3处理DC过继卵蛋白致敏小鼠肺组织病理特点和支气管肺泡灌洗液细胞类型。结果经1,25-二羟维生素D3处理后,DC表达CD80和MHCⅡ均明显降低,而CD11c变化不明显;分泌IL-10显著增加,而分泌IL-12显著降低。过继小鼠肺组织未见典型的哮喘样病理改变,支气管肺泡灌洗液细胞类型与空白对照组无显著差异。结论1,25-二羟维生素D3可抑制DC成熟,经其处理后DC过继致敏小鼠可诱导对抗原的免疫耐受,避免过敏性气道炎症的发生。

关键词：树突状细胞 1,25-二羟维生素D3

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屋尘螨过敏原DNA疫苗对哮喘模型小鼠Foxp3^＋调节性T细胞功能的影响

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第三军医大学学报 2008年第5期30卷 374-377页

作者：吴奎孙鲲毕玉田夏俊波王长征第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所全军呼吸病研究重点实验室重庆400037 第三军医大学大坪医院野战外科研究所呼吸内科重庆400042 武警总医院急诊科北京100039

目的观察编码屋尘螨主要过敏原Derp1和Derp2的质粒DNA疫苗对哮喘小鼠脾细胞Foxp3+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg细胞)功能的影响。方法以屋尘螨提取液复制哮喘模型后,将编码Der p1、Der p2的真核表达质粒pDs-Der p1、pCI-neo-Der... 详细信息

目的观察编码屋尘螨主要过敏原Derp1和Derp2的质粒DNA疫苗对哮喘小鼠脾细胞Foxp3+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg细胞)功能的影响。方法以屋尘螨提取液复制哮喘模型后,将编码Der p1、Der p2的真核表达质粒pDs-Der p1、pCI-neo-Der p2等量混合接种小鼠后对小鼠进行再次激发。分离小鼠脾脏细胞,以流式细胞仪方法检测CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例。采用磁珠法分离CD4+CD25+T细胞,流式细胞仪检测其Foxp3基因的表达,并以IL-2进行刺激观察其增殖反应,测定其上清液中的IL-10、TGF-β含量。将分离的Treg细胞与哮喘小鼠CD4+CD25-T细胞共同培养,观察Treg细胞对CD4+CD25-T细胞增殖及IL-4、IL-5、IFN-γ的影响。结果哮喘组小鼠脾脏CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例显著低于对照组,经DNA疫苗治疗后CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞显著增加。体外培养发现各组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞增殖能力均显著低于CD4+CD25-T细胞,培养液上清中均未检测到IL-10和TGF-β存在。3组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞均可显著抑制哮喘CD4+CD25-T细胞的增殖及IL-4、IL-5和IFN-γ的分泌,但在3组Treg细胞中,哮喘组Treg细胞作用显著低于其他两组。结论Treg细胞可显著抑制哮喘CD4+CD25-T细胞的增殖及炎性介质的分泌,哮喘小鼠不仅出现CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞数量的减少,而且其功能也可能出现缺陷。DNA疫苗治疗可以诱导CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞增加,并恢复其功能活性。

关键词： DNA疫苗调节性T细胞哮喘

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地塞米松血管内支架的涂层制备及体外缓释实验研究

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第三军医大学学报 2008年第10期30卷 935-937页

作者：陈勇鹏王贵学陈琰晋献春侯延斌罗来龙孙大贵第三军医大学新桥医院中医科重庆大学生物工程学院第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所全军呼吸病研究重点实验室重庆400037 重庆大学化学化工学院重庆400044

目的制备地塞米松血管内支架的涂层,观察体外缓释特性。方法采用喷涂、浸涂两种方法制备支架,以高效液相色谱仪检测载药量,并进行体外药物缓释测定。结果喷涂支架的载药量为(24.26±5.23)μg,浸涂4d的载药量为(93.15±7.83)μg... 详细信息

目的制备地塞米松血管内支架的涂层,观察体外缓释特性。方法采用喷涂、浸涂两种方法制备支架,以高效液相色谱仪检测载药量,并进行体外药物缓释测定。结果喷涂支架的载药量为(24.26±5.23)μg,浸涂4d的载药量为(93.15±7.83)μg。浸涂4d的支架,药物缓慢释放,15d时释放84%。结论制备的支架具有明显的缓释作用。

关键词：地塞米松支架体外研究缓释

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Noggin参与海人酸损伤后成年大鼠海马颗粒下区颗粒细胞增殖

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中华神经医学杂志 2008年第10期7卷 981-984页

作者：尹清徐海伟郑健安宁阴金波马玉新刘仕勇杨辉第三军医大学西南医院康复理疗科重庆400038 第三军医大学生理教研室重庆400038 第三军医大学新桥医院神经内科重庆400038 第三军医大学新桥医院神经外科重庆400038

目的探讨侧脑室注射海人酸（KA）致大鼠海马损伤后Noggin的表达变化及其与颗粒细胞增殖的关系。方法健康雄性SD大鼠32只采用随机数字表法分为实验组（16只）及对照组（16只），对照组义分为生理盐水对照组和空白对照组，各8只。实验组... 详细信息

目的探讨侧脑室注射海人酸（KA）致大鼠海马损伤后Noggin的表达变化及其与颗粒细胞增殖的关系。方法健康雄性SD大鼠32只采用随机数字表法分为实验组（16只）及对照组（16只），对照组义分为生理盐水对照组和空白对照组，各8只。实验组大鼠侧脑室注射KA，生理盐水对照组注射等剂量生理盐水，空白对照组不作处理。侧脑室注射KA 1周内，尼氏染色检测海马神经元的丢失，免疫荧光染色与原位杂交的方法检测海马齿状回BrdU标记细胞与Noggin mRNA阳性细胞的变化。结果在侧脑室注射KA致海马损伤后1周，海马CA3、CA4区神经元丢失明显。与生理盐水对照组比较，实验组海马齿状同BrdU阳性细胞升高，差异有统计学意义（P=0．006），其中注射侧较对侧更为明显。海马Noggin mRNA阳性细胞在第3天时升高，第7天时下降。结论侧脑室注射KA致海马损伤后．成年大鼠海马齿状回颗粒细胞异常增殖可能与Noggin表达波动有关。

关键词： Noggin蛋白细胞增殖海人酸海马

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