检索结果-内蒙古大学图书馆

目的探讨人外周血网织红细胞微核率在鼻咽癌患者接受放疗前后的变化．比较其对辐射所致损伤进行评估的临床意义。方法以接受放射治疗的鼻咽癌患者为受照射模型,以双核淋巴细胞微核试验为对比标准,应用已建立的基于单激光流式细胞仪的人外周血网织红细胞微核自动化检测体系,检测鼻咽癌患者接受不同累积放疗剂量后的外周血网织红细胞微核率．结果鼻咽癌患者接受放射治疗后,外周血网织红细胞微核率迅速显著增高,呈现良好的剂量—反应关系;外周血网织红细胞微核率对辐射的反应模式与双核淋巴细胞微核率对辐射的反应模式一样,所得曲线方程均符合 Y=A+B X—C X+D X模式．结论鼻咽癌患者接受放射治疗后,外周血网织红细胞微核率的增高呈现良好的剂量—反应关系：人外周血网织红细胞微核率有可能代替双核淋巴细胞微核率作为对辐射所致损伤进行评估。

关键词：网织红细胞鼻咽癌患者放射治疗外周血鼻咽癌

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骨髓增生异常综合症65例临床疗效分析

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西部医学 2007年第5期19卷 781-782,785页

作者：刘红江渝曾东风孔佩艳陈幸华刘林张曦高蕾王庆余第三军医大学新桥医院血液科重庆400037 第三军医大学基础部生化教研室重庆400038

目的比较骨髓增生异常综合征（Myelodysplastic syndrome,MDS）各型治疗方法。方法我们把65例MDS患者分成四组,采用相应的治疗方法治疗3月观察疗效。结果1常规治疗组完全缓解及进步共8例,有效率47.1%,无效9例,占53.9%;2环孢菌素组完全... 详细信息

目的比较骨髓增生异常综合征（Myelodysplastic syndrome,MDS）各型治疗方法。方法我们把65例MDS患者分成四组,采用相应的治疗方法治疗3月观察疗效。结果1常规治疗组完全缓解及进步共8例,有效率47.1%,无效9例,占53.9%;2环孢菌素组完全缓解及进步共7例,有效率为58.3%,无效5例占41.6%;3维生素B6组6例均无效;4化疗组完全缓解及进步共11例（36.7%）,无效19例占63.3%。在11例需4周输血的患者中,6例贫血情况得到改善,输血间隔时间延长至6~8周。51例血小板减少患者中,14例血小板计数增加了50%以上。9例脾大者均有缩小,5例缩小50%以上。老年患者治疗效果不理想。结论本组患者的治疗疗效均不很理想,老年患者在治疗中药物毒副作用较明显,支持治疗和对伴发病的处理更重要。

关键词：骨髓增生异常综合征维甲酸沙利度胺环孢菌素三尖杉酯碱阿糖胞苷

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大鼠肾小球内皮细胞培养及高糖对其分泌NO的影响

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免疫学杂志 2007年第1期23卷 13-15页

作者：赵景宏黄岚王军平晋军宋耀明方玉强崔斌于世勇第三军医大学附属新桥医院全军心血管内科研究所重庆400037 第三军医大学军事预防医学院全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的进行大鼠肾小球内皮细胞体外培养和鉴定,并观察高糖对其分泌一氧化氮(nitricoxide,NO)的影响。方法利用不同目数的筛网从大鼠肾皮质分离肾小球,Ⅳ型胶原酶消化后用内皮细胞培养液培养。待细胞自肾小球内长出,以套环或挑克隆的方法纯... 详细信息

目的进行大鼠肾小球内皮细胞体外培养和鉴定,并观察高糖对其分泌一氧化氮(nitricoxide,NO)的影响。方法利用不同目数的筛网从大鼠肾皮质分离肾小球,Ⅳ型胶原酶消化后用内皮细胞培养液培养。待细胞自肾小球内长出,以套环或挑克隆的方法纯化,在倒置显微镜下观察细胞形态,分别用Ⅷ因子相关抗原抗体和CD31荧光抗体对纯化后的细胞进行鉴定。不同浓度的高糖作用于培养的肾小球内皮细胞,Griess法检测各时相点培养液中NO的含量。结果倒置显微镜下观察纯化后的细胞为单层排列,似鹅卵石状,Ⅷ因子相关抗原抗体免疫组化染色和CD31荧光抗体染色阳性。高糖可以引起肾小球内皮细胞NO分泌减少,并呈浓度和时间依赖性。结论利用过筛法分离肾小球并在特定条件下进行培养、纯化,成功培养大鼠肾小球内皮细胞。高糖可以导致肾小球内皮细胞NO释放减少,这可能与糖尿病肾病的发生有关。

关键词：肾小球内皮细胞高糖一氧化氮

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小鼠IDO基因重组腺病毒载体的构建表达和鉴定

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重庆医学 2007年第5期36卷 391-393页

作者：侯卫平黄钢翟志芳袁发焕第三军医大学新桥医院肾内科重庆400037 第三军医大学基础部医学遗传教研室重庆400038 第三军医大学西南医院皮肤科重庆400038

目的构建携带小鼠IDO基因的重组腺病毒载体,以期进一步进行研究其免疫学效应。方法酶切含有小鼠全长IDOcDNA的PCOUS-2质粒,亚克隆至穿梭质粒pAdtrack-CMV上,在BJ5183细菌中和AdEasy-1进行同源重组,筛选阳性克隆,酶切、测序鉴定正确后,... 详细信息

目的构建携带小鼠IDO基因的重组腺病毒载体,以期进一步进行研究其免疫学效应。方法酶切含有小鼠全长IDOcDNA的PCOUS-2质粒,亚克隆至穿梭质粒pAdtrack-CMV上,在BJ5183细菌中和AdEasy-1进行同源重组,筛选阳性克隆,酶切、测序鉴定正确后,脂质体法转染AD-293细胞进行包装,扩增,氯化铯密度梯度离心纯化病毒并检测其滴度。RT-PCR和荧光显微镜鉴定和检测重组腺病毒转染AD-293细胞后IDO的表达,同时进行野生型腺病毒的检测。结果经酶切及测序证实IDO基因重组腺病毒载体构建成功,RT-PCR检测到转染后AD-293细胞内IDO的表达,且无野生型腺病毒的产生。结论成功构建了含小鼠IDO基因的重组腺病毒载体,为探讨IDO的生物学功能奠定了基础。

关键词： IDO 腺病毒色氨酸

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大鼠肾移植三种尿路重建术式的比较

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重庆医学 2007年第3期36卷 227-229,232页

作者：李健黄赤兵郑峻松张艮甫王琦范明齐冯嘉瑜肖亚黄辉第三军医大学新桥医院泌尿外科重庆400037 第三军医大学临床检验学教研室重庆400038

目的对大鼠肾移植3种尿路重建术式进行比较,筛选出稳定性好、并发症少的手术方案。方法以3种术式进行大鼠同系肾移植尿路重建:A组,供/受体输尿管端端吻合术(n=14);B组,供体膀胱瓣-受体膀胱吻合术(n=15);C组,供体输尿管-受体膀胱浆肌层... 详细信息

目的对大鼠肾移植3种尿路重建术式进行比较,筛选出稳定性好、并发症少的手术方案。方法以3种术式进行大鼠同系肾移植尿路重建:A组,供/受体输尿管端端吻合术(n=14);B组,供体膀胱瓣-受体膀胱吻合术(n=15);C组,供体输尿管-受体膀胱浆肌层隧道术(n=17)。对各组尿路重建时间、尿路并发症以及血肌酐动态指标进行比较。结果A、B、C 3组手术时间分别为(6±2.0)min(、14±2.5)min、(7±2.0)min,A组与C组差异无统计学意义,B组用时分别与A组、C组差异有统计学意义(P<0.05);术后,A组输尿管梗阻发生率最高(21.4%),B组尿漏发生率最高(13.3%);C组术后尿路并发症总发生率最低,为11.8%,A、B两组术后尿路并发症总发生率分别为28.5%和26.1%,与C组之间差异均有统计学意义(P<0.05);血肌酐监测显示A组术后40d与C组差异有统计学意义(P<0.05),术后60d与B、C两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论供体输尿管-受体膀胱浆肌层隧道吻合术后尿路并发症少,对移植肾恢复影响小,是大鼠肾移植尿路重建的较理想方案。

关键词：尿路重建肾移植大鼠

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组织块法培养大鼠肺微血管内皮细胞的综合鉴定

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第三军医大学学报 2007年第1期29卷 39-42页

作者：徐顺贵吴国明徐智冯起甲王关嵩张健鹏第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所全军呼吸病研究重点实验室重庆400037 武警总医院呼吸内科北京100039

目的为组织块法培养的大鼠肺微血管内皮细胞(rat pu lmonary m icrovascu lar endothelial cells,RPMVECs)建立合理可靠的多指标综合鉴定方案。方法采用外周肺组织贴块法培养RPMVECs,抽取组织块进行切片观察,以大鼠肺动脉平滑肌细胞和... 详细信息

目的为组织块法培养的大鼠肺微血管内皮细胞(rat pu lmonary m icrovascu lar endothelial cells,RPMVECs)建立合理可靠的多指标综合鉴定方案。方法采用外周肺组织贴块法培养RPMVECs,抽取组织块进行切片观察,以大鼠肺动脉平滑肌细胞和人脐静脉内皮细胞为对照,对培养细胞进行CD34、植物凝集素BSI、Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学鉴定,通过光镜和透射电镜观察细胞形态和超微结构。结果组织切片显示组织块源于外周肺组织,CD34免疫细胞化学染色阳性,植物凝集素BSI结合试验阳性,而Ⅷ因子相关抗原染色阴性,透射电镜未见W e ibel-Palade小体。结论Ⅷ因子相关抗原和W e ibel-Palade小体并非RPMVECs鉴定的理想指标,联合应用外周肺组织切片、CD34和植物凝集素BSI三指标为组织块法培养的RPMVECs提供了一个简单易行、合理、可靠的综合鉴定方案。

关键词：肺微血管内皮细胞细胞鉴定大鼠

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应用CD4^+CD25^+Treg细胞诱导大鼠肾移植免疫耐受的研究

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重庆医学 2007年第23期36卷 2396-2398,2410页

作者：李健黄赤兵郑峻松张艮甫王琦冯嘉瑜肖亚贾维胜方针强第三军医大学新桥医院泌尿外科重庆400037 第三军医大学临床检验学教研室重庆400038

目的应用供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞诱导移植免疫耐受,抑制大鼠肾移植慢性排斥反应。方法以SD、Wister大鼠分别为供、受体建立同种异体肾移植慢性排斥反应动物模型;受体脾细胞悬液同供体肾组织抗原孵育培养,诱导获得对供体抗原的... 详细信息

目的应用供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞诱导移植免疫耐受,抑制大鼠肾移植慢性排斥反应。方法以SD、Wister大鼠分别为供、受体建立同种异体肾移植慢性排斥反应动物模型;受体脾细胞悬液同供体肾组织抗原孵育培养,诱导获得对供体抗原的特异性;采用MACS法分选具有供体抗原特异性的CD4+ CD25+T细胞,FACS流式细胞法检测分选的CD4+CD25+T细胞及CD4+CD25+Treg细胞纯度;获得之供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞于同种异体肾移植术后2、4、6、8、10周,分别经尾静脉注射入受者体内(实验组,n=12),选取未注射组为对照(n=12)。观察两组移植肾脏存活时间;术后第10、40、80天MTT法检测比较两组受体脾细胞对供体抗原刺激反应程度;术后第10、20、40、60、80天分别监测各组血肌酐水平。结果FACS流式细胞法检测分选的CD4+CD25+T细胞得率为4.13%,分离纯度为73.34%;CD4+CD25+Treg细胞纯度为65.22%。所分选之CD4+CD25+Treg细胞成功获得供体抗原特异性,对供体抗原的抑制率(IR)为85.4%。移植肾存活时间:治疗组移植肾存活时间为(98.83±6.66)d,显著长于对照组的(78.25±4.71)d,组间差异有统计学意义(P<0.05);术后第40、80天治疗组脾细胞对供体抗原刺激反应程度均明显低于对照组,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。术后第20、40、60、80天对照组血肌酐指标明显高于治疗组,同治疗组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞可特异性抑制受体对供体抗原的免疫反应,有效抑制了移植肾慢性排斥反应的发生。

关键词：抗原特异性CD4^+CD25^+Treg细胞免疫耐受肾移植

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全氟化碳对脂多糖诱导肺微血管内皮细胞表达ICAM-1的影响

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第三军医大学学报 2007年第8期29卷 670-673页

作者：徐顺贵吴国明徐智冯起甲郭芮伶陈维中张健鹏第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所全军呼吸病研究重点实验室重庆400037 武警总医院呼吸科北京100039

目的观察全氟化碳(PFC)对脂多糖(LPS)诱导肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVEC)表达细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的影响,探讨PFC的抗炎作用及其对PM-VEC的保护机制。方法采用组织块法培养大鼠PMVEC,将细胞接种于Transwell小室,按随机数字表法分为空白对照组(C)、PFC干预组(F)、LPS刺激组(L)、LPS刺激+PFC干预组(LF),以处理0 h为空白对照,各处理组分别给予PFC或100μg/L LPS共孵育3、8、24 h,通过MTT法观测PFC作用后正常大鼠PMVEC细胞活力变化,应用逆转录PCR(RT-PCR)和流式细胞术(FCM)分别检测各组各时相点大鼠PMVEC ICAM-1 mRNA和蛋白表达量。结果PFC作用后,正常大鼠PMVEC的细胞活力未见明显改变。各组各时相点ICAM-1 mRNA表达的变化规律与蛋白质水平基本一致,F组各时相点ICAM-1的表达量与C组比较均无显著性差异(P>0.05);L组各时相点细胞的ICAM-1表达均较C组显著增强(P<0.05,P<0.01);LF组与L组同时相点比较,3 h组ICAM-1表达量无明显差异(P>0.05),但8 h和24 h组均有显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论PFC通过抗炎效应直接下调LPS诱导PMVEC表达ICAM-1,发挥PMVEC保护作用。

关键词：全氟化碳肺微血管内皮细胞细胞间黏附分子-1 脂多糖急性肺损伤

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供体抗原特异性CD4^+ CD25^+ Treg细胞对肾移植大鼠免疫状态的影响

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重庆医学 2007年第22期36卷 2289-2291页

作者：王琦张艮甫黄赤兵郑峻松李健范明齐金欢胜冯嘉瑜肖亚第三军医大学新桥医院泌尿外科重庆400037 第三军医大学临床检验学教研室重庆400038

目的研究供体抗原特异性CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)对肾移植后大鼠免疫状态的影响。方法常规分离Lewis和F344大鼠脾脏淋巴细胞,然后将Lewis大鼠淋巴细胞负载F344大鼠抗原,然后从负载抗原后的Lewis大鼠淋巴细胞悬液中用MACS磁珠分选法... 详细信息

目的研究供体抗原特异性CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)对肾移植后大鼠免疫状态的影响。方法常规分离Lewis和F344大鼠脾脏淋巴细胞,然后将Lewis大鼠淋巴细胞负载F344大鼠抗原,然后从负载抗原后的Lewis大鼠淋巴细胞悬液中用MACS磁珠分选法分离纯化供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞,并用流式检测分选Treg细胞纯度以及RT-PCR检测分选细胞的Foxp3基因表达。以F344、Lewis大鼠分别为供、受体建立同种异体肾移植动物模型,将供体抗原特异性Treg细胞经尾静脉注射入受者体内(治疗组,n=8),选取未注射组为对照组(n=8)。于术前1d,术后15d检测移植后4组大鼠血清IL-10、IgG,并于术后15d MTT法检测受体脾细胞对供体抗原刺激的反应。结果所分选之CD4+CD25+Treg细胞成功获得供体抗原特异性,对供体抗原的抑制率(IR)为85.4%,并检测到Foxp3表达。移植前治疗组和对照组大鼠血清中均无法检测到IL-10浓度。术后15d治疗组血清IL-10与对照组比较,明显增高(P<0.01)。对照组在术后15d血清IgG浓度已经显著升高,较术前差异有统计学意义(P<0.05)。而治疗组术后15d血清IgG浓度与术前相比有所降低,与术前相比差异无统计学意义(P>0.05),但与对照组相比较均差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组对供体脾细胞的刺激反应也明显低于Ⅰ组(P<0.01)。结论供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞能显著促进体内IL-10的产生以及抑制免疫球蛋白IgG的产生,并且可特异性抑制受体对供体抗原的免疫反应。

关键词： Treg IL-10 IgG 肾移植 Foxp3

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