检索结果-内蒙古大学图书馆

中华整形外科杂志 2011年第6期27卷 427-431页

作者：王洪一陶灵陈亮曹川李世荣第三军医大学第一附属医院整形美容科重庆400038

目的研究悬韧带松解阴茎延长术术后延长长度的个体化预测方法。方法选取第三军医大学第一附属医院整形美容科1988年10月至2011年4月行悬韧带松解阴茎延长术的先天性阴茎发育不良病例322例，随机分为建模组（200例）与验证组（122例），... 详细信息

目的研究悬韧带松解阴茎延长术术后延长长度的个体化预测方法。方法选取第三军医大学第一附属医院整形美容科1988年10月至2011年4月行悬韧带松解阴茎延长术的先天性阴茎发育不良病例322例，随机分为建模组（200例）与验证组（122例），将建模组手术前、后的常态与勃起状态阴茎长度等指标进行相关性或线性回归分析，并推导预测公式，通过建模组与验证组中预测结果与实际结果的一致性来评价预测效果。结果患者术后常态与勃起状态的延长长度以及术前、术后阴茎由常态到勃起状态的伸长率存在显著的相关性（相关系数分别为0．921、0．803，P〈0．01），由此可推导出延长长度的预测公式，通过对建模组与验证组的数据进行检验，预测误差在±1．5cm以内时其有效预测率分别为84．5％（169／200）和87．7％（107／122）。结论该预测公式可用于悬韧带松解阴茎延长术后延长长度的初步个体化预测。

关键词：阴茎延长术悬韧带松解阴茎长度模型统计学预测

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碳、银和氮离子注入硅橡胶对大鼠骨髓间充质干细胞生物学行为的影响

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第三军医大学学报 2018年第23期40卷 2162-2167,2189页

作者：李翔陈瑶周鑫樊东力张一鸣燕荣帅陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院整形美容外科

目的探讨碳、银和氮离子注入硅橡胶对大鼠骨髓间充质干细胞黏附、增殖和分化的影响。方法以浓度为1×1016ions/cm2在10KeV条件下向普通硅橡胶注入碳离子、银离子和氮离子,得到碳硅胶(C-SR)、银硅胶(Ag-SR)和氮硅胶(N-SR) 3组改性的... 详细信息

目的探讨碳、银和氮离子注入硅橡胶对大鼠骨髓间充质干细胞黏附、增殖和分化的影响。方法以浓度为1×1016ions/cm2在10KeV条件下向普通硅橡胶注入碳离子、银离子和氮离子,得到碳硅胶(C-SR)、银硅胶(Ag-SR)和氮硅胶(N-SR) 3组改性的硅橡胶材料并作为实验组,普通硅橡胶(SR)作为对照组,从130g成年SD大鼠骨髓取2~5代骨髓间充质干细胞进行生物相容性实验。通过CCK-8观察细胞增殖,并在普通光镜下比较黏附细胞的数量和形态,F-actin免疫荧光染色观察细胞骨架形态的变化、Western blot检测成骨及成脂分化相关标志物的表达。结果成功将离子注入硅橡胶中,得到碳硅胶(C-SR)、银硅胶(Ag-SR)和氮硅胶(N-SR) 3种改性的硅橡胶材料。大鼠骨髓间充质干细胞能较好地粘附在改性后的硅橡胶材料上,并且N-SR上细胞增殖较明显,与硅橡胶上的细胞增殖差异有统计学意义(P <0. 05)。通过F-actin免疫荧光染色,不同材料上的细胞骨架形态发生变化,Western blot检测结果显示N-SR有促进成骨分化的趋势。结论碳、银和氮离子注入硅橡胶提高了材料表面的生物相容性,其中N-SR能促进细胞的粘附与增殖,并对干细胞的分化产生影响。

关键词：硅橡胶离子注入骨髓间充质干细胞细胞分化表面改性

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肿瘤坏死因子α/胞外信号调节激酶途径对HaCaT细胞迁移能力及小鼠全层皮肤缺损的影响

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中华烧伤与创面修复杂志 2023年第2期39卷 122-131页

作者：赵诗涵金琳博张江河张一鸣樊东力陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院整形美容外科重庆400037

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)/胞外信号调节激酶(ERK)途径对HaCaT细胞迁移能力及小鼠全层皮肤缺损的影响。方法采用实验研究方法。按照随机数字表法(下同)将HaCaT细胞分为常氧组和低氧(氧气体积分数为1%,下同)条件下培养的低氧组。培... 详细信息

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)/胞外信号调节激酶(ERK)途径对HaCaT细胞迁移能力及小鼠全层皮肤缺损的影响。方法采用实验研究方法。按照随机数字表法(下同)将HaCaT细胞分为常氧组和低氧(氧气体积分数为1%,下同)条件下培养的低氧组。培养24 h后,采用微阵列置信度分析软件SAM 4.01筛选出2组细胞的显著差异表达基因,通过京都基因和基因组百科全书对信号通路中每条基因数目的显著性进行分析以筛选差异显著的信号通路,样本数为3。另取HaCaT细胞,在低氧条件下培养0(即刻)、3、6、12、24 h,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞分泌TNF-α的水平,样本数为5。另取HaCaT细胞,分为常氧组、单纯低氧组和加入FR180204(一种ERK抑制剂)并置于低氧条件下培养的低氧+抑制剂组,培养3、6、12、24 h,采用划痕试验检测细胞的迁移能力,样本数为12。另取HaCaT细胞,在低氧条件下培养0、3、6、12、24 h,采用蛋白质印迹法检测细胞中磷酸化核因子κB(p-NF-κB)、磷酸化p38(p-p38)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、神经钙黏素和上皮钙黏素的表达,样本数为3。取64只6~8周龄雄性BALB/c小鼠,在小鼠背部制作全层皮肤缺损创面模型后,将其分为空白对照组和用FR180204处理的抑制剂组,每组32只,分别作相应处理。伤后0、3、6、9、12、15 d,观察创面情况并计算其愈合率(样本数为8)。伤后1、3、6、15 d,采用苏木精-伊红染色观察创面中新生血管生成、炎症细胞浸润和表皮新生情况,采用Masson染色观察创面中胶原沉积情况,采用蛋白质印迹法检测创面组织中p-NF-κB、p-p38、p-ERK1/2、神经钙黏素和上皮钙黏素的表达(样本数为6),采用免疫组织化学法检测创面中Ki67阳性细胞数和血管内皮生长因子(VEGF)吸光度值(样本数为5),采用ELISA法检测创面组织中白细胞介素6(IL-6)、IL-10、IL-1β和CCL20的蛋白表达(样本数为6)。对数据行单因素方差分析、重复测量方差分析、析因设计方差分析、Tukey检验、LSD检验和独立样本t检验。结果培养24 h后,与常氧组相比,低氧组细胞中上调了7667个基因,下调了7174个基因;在前述差异表达基因中,TNF-α信号通路有显著的变化(P<0.05)且基因数目多。低氧条件下,与0 h的(1.9±0.3)pg/mL相比,TNF-α表达量仅在细胞培养24 h[(11.1±2.1)pg/mL]时显著增加(P<0.05)。与常氧组相比,单纯低氧组细胞培养6、12、24 h的迁移能力均明显增强(t值分别为2.27、4.65、4.67,P<0.05);与单纯低氧组相比,低氧+抑制剂组细胞培养3、6、12、24 h的迁移能力均明显减弱(t值分别为2.43、3.06、4.62、8.14,P<0.05)。低氧条件下,与培养0 h相比,p-NF-κB、p-ERK1/2、神经钙黏素表达量在细胞培养12、24 h时均明显升高(P<0.05),p-p38表达量在细胞培养3、6、12、24 h时均明显升高(P<0.05),上皮钙黏素表达量在细胞培养6、12、24 h时均明显降低(P<0.05);其中,p-ERK1/2、p-NF-κB和上皮钙黏素在细胞中的表达量呈时间依赖性。与空白对照组相比,抑制剂组小鼠伤后3、6、9、12、15 d创面愈合率均明显降低(P<0.05);抑制剂组小鼠创缘周围在伤后3、6、15 d有更多炎症细胞浸润,尤其在伤后15 d,创面中可见大量组织坏死且新生表皮层不连续,同时胶原合成和新生血管减少;抑制剂组小鼠创面中p-NF-κB表达量在伤后3、6 d均明显降低(t值分别为3.26、4.26,P<0.05)但在伤后15 d明显升高(t=3.25,P<0.05),p-p38和神经钙黏素表达量在伤后1、3、6 d均明显降低(t值分别为4.89、2.98、3.98,9.51、11.69、4.10,P<0.05),p-ERK1/2表达量在伤后1、3、6、15 d均明显降低(t值分别为26.69、3.63、5.12、5.14,P<0.05),上皮钙黏素表达量在伤后1 d明显降低(t=20.67,P<0.05)但在伤后6 d明显增加(t=2.90,P<0.05);抑制剂组小鼠创面中Ki67阳性细胞数和VEGF的吸光度值在伤后3、6、15 d均明显减少/降低(t值分别为4.20、7.35、3.34,4.14、3.20、3.73,P<0.05);抑制剂组小鼠创面组织中IL-10表达量在伤后6 d明显降低(t=2.92,P<0.05),IL-6表达量在伤后6 d明显增加(t=2.73,P<0.05),IL-1β表达量在伤后15 d显著增

关键词：伤口愈合肿瘤坏死因子α 皮肤胞外信号调节激酶通路表皮细胞迁移

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胸骨正中切口感染患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌噬菌体的基因组学信息及生物学特性分析

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中华烧伤与创面修复杂志 2022年第2期38卷 137-146页

作者：张建燕荣帅杨子晨石茜李翔毛彤春张一鸣陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院整形美容外科重庆400037

目的分离提纯1株新型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的噬菌体,并对其基因组学信息和生物学特性进行分析。方法采用实验研究方法。取分离自陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院收治的1例胸骨正中切口感染的63岁女性患者创面的MRSA(... 详细信息

目的分离提纯1株新型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的噬菌体,并对其基因组学信息和生物学特性进行分析。方法采用实验研究方法。取分离自陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院收治的1例胸骨正中切口感染的63岁女性患者创面的MRSA(下称宿主菌)液,采用污水共培养法和双层琼脂平板法从该院污水中分离提纯得到噬菌体,并命名为噬菌体SAP23,观察噬菌斑形态。采用磷钨酸负染法将噬菌体SAP23染色,采用透射电子显微镜观察其形态。采用十二烷基磺酸钠/蛋白酶裂解方案制备噬菌体SAP23 DNA,在Illumina NovaSeq PE150平台下进行全基因组测序,并完成序列组装、注释、系统发生树等基因组学分析。将噬菌体SAP23液分别按10.0000、1.0000、0.1000、0.0100、0.0010、0.0001感染复数与宿主菌液共培养4 h后,采用点滴法测定噬菌体效价,筛选最佳感染复数,此处及以下样本数均为3。按测得的最佳感染复数取噬菌体SAP23液与宿主菌液分别共同孵育5、10、15 min后,同前测定噬菌体效价,筛选最佳吸附时间。按测得的最佳感染复数取噬菌体SAP23液与宿主菌液按最佳吸附时间孵育后,分别于培养0(即刻)、5、10、15、20、30、40、50、60、80、100、120 min,同前测定噬菌体效价,绘制一步生长曲线。取噬菌体SAP23液分别在温度为4、37、50、60、70、80℃下,在pH值为2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12下孵育1 h,测定稳定性。取陆军军医大学(第三军医大学)微生物教研室储存的41株MRSA,完成噬菌体SAP23的宿主谱范围检测。结果噬菌体SAP23能在宿主菌双层琼脂板上形成透明噬菌斑。噬菌体SAP23头部是直径为(88±4)nm的多面体,其尾部长度为(279±21)nm、宽度为(22.6±2.6)nm。噬菌体SAP23基因组为全长151618 bp的线状双链DNA,序列两端有11681 bp的长末端重复序列,预测出220个开放阅读框,噬菌体可编码4个转运RNA,未预测出毒力因子或抗性基因,注释功能的噬菌体SAP23基因可分为5个组,GenBank登录号为MZ427930,噬菌体SAP23全基因组序列与共线性分析中的6个葡萄球菌噬菌体全基因组序列有5个局部共线区域,但在局部共线区域内部或外部存在差异。噬菌体SAP23属于Herelleviridae科Twortvirinae亚科Kayvirus病毒属。噬菌体SAP23的最佳感染复数为0.0100,最佳吸附时间为10 min,潜伏期约为20 min,裂解期约为80 min;在4~37℃温度条件及pH值为4~9的条件中,稳定性较好。噬菌体SAP23可裂解41株MRSA中的3株。结论噬菌体SAP23为Herelleviridae科Twortvirinae亚科Kayvirus病毒属成员,潜伏期短,其对温度和酸碱耐受性好,可有效裂解MRSA,为不含毒力因子和抗性基因的新型烈性窄谱噬菌体。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌细菌噬菌体基因组学伤口感染生物学特性

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Gαi1蛋白促进短期低氧条件下表皮细胞迁移的实验研究

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第三军医大学学报 2019年第4期41卷 296-301页

作者：周鑫黄竞卓陈鑫毛彤春李翔燕荣帅石小花樊东力张一鸣陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院整形美容外科重庆400037

目的观察低氧条件下表皮细胞迁移及运动变化,初步探究G蛋白偶联受体相关的G蛋白Gαi1在迁移调控中的作用。方法采用活细胞工作站观察比较HaCaT细胞在常氧及低氧处理24 h的迁移及运动情况,采用基因芯片技术筛选出早期关键调控基因,采用We... 详细信息

目的观察低氧条件下表皮细胞迁移及运动变化,初步探究G蛋白偶联受体相关的G蛋白Gαi1在迁移调控中的作用。方法采用活细胞工作站观察比较HaCaT细胞在常氧及低氧处理24 h的迁移及运动情况,采用基因芯片技术筛选出早期关键调控基因,采用Western blot、免疫荧光以及慢病毒转染等方式,检测常氧及低氧条件下G蛋白表达变化,进一步观察细胞迁移情况。结果低氧条件下HaCaT细胞迁移较常氧条件迁移能力明显增强(P <0. 05); HaCaT细胞在低氧处理早期(前12 h)其运动速度及持久性明显强于常氧组。基因芯片、Western blot及免疫荧光检测结果显示,低氧条件下Gαi1蛋白呈现出高表达趋势(P <0. 05);干扰Gαi1蛋白后,HaCaT细胞迁移能力明显降低,常氧及低氧组差异无统计学意义;同时低氧早期运动能力及持久性也明显降低。结论低氧条件下表皮细胞迁移及运动能力明显增强。Gαi1蛋白在低氧促进表皮细胞迁移中起着极其重要的正向调控作用。

关键词： Gαi1 低氧表皮细胞细胞迁移

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Rab4蛋白的细胞内定位及其活性改变对DC内源抗原递呈的影响

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免疫学杂志 2012年第10期28卷 877-879,883页

作者：柴琳琳万瑛吴玉章邹丽云第三军医大学基础部全军免疫学研究所重庆400038 第三军医大学第一附属医院整形美容外科

目的观察Rab4突变体在树突状细胞(DC)内的定位,研究其对DC内源抗原递呈的影响。方法构建Rab4突变体的慢病毒表达质粒,以DNA-磷酸钙共沉淀法制备慢病毒,病毒感染DC-OVA细胞并使用流式细胞术检测感染效率,激光共聚焦显微镜观察DC-OVA细胞... 详细信息

目的观察Rab4突变体在树突状细胞(DC)内的定位,研究其对DC内源抗原递呈的影响。方法构建Rab4突变体的慢病毒表达质粒,以DNA-磷酸钙共沉淀法制备慢病毒,病毒感染DC-OVA细胞并使用流式细胞术检测感染效率,激光共聚焦显微镜观察DC-OVA细胞中Rab4突变体的表达与定位,最后用识别MHC I类分子-OVA肽复合物的T细胞杂交瘤B3Z细胞检测DC-OVA细胞内源抗原递呈的变化。结果慢病毒可高效感染DC-OVA细胞,感染后Rab4突变体可在DC-OVA中稳定表达,主要分布在细胞膜周围的囊泡结构中。抗原递呈检测结果显示Rab4对DC内源性抗原递呈具有正相关性影响。结论成功观察到不同Rab4突变体在DC内的表达与分布,初步证实Rab4蛋白可通过其活性的改变参与调节DC的内源性抗原递呈。

关键词： Rab4 DC 突变体内源抗原递呈

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瘢痕的手术治疗原则及术式选择

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中华医学杂志 2013年第14期93卷 1044-1046页

作者：杨东运李世荣第三军医大学第一附属医院整形美容科重庆400038

瘢痕不仅影响患者的外观，还可导致不同程度的功能障碍，因此，瘢痕治疗一直是整形美容外科及相关领域研究的热点。瘢痕的治疗分为非手术和手术两大类。手术治疗是瘢痕治疗的重要手段，不同部位、不同类型的瘢痕应遵循不同的手术治疗原... 详细信息

瘢痕不仅影响患者的外观，还可导致不同程度的功能障碍，因此，瘢痕治疗一直是整形美容外科及相关领域研究的热点。瘢痕的治疗分为非手术和手术两大类。手术治疗是瘢痕治疗的重要手段，不同部位、不同类型的瘢痕应遵循不同的手术治疗原则，采取不同的治疗方案，否则不仅达不到应有的治疗效果，还有可能使瘢痕加重。

关键词：治疗原则非手术瘢痕术式选择整形美容外科功能障碍手术治疗治疗方案

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基于甲基丙烯酸酐化明胶悬滴培养小鼠毛乳头细胞制备仿生毛乳头球的生物活性及其在裸鼠中的毛发诱导功能

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中华烧伤杂志 2021年第8期37卷 770-780页

作者：黄刚陈亮德阳市人民医院烧伤整形科 618000 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院整形美容外科重庆400038

目的探讨基于甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)仿生微环境与悬滴法三维培养小鼠毛乳头细胞(DPC)制备仿生毛乳头球的生物活性及其在裸鼠中的毛发诱导功能。方法采用实验研究方法。采用酶消化法获取雄性5~6周龄C57BL/6J小鼠触须毛的DPC以及1 d龄... 详细信息

目的探讨基于甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)仿生微环境与悬滴法三维培养小鼠毛乳头细胞(DPC)制备仿生毛乳头球的生物活性及其在裸鼠中的毛发诱导功能。方法采用实验研究方法。采用酶消化法获取雄性5~6周龄C57BL/6J小鼠触须毛的DPC以及1 d龄C57BL/6J小鼠皮肤角质形成细胞(KC),经免疫荧光法鉴定前者第3代细胞稳定表达DPC标志物神经细胞黏附分子、碱性磷酸酶(ALP)、β连环蛋白及α平滑肌肌动蛋白,后者原代细胞稳定表达KC标志物角蛋白15。取第8代DPC,用GelMA重新悬浮并接种至Transwell孔板插件底面,光交联后倒置培养,于光学显微镜下观察培养0(即刻)、3 d GelMA悬滴中DPC聚集情况(聚集成球即仿生毛乳头球),采用活/死染色试剂盒检测培养3 d仿生毛乳头球中细胞活性。将传统二维培养的原代DPC、第8代DPC以及按前述方法制备的仿生毛乳头球分别设为原代DPC组、第8代DPC组、仿生毛乳头球组,利用高通量测序技术平台对每组培养3 d的3个样本中DPC进行转录组测序,利用基迪奥生物信息云工具平台(OmicShare Tools)对转录组数据进行主成分分析、Pearson相似性分析、差异表达基因筛选,利用时间序列趋势分析软件对差异表达基因进行表达模式聚类分析,利用基迪奥生物信息云工具平台对具有特定表达模式的差异表达基因进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)和基因本体论(GO)富集分析。同前进行细胞分组,采用随机数字表法从差异表达基因中抽取性别决定区Y框蛋白8(SOX8)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、26型胶原纤维α1(COL26A1)、无翅型MMTV整合位点家族成员6(Wnt6),采用实时荧光定量反转录PCR(RT-PCR)法验证差异表达基因mRNA表达情况与测序结果的一致性(样本数为9);采用实时荧光定量RT-PCR法检测DPC生物功能标志物成纤维细胞生长因子7(FGF7)、Wnt10a、淋巴样增强因子1(LEF1)、ALP、β连环蛋白、多功能蛋白聚糖、SOX2的mRNA表达情况(样本数为9)。取3只5~6周龄雄性BALB/c裸鼠,分别设为原代DPC组、第8代DPC组、仿生毛乳头球组,将原代DPC、第8代DPC、仿生毛乳头球分别与原代KC以2∶1细胞数比例混合后分别注射至相应组别裸鼠皮下,每只注射6个区域。注射后2周,取注射区域全厚皮,计数再生毛发,行苏木精-伊红染色后观察再生毛囊情况。对数据行单因素方差分析、Tukey检验并进行Bonferroni校正。结果培养3 d,DPC在GelMA悬滴中由培养0 d的分散状态聚集成仿生毛乳头球,制备的仿生毛乳头球中细胞活性良好。培养3 d,主成分分析显示,相比于第8代DPC组,原代DPC组、仿生毛乳头球组组内样本间变异程度较低,仿生毛乳头球组与原代DPC组组间样本变异程度最低,3组DPC样本超过90%的基因谱数据变异可由第1个和第2个主要成分来解释;Pearson相似性分析显示,组内样本重复性好,原代DPC组和仿生毛乳头球组样本间的相关系数为0.84~0.95,原代DPC组和第8代DPC组样本间的相关系数为0.72~0.87;3组DPC间差异表达基因分析筛选出642个组间交集差异表达基因,对其进行表达模式聚类显示有2种基因表达模式有显著趋势(P<0.05),分别为第8代DPC组基因表达显著低于原代DPC组/仿生毛乳头球组、第8代DPC组基因表达显著高于原代DPC组/仿生毛乳头球组,共包含411个差异表达基因;KEGG富集分析显示这411个差异表达基因在Wnt信号通路以及磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B信号通路显著富集(P<0.05),GO富集分析表明细胞外基质、经典Wnt信号通路、细胞分化等GO术语被显著富集(P<0.05)。与原代DPC组、仿生毛乳头球组比较,第8代DPC组细胞基因SOX8、MMP-9、COL26A1、Wnt6 mRNA表达量均明显下降(q=15.950、8.854、11.890、11.050,9.851、5.884、7.418、4.870,P<0.01),与测序数据一致。与原代DPC组、仿生毛乳头球组比较,第8代DPC组细胞生物功能标志物FGF7、Wnt10a、LEF1、ALP、β连环蛋白、多功能蛋白聚糖、SOX2 mRNA表达量均明显下降(q=11.470、9.795、4.165、9.242、10.970、10.570、8.005,7.472、4.976、3.651、4.784、5.236、6.825、5.214,P<0.05或P<0.01)。注射后2周,第8代DPC组裸鼠无毛发再生,仿生毛乳头球组与原代DPC组裸鼠再生毛发数量相近(q=1.852,P>0.05)且均显著高于第8代DPC组(q=18.980、17.130,P<0.01);

关键词：毛发聚甲基丙烯酸类仿生学高通量核苷酸测序毛乳头细胞悬滴法毛乳头球

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硅橡胶硬度通过自噬调控成纤维细胞增殖及α- SMA、CollagenⅠ的表达

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第三军医大学学报 2019年第9期41卷 829-835页

作者：王海淋高扬石小花杜依晨张一鸣樊东力陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院整形美容外科重庆400037 重庆医科大学附属第三医院皮肤整形美容中心重庆401120

目的探讨不同硬度硅橡胶对人真皮成纤维细胞增殖及其表达α-SMA和CollagenⅠ的影响,并研究自噬在其中所起的作用。方法将A、B组分液体硅胶按不同比例混合固化制成一系列不同硬度的硅橡胶片,测定其邵氏硬度、断裂伸长率、水接触角、表面... 详细信息

目的探讨不同硬度硅橡胶对人真皮成纤维细胞增殖及其表达α-SMA和CollagenⅠ的影响,并研究自噬在其中所起的作用。方法将A、B组分液体硅胶按不同比例混合固化制成一系列不同硬度的硅橡胶片,测定其邵氏硬度、断裂伸长率、水接触角、表面形貌等机械性能。利用CCK-8检测成纤维细胞在不同硬度硅橡胶表面的增殖情况,而后选取细胞增殖存在显著差异的两种硬度硅橡胶进一步实验,采用Western blot和ELISA法分别检测正常条件下、施加自噬抑制剂3-MA和诱导剂西罗莫司后成纤维细胞自噬标志蛋白和α-SMA、CollagenⅠ的表达情况。结果成纤维细胞增殖能力随硅橡胶硬度的增加而增加,差异有统计学意义(P<0.05)。高硬度硅橡胶上的成纤维细胞具有更高的自噬活性,且α-SMA、Collagen I的表达量比低硬度硅橡胶更低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论硅橡胶硬度可通过自噬调控成纤维细胞的增殖,高硬度硅橡胶上调成纤维细胞自噬活性从而促进成纤维细胞增殖并抑制其表达α-SMA和CollagenⅠ。

关键词：硅橡胶硬度细胞增殖自噬 α-SMA CollagenⅠ

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基于网络药理学与分子对接和体外实验探讨青蒿治疗脓肿分枝杆菌感染的研究

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陆军军医大学学报 2023年第13期45卷 1463-1475页

作者：石茜杨子晨张建廖丹溪张一鸣陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院整形美容外科重庆400037 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的结合网络药理学、分子对接技术及其体外实验,探讨青蒿应用于脓肿分枝杆菌感染的作用机制。方法从中药系统药理学数据库和分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)系统... 详细信息

目的结合网络药理学、分子对接技术及其体外实验,探讨青蒿应用于脓肿分枝杆菌感染的作用机制。方法从中药系统药理学数据库和分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)系统中获得青蒿的活性成分,使用PharmMapper、SwissTargetPrediction预测青蒿作用靶点。从GeneCards数据库和OMIM数据库获得脓肿分枝杆菌感染相关靶点。获得共同靶点后,使用STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络图。使用Metascape数据库进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。筛选出青蒿主要潜在活性成分与核心靶点进行分子对接。将青蒿提取物及筛选出的青蒿主要潜在活性成分进行体外实验,探究其最小抑菌浓度,与常用抗脓肿分枝杆菌抗生素的体外联合作用,及其对脓肿分枝杆菌活力的影响。结果共发现48个青蒿靶点参与脓肿分枝杆菌感染的发病机制。MMP9、MAPK3、CASP3、IL2、CASP1、MMP2共6个靶点预测为通过青蒿治疗该疾病的核心靶点。KEGG富集分析表明,青蒿可能通过IL-17信号通路、中性粒细胞胞外陷阱形成、Toll样受体信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、MAPK信号通路等炎症和免疫相关信号通路治疗该疾病。分子对接结果表明,青蒿与这些核心靶点具有高亲和力。筛选出柽柳黄素、艾黄素、双氢青蒿素、青蒿提取物对脓肿分枝杆菌具有体外抑菌活性,单独药物的最小抑菌浓度(MIC)值分别为200、100、100、100μg/mL。联合使用青蒿提取物后,克拉霉素、阿奇霉素、阿米卡星、亚胺培南、头孢西丁的MIC值都较单独使用时下降,下降倍数为2~8倍。结论青蒿可能通过多靶点和多途径作用于脓肿分枝杆菌感染,其对脓肿分枝杆菌具有体外抑菌作用并与部分抗生素产生协同作用。

关键词：青蒿脓肿分枝杆菌网络药理学分子对接最小抑菌/杀菌浓度

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