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木犀草素通过抑制Drp1活性改善自噬流过程减少脑缺血再灌注后氧化应激损伤

第三军医大学学报 2020年第18期42卷 1777-1786页

作者：曾雪王龙赖玉洁陈波蒋航段晨阳张云东重庆医科大学附属第三医院神经疾病中心重庆401120 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院神经外科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)野战外科研究所战伤休克与输血研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探究木犀草素(luteolin)对脑缺血再灌注氧化应激损伤的保护机制。方法通过靶向药物评分方法筛选出对脑缺血再灌注损伤具有潜在治疗效果的抗氧化剂并在大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)小鼠模型中验证木犀草... 详细信息

目的探究木犀草素(luteolin)对脑缺血再灌注氧化应激损伤的保护机制。方法通过靶向药物评分方法筛选出对脑缺血再灌注损伤具有潜在治疗效果的抗氧化剂并在大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)小鼠模型中验证木犀草素的保护效果;在缺氧缺糖/复氧复糖(oxygen/glucose deprivation and re-oxygen/glucose,OGD/R)诱导的神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中使用不同浓度(10和50μmol/L)木犀草素药物处理,检测MTT细胞活力及氧自由基ROS含量变化;通过免疫荧光、蛋白印迹等方法检测木犀草素处理后OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞自噬流情况及线粒体形态变化,观察木犀草素对OGD/R后ROS生成和清除过程的影响。结果木犀草素对脑缺血再灌注靶向药物评分为96.86分。TTC染色结果显示木犀草素明显减少MCAO小鼠脑梗死面积(P<0.05)。OGD/R后SH-SY5Y细胞MTT值约为正常对照组的50%,使用50μmol/L的木犀草素处理后MTT值增加至83%(P<0.05),并且木犀草素显著减弱OGD/R诱导的ROS的产生,且呈剂量依赖性(P<0.05)。激光共聚焦结果显示50μmol/L木犀草素处理OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞后自噬小体荧光强度增高64.6%(P<0.05),自噬小体与溶酶体共定位情况提高1.56倍(P<0.05)。Western blot结果显示木犀草素明显抑制OGD/R后Drp1 Ser616磷酸化水平及Drp1线粒体转位(P<0.05),改善OGD/R后SH-SY5Y细胞线粒体形态(P<0.05)。结论木犀草素对于脑缺血再灌注后氧化应激损伤具有明显保护作用,一方面它可以通过改善自噬流过程促进线粒体自噬小体的降解,加速ROS的清除效率;另一方面它还可以通过抑制Drp1活性保护线粒体形态,减少ROS的产生。

关键词：木犀草素脑缺血再灌注线粒体氧自由基 Drp1 自噬流

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不同声学参数的低强度脉冲超声对软骨细胞活性及培养骨胚生长的影响

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第三军医大学学报 2019年第10期41卷 907-912页

作者：刘汨谢杨丽黄俊兰张若彬孙先定蒋宛凌陈涵纲倪振洪张斌陈林杜晓兰陆军军医大学(第三军医大学)大坪医院野战外科研究所战创伤康复医学研究室创伤实验室骨代谢与修复中心创伤烧伤与复合伤国家重点实验室全军军事训练伤防治与康复实验室重庆400042

目的探讨低强度脉冲超声(low-intensity pulsed ultrasound, LIPUS)对体外培养软骨细胞活性、增殖、分化和凋亡以及骨组织生长的影响。方法分离新生3～5 d C57BL/6J小鼠的软骨细胞和胚胎期18.5 d小鼠跖骨,分为对照组(未处理组)及3种LIPU... 详细信息

目的探讨低强度脉冲超声(low-intensity pulsed ultrasound, LIPUS)对体外培养软骨细胞活性、增殖、分化和凋亡以及骨组织生长的影响。方法分离新生3～5 d C57BL/6J小鼠的软骨细胞和胚胎期18.5 d小鼠跖骨,分为对照组(未处理组)及3种LIPUS处理组,其声强度和占空比的参数为:LIPUSⅠ,30 mW/cm^2-20%;LIPUSⅡ,30 mW/cm^2-40%;LIPUSⅢ,50 mW/cm^2-20%;其余参数为:中心频率1.5 MHz,脉冲重复频率1 KHz,处理时间20 min/d;分别用CCK-8、EdU掺入及TUNEL检测软骨细胞的活性变化、增殖、凋亡;定量RT-PCR检测蛋白聚糖(Aggrecan,Acan)、Ⅱ型胶原(CollagenⅡ,ColⅡ)、Ⅹ型胶原(CollagenⅩ,ColⅩ)等软骨基质相关基因表达;采集图像后测量跖骨长度,计算跖骨全长增长率、软骨增长率。结果 3种参数的LIPUS处理能促进软骨细胞的活性和增殖,抑制软骨细胞凋亡,其中LIPUSⅡ组效果最明显;定量RT-PCR结果显示:各处理组软骨细胞的Acan、ColⅡ的mRNA表达均较对照组明显增高,ColⅩ表达降低(P<0.05);跖骨长度计算结果显示:LIPUSⅡ、Ⅲ组软骨和全长增长率均显著高于对照组(P<0.01),而LIPUSⅠ组与对照组无明显差异。结论 LIPUS可能通过促进软骨细胞活性、增殖以及细胞外基质合成,抑制细胞凋亡,加快骨组织生长,且效果与超声参数有关;其中声强度30 mW/cm^2、占空比40%的LIPUS作用最明显。

关键词：低强度脉冲超声强度占空比软骨细胞骨培养小鼠

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不同强度的低强度脉冲超声波对椎间盘退变的影响

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第三军医大学学报 2018年第22期40卷 2027-2033页

作者：蒋宛凌黄俊兰谭乔燕张若彬李灿谢杨丽李芳芳许萌刘汨杜晓兰陈林陆军军医大学第三军医大学第三附属医院(野战外科研究所)战创伤康复研究室、创伤实验室、骨代谢与修复中心、创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 陆军军医大学(第三军医大学)第三附属医院(野战外科研究所)康复医学科重庆400042

目的探讨不同强度的低强度脉冲超声波对椎间盘退变的影响,筛选低强度脉冲超声波的最佳治疗强度。方法采用3种强度（0. 1、0. 5、1. 0 W/cm^2）的低强度脉冲超声波处理大鼠髓核细胞及筛选的最佳强度超声波处理针刺椎间盘模型小鼠; EdU... 详细信息

目的探讨不同强度的低强度脉冲超声波对椎间盘退变的影响,筛选低强度脉冲超声波的最佳治疗强度。方法采用3种强度（0. 1、0. 5、1. 0 W/cm^2）的低强度脉冲超声波处理大鼠髓核细胞及筛选的最佳强度超声波处理针刺椎间盘模型小鼠; EdU检测髓核细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,定量PCR检测蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、波形蛋白等相关基因表达;组织学分析小鼠尾部椎间盘退变程度。结果 3种强度的低强度脉冲超声波能促进髓核细胞增殖及迁移,强度为0. 5 W/cm^2及1. 0 W/cm^2的低强度脉冲超声波作用较明显（P 〈0. 01）。低强度脉冲超声波也可上调正常环境及炎症刺激下髓核细胞中蛋白聚糖、波形蛋白等表达,其中强度为0. 5 W/cm^2、频率为3 MHz、占空比为50%中强度的低强度脉冲超声波作用最强（P 〈0. 01）。对照组小鼠椎间盘表现出明显退变表型,而超声组椎间盘退变程度的组织评分明显低于对照组（P 〈0. 01）。结论低强度脉冲超声波可能通过上调椎间盘的蛋白聚糖、波形蛋白、Ⅱ型胶原表达,加快细胞增殖及迁移等,对椎间盘退变有一定防治作用,其中强度为0. 5 W/cm^2、频率为3 MHz、占空比为50%中强度的低强度脉冲超声波作用最明显。

关键词：低强度脉冲超声波强度椎间盘退变髓核小鼠

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成纤维细胞生长因子受体2对小肠上皮细胞增殖与分化的影响

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第三军医大学学报 2018年第10期40卷 847-854页

作者：唐才智任泂高美娇李旭东杨杰陈林王军平王锋超粟永萍陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系全军复合伤研究所重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第三附属医院(野战外科研究所)创伤实验室、创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的探究成纤维细胞生长因子受体2(fibroblast growth factor receptor 2,Fgfr2)功能缺失对成年小鼠小肠上皮细胞增殖和分化的影响。方法繁殖和培育小肠上皮Fgfr2条件性敲除小鼠,经他莫昔芬(tamoxifen)诱导,Western blot验证Fgfr2在肠... 详细信息

目的探究成纤维细胞生长因子受体2(fibroblast growth factor receptor 2,Fgfr2)功能缺失对成年小鼠小肠上皮细胞增殖和分化的影响。方法繁殖和培育小肠上皮Fgfr2条件性敲除小鼠,经他莫昔芬(tamoxifen)诱导,Western blot验证Fgfr2在肠上皮的特异性基因敲除情况;将诱导肠上皮敲除Fgfr2的小鼠作为实验组,同胎野生型小鼠作为对照组。利用免疫荧光技术对潘氏细胞和内分泌细胞占肠上皮细胞的比例进行计数,利用Alcian染色对杯状细胞占肠上皮细胞的比例进行计数;运用HE染色和免疫组化染色指标推断小肠上皮Fgfr2功能缺失对小肠上皮细胞增殖的影响。结果经过转基因小鼠繁殖后诱导,Western blot检测结果显示小肠上皮特定敲除的Fgfr2小鼠构建成功;免疫荧光和Alcian染色结果显示:与对照组小鼠比较,Fgfr2敲除小鼠的十二指肠、空肠和回肠上皮潘氏细胞数量增加(P<0.05),杯状细胞数量减少(P<0.05),而内分泌细胞数量不变(P>0.05);HE染色和免疫组化染色结果显示:绒毛长度和隐窝深度以及增殖细胞数目未见明显变化(P>0.05)。结论 Fgfr2介导的微环境信号可参与调控成年小鼠小肠上皮分泌系细胞分化,但对小肠上皮细胞增殖无显著影响。

关键词：成纤维细胞生长因子受体2 小肠上皮细胞分化细胞增殖

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大出血的损害控制性复苏——挽救战伤伤员的关键

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解放军医学杂志 2017年第12期42卷 1025-1028页

作者：张连阳李阳第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军战创伤中心创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

战伤包括不可救治(NS)和可救治(PS)两类,美军的资料显示PS中大出血占90.98%,提升战伤救治能力的重中之重是救治大出血。本文重点介绍了战术阶段和紧急救治阶段控制躯干及交界部位战伤所致的不可压迫性出血(NCH)的外科技术,以及损害控制... 详细信息

战伤包括不可救治(NS)和可救治(PS)两类,美军的资料显示PS中大出血占90.98%,提升战伤救治能力的重中之重是救治大出血。本文重点介绍了战术阶段和紧急救治阶段控制躯干及交界部位战伤所致的不可压迫性出血(NCH)的外科技术,以及损害控制性复苏伤员的识别、野战输血流程和新鲜全血输注等损害控制性复苏策略和技术。

关键词：战伤大出血损害控制性复苏外科止血

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直面挑战躯干战伤出血的紧急控制

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解放军医学杂志 2017年第1期42卷 1-5页

作者：李阳张连阳第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军战创伤中心创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

近年来,由于战场止血带的广泛应用,四肢战伤大出血死亡率已显著下降,而躯干战伤出血逐渐成为战场致命性大出血死亡的首要因素。本文主要介绍躯干战伤出血的概念及其特点,系统阐述了躯干战伤出血紧急控制的策略、装备和技术,包括局部止... 详细信息

近年来,由于战场止血带的广泛应用,四肢战伤大出血死亡率已显著下降,而躯干战伤出血逐渐成为战场致命性大出血死亡的首要因素。本文主要介绍躯干战伤出血的概念及其特点,系统阐述了躯干战伤出血紧急控制的策略、装备和技术,包括局部止血材料、腔内泡沫材料、交界部位止血装置及主动脉阻断压迫技术等。积极研发躯干战伤战术阶段的救治装备和技术,是现阶段战术战伤救治进一步降低死亡率的关键,我军应借鉴外军经验,积极面对躯干战伤救治的严峻挑战,努力提升战术战伤救治水平。

关键词：创伤和损伤急救止血

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2004-2015年中国高速公路与普通公路交通伤对比研究

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第三军医大学学报 2017年第6期39卷 589-596页

作者：杨东张岫竹张彦琦刘冬常明涛张连阳第三军医大学大坪医院野战外科研究所:全军战创伤中心创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所:第四研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 第三军医大学军事预防医学院卫生统计学教研室重庆400038

目的明确我国高速公路道路与普通公路交通事故在事故严重性、时间分布、道路环境、驾龄分布方面的差异。方法采集2004-2015年高速公路和普通公路交通伤相关数据(除西藏和重庆外),包括事故起数、死亡人数、受伤人数、直接财产损失、24 h... 详细信息

目的明确我国高速公路道路与普通公路交通事故在事故严重性、时间分布、道路环境、驾龄分布方面的差异。方法采集2004-2015年高速公路和普通公路交通伤相关数据(除西藏和重庆外),包括事故起数、死亡人数、受伤人数、直接财产损失、24 h分布、驾龄分布和道路环境条件等。分析高速公路道路交通事故与普通公路的差异。定量资料采用描述性分析;高速公路与普通公路比较采用独立样本t检验;危险因素的危险程度大小采用相对危险度表示,差异性分析采用χ2检验。结果高速公路事故与普通公路相比,里程死亡率为4.51倍(P<0.01),事故死亡率为2.21倍(P<0.01),每起事故直接财产损失约为10倍(P<0.01),交通伤伤死率为1.64倍(P<0.01)。高速公路交通事故发生死亡的危险性是普通公路交通事故的1.97倍(RR=1.97,95%CI:1.96~1.99)。24 h内的事故分布特点:高速公路呈双高峰特点(4:00-6:00和15:00-17:00),而普通公路8:00-24:00没有明显的高发时间段,两者时间分布差异具有统计学意义(P<0.01)。高速公路致死性事故多发生在晴朗天气和干燥路面,RR值分别为1.17(95%CI:1.15~1.19)和1.23(95%CI:1.21~1.26),与普通公路比较差异具有统计学意义(P=0.028)。驾驶员驾龄>10年导致高速公路致死性事故明显高于普通公路(P=0.043)。结论我国高速公路交通伤严重程度明显高于普通公路交通伤。高速公路交通事故更倾向于发生在凌晨、高龄驾驶员、环境条件较好的情况下。

关键词：交通事故创伤和损伤高速公路普通公路

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多发伤致失血性休克1例经验教训

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创伤外科杂志 2017年第2期19卷 155-156页

作者：陈玺周健王耀丽艾山木谭浩孙士锦张连阳第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军战创伤中心创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重症医学科重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军战创伤中心创伤烧伤与复合伤国家重点实验室创伤外科重庆400042

回顾性总结1例因高处坠落致失血性休克病例的经验教训。经积极治疗,预后良好。

关键词：多发伤失血性休克

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诊疗规范能否规避腹部钝性伤救治中的风险

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创伤外科杂志 2017年第5期19卷 321-324页

作者：张连阳第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军战创伤中心、创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

临床实践中,医师如果不遵循规范选择某项诊疗技术,则可能存在局限性,容易造成诊治方案的偏差和不一致性,甚至危及医疗安全。本文阐述诊疗规范的概念,分别介绍了国家政府、行业组织、教材专著和医疗机构等层面各类规范的特点和存在问题... 详细信息

临床实践中,医师如果不遵循规范选择某项诊疗技术,则可能存在局限性,容易造成诊治方案的偏差和不一致性,甚至危及医疗安全。本文阐述诊疗规范的概念,分别介绍了国家政府、行业组织、教材专著和医疗机构等层面各类规范的特点和存在问题。以钝性脾损伤为例,指出遵循规范规避腹部钝性伤诊疗风险的初次评估方法,区分血流动力学稳定和不稳定患者的不同救治流程。提出了对现有规范分门别类,减少重复性,增加权威性;积极宣讲、示范规范,评价其实施效果;并注意区分诊疗规范与精益求精的医疗行为等。

关键词：腹部钝性伤脾损伤诊疗规范

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肠道损伤紧急救治策略

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创伤外科杂志 2017年第9期19卷 641-645页

作者：张连阳第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军战创伤中心、创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

十二指肠、空肠、回肠、结直肠及其系膜等肠道损伤遗漏或延迟诊断仍较常见,一旦发生将增加切口、感染等并发症发生率和病死率。本文基于肠道损伤致伤机制和流行病学等,阐述了体格检查、创伤重点超声评估(focused assessment with sonogr... 详细信息

十二指肠、空肠、回肠、结直肠及其系膜等肠道损伤遗漏或延迟诊断仍较常见,一旦发生将增加切口、感染等并发症发生率和病死率。本文基于肠道损伤致伤机制和流行病学等,阐述了体格检查、创伤重点超声评估(focused assessment with sonography for trauma,FAST)、腹部X线片、CT扫描和腹腔探查等肠道损伤伤情评估的关键技术,并介绍了肠道损伤紧急手术的策略和技术。

关键词：肠道损伤影像学流行病学诊治

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