检索结果-内蒙古大学图书馆

陆军军医大学学报 2025年第8期47卷 816-825页

作者：李松涛孙靖初同伟陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院骨科重庆中国人民解放军总医院第九医疗中心脊柱外科北京

目的探究核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)通过ROS-HIF-1α信号轴调控自噬和破骨细胞分化的分子机制。方法以RAW264.7小鼠单核/巨噬细胞系为模型,采用随机数字表法将细胞分为Contro... 详细信息

目的探究核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)通过ROS-HIF-1α信号轴调控自噬和破骨细胞分化的分子机制。方法以RAW264.7小鼠单核/巨噬细胞系为模型,采用随机数字表法将细胞分为Control组、RANKL组及联合干预组[RANKL+CQ组(自噬抑制剂干预)、RANKL+FG-4592组(HIF-1α稳定剂干预)、RANKL+NAC组(ROS清除剂干预)]。通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色定量检测成熟多核破骨细胞数量;Western blot检测HIF-1α、LC3蛋白表达水平;qRT-PCR分析破骨细胞分化相关基因(TRAP、Cath K和MMP-9)mRNA表达水平;基于腺病毒mRFP-GFP-LC3标记系统结合激光共聚焦显微镜观察自噬通量活性;DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(ROS)水平。结果与Control组相比,RANKL组中TRAP阳性多核破骨细胞数量显著增加(P<0.05),破骨细胞分化相关基因mRNA表达水平明显上调;同时激活自噬通路,表现为LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高(P<0.05)及自噬溶酶体数量增加(P<0.05);细胞内ROS水平显著升高(P<0.05),且HIF-1α蛋白表达下调(P<0.05)。与RANKL组比较,RANKL+NAC组显著抑制细胞内ROS蓄积(P<0.05),并逆转HIF-1α蛋白的低表达(P<0.05);同时降低LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值(P<0.05)及自噬通量活性(P<0.05);伴随破骨细胞分化相关基因表达水平下降(P<0.05)及成熟破骨细胞数量减少(P<0.05)。与RANKL组比较,RANKL+FG-4592组明显提升HIF-1α蛋白表达水平(P<0.05);同时抑制自噬激活[LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值降低(P<0.05);自噬通量活性减少(P<0.05)],进而减少破骨细胞分化相关基因表达(P<0.05)及成熟破骨细胞数量(P<0.05)。与RANKL组比较,RANKL+CQ组显著抑制自噬通量活性(P<0.05);同时明显减少破骨细胞分化相关基因表达水平(P<0.05)及成熟破骨细胞数量(P<0.05)。结论 RANKL通过ROS介导的HIF-1α下调激活自噬,促进破骨细胞分化。

关键词： HIF-1α 自噬破骨细胞分化活性氧

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低氧抑制乳腺癌细胞中信号素3A表达并调控成骨前体细胞分化

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肿瘤 2016年第12期36卷 1298-1306页

作者：徐峥陈武桂孙靖陈培初同伟第三军医大学第二附属医院骨科重庆400037

目的 :通过低氧刺激乳腺癌MCF-7细胞,比较常氧与低氧条件下获取的MCF-7细胞条件培养液对成骨前体细胞MC3T3-E1分化能力的影响,并初步探讨信号素3A(semaphorin 3A,Sema3A)表达对低氧调控乳腺癌骨转移中成骨细胞分化的作用。方法 :收集乳... 详细信息

目的 :通过低氧刺激乳腺癌MCF-7细胞,比较常氧与低氧条件下获取的MCF-7细胞条件培养液对成骨前体细胞MC3T3-E1分化能力的影响,并初步探讨信号素3A(semaphorin 3A,Sema3A)表达对低氧调控乳腺癌骨转移中成骨细胞分化的作用。方法 :收集乳腺癌MCF-7细胞在常氧和低氧条件下培养48 h后的条件培养液,用其培养成骨前体细胞MC3T3-E1。采用BCIP/NBT碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)显色试剂盒和ALP活性检测试剂盒检测MC3T3-E1细胞中ALP的含量及活性,茜素红S(alizarin red S,ARS)染色法检测MC3T3-E1细胞的矿化情况。同时,采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测常氧和低氧条件培养0、12、24和48 h后MCF-7细胞中Sema3A的表达变化。将重组人Sema3A蛋白加入到MCF-7低氧条件培养液处理的MC3T3-E1细胞中,实时荧光定量PCR法检测各组细胞中成骨分化相关蛋白ALP、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)和转录因子Osterix(Osx)的m RNA表达水平。结果 :相比于常氧条件培养获得的MCF-7条件培养液组,低氧条件培养获得的MCF-7条件培养液可以使MC3T3-E1细胞中ALP的活性明显减弱(P<0.05),且ARS染色钙化面积明显减小(P<0.05)。低氧处理24和48 h后,MCF-7细胞中Sema3A的表达水平明显低于常氧条件下相同时间点的表达水平(P值均<0.05)。向低氧条件培养液培养的MC3T3-E1细胞中加入重组人Sema3A蛋白处理后,MC3T3-E1细胞中ALP、RUNX2、OCN和Osx m RNA的表达水平均较未加重组人Sema3A处理组明显升高(P值均<0.05)。结论 :体外低氧环境可下调乳腺癌MCF-7细胞中Sema3A的表达,进而抑制成骨细胞的分化。提示Sema3A可能是低氧环境下乳腺癌条件培养液抑制成骨细胞分化的重要因素之一。

关键词：乳腺肿瘤细胞低氧信号素3A 成骨分化

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不同前列腺癌细胞对成骨前体细胞增殖和成熟能力的影响

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肿瘤 2013年第12期33卷 1033-1038页

作者：刘复州邱浩王汝杰邹传奇刘栓得胡旭沈伟伟张超周跃初同伟第三军医大学第二附属医院骨科重庆400037

目的 :探讨前列腺癌LNCaP和PC-3细胞条件培养液(conditioned medium,CM)对成骨前体细胞MC3T3-E1增殖和分化的影响。方法 :分别用含20%LNCaP CM、20%PC-3 CM和不含CM的α-MEM培养液(作为对照组)处理MC3T3-E1细胞。CCK-8法检测各组细胞的... 详细信息

目的 :探讨前列腺癌LNCaP和PC-3细胞条件培养液(conditioned medium,CM)对成骨前体细胞MC3T3-E1增殖和分化的影响。方法 :分别用含20%LNCaP CM、20%PC-3 CM和不含CM的α-MEM培养液(作为对照组)处理MC3T3-E1细胞。CCK-8法检测各组细胞的增殖情况,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测试剂盒检测各组细胞中ALP的活性,茜素红染色法检测各组细胞的钙化情况,实时荧光定量-PCR法检测各组细胞中Ⅰ型胶原蛋白α1(collagen typeⅠalpha 1,Col1α1)、骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)和RUNX2(runt-related transcription factor 2)的mRNA表达水平。结果 :与对照组和LNCaP CM组相比,PC-3CM组MC3T3-E1细胞的增殖能力明显增高(P<0.05);LNCaP CM组MC3T3-E1细胞中ALP的活性明显高于对照组(P<0.05),钙化面积大于对照组(P<0.05);PC-3 CM组MC3T3-E1细胞中ALP的活性较对照组明显降低(P<0.05),钙化面积明显小于对照组(P<0.05);LNCaP CM组MC3T3-E1细胞中Col1α1、OCN和RUNX2的mRNA表达水平均明显高于对照组(P<0.05),而PC-3 CM组MC3T3-E1细胞中Col1α1、OCN和RUNX2的mRNA表达水平均明显低于对照组(P<0.05)。结论 :PC-3 CM可明显促进成骨前体细胞增殖,但抑制其分化成熟;而LNCaP CM可显著促进成骨前体细胞分化成熟,说明该模型能够充分反映不同前列腺癌细胞对成骨前体细胞增殖和分化的差异,可以作为后续研究前列腺癌骨转移机制的体外模型。

关键词：前列腺肿瘤细胞增殖细胞分化体外研究成骨前体细胞

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CD147对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响

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肿瘤 2015年第2期35卷 168-175页

作者：卓云云王洪凯沈伟伟陈武桂毛德举胡旭张超初同伟第三军医大学第二附属医院骨科重庆400037

目的:探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN,EMP,又称CD147)对肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响及其可能的机制。方法:将CD147过表达慢病毒、短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)干扰CD147表达的慢病毒及阴性对照(negative control,NC)慢病毒分别感染肺癌A549细胞,获得CD147稳定过表达的A549EMP细胞、稳定干扰CD147表达的A549sh EMP细胞和阴性对照A549NC细胞。应用CCK-8(cell counting kit-8)法、细胞划痕实验和Transwell小室法分别检测A549EMP、A549sh EMP和A549NC细胞的增殖、迁移及侵袭能力;蛋白质印迹法检测A549EMP、A549sh EMP和A549NC细胞中β-catenin的核表达情况。结果:A549EMP细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显高于未进行慢病毒感染的空白对照组A549细胞和阴性对照组A549NC细胞(P<0.05),而A549sh EMP细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显低于空白对照组A549细胞和阴性对照组A549NC细胞(P<0.05)。A549EMP细胞β-catenin的核表达水平明显高于空白对照组A549细胞和阴性对照组A549NC细胞(P<0.05),而A549sh EMP细胞β-catenin的核表达水平明显低于空白对照A549细胞和阴性对照组A549NC细胞(P<0.05)。结论:CD147可增强肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与β-catenin的激活有关。

关键词：肺肿瘤细胞增殖细胞运动肿瘤浸润 CD147 beta-Catenin

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肺癌细胞条件培养液刺激成骨细胞增殖但抑制其分化

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肿瘤 2012年第11期32卷 868-873页

作者：黄晨刘栓得许红飞张超初同伟周跃第三军医大学第二附属医院骨科重庆400037

目的:体外研究肺癌细胞条件培养液(conditioned medium,CM)对前骨细胞亚克隆14细胞株MC3T3-E1Subclone14增殖、分化和矿化的作用。方法:收集人肺腺癌A549细胞CM,以10%A549CM和20%A549CM加入MC3T3-E1Subclone14细胞培养液,采用CCK-8(cell counting kit-8)法检测MC3T3-E1Subclone14细胞增殖,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒检测MC3T3-E1Subclone14细胞中ALP的活性,茜素红染色检测MC3T3-E1Subclone14细胞的矿化能力,实时荧光定量PCR检测MC3T3-E1Subclone14细胞中ALP、骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)、Ⅰ型胶原蛋白α1(collagen typeⅠalpha1,Col1α1)及RUNX2(runt-related transcription factor2)mRNA的表达。结果:MC3T3-E1Subclone14细胞培养24和48h时,10%A549CM组和20%A549CM组的细胞增殖率均高于不加A549CM的对照组(P<0.05);10%A549CM组和20%A549CM组MC3T3-E1Subclone14细胞中ALP活性低于对照组(P<0.05);A549CM组矿化结节的数量和面积均小于对照组(P<0.05);A549CM组MC3T3-E1Subclone14细胞中ALP、OCN、Col1α1和RUNX2mRNAs的表达水平明显低于对照组(P<0.05)。结论:肺癌A549细胞CM可促进MC3T3-E1Subclone14细胞的增殖,抑制其分化和矿化。

关键词：肺肿瘤成骨细胞细胞增殖细胞分化

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主胸弯型特发性脊柱侧凸后路选择性胸弯融合术后远端叠加现象的危险因素分析

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中国修复重建外科杂志 2016年第10期30卷 1258-1263页

作者：施剑雄叶峰周跃黄博邱浩初同伟第三军医大学第二附属医院新桥医院骨科重庆400037

目的对Lenke 1A型青少年特发性脊柱侧凸行后路选择性胸弯融合术后远端叠加现象的发生率进行研究,对可能的危险因素进行分析,以期得出更为合理的远端固定椎（lowest instrumented vertebra,LIV）选择策略。方法回顾性分析2011年7月-201... 详细信息

目的对Lenke 1A型青少年特发性脊柱侧凸行后路选择性胸弯融合术后远端叠加现象的发生率进行研究,对可能的危险因素进行分析,以期得出更为合理的远端固定椎（lowest instrumented vertebra,LIV）选择策略。方法回顾性分析2011年7月-2015年12月行后路椎弓根螺钉系统选择性胸弯融合术矫正治疗的43例Lenke 1A型脊柱侧凸患者。其中男15例,女28例;年龄12~18岁,平均16岁。术前主胸弯Cobb角（50.1±11.3）°。所有患者均在术前、术后即刻及末次随访时摄站立位脊柱全长正侧位X线片,测量手术前后各影像学参数。在末次随访X线片上判定是否发生了术后远端叠加现象,将发生远端叠加现象的患者纳入叠加组,未叠加患者为非叠加组。将可能发生叠加现象的参数进行统计分析。结果 43例均获随访,随访时间12~50个月,平均26.5个月。末次随访时10例（23.3%）发生了远端叠加现象,其中男2例（13.3%）,女8例（28.6%）。单因素分析显示,两组间比较术前腰弯柔韧性、术前骨盆冠状面倾斜角、术前LIV＋1与骶骨中线偏移距离、L4亚分型、LIV与远端触及椎（last touching vertebra,LTV）节段差距（LIV—LTV）、LIV与下端椎（lower end vertebra,LEV）节段差距（LIV—LEV）、LIV与稳定椎（stable vertebra,SV）节段差距（LIV—SV）7个参数差异有统计学意义（P〈0.05）;而性别、年龄、Risser征、LIV与中立椎节段差距、手术前后主胸弯Cobb角、术前主胸弯柔韧性、术前代偿性腰弯Cobb角及术后代偿性腰弯残余角、术前顶椎偏移、术前LIV倾斜角、术后主胸弯及腰弯Cobb角矫正率、术后顶椎偏移、末次随访时主胸弯及腰弯Cobb角矫正丢失等参数差异均无统计学意义（P〉0.05）。将差异有统计学意义的7个变量带入Logistic回归模型,采用逐步回归法进行变量筛选,结果显示术前LIV＋1偏移（〉10 mm,OR值=10.812,P=0.026）、LIV—LTV（〈1,OR值=9.017,P=0.040）、L4亚分型（L4向右倾斜,OR值=9.744,P=0.047）与远端叠加现象明显相关。结论术前LIV＋1偏移〉10 mm、LIV—LTV〈1、L4亚分型（L4向右倾斜）是术后发生叠加现象的独立危险因素。由于叠加现象的发生与远端融合平面的选择密切相关,因此术前应全面考虑下端融合平面并且至少延伸至LTV＋1,以防止术后远端叠加现象的发生。

关键词：青少年特发性脊柱侧凸选择性融合术 Lenke 1A型叠加现象

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siRNA沉默Sema 4D对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及迁移的影响

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中国肿瘤生物治疗杂志 2015年第4期22卷 454-458页

作者：陈武桂沈伟伟胡旭卓云云毛德举初同伟第三军医大学第二附属医院骨科重庆400037

目的:观察siRNA沉默信号素4D(semaphorin 4D,Sema 4D)对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移的影响。方法:构建靶向Sema 4D基因的siRNA,脂质体法转染MDA-MB-231细胞系,通过实时荧光定量-PCR、Western blotting检测干扰效率,筛选有效序列。si... 详细信息

目的:观察siRNA沉默信号素4D(semaphorin 4D,Sema 4D)对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移的影响。方法:构建靶向Sema 4D基因的siRNA,脂质体法转染MDA-MB-231细胞系,通过实时荧光定量-PCR、Western blotting检测干扰效率,筛选有效序列。siRNA有效干扰MDA-MB-231细胞Sema 4D表达后,CCK-8法及Transwell迁移实验检测细胞增殖及迁移能力的变化。结果:Sema 4D siRNA转染MDA-MB-231细胞后Sema 4D的(mRNA及蛋白)表达水平明显下降(P<0.05),其中以siRNA-C最明显(P<0.05);与空白、阴性对照组相比,siRNA-C沉默MDA-MB-231细胞Sema 4D表达可明显抑制MDA-MB-231细胞增殖(均P<0.05),同时明显减弱细胞的迁移能力[穿膜细胞数:(105.60±12.07)vs(196.20±9.04)、(186.40±6.69)个,均P<0.05]。结论:siRNA沉默Sema 4D可抑制MDA-MB-231细胞增殖,并抑制细胞迁移,可作为乳腺癌基因治疗的潜在位点。

关键词： siRNA 信号素4D 乳腺癌增殖迁移

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经皮内镜髓核摘除术治疗腰椎间盘突出症长期随访研究

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第三军医大学学报 2021年第22期43卷 2455-2461页

作者：李悦洋李海音常献胡志雷刘晨浩高小新张雨尧李长青陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院骨科重庆400037

目的评估经皮内镜髓核摘除术治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法选取2012年1月至2015年12月我科诊断为单节段腰椎间盘突出症并行经皮内镜髓核摘除手术的病例,完成至少5年的术后随访。观测患者术前,术后3个月、6个月、1年及末次随访的... 详细信息

目的评估经皮内镜髓核摘除术治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法选取2012年1月至2015年12月我科诊断为单节段腰椎间盘突出症并行经皮内镜髓核摘除手术的病例,完成至少5年的术后随访。观测患者术前,术后3个月、6个月、1年及末次随访的腰椎疾病的功能评分(the Oswestry disability index,ODI)及腰、腿部疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)评分变化;记录术后并发症及其治疗方式。结果共纳入病例1 807例,完成随访病例1 706例,失访101例,随访率为94.08%。随访时间(6.36±1.08)年。术后3个月、6个月、1年及最终随访ODI评分分别为(26.01±7.48)、(20.87±7.50)、(17.25±7.77)及(17.26±13.53)分,较术前[(58.23±13.06)分]均明显下降;术后1年ODI评分较术后3、6个月明显下降。腰部VAS评分术后3个月、6个月、1年及最终随访分别为(2.50±0.83)、(1.93±0.84)、(1.54±0.82)、(1.46±1.28)分,均较术前[(5.48±1.24)分]明显下降;腰部术后1年VAS评分较术后3、6个月明显下降。术后3个月、6个月、1年及最终随访腿部VAS评分分别为(2.00±1.07)、(1.43±1.02)、(1.01±1.01)、(0.89±1.39)分,较术前[(4.73±1.84)分]均有下降。术后并发症发生率为0.53%(9/1 706),包括椎间盘囊肿2例,椎间隙感染2例,邻近节段突出5例。术后症状未缓解11例。术后复发177例,复发率10.38%。术后1年为患者复发高峰时间,61~90岁患者复发率较高。复发再手术率为50.85%,全部再手术率5.98%。复发治疗方式:手术治疗90例,保守治疗87例。结论经皮内镜髓核摘除术治疗腰椎间盘突出症长期随访结果良好。

关键词：腰椎间盘突出症经皮内镜髓核摘除术手术疗效并发症

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人工膝关节置换术后药物抗凝空窗期使用间歇充气加压装置的安全性及成本效果分析

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陆军军医大学学报 2023年第5期45卷 450-455页

作者：杨昌凤何永琴周媛媛黄盈赖淋雨张玉梅陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院骨科重庆400037 陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院超声科重庆400037

目的分析人工膝关节置换术(total knee arthroplasty,TKA)后药物抗凝空窗期使用间歇充气加压装置(intermittent pneumatic compression,IPC)的安全性及成本-效果。方法纳入行TKA手术的患者337例,采用随机数字表法进行分组,其中试验组168... 详细信息

目的分析人工膝关节置换术(total knee arthroplasty,TKA)后药物抗凝空窗期使用间歇充气加压装置(intermittent pneumatic compression,IPC)的安全性及成本-效果。方法纳入行TKA手术的患者337例,采用随机数字表法进行分组,其中试验组168例,对照组169例。试验组在药物抗凝空窗期间双下肢持续使用IPC,对照组术后即刻至下床期间双下肢持续使用IPC,比较两组患者术后1 d肌间静脉丛血栓(muscular calf vein thrombosis,MCVT)的预防有效率、D2聚体水平、术后总失血量及成本-效果比的差异。结果2组患者术后1 d MCVT预防有效率、血红蛋白水平、总失血量、D2聚体水平比较,差异均无统计学意义;试验组IPC使用时间[6.00(6.00,6.00)h]较对照组[20.00(15.00,24.25)h]短,两组比较差异有统计学意义(P<0.01);试验组IPC使用总成本为172.84(172.84,172.84)元,与对照组[628.37(461.82,758.49)元]比较差异具有统计学意义(P<0.01);试验组的成本-效果比(2.23)小于对照组(7.75)。结论TKA术后药物抗凝空窗期使用IPC安全性好,较术后持续使用IPC具有更佳的成本效果。

关键词：膝关节置换肢体气压治疗药物抗凝药物空窗期成本-效果

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残留轻度内翻不影响弓形股骨膝内翻膝关节置换的临床效果

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第三军医大学学报 2021年第22期43卷 2462-2467页

作者：李思宁王直兵程兴旺张峡陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院骨科重庆400037

目的探讨全膝关节置换(total knee arthroplasty,TKA)时,残留轻度下肢内翻对股骨外弓膝内翻患者功能的影响。方法采用回顾性队列研究设计,收集2015年1-12月在我科行TKA的152例下肢力线内翻的内侧膝骨关节炎(medial osteoarthritis of th... 详细信息

目的探讨全膝关节置换(total knee arthroplasty,TKA)时,残留轻度下肢内翻对股骨外弓膝内翻患者功能的影响。方法采用回顾性队列研究设计,收集2015年1-12月在我科行TKA的152例下肢力线内翻的内侧膝骨关节炎(medial osteoarthritis of the knee,MOA)患者病例资料。根据术后的下肢力线将患者分为3组:轻度内翻(>3°~6°,A组),重度内翻(>6°,B组),中立位(-3°~3°,C组)。平均随访4.3年,比较各组间的国际膝关节协会(international knee society score,KSS)及麦克马斯特大学骨关节炎指数(Western Ontario and McMaster University Osteoarthritis Index,WOMAC)评分。结果随访期间,各组均无患者出现翻修。术后力线分别为A组术前(9.8±3.2)°,术后(4.3±0.6)°;B组术前(10.8±1.6)°,术后(7.1±1.2)°;C组术前(8.8±3.5)°,术后(0.6±1.3)°。术后各组KSS评分均有所提高,与C组[(157.0±29.4)分,P=0.02]及B组[(150.9±32.3)分,P=0.01]相比,A组总的KSS评分(167.5±26.1)提高更显著;功能评分上,与B组(P=0.04)及C组(P=0.01)相比,A组的KSS评分提高更显著;膝关节评分上,A组较B组改善更明显(P=0.03),但与C组相似。WOMAC评分上,与C组相比,A组具有更低的WOMAC总评分(P=0.02)、日常活动度(P=0.02)及僵硬度评分(P=0.03);B组和C组具有相近的WOMAC评分。结论股骨外弓膝内翻患者行TKA时,残留轻度下肢内翻(>3°~6°)不影响术后的短期效果。

关键词：膝骨关节炎全膝关节置换术股骨外弓内翻膝

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