检索结果-内蒙古大学图书馆

CD3^+CD56^+NKT样细胞在胃癌患者外周血中的检测及其功能下降的机制

第三军医大学学报 2020年第10期42卷 1022-1027页

作者：余路遥王辉彭六生江油市九○三医院普外科四川绵阳621700 华西医院胃肠外科成都610041 陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系微生物与生化药学教研室重庆400038

目的分析CD3^+CD56^+NKT细胞在胃癌患者外周血中的应答水平和功能特征,并初步探讨其功能下降的机制。方法采用流式细胞术检测胃癌患者外周血中CD3^+CD56^+NKT样细胞的比例及其功能,同时采用胃癌患者外周血浆刺激单个核细胞并加入抗体阻... 详细信息

目的分析CD3^+CD56^+NKT细胞在胃癌患者外周血中的应答水平和功能特征,并初步探讨其功能下降的机制。方法采用流式细胞术检测胃癌患者外周血中CD3^+CD56^+NKT样细胞的比例及其功能,同时采用胃癌患者外周血浆刺激单个核细胞并加入抗体阻断,探讨外周血中细胞因子对CD3^+CD56^+NKT样细胞功能的影响,最后分析其功能变化与疾病进展的关联性。结果与正常对照组和胃溃疡患者组相比,胃癌患者外周血中CD3^+CD56^+NKT样细胞的比例无统计学差异;但其表达的INF-γ和TNF-α水平显著下降(P<0.05);体外刺激实验显示,胃癌患者外周血来源的TGF-β1可抑制CD3^+CD56^+NKT样细胞分泌INF-γ和TNF-α(P<0.05);晚期胃癌患者外周血中表达INF-γ和TNF-α的CD3^+CD56^+NKT样细胞水平显著低于早期胃癌患者(P<0.05)。结论胃癌患者外周血中的TGF-β1抑制了CD3^+CD56^+NKT样细胞的抗肿瘤功能,从而导致了胃癌的进展。

关键词：胃癌 CD3+CD56+NKT样细胞 TGF-β1 疾病进展

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具核梭杆菌研究进展

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陆军军医大学学报 2019年第19期41卷 1867-1872页

作者：毛旭虎童亚楠陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系临床微生物与免疫学教研室

具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,***)是口腔微生物群中常驻成员,并且可以与其宿主产生共生关系。具核梭杆菌能够引起多种机会性感染。最近的研究发现其感染与结直肠癌的发生、发展密切相关。现就具核梭杆菌与宿主的共生关系、作为... 详细信息

具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,***)是口腔微生物群中常驻成员,并且可以与其宿主产生共生关系。具核梭杆菌能够引起多种机会性感染。最近的研究发现其感染与结直肠癌的发生、发展密切相关。现就具核梭杆菌与宿主的共生关系、作为感染因子在疾病中的角色,以及促进肿瘤进程的作用等方面进行评述,并深入探讨目前对该菌的一些新见解和未来的研究方向。这些新观点希望可以帮助我们不断认识具核梭杆菌及其促进结直肠癌作用的新机制,为寻找具核梭杆菌诊断与治疗的新方法提供依据。

关键词：具核梭杆菌宿主感染与免疫结直肠癌

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金黄色葡萄球菌在动物和人机体中的T细胞应答新进展

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中国生物制品学杂志 2019年第1期32卷 100-105页

作者：曾江闽赵卓第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室&国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆400038

金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)是造成医院和社区获得性细菌感染的主要原因。在过去的研究中,抗金葡菌的特异性抗体反应占主导地位。最新的研究正逐渐认识到T细胞不同亚群共同参与由金葡菌所引起的免疫应答,起到保护机体的作用。本文综述... 详细信息

金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)是造成医院和社区获得性细菌感染的主要原因。在过去的研究中,抗金葡菌的特异性抗体反应占主导地位。最新的研究正逐渐认识到T细胞不同亚群共同参与由金葡菌所引起的免疫应答,起到保护机体的作用。本文综述了金葡菌在动物和人机体中T细胞应答的最新研究进展。

关键词：金黄色葡萄球菌 T细胞应答抗菌免疫机制疫苗接种实验动物

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超级细菌疫苗研究的挑战与策略

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第三军医大学学报 2019年第19期41卷 1823-1825,1827页

作者：邹全明曾浩陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系微生物与生化药学教研室国家免疫生物制品工程技术研究中心

超级细菌(superbugs)泛指那些对多种抗生素具有耐药性的细菌,专业术语是'多重耐药性细菌'。2017年,WHO列出严重威胁人类的12种耐药细菌清单,金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌在清单中分别位列G^+菌首... 详细信息

超级细菌(superbugs)泛指那些对多种抗生素具有耐药性的细菌,专业术语是'多重耐药性细菌'。2017年,WHO列出严重威胁人类的12种耐药细菌清单,金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌在清单中分别位列G^+菌首位和G^-菌前3位。因现在大部分的抗生素对它们已失去效力,全人类将面临难以承受的巨大挑战与威胁。疫苗是防控致病菌流行感染最佳的科学手段。我国科学家团队已研制国际首个靶标最多、效果最佳的金黄色葡萄球菌疫苗,正开展Ⅱ期临床试验。近20年来,欧美国家先后研发20余种超级细菌疫苗进行临床试验,但尚无一项成功。超级细菌疫苗研究面临巨大的挑战,如超级细菌致病机制不详,超级细菌疫苗如何在易感人群快速起效,超级细菌动物模型、临床流行病学基础数据和临床试验评价的关键技术及标准缺乏等均是目前超级细菌研究亟待解决的难题。我们建议今后的研究围绕以下几个方面进行:①建立保护性抗原表位大数据及高通量筛选新技术;②研究耐药菌疫苗快速起效机制及新技术;③开展超级细菌疫苗使用人群的免疫应答规律及特征研究;④建立成熟、稳定的超级细菌感染动物模型;⑤运用大数据、人工智能、基因组学等建立超级细菌流行病学大数据库和菌种资源库;⑥开展细菌疫苗的免疫保护机制及其核心指标的研究。

关键词：超级细菌耐药菌,疫苗挑战策略

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类鼻疽伯克霍尔德菌bopA基因敲除株的构建及生物学特征

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微生物学通报 2019年第2期46卷 233-242页

作者：卢晓雪胡治强梅国徽张雨胡语涵岳娟娟向阳毛旭虎陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系临床微生物与免疫学教研室重庆400038 陆军勤务学校门诊部重庆401331

【【背景】类鼻疽杆菌是一种能够引起人类疾病甚至死亡的胞内寄生菌,Ⅲ型分泌系统在该菌入侵上皮细胞、逃避宿主免疫以及毒力因子的分泌过程中发挥重要作用,其中bopA基因为TTSS-3基因编码的重要效应蛋白,在类鼻疽杆菌的免疫逃逸中发挥... 详细信息

【【背景】类鼻疽杆菌是一种能够引起人类疾病甚至死亡的胞内寄生菌,Ⅲ型分泌系统在该菌入侵上皮细胞、逃避宿主免疫以及毒力因子的分泌过程中发挥重要作用,其中bopA基因为TTSS-3基因编码的重要效应蛋白,在类鼻疽杆菌的免疫逃逸中发挥重要作用。【目的】构建类鼻疽杆菌bopA基因敲除菌株,并对其生物学特征进行初步研究。【方法】构建pK18mobSacB-ΔbopA自杀质粒,通过大肠杆菌S17-1λpair以接合的方式转入类鼻疽杆菌,利用同源重组敲除了bopA基因,并用蔗糖平板筛选出菌株,最后在细胞和动物水平检测敲除菌株的表型变化。【结果】构建了bopA敲除的类鼻疽菌株,并通过细胞和动物实验证实敲除bopA基因后,细菌的细胞侵袭和胞内存活以及体内定殖能力都显著降低。【结论】利用同源重组成功构建类鼻疽bopA基因敲除株,为深入研究该基因的作用靶点奠定了实验基础。

关键词：类鼻疽伯克霍尔德菌 bopA基因基因敲除生物学特征

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基于自主创新的产学研一体化生物技术制药人才培养实践

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西南师范大学学报（自然科学版） 2018年第3期43卷 171-174页

作者：赵卓邹全明郭刚曾浩吴超肖斌庄园张卫军罗萍孙红武第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室重庆400038

实施基于自主创新的产学研一体化药学人才培养实践,建立了基于自主创新与"产学研"一体化的创新教育新体系、生物技术制药学研究型教学学科平台及课程体系,显著提升了本学科教育水平.

关键词：生物技术制药自主创新产学研一体化

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肾上腺髓质素在幽门螺杆菌感染中的表达调控及其功能的初步研究

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第三军医大学学报 2018年第3期40卷 183-189页

作者：孔辉庄园毛方圆彭六生滕永生刘毓刚吕一品郭刚陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系微生物与生化药学教研室重庆400038

目的探讨肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)在幽门螺杆菌感染中的表达调控及其对CD3+T细胞增殖的影响。方法建立幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)感染C57小鼠及胃上皮细胞模型,运用定量PCR、免疫组织化学染色和Western blot检测ADM... 详细信息

目的探讨肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)在幽门螺杆菌感染中的表达调控及其对CD3+T细胞增殖的影响。方法建立幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)感染C57小鼠及胃上皮细胞模型,运用定量PCR、免疫组织化学染色和Western blot检测ADM的表达;并在细胞模型中探讨***感染诱导ADM上调的机制;利用ADM刺激CD3+T细胞,检测其对T细胞增殖的影响。结果 ***感染可诱导胃上皮细胞AGS和HGC-27上调ADM的表达,并具有时间和感染菌量依赖性(P<0.05);PI3K/AKT信号通路阻断可显著抑制***感染诱导的ADM上调表达(P<0.05);相对于未感染组,***感染小鼠胃组织中的ADM水平也显著增高;而相对于野生型全毒株,敲除cag A基因后,***感染诱导ADM上调的能力则显著下降(P<0.05);ADM能够以剂量依赖的方式诱导CD3+T细胞的增殖并促进IFN-γ的表达(P<0.05)。结论幽门螺杆菌感染可经PI3K/AKT信号诱导肾上腺髓质素的表达上调,后者则可能通过影响CD3+T细胞的增殖和分化而发挥免疫调节作用。

关键词：幽门螺杆菌肾上腺髓质素 PI3K/AKT信号通路 CD3+T细胞

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类鼻疽杆菌通过抑制自噬调控HepG2细胞胞内脂质代谢

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第三军医大学学报 2019年第18期41卷 1722-1729页

作者：唐梦灵胡治强袁思琪饶承龙张雨谢建平李倩毛旭虎西南大学生命科学学院三峡地区生态环境与生物资源国家重点实验室培育基地现代生物制药研究所重庆400715 陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系临床微生物及免疫学教研室重庆400038

目的探讨类鼻疽杆菌感染HepG2细胞后诱导的自噬抑制对胞内脂质代谢的调控作用。方法类鼻疽杆菌感染HepG2细胞6、12、24 h为感染组,以未感染组作为对照。激光共聚焦显微镜观测各组细胞内脂滴和GFP-自噬点的数量;定量试剂盒检测各组细胞... 详细信息

目的探讨类鼻疽杆菌感染HepG2细胞后诱导的自噬抑制对胞内脂质代谢的调控作用。方法类鼻疽杆菌感染HepG2细胞6、12、24 h为感染组,以未感染组作为对照。激光共聚焦显微镜观测各组细胞内脂滴和GFP-自噬点的数量;定量试剂盒检测各组细胞内甘油三酯及胆固醇水平;Western blot检测各组细胞中自噬相关蛋白LC3Ⅱ、p62表达水平。利用自噬抑制剂3-MA、Baf-A1以及自噬激活剂Rapa处理细胞,检测改变宿主细胞自噬水平后,对类鼻疽杆菌感染HepG2细胞后胞内脂质代谢的影响;外源加入游离脂肪酸三醋酸甘油酯,通过细菌胞内计数实验检测类鼻疽杆菌胞内存活情况。结果类鼻疽杆菌感染HepG2细胞6、12、24 h后,与未感染组比较,胞内脂滴数量增多,脂质成分甘油三酯和胆固醇水平也随感染时间延长逐渐升高,且在感染24 h后达到最高水平(P<0.01);自噬检测发现,与未感染组比较,LC3Ⅱ蛋白表达随感染时间逐渐下降,p62蛋白表达水平随感染时间逐渐蓄积,胞内自噬小体的数量也随感染时间逐渐减少,且感染24 h后数量最低(P<0.01),提示类鼻疽杆菌感染HepG2细胞后自噬受抑;使用自噬抑制剂3-MA、Baf-A1以及自噬激活剂Rapa处理细胞后,与对照组比较,抑制自噬导致胞内脂质蓄积加重(P<0.01),而激活自噬可以减轻胞内脂质的蓄积(P<0.01);此外,外源补充三醋酸甘油酯促进宿主细胞脂质代谢速率能明显降低类鼻疽杆菌胞内存活量(P<0.01)。结论类鼻疽杆菌感染HepG2细胞后,通过诱导自噬抑制调控HepG2细胞胞内脂质代谢。

关键词：类鼻疽杆菌 HepG2细胞自噬脂代谢

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人用疫苗佐剂及其免疫学机制研究现状

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免疫学杂志 2018年第9期34卷 811-817页

作者：喻吉林彩李海波孙红武陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院药学部重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)国家免疫制品工程技术研究中心暨陆军军医大学药学与检验医学系微生物与生化药学教研室重庆400038

疫苗佐剂能够提高机体对抗原的适应性免疫应答,在疫苗研发中具有重要的作用。目前,常用的铝佐剂、MF59乳剂佐剂、AS系列乳剂佐剂等几个为数不多的佐剂均是被美国或者欧盟批准。随着疫苗佐剂研究的不断深入,近年来国内外出现了一些具有... 详细信息

疫苗佐剂能够提高机体对抗原的适应性免疫应答,在疫苗研发中具有重要的作用。目前,常用的铝佐剂、MF59乳剂佐剂、AS系列乳剂佐剂等几个为数不多的佐剂均是被美国或者欧盟批准。随着疫苗佐剂研究的不断深入,近年来国内外出现了一些具有临床应用前景人用的佐剂。本文对临床批准的铝盐佐剂、MF59、AS系列及纳米佐剂等现状及其机制进行综述,为后期寻找并研制出具有我国自主知识产权的新型人用疫苗佐剂提供新思路和研究新策略。

关键词：人用疫苗佐剂免疫学机制纳米佐剂乳剂佐剂免疫刺激分子

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类鼻疽杆菌Ⅲ型分泌系统BPSS1617蛋白的重组表达及其抗体制备

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第三军医大学学报 2018年第18期40卷 1663-1667页

作者：吴利黎礼达胡艺黎元莉陈海朱雄胡治强马腾飞韩丹李倩曹刘素尹小毛毛旭虎海南省三亚市人民医院检验科海南三亚572000 陆军军医大学(第三军医大学)药学与检验医学系临床微生物及免疫学教研室重庆400038

目的构建重组表达类鼻疽杆菌Ⅲ型分泌系统蛋白BPSS1617,并制备其抗体。方法采用PCR扩增BPSS1617全长序列,克隆至原核表达载体p ET-22b,将重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,免疫新西兰兔,制备其多克隆抗体,并通过Weste... 详细信息

目的构建重组表达类鼻疽杆菌Ⅲ型分泌系统蛋白BPSS1617,并制备其抗体。方法采用PCR扩增BPSS1617全长序列,克隆至原核表达载体p ET-22b,将重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,免疫新西兰兔,制备其多克隆抗体,并通过Western blot、免疫荧光和ELISA检测抗体的特异性,并分析该蛋白在类鼻疽杆菌中的亚细胞定位。结果成功扩增类鼻疽杆菌BPC006株基因组中的BPSS1617基因;酶切和测序验证重组表达质粒p ET-22b-BPSS1617构建成功;经IPTG诱导表达、包涵体洗涤、纯化以及变性复性,成功获得纯度>95%,分子量为25×103的目的蛋白;将纯化的BPSS1617重组蛋白免疫新西兰兔,获得抗BPSS1617蛋白多克隆抗体,经实验验证其特异性良好;同时BPSS1617蛋白主要定位于类鼻疽杆菌的细胞质中。结论成功构建、表达、纯化获得BPSS1617蛋白,并成功制备了其特异性多克隆抗体,并且该蛋白定位于类鼻疽杆菌的细胞质中。

关键词：类鼻疽杆菌蛋白表达抗体制备与鉴定

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