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中国免疫学会第十届全国免疫学学术大会

作者：刘开云张卫军付强杜方川徐丽敏中国人民解放军第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室国家免疫制品技术工程研究中心

背景：单磷酸脂质A (MPLA)来自沙门菌Re595脂质A,LTs63k是大肠杆菌不耐热肠毒素无毒突变体,它们在保留了强有力的黏膜刺激的同时且降低了毒性.SpaP是变异链球菌的外膜蛋白,对龋齿的免疫保护效果已被广泛研究.目前还未有通过MPLA和LTs63... 详细信息

背景：单磷酸脂质A (MPLA)来自沙门菌Re595脂质A,LTs63k是大肠杆菌不耐热肠毒素无毒突变体,它们在保留了强有力的黏膜刺激的同时且降低了毒性.SpaP是变异链球菌的外膜蛋白,对龋齿的免疫保护效果已被广泛研究.目前还未有通过MPLA和LTs63k联合辅助SpaP抗原来增强龋齿免疫保护效果的文献报道.

关键词： MPLA LTs63k SpaP 变异链球菌

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以科研优势带动研究型教学的《生物技术制药》教学改革

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西南师范大学学报（自然科学版） 2014年第8期39卷 155-157页

作者：赵卓郭刚吴超曾浩邹全明第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室重庆400038

当前,我国的生物技术制药领域具有自主创新能力的复合型专业人才紧缺,高等教育要以市场需求为导向培养研究型学生.传统教学形式已不能满足研究型人才的培养需求,笔者所在单位借助国家免疫生物制品工程技术研究中心的科研平台,在《生物... 详细信息

当前,我国的生物技术制药领域具有自主创新能力的复合型专业人才紧缺,高等教育要以市场需求为导向培养研究型学生.传统教学形式已不能满足研究型人才的培养需求,笔者所在单位借助国家免疫生物制品工程技术研究中心的科研平台,在《生物技术制药》课程实施教学及考核两大环节的教学改革,获得了一些教学心得,力争能开辟出一条适合现代生物技术制药课程的研究型教学改革之路.

关键词：生物技术制药研究型教学

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幽门螺杆菌黏附素A的原核表达、纯化及其结晶条件搜索

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中国生物制品学杂志 2014年第3期27卷 325-329页

作者：赵祥徐欢张欣熊昌辉马贤纵安家昆章金勇第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室重庆400038 第三军医大学学员旅15队重庆400038

目的原核表达、纯化幽门螺杆菌（Helicobacterpylori，***）黏附素A（麒pyloriadhesinA，HpaA），并初步搜索其结晶条件。方法采用TMHMM和SignalP．4．1软件预测HpaA蛋白中的跨膜序列和信号肽序列，根据GenBank中登录的编码HpaA的基因序... 详细信息

目的原核表达、纯化幽门螺杆菌（Helicobacterpylori，***）黏附素A（麒pyloriadhesinA，HpaA），并初步搜索其结晶条件。方法采用TMHMM和SignalP．4．1软件预测HpaA蛋白中的跨膜序列和信号肽序列，根据GenBank中登录的编码HpaA的基因序列hp0797去掉预测出的信号肽序列后设计引物，以***标准株26695基因组为模板，PCR扩增编码HpaA的基因序列，插入原核表达载体pET-22b，构建重组表达质粒pET-22b-HpaA，转化大肠埃希菌（Ecoil）BL21（DE3），IPTG25℃诱导表达，表达的重组蛋白经亲和层析、阴离子交换层析和分子筛层析进行纯化。将纯化产物浓缩至10mg／ml，采用结晶搜索试剂盒，通过悬滴汽相扩散法搜索HpaA的结晶条件，并在此基础上配制条件进行优化。结果去掉序列中编码信号肽区域或跨膜结构域的密码子，选择HpaA的36-260位氨基酸进行克隆，构建的重组原核表达质粒pET．22b-HpaA经双酶切及测序鉴定，证明构建正确；表达的重组蛋白HpaA相对分子质量约27000，表达量约占菌体总蛋白的10％以上，主要以可溶形式表达，纯化后的纯度可达99％以上。在多种条件下，均有结晶生长，晶体多为薄片状、针状或簇状，在20％PEG3350，0．1mol／LHEPES（pH7．0）条件下，晶体形状类似长方体，外形有所改善。结论成功表达了HpaA蛋白，初步掌握其结晶条件，为下一步晶体结构学的研究及其在***感染与致病中的作用机制奠定了基础。

关键词：幽门螺杆菌黏附素原核细胞基因表达晶体

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奥马珠单抗治疗慢性特发性荨麻疹荟萃分析

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现代医药卫生 2015年第17期31卷 2578-2582页

作者：孙康悦李建陈晓红中南大学湘雅医学院中南大学湘雅医学院检验系临床微生物学免疫学教研室湖南长沙410013 第三军医大学药学系药理学教研室重庆400038

目的系统荟萃分析奥马珠单克隆抗体(单抗)治疗慢性特发性荨麻疹的疗效与安全性。方法采用Pub Med数据库、Cochrane图书馆临床对照试验数据库、中国生物医学文献数据库、中国知网全文数据库及万方科技期刊全文数据库等收集文献,研究文献... 详细信息

目的系统荟萃分析奥马珠单克隆抗体(单抗)治疗慢性特发性荨麻疹的疗效与安全性。方法采用Pub Med数据库、Cochrane图书馆临床对照试验数据库、中国生物医学文献数据库、中国知网全文数据库及万方科技期刊全文数据库等收集文献,研究文献为奥马珠单抗治疗慢性特发性荨麻疹的随机双盲对照试验,观察对象为年龄大于12岁,经抗H1受体拮抗剂治疗未达到满意效果的慢性特发性荨麻疹患者。应用Rev Man5.0.24软件对数据进行meta分析,评价奥马珠单抗的疗效及安全性。结果共纳入4项随机双盲对照试验,1 128例患者。各组7 d荨麻疹活动性评分(UAS7)<6分的病例数比较:75 mg奥马珠单抗治疗组优于安慰剂对照组,差异有统计学意义[相对危险度(RR)=1.73,95%可信区间(95%CI):1.10~2.71,P=0.020],300 mg奥马珠单抗治疗组优于75 mg奥马珠单抗治疗组,差异有统计学意义(RR=0.45,95%CI:0.33~0.60,P=0.001);各组治疗后UAS7降低值比较:75 mg奥马珠单抗治疗组优于安慰剂对照组,差异有统计学意义[均方差(MD)=5.03,95%CI:1.72~8.34,P=0.003],300 mg奥马珠单抗治疗组优于75 mg奥马珠单抗治疗组,差异有统计学意义(MD=-7.73,95%CI:-11.15^-4.30,P=0.001);各组1周瘙痒严重程度评分比较:75 mg奥马珠单抗治疗组优于安慰剂对照组,差异有统计学意义(MD=1.75,95%CI:0.55~2.95,P=0.004),300 mg奥马珠单抗治疗组优于75 mg奥马珠单抗治疗组,差异有统计学意义(MD=-3.35,95%CI:-4.97^-1.73,P=0.001)。300 mg奥马珠单抗治疗组总的不良反应和严重不良反应发生情况与安慰剂对照组比较,差异均无统计学意义(RR=1.07、0.39,95%CI:0.97~1.18、0.39~1.38,P=0.200、0.340)。75 mg奥马珠单抗治疗组总的不良反应发生情况与300 mg奥马珠单抗治疗组比较,差异也无统计学意义[RR=0.91,95%CI:0.78~1.06,P=0.240]。结论慢性特发性荨麻疹患者在常规治疗未奏效时加用奥马珠单抗治疗可改善疗效,且安全性高。

关键词：抗体,单克隆/治疗应用荨麻疹/药物疗法治疗结果 Meta分析奥马珠单抗

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B淋巴细胞在胃癌中的分布、表型及与胃癌进展相关性初步研究

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免疫学杂志 2014年第12期30卷 1077-1081页

作者：李文华庄园彭六生程平吕一品毛方圆王婷婷陈娜赵永亮余佩武邹全明第三军医大学药学院微生物与生化药学教研室暨国家免疫生物制品工程研究中心重庆400038 西南医院普外科

目的分析胃癌患者与健康人外周血、胃癌组织及正常组织中的B淋巴细胞(B细胞)的分布情况以及胃癌微环境中B细胞的表型特征;探讨胃癌组织中浸润B细胞与胃癌患者临床分期的相关性。方法采用流式细胞术检测并分析胃癌患者外周血中以及胃癌... 详细信息

目的分析胃癌患者与健康人外周血、胃癌组织及正常组织中的B淋巴细胞(B细胞)的分布情况以及胃癌微环境中B细胞的表型特征;探讨胃癌组织中浸润B细胞与胃癌患者临床分期的相关性。方法采用流式细胞术检测并分析胃癌患者外周血中以及胃癌组织中CD20+B细胞的频率以及B细胞在胃癌微环境中的表型;同时采用免疫组化染色技术检测B细胞在组织中的浸润情况并分析胃癌组织中B细胞的数量与胃癌患者临床分期的相关性。结果在胃癌患者、健康人外周血以及胃癌组织与正常组织中,CD20+B细胞的频率均无显著差异(P>0.05);与胃癌患者正常组织相比,胃癌组织中CD20+B细胞数量显著增加,具有显著统计学差异(P<0.01)。表型分析显示胃癌组织中B细胞表达Ig D、Ig M、Ig G,高表达CD40、HLA-DR、HLA-ABC,低表达CD80、CD86。此外,与晚期胃癌相比,早期胃癌肿瘤组织中浸润的CD20+B细胞数显著增加(P<0.01)。结论 B细胞在胃癌微环境中浸润显著增加,其在早期胃癌患者肿瘤组织中的浸润数目显著多于晚期胃癌患者,提示B细胞在胃癌进展中可能发挥一定的免疫调控作用。

关键词：胃癌 B淋巴细胞肿瘤进展

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超顺磁性氧化铁(SPIO)与多聚赖氨酸(PLL)纳米粒的制备、结构验证及其空间结构表征

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复旦学报（医学版） 2014年第3期41卷 309-314,327页

作者：李易文曦琳孙红武葛晓东李妹玲文明重庆医科大学附属第一医院放射科重庆400016 第三军医大学药学院微生物及生化药学教研室-国家免疫制品工程技术研究中心重庆400038

目的探讨葡聚糖修饰的超顺磁性氧化铁（super-paramagnetic iron oxide,SPIO）与多聚赖氨酸（polylysine,PLL）纳米粒的制备及其结构验证和空间结构表征。方法在共沉淀法制备葡聚糖修饰的SPIO基础上,加入PLL制备出一种新的SPIO-PLL纳... 详细信息

目的探讨葡聚糖修饰的超顺磁性氧化铁（super-paramagnetic iron oxide,SPIO）与多聚赖氨酸（polylysine,PLL）纳米粒的制备及其结构验证和空间结构表征。方法在共沉淀法制备葡聚糖修饰的SPIO基础上,加入PLL制备出一种新的SPIO-PLL纳米粒,利用粒度电位分析仪、透射电镜（transmission electron microscopy,TEM）对SPIO-PLL的粒径、电位、形貌学进行检测;高效液相凝胶色谱法（gel permeation chromatography,GPC）、红外光谱（fourier transform infrared spectroscopy,FTIR）及核磁共振氢谱法（1HNMR）对SPIOPLL连接成功与否进行验证;高精度的原子力显微镜（atomic force microscope,AFM）对SPIO-PLL的结构、形态及连接状态进行空间结构表征。结果粒度电位分析和TEM结果显示SPIO-PLL的平均粒径为7.37 nm,平均电位为13.6 mV;GPC、FTIR及1HNMR结果显示SPIO及PLL之间已经成功连接;高精度AFM清楚显示出SPIO与PLL之间以亚胺键形式稳定相连。结论成功制备出一种性质稳定、粒径较小的新型SPIO-PLL纳米粒,这将对随后的肿瘤特异性探针制备奠定一定的基础。

关键词：多聚赖氨酸(PLL) 纳米粒超顺磁性氧化铁(SPIO) 结构表征

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幽门螺杆菌感染的慢性胃炎与凋亡基因的相关性研究

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重庆医学 2014年第29期43卷 3858-3860页

作者：兰春慧黎博胜常辉左钱飞廖盛涛邹全明陈东风第三军医大学大坪医院野战外科研究所消化内科重庆400042 第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室重庆400038 第三军医大学学员旅五营重庆400038

目的探讨幽门螺杆菌(HP)感染相关胃炎程度与胃黏膜细胞凋亡基因表达的相关性。方法将2013年11～12月大坪医院消化内镜中心45例慢性胃炎患者纳入研究,快速尿素酶实验和13 C-呼气实验检测HP感染情况,病理分析HP感染部位胃炎严重程度,实时... 详细信息

目的探讨幽门螺杆菌(HP)感染相关胃炎程度与胃黏膜细胞凋亡基因表达的相关性。方法将2013年11～12月大坪医院消化内镜中心45例慢性胃炎患者纳入研究,快速尿素酶实验和13 C-呼气实验检测HP感染情况,病理分析HP感染部位胃炎严重程度,实时定量PCR(qRT-PCR)法检测HP感染部位胃黏膜组织和无HP感染的胃黏膜组织中凋亡相关基因Bax、Bak、Bcl-2的表达,Person相关分析HP感染的慢性胃炎程度与凋亡基因表达的相关性。结果 45例患者13 C-呼气实验和胃窦黏膜快速尿素酶实验均阳性,提示HP感染。病理结果显示45例(100%)患者均为慢性胃窦胃炎,其中28例(62.2%)为轻度,16例(35.6%)为中度,1例(2.0%)为重度;9例(20.0%)肠化生,5例(11.1%)低级别上皮内瘤变。45例患者胃体黏膜尿素酶实验阴性,提示无HP感染,其中6例胃体组织显示轻度慢性炎症(13.3%),39例无炎症(86.7%);无肠化生及上皮内瘤变。qRT-PCR结果显示HP感染胃黏膜中Bax mRNA的表达明显高于HP未感染胃黏膜患者(P<0.01)且与胃炎程度呈明显正相关(P<0.01),而Bak和Bcl-2的表达在两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HP感染的慢性胃炎程度与胃黏膜细胞凋亡呈正相关,提示HP感染可能导致胃上皮细胞中Bax基因的表达从而促进细胞凋亡。

关键词：螺杆菌 ,幽门胃炎细胞凋亡基因

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肿瘤相关中性粒细胞在胃癌中的分布、表型及其免疫抑制功能研究

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第三军医大学学报 2014年第6期36卷 587-591页

作者：王婷婷庄园陈娜彭六生程平李文华赵永亮余佩武邹全明第三军医大学:药学系微生物与生化药学教研室暨国家免疫生物制品工程技术研究中心重庆400038 西南医院普通外科重庆400038

目的分析胃癌患者外周血中及不同类型胃组织中的中性粒细胞的分布情况,并研究其表型,探讨胃癌组织培养上清诱导的条件性中性粒细胞对CD3+T细胞功能的影响。方法采用流式细胞术检测并分析42例胃癌患者的胃癌组织、癌旁组织、正常胃组织... 详细信息

目的分析胃癌患者外周血中及不同类型胃组织中的中性粒细胞的分布情况,并研究其表型,探讨胃癌组织培养上清诱导的条件性中性粒细胞对CD3+T细胞功能的影响。方法采用流式细胞术检测并分析42例胃癌患者的胃癌组织、癌旁组织、正常胃组织及外周血中CD66b+中性粒细胞的比例及表型,同时采用免疫组织化学染色技术针对中性粒细胞表面标志CD15原位分析不同类型胃组织石蜡切片中中性粒细胞的浸润情况,最后用胃癌组织培养上清诱导的条件性中性粒细胞与CD3+T细胞共培养,检测其对T细胞增殖能力的影响。结果胃癌患者外周血中性粒细胞比例明显高于健康成人(P<0.01),胃癌组织中的中性粒细胞的频率也高于癌旁组织(P<0.05)和正常胃组织(P<0.05);在胃癌患者外周血及不同类型胃组织浸润的中性粒细胞可能主要为成熟的分叶核粒细胞;相较于正常胃组织,胃癌组织培养上清诱导的条件性中性粒细胞能显著抑制CD3+T细胞增殖(P<0.01)。结论中性粒细胞在胃癌微环境中浸润增高,其可能通过抑制CD3+T细胞增殖而促进胃癌进展。

关键词：胃癌中性粒细胞 CD3+T细胞

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肥大细胞在胃癌患者中分布及其免疫抑制作用的研究

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免疫学杂志 2014年第1期30卷 1-5页

作者：陈娜庄园王婷婷彭六生程平李文华赵永亮余佩武邹全明第三军医大学医学检验系(药学院)临床微生物与免疫学教研室暨国家免疫生物制品工程研究中心重庆400038

目的分析胃癌患者与正常人外周血中及胃癌患者不同类型组织中的肥大细胞的分布情况;研究肥大细胞在胃癌微环境中的免疫抑制表型及对肿瘤细胞促炎的抑制作用。方法采用流式细胞术检测,分析56例患者的外周血、肿瘤组织、癌旁组织、非肿瘤... 详细信息

目的分析胃癌患者与正常人外周血中及胃癌患者不同类型组织中的肥大细胞的分布情况;研究肥大细胞在胃癌微环境中的免疫抑制表型及对肿瘤细胞促炎的抑制作用。方法采用流式细胞术检测,分析56例患者的外周血、肿瘤组织、癌旁组织、非肿瘤正常组织的肥大细胞占CD45+总白细胞的比例,以及其在各组织中共刺激分子HLA-DR的表达情况;同时采用免疫组织化学染色技术针对肥大细胞特异性标志胰蛋白酶(tryptase)原位分析其在各组织中的浸润情况;最后通过人肥大细胞系HMC-1与胃癌细胞系BGC-823共培养,探讨肥大细胞抑制肿瘤细胞分泌促炎因子TNF-ɑ的作用。结果正常人和胃癌患者外周血中肥大细胞的比例没有明显差异(P>0.05),胃癌组织内肥大细胞的比例明显高于癌旁组织(P<0.05)和正常组织(P<0.01);相对于癌旁组织和非肿瘤正常组织,胃癌组织中浸润的肥大细胞显著低表达HLA-DR;HMC-1细胞能抑制BGC-823细胞分泌促炎症因子TNF-α。结论肥大细胞在胃癌微环境中特异性浸润增高,且具有一定免疫抑制表型,提示可能具有抑制胃癌肿瘤细胞促炎症作用的功能。

关键词：胃癌肥大细胞肿瘤细胞

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鲍曼不动杆菌感染动物模型研究进展

鲍曼不动杆菌感染动物模型研究进展

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中华医学会2014全国微生物学与免疫学学术年会

作者：杨赟曾浩邹全明第三军医大学微生物与生化药学教研室

鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)是一种常见的非发酵革兰阴性杆菌,在自然界中广泛存在,可正常定植于人体皮肤表面及腔道内,为条件致病菌,主要可导致肺炎、血流感染、皮肤及软组织感染、心内膜炎以及脑膜炎等。随着其耐药菌株检... 详细信息

鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)是一种常见的非发酵革兰阴性杆菌,在自然界中广泛存在,可正常定植于人体皮肤表面及腔道内,为条件致病菌,主要可导致肺炎、血流感染、皮肤及软组织感染、心内膜炎以及脑膜炎等。随着其耐药菌株检出率的逐年增高,鲍曼不动杆菌在全球范围内已成为一种重要的病原菌,据美国NHSN(National Healthcare Safety Network)的报告,

关键词：鲍曼不动杆菌感染动物模型检出率

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