检索结果-内蒙古大学图书馆

陆军军医大学学报 2025年第8期47卷 794-806页

作者：杨婷刘鑫蒋青松王宇洁时新惠杨雄刘思佳李小丽重庆医科大学药学院药理学系重庆高校生物化学与分子药理学重点实验室重庆陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院临床研究中心重庆不详

目的研究转录因子EB(transcription factor EB,TFEB)在内毒素耐受巨噬细胞中的作用。方法采用脂多糖(LPS)诱导建立内毒素耐受细胞模型,将RAW264.7细胞分为空白组(Medium组)、5ng/mLLPS组(LPS5组)、100ng/mLLPS组(LPS100组)、5ng/mLLPS+100ng/mLLPS组(Tolerance组)。采用ELISA法检测炎症因子TNF-α和IL-6的释放水平;Western blot和免疫荧光法检测自噬相关蛋白LC3和P62以及TFEB在细胞质和细胞核中的分布;通过慢病毒过表达TFEB或siRNA敲低TFEB后,观察耐受细胞的自噬水平和细菌清除能力的变化。结果与LPS 100组相比,Tolerance组细胞炎症因子TNF-α和IL-6的释放水平以及细菌清除能力显著降低(P<0.01);LC3水平降低,P62水平升高,细胞质和细胞核中TFEB的水平均显著降低(P<0.01);过表达TFEB可显著上调Tolerance组细胞中LC3水平,降低P62水平,并增强细菌清除能力(P<0.01)。siRNA敲低TFEB对Tolerance组LC3和P62水平以及细菌清除能力无明显影响。结论过表达TFEB能恢复内毒素耐受细胞的自噬功能,增强细菌清除能力,从而改善脓毒症的免疫抑制状态,有望成为脓毒症防治的潜在靶点。

关键词：脓毒症免疫抑制内毒素耐受转录因子EB 自噬

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青蒿琥酯对多囊卵巢综合征模型小鼠的治疗作用及机制研究

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陆军军医大学学报 2025年第3期47卷 193-204页

作者：王雪玲钟佩伶赵志鹏陈飞刘鑫刘思佳袁烈方路姚千弋杨雄刘超成嘉坤蔡永青李小丽李维宏重庆医科大学附属第一医院生殖医学中心重庆重庆医科大学重庆高校生物化学与分子药理学重点实验室重庆重庆医科大学药学院药理系重庆曲靖市第一人民医院病理科云南曲靖达州市中西医结合医院药学科四川达州陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院临床研究中心重庆陆军特色医学中心(第三军医大学大坪医院)药剂科重庆

目的观察青蒿琥酯(artesunate,AS)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)模型小鼠的治疗作用,并对其作用机制进行初步探讨。方法25只雌性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为(n=5):对照组(Control组)、模型组(PCOS组)、青蒿... 详细信息

目的观察青蒿琥酯(artesunate,AS)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)模型小鼠的治疗作用,并对其作用机制进行初步探讨。方法25只雌性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为(n=5):对照组(Control组)、模型组(PCOS组)、青蒿琥酯低剂量组(AS15组)、青蒿琥酯高剂量组(AS30组)和二甲双胍组(metformin,Met组)。除Control组外,其余各组小鼠皮下注射脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA,60 mg/kg)并给予高脂饲料21 d以构建PCOS模型,AS组腹腔分别注射15和30 mg/kg剂量的青蒿琥酯,Met组灌胃给予200 mg/kg剂量的二甲双胍,每日1次,持续6周。采用ELISA法检测小鼠血清睾酮(testosterone,T)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、卵泡刺激水平(follicle-stimulating hormone,FSH),并计算LH/FSH比值;采用全自动生化仪检测小鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、甘油三酯(triglyceride,TG)和总胆固醇(total cholesterol,TC)水平,并计算胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR);采用HE染色观察小鼠动情周期,以及卵巢、子宫组织病理形态改变;采用免疫荧光染色观察小鼠卵巢组织中p-eIF2α、ATF4、CHOP蛋白表达情况。体外,使用100μmol/L DHEA诱导人颗粒细胞瘤样细胞系KGN细胞模拟PCOS的高雄激素环境,以5和10μg/mL浓度的AS分别处理24 h后,Western blot检测内质网应激信号通路蛋白表达情况。结果与Control组相比,PCOS组小鼠动情周期紊乱,卵巢出现多囊样改变,血清T、LH/FSH比值显著升高(P<0.05);代谢方面,PCOS小鼠HOMA-IR、TC、TG水平明显升高(P<0.01);PCOS小鼠卵巢颗粒细胞和KGN细胞中p-eIF2α、ATF4、CHOP表达增加(P<0.05)。而与PCOS组相比,AS各剂量组小鼠卵巢和子宫病理形态改变显著改善,血清T、LH/FSH比值也明显降低(P<0.05);代谢方面,AS各剂量组小鼠HOMA-IR、TC、TG水平明显降低(P<0.05);AS各剂量组小鼠卵巢颗粒细胞和KGN细胞中p-eIF2α、ATF4、CHOP表达降低(P<0.05)。结论AS可显著改善PCOS小鼠的糖脂代谢异常和生殖功能,其作用机制可能是通过抑制PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路缓解内质网应激。

关键词：青蒿琥酯多囊卵巢综合征生殖功能糖脂代谢内质网应激

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异甘草酸镁对小鼠放射性肺纤维化的改善作用及其机制的初步研究

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中国药理学通报 2017年第2期33卷 201-206页

作者：张攀刘涛王芳芹阳群芳陈晓红第三军医大学药学系药理学教研室重庆400038

目的探讨异甘草酸镁(magnesium isoglycyrrhizinate,MgIG)对小鼠放射性肺纤维化的影响及其机制。方法 50只♀C57BL/6小鼠随机分为对照组(Control组)、辐照组(RT组)、异甘草酸镁组(MgIG组)、异甘草酸镁治疗组(RT+MgIG组)和地塞米松治疗组... 详细信息

目的探讨异甘草酸镁(magnesium isoglycyrrhizinate,MgIG)对小鼠放射性肺纤维化的影响及其机制。方法 50只♀C57BL/6小鼠随机分为对照组(Control组)、辐照组(RT组)、异甘草酸镁组(MgIG组)、异甘草酸镁治疗组(RT+MgIG组)和地塞米松治疗组(RT+DXM组),每组10只。除Control组和MgIG组外,其余各组小鼠均给予15Gy^(60)Coγ射线全胸单次照射。各组小鼠于辐照前2 h及辐照后每日给药:MgIG组和RT+MgIG组腹腔注射MgIG(100 mg·kg^(-1));Control组和RT组腹腔注射生理盐水(20 m L·kg^(-1));RT+DXM组腹腔注射DXM(0.5 mg·kg^(-1))。辐照后12周取材,行HE染色及Masson染色观察小鼠肺泡炎和肺纤维程度,免疫组化检测肺组织Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白表达。结果 RT组小鼠肺泡炎和肺纤维化程度及CollagenⅠ、CollagenⅢ、TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达较Control组明显增强(P<0.05),而RT+MgIG组与RT+DXM组肺泡炎、肺纤维化程度及蛋白表达相较于RT组明显降低(P<0.05)。结论异甘草酸镁可有效改善小鼠放射性肺纤维化,其机制可能与调控TGF-β信号通路有关。

关键词：异甘草酸镁放射性肺纤维化 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原转化生长因子β/Smad信号通路小鼠

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植物来源抗菌增敏剂的研究进展

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中国新药杂志 2014年第11期23卷 1285-1289页

作者：覃容欣周红第三军医大学药学系药理学教研室

由于抗菌药物的广泛使用甚至滥用导致细菌耐药性日益严重,因此研究新的抗菌策略,寻找新的抗菌药物具有重要意义,其中间接抗菌策略即通过逆转细菌耐药性以提高现有抗菌药物作用的抗菌增敏剂是目前研究的焦点与热点。抗菌增敏剂具有逆转... 详细信息

由于抗菌药物的广泛使用甚至滥用导致细菌耐药性日益严重,因此研究新的抗菌策略,寻找新的抗菌药物具有重要意义,其中间接抗菌策略即通过逆转细菌耐药性以提高现有抗菌药物作用的抗菌增敏剂是目前研究的焦点与热点。抗菌增敏剂具有逆转细菌耐药性、减少联用抗生素使用量和耐药菌株不易产生的优点,植物是此类药物的主要来源。本文综述了植物来源抗菌增敏剂的研究现状,以期为新型抗菌增敏剂的发现提供研究思路。

关键词：抗菌增敏剂天然植物细菌耐药

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CpG ODN核心序列改变对其生物学活性的影响

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中国病理生理杂志 2008年第10期24卷 2025-2028页

作者：丁国富李斌吴翀罗平李军周红第三军医大学药学院药理学教研室重庆400038

目的:观察含CpG基序寡核苷酸(CpG ODN)核心序列改变后对其细胞内化和免疫活性的影响。方法:人工合成6-FAM标记的CpG ODN,将其核心序列CpG二核苷酸的胞嘧啶(C)甲基化(mCpG ODN)、胞嘧啶(C)和鸟嘌呤(G)顺序颠倒(GpC ODN),在RAW264.7细胞... 详细信息

目的:观察含CpG基序寡核苷酸(CpG ODN)核心序列改变后对其细胞内化和免疫活性的影响。方法:人工合成6-FAM标记的CpG ODN,将其核心序列CpG二核苷酸的胞嘧啶(C)甲基化(mCpG ODN)、胞嘧啶(C)和鸟嘌呤(G)顺序颠倒(GpC ODN),在RAW264.7细胞培养体系中加入不同的ODN后,应用流式细胞术和激光共聚焦显微镜观察ODN的细胞内化与定位,ELISA法检测ODN对细胞释放TNF-α的影响。结果:CpG ODN核心序列的改变不影响其在细胞内的聚集,激光共聚焦术检测发现6-FAM ODN被内化进入RAW264.7细胞,绿色荧光小体呈散点状分布于细胞中;胞嘧啶甲基化后,mCpG ODN促细胞释放TNF-α的作用显著降低(P<0.01),仅保留部分刺激活性,但是GpC ODN几乎丧失了促细胞释放TNF-α的作用。结论:CG序列对CpG ODN的生物活性至关重要,胞嘧啶C甲基化不影响CpG ODN在细胞内的定位,但能部分抑制CpG ODN的免疫活性。

关键词： CpG寡核苷酸甲基化受体,Toll样

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人TLR9真核表达载体在HEK293T细胞中的表达

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第三军医大学学报 2008年第13期30卷 1246-1248页

作者：丁国富吴翀蒋为薇李军罗平周红第三军医大学药学院药理学教研室重庆400038

目的构建人Toll样受体9(TLR9)全长序列与绿色荧光蛋白GFP的重组质粒,观察融合蛋白在HEK293T细胞内表达并检测其应答CpG DNA的能力。方法PCR法扩增TLR9全长,限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ双酶切绿色荧光真核表达质粒pcDNA3/GFP和TLR9全长,... 详细信息

目的构建人Toll样受体9(TLR9)全长序列与绿色荧光蛋白GFP的重组质粒,观察融合蛋白在HEK293T细胞内表达并检测其应答CpG DNA的能力。方法PCR法扩增TLR9全长,限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ双酶切绿色荧光真核表达质粒pcDNA3/GFP和TLR9全长,构建重组质粒pcDNA3-TLR9/GFP,脂质体转染人胚肾293T细胞(HEK293T),荧光显微镜下观察绿色荧光融合蛋白在细胞内的表达与分布;将重组质粒与NF-κB荧光素酶报告质粒pGL2-luc共转染HEK293T细胞,CpG DNA(10mg/L)刺激后,化学发光法检测细胞内荧光素酶活性。结果成功构建pcDNA3-TLR9/GFP质粒,经酶切及测序分析证实载体构建正确;转染细胞后,在荧光显微镜下观察到TLR9/GFP融合蛋白大量表达;重组质粒与pGL2-luc共转染细胞,应用荧光报告系统检测显示,CpG DNA刺激后荧光素酶活性显著高于生理盐水对照组(P<0.01)。结论重组质粒pcDNA3-TLR9/GFP在HEK293T细胞中表达的TLR9/GFP绿色荧光融合蛋白,能够识别CpG DNA并诱导增加胞内NF-κB转录活性。

关键词： Toll样受体9 克隆真核表达核转录因子-κB 荧光素酶

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儿茶素类化合物增强β-内酰胺类抗生素抗MRSA的作用

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中国抗生素杂志 2012年第5期37卷 397-400,I0001-I0004页

作者：肖康康覃容欣李斌李小丽彭伟周红重庆市第三军医大学药学院药理学教研室重庆400038

目的确定儿茶素类化合物——儿茶素(C)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、表没食子酸儿茶素(EGC)联合增强β-内酰胺类抗生素对耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)产生抗菌增敏作用的最佳配伍比并对其可能的抗菌增敏作用的机制进行初步探讨。方... 详细信息

目的确定儿茶素类化合物——儿茶素(C)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、表没食子酸儿茶素(EGC)联合增强β-内酰胺类抗生素对耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)产生抗菌增敏作用的最佳配伍比并对其可能的抗菌增敏作用的机制进行初步探讨。方法以微量稀释法测定C、ECG、EGC和几种β-内酰胺类抗生素单独对MRSA WHO-2菌株的最小抑菌浓度(MIC),以棋盘法测定C、ECG和EGC联合β-内酰胺类抗生素后对MRSA WHO-2菌株和25株MRSA临床分离株的最小抑菌浓度(MIC);以荧光分光光度计法和激光共聚焦扫描显微镜法观察C、ECG、EGC单独、两两联合、三者联合后对柔红霉素在MRSA WHO-2菌株菌体聚集的影响。结果 C、ECG、EGC三者联用时可以增强苯唑西林抗MRSA WHO-2菌株的能力,其中C、ECG、EGC按照1:1:1的比例配伍后可以取得最佳的抗菌增敏效果,后续实验选用此药物配伍。药物总浓度为16μg/mL的C2E(C+ECG+EGC)与苯唑西林、头孢唑林、氨苄西林联合时对于MRSA WHO-2菌株可产生抗菌增敏作用,对应的FIC指数均为0.38,同样浓度的C2E联合苯唑西林、氨苄西林、头孢唑林、头孢吡肟、泰能后对25株MRSA临床分离株中可产生抗菌增敏作用的菌株数所占比例分别为80%、76%、88%、80%、92%,说明C2E在MRSA临床分离株中同样存在广泛的抗菌增敏作用。经过均为16μg/mL的C、ECG、EGC三者联合处理后,MRSA WHO-2菌株菌体内的柔红霉素在荧光分光光度计下测得的A值为9.26±0.16,大于单独或两两联合处理时的A值(P<0.05),提示三者联合处理后增强了柔红霉素在MRSA WHO-2菌体内的聚集;激光共聚焦扫描显微镜法也显示出相同的结果。结论 C、ECG、EGC三者联合后可显著增强β-内酰胺类抗生素抗MRSA的作用,其最佳配伍比为1:1:1。抗菌增敏作用机制可能与其增加药物在菌体内的聚集有关。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌儿茶素表没食子儿茶素表儿茶素没食子酸酯抗菌增敏作用 β-内酰胺类抗生素

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CpG ODN107增强人鼻咽癌CNE-2细胞对β射线照射的敏感性

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中国肿瘤生物治疗杂志 2008年第6期15卷 538-542页

作者：岑彦艳刘昱竹丁国富赵妍妍李斌周红第三军医大学药学院药理学教研室重庆400038

目的:筛选能提高鼻咽癌CNE-2细胞对β射线放射敏感性的CpG ODN序列,观察筛选获得的CpG ODN序列放射增敏的作用特点,为寻找新的鼻咽癌放疗增敏剂提供实验依据。方法:应用MTT实验筛选21种CpG ODN序列中对人鼻咽癌CNE-2细胞放射增敏作用最... 详细信息

目的:筛选能提高鼻咽癌CNE-2细胞对β射线放射敏感性的CpG ODN序列,观察筛选获得的CpG ODN序列放射增敏的作用特点,为寻找新的鼻咽癌放疗增敏剂提供实验依据。方法:应用MTT实验筛选21种CpG ODN序列中对人鼻咽癌CNE-2细胞放射增敏作用最强的序列,以MTT实验、集落形成实验、划痕实验和流式细胞术检测该最强作用序列与β射线联合作用对CNE-2细胞的增殖、集落形成、细胞迁移、细胞周期与凋亡的影响。结果:筛选实验显示CpG ODN107对CNE-2细胞具有最高的增敏比(1.59±0.06),CpG ODN107和β射线联合作用能以剂量依赖方式显著抑制CNE-2细胞的增殖,抑制效应显著高于单纯照射(P<0.05,P<0.01);联合作用显著抑制CNE-2细胞集落形成和迁移能力,显著诱导细胞周期阻滞于G_0/G_1期,显著增加细胞凋亡(P<0.01),上述作用效应均明显强于单纯β射线照射(P<0.05或P<0.01)。结论:CpG ODN 107可显著增强人鼻咽癌CNE-2细胞对β射线的照射敏感性,其放射增敏作用可能与诱导细胞周期阻滞和凋亡有关。

关键词： CpG ODN107 人鼻咽癌细胞放射敏感性细胞增殖凋亡

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肿瘤研究的新焦点——外体

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第三军医大学学报 2016年第1期38卷 1-7页

作者：周维英第三军医大学药学系药理学教研室重庆400038

外体（exosomes）是细胞分泌的不可溶的膜性囊泡中的一种,是由脂质双层膜包绕形成的扁平半球体,直径30~100 nm,密度1.13~1.21 g/m L[1-5]。由Johnstone等[3]于1987年在网织红细胞培养液中分离并命名,后来发现多种细胞均能以胞外分泌的... 详细信息

外体（exosomes）是细胞分泌的不可溶的膜性囊泡中的一种,是由脂质双层膜包绕形成的扁平半球体,直径30~100 nm,密度1.13~1.21 g/m L[1-5]。由Johnstone等[3]于1987年在网织红细胞培养液中分离并命名,后来发现多种细胞均能以胞外分泌的方式释放外体,如肥大细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、血小板、肠上皮细胞、星形胶质细胞、树突状细胞、生殖细胞以及肿瘤细胞等[6-8]。

关键词：外体肿瘤转移治疗抵抗

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虾青素通过TGF-β1介导的Smads/ERK通路抑制肺纤维化

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第三军医大学学报 2017年第5期39卷 442-447页

作者：王芳芹刘涛张攀阳群芳陈晓红第三军医大学药学系药理学教研室重庆400038

目的研究虾青素(astaxanthin,AX)对博莱霉素(bleomycin,BLM)所致SD大鼠肺纤维化的干预作用及机制。方法 SD雄性大鼠32只,体质量(200±20)g,采用随机数字表法分为Sham组(假手术组)、AX组、BLM组和AX+BLM组。经气道注入5 mg/kg的BLM(... 详细信息

目的研究虾青素(astaxanthin,AX)对博莱霉素(bleomycin,BLM)所致SD大鼠肺纤维化的干预作用及机制。方法 SD雄性大鼠32只,体质量(200±20)g,采用随机数字表法分为Sham组(假手术组)、AX组、BLM组和AX+BLM组。经气道注入5 mg/kg的BLM(BLM组和AX+BLM组)或生理盐水(Sham组)后,每天灌服虾青素(2 mg/kg)油溶液(AX组和AX+BLM组)或植物油(BLM组)连续14 d,最后一次给药24 h后取材。检测肺系数,肺组织进行HE染色及Masson染色,显微镜下观察大鼠肺部炎症及纤维化程度;碱水解法检测羟脯氨酸含量;免疫组化法观察肺组织α-SMA蛋白表达情况;酶联免疫夹心法(ELISA)检测血清中TGF-β1水平;Western blot法检测Smad2/3及ERK1/2蛋白。结果与Sham组及AX组相比,BLM组肺损伤严重,有明显的肺纤维化病灶形成;与BLM组比较,AX+BLM组肺炎症程度及纤维化程度明显减轻(P<0.01),肺组织胶原蛋白沉积减少,羟脯氨酸含量明显降低(P<0.01),α-SMA蛋白表达减少,TGF-β1水平也明显降低(P<0.05),同时Smad2/3蛋白及ERK1/2蛋白磷酸化水平明显下降。结论虾青素能明显抑制BLM诱导的肺纤维化,其作用机制可能与降低TGF-β1水平,从而下调Smads/ERK通路有关。

关键词：虾青素肺纤维化博来霉素 TGF-β1

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