检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2012年第12期34卷 1189-1191页

作者：李永强粟永萍李蓉熊玮戴晓天第三军医大学西南医院呼吸内科重庆400038 第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的模拟矽肺的致病过程,建立初步的矽肺犬动物模型。方法利用气管插管及呼吸机通气,将二氧化硅粉末吹入实验犬肺内,观察不同染尘剂量、不同染尘频次下,各持续时间段内(染尘前,染尘1、2、3个月)实验犬的动脉血气、胸部CT影像学、肺组织... 详细信息

目的模拟矽肺的致病过程,建立初步的矽肺犬动物模型。方法利用气管插管及呼吸机通气,将二氧化硅粉末吹入实验犬肺内,观察不同染尘剂量、不同染尘频次下,各持续时间段内(染尘前,染尘1、2、3个月)实验犬的动脉血气、胸部CT影像学、肺组织病理形态学改变。结果各组实验犬染尘前后的动脉血气水平无明显差异(P>0.05),但染尘后实验犬胸部CT均有不同程度的磨玻璃样改变,肺组织病理可见肺间质增厚,终末细支气管壁周围大量吞尘巨噬细胞聚集,有成纤维细胞增生及网状胶原纤维形成,偏光显微镜下可见肺间质内二氧化硅颗粒沉积,且染尘犬胸部CT及肺组织病理改变程度与染尘剂量、染尘频次、染尘时间呈正相关。结论经气管插管后呼吸机通气,每次按400 mg/kg称取二氧化硅粉尘吹入实验犬肺内,每周染尘1次,持续染尘3个月,可建立初步的矽肺犬动物模型。

关键词：矽肺犬动物模型

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3种不同survivin基因启动子驱动Apoptin表达的重组慢病毒构建及体外抑瘤效果比较

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第三军医大学学报 2012年第1期34卷 39-43页

作者：叶枫钟波但国蓉姜帆赛燕赵吉清孙慧勤梁后杰邹仲敏第三军医大学军事预防医学院毒理学研究所重庆400038 第三军医大学西南医院肿瘤科第三军医大学军事预防医学院全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室

目的构建3种不同长度的survivin基因启动子融合6×his标签Apoptin cDNA的重组慢病毒载体,经鉴定后行慢病毒包装并感染人结直肠癌细胞(SW480),体外实验观察并比较抑瘤效果。方法克隆3种不同长度的人survivin基因启动子(160、270、987... 详细信息

目的构建3种不同长度的survivin基因启动子融合6×his标签Apoptin cDNA的重组慢病毒载体,经鉴定后行慢病毒包装并感染人结直肠癌细胞(SW480),体外实验观察并比较抑瘤效果。方法克隆3种不同长度的人survivin基因启动子(160、270、987 bp)和Apoptin-6×his cDNA,将其分别连接到pMD18-T载体并在该载体上完成survivin基因启动子和Apoptin基因组装。将组装好的表达盒构建入polyA改造后的慢病毒载体FG12中,利用三质粒包装系统包装成慢病毒。为观察重组慢病毒的抑瘤效果,以最适MOI值感染SW480肿瘤细胞后第5天及第30天,利用AnnexinV-PE/7-AAD凋亡试剂盒和流式细胞术检测细胞凋亡和周期变化,Western blot检测Apoptin-6×his表达。结果成功构建3种重组慢病毒载体,经包装浓缩后获得高滴度病毒,可以有效地感染目的细胞(感染效率大于80%)。体外结果提示病毒感染的SW480可以正确表达Apoptin-6×his蛋白,并能在感染后第30天出现明显的凋亡/坏死。其中,含有270 bp启动子的慢病毒抑瘤作用更为明显。结论采用270 bp survivin启动子,apoptin基因构建的重组慢病毒在靶细胞中显示出较好的抑瘤效果。

关键词： Apoptin基因 survivin启动子慢病毒肿瘤特异性

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新型斑蝥素类似物LB1协同阿霉素杀伤肝癌细胞的实验研究

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第三军医大学学报 2012年第6期34卷 522-525页

作者：王得春谭旭张二龙王曙光史春梦第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆市纳米工程研究中心重庆400038 第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所重庆400038

目的通过水溶性化学小分子蛋白磷酸酶2A抑制剂LB1与阿霉素(doxorubicin,DOX)联合应用,研究其在肝癌化疗过程中的协同作用。方法体外细胞活性分析检测不同剂量LB1对HepG2细胞活性影响及其与阿霉素(DOX)的协同杀伤效应;通过裸鼠体内荷瘤... 详细信息

目的通过水溶性化学小分子蛋白磷酸酶2A抑制剂LB1与阿霉素(doxorubicin,DOX)联合应用,研究其在肝癌化疗过程中的协同作用。方法体外细胞活性分析检测不同剂量LB1对HepG2细胞活性影响及其与阿霉素(DOX)的协同杀伤效应;通过裸鼠体内荷瘤模型以及组织化学分析,进一步观察LB1对肿瘤生长影响以及在体与阿霉素的协同化疗作用。结果 LB1对HepG2细胞生长与作用剂量相关,低剂量时可促进其生长,高剂量时则促进其凋亡,而且在联合阿霉素后,可显著提高对HepG2肿瘤细胞的杀伤作用;体内实验也发现,单纯给予阿霉素抑瘤率为57%,而LB1联合应用后,抑瘤率可达77%,显著提高了阿霉素对肿瘤的杀伤作用(P<0.05),且无明显毒副作用。结论 LB1联合应用可显著提高阿霉素(DOX)对肝癌细胞的化学杀伤作用。

关键词：斑蛰素衍生物 PP2A抑制剂 LB1 阿霉素 HepG2细胞

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创面修复中PDGFβ受体拮抗剂对周细胞血管生成的影响

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成都医学院学报 2012年第1期7卷 6-10,21页

作者：孙慧勤肖生强杨涛郝娜郭徳玉周青粟永萍冉新泽第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆市纳米医药工程技术研究中心重庆400038 第三军医大学护理学院基础护理学教研室重庆400038 第三军医大学西南医院病理学研究所重庆400038

目的研究PDGFRβ受体拮抗剂-甲磺酸伊马替尼(imatinib mesylate,75mg/kg)阻断PDGFβ受体通路对周细胞的调控在创面修复特别是肉芽组织血管生成中的作用。方法采用大体观测、组织学及免疫组化结合形态定量分析方法,研究PDGFβ受体阻断后... 详细信息

目的研究PDGFRβ受体拮抗剂-甲磺酸伊马替尼(imatinib mesylate,75mg/kg)阻断PDGFβ受体通路对周细胞的调控在创面修复特别是肉芽组织血管生成中的作用。方法采用大体观测、组织学及免疫组化结合形态定量分析方法,研究PDGFβ受体阻断后创面愈合情况,并着重观测早期1～10d肉芽组织血管生成过程中微血管形态、密度,周细胞标记指数状况,分析周细胞变化与血管生成、创面愈合之间的关系以及与创面修复改变的联系与规律。结果对照组创面10d左右愈合,12d完全愈合,而甲磺酸伊马替尼组愈合时间延长多至14d,17d完全愈合,与对照相比延迟4～5d;创面残留面积伤后1d起与对照组比较存在差异(P<0.05)并见于主要观测点。致伤后创面修复组织病理变化呈现炎症、肉芽组织增生和瘢痕形成改变,其中的血管生成及周细胞主要见于肉芽组织增生期(3～10d),以5、7d为明显;周细胞标记指数与微血管密度呈正相关,但甲磺酸伊马替尼组较对照组微血管密度、周细胞标记指数则明显降低(P<0.05),且微血管管腔较大,以肉芽组织较丰富的5、7d时为明显,并与周细胞标记指数相关。此外甲磺酸伊马替尼组肉芽组织内还呈现细胞(主要是成纤维细胞为主的梭形细胞)数目、形成的胶原纤维较对照组减少等变化。结论 PDGFβ及其受体通路在创面修复中具有重要作用,其中对周细胞的作用可能影响血管生成及胶原形成等过程延迟创面修复,提示周细胞是血管生成中的重要组分之一,而PDGFβ受体通路对周细胞具有特异的调控作用。

关键词：周细胞血管生成 PDGFβ受体通路创面修复

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VEGF165/HBD3双基因共表达真核质粒载体的构建及其体外表达

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第三军医大学学报 2011年第5期33卷 463-468页

作者：夏章权张从纪王涛第三军医大学西南医院口腔科重庆400038 第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室全军复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的构建人血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor,VEGF165)和人β防御素3(humanbeta defensins,HBD3)双基因共表达真核质粒载体、观察其在293FT细胞中的表达,并检测其活性。方法利用RT-PCR方法分别从白血病细胞(HL60)和牙龈组织中扩增出VEGF165和HBD3基因片段,通过DNA重组技术将基因片段先后重组于pVIVO1-mcs真核表达载体上,构建成pVIVO1-VEGF165-HBD3重组质粒载体,分别用酶切电泳分析及DNA测序的方法对重组质粒载体进行鉴定。运用脂质体转染的方法将重组质粒转染293FT细胞后,RT-PCR和Western blot法检测目的基因的表达。用转染重组质粒的293FT无血清上清刺激内皮细胞***926增殖,CCK-8法检测其增殖效应。取转染重组质粒的293FT无血清上清的浓缩液,采用K-B纸片扩散法进行抗菌活性实验。结果①酶切电泳分析得到相应的目的片段,大小与理论计算值一致,DNA测序证实目的基因序列正确无突变,成功构建真核表达质粒载体pVIVO1-VEGF165-HBD3。②RT-PCR和Western blot法分别从mRNA和蛋白质2个水平证实:转染重组质粒的293FT细胞高表达VEGF165和HBD3。③转染重组质粒的293FT无血清上清明显促进内皮细胞***926的增殖,证实了表达分泌出的VEGF165的活性。转染重组质粒的293FT无血清上清的浓缩液对大肠埃希菌(escherichia coli,EC)(ATCC 25922)、金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus,SA)(ATCC 25923)、绿脓杆菌(pseudomonas aeruginosa,PA)(ATCC 27853)和枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis,BS)(ATCC62037)产生明显的抑菌环,证实了表达分泌出的HBD3的活性。结论构建了pVIVO1-VEGF165-HBD3双基因共表达真核质粒载体,证实其转染293FT细胞后双基因的表达和活性。

关键词：血管内皮生长因子165 人β防御素3 基因表达

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鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化的作用及其机制研究

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第三军医大学学报 2011年第3期33卷 274-277页

作者：艾志波张荣华闫国和粟永萍艾国平第三军医大学:西南医院中西医结合科重庆400038 第三军医大学:军事预防医学院全军复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的探讨鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)的作用及其机制。方法 SD雄性大鼠90只,随机分6组,每组15只,其中以40%CCl4处理(3 ml/kg)8周复制中毒肝纤维化模型(模型组),复制模型的同时分别用鳖甲煎改良方高剂量组28.4 g/(k... 详细信息

目的探讨鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)的作用及其机制。方法 SD雄性大鼠90只,随机分6组,每组15只,其中以40%CCl4处理(3 ml/kg)8周复制中毒肝纤维化模型(模型组),复制模型的同时分别用鳖甲煎改良方高剂量组28.4 g/(kg.d)、中剂量组14.2 g/(kg.d)、低剂量组7.1 g/(kg.d)灌胃治疗并且以复方鳖甲软肝片灌胃0.6 g/(kg.d)作阳性对照组治疗6周。以复制模型同样方式与用量于右后腿皮下注射橄榄油及生理盐水灌胃(10 ml/kg.d)作空白对照组。苏木精-伊红(HE)染色观察各组8周后肝纤维化变化程度,RT-PCR检测其转化生长因子β1(transforming growth factor beta one,TGF-β1)、Smad3及Smad7变化,免疫组化(S-P法)观测TGF-β1、smad3、smad7表达情况。结果 8周后,与模型组比较,鳖甲煎改良方高、中、低剂量组和复方鳖甲软肝片组肝小叶结构破坏明显减轻,部分肝细胞脂肪变性,炎性细胞浸润与少量胶原纤维形成;肝组织TGF-β1与Smad3的mRNA及蛋白表达显著减少(P<0.01),smad7 mRNA及蛋白表达明显增加(P<0.01)且鳖甲煎改良方高、中、低剂量组和复方鳖甲软肝片组疗效并无显著差异。结论鳖甲煎改良方能显著改善大鼠肝纤维化,其作用机制可能与鳖甲煎改良方调控TGF-β/smad信号通路有关。

关键词：鳖甲煎改良方肝纤维化 TGF-β1 Smad3 Smad7

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BMDCs多途径参与肺损伤修复的实验研究

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重庆医学 2011年第21期40卷 2102-2103,2124,I0002,I0001页

作者：罗丹刘登群刘国祥第三军医大学西南医院呼吸科重庆400038 第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室/全军复合伤研究所/创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的观察骨髓来源细胞(BMDCs)通过多途径在不同时间点参与肺损伤修复的作用。方法构建FVB/NJ小鼠博莱霉素诱导肺损伤模型,24 h或21 d后接受BMDCs或空培养基尾静脉注射,第7、14、21和28天取材,行HE染色、马森染色、羟脯氨酸含量检测和肿... 详细信息

目的观察骨髓来源细胞(BMDCs)通过多途径在不同时间点参与肺损伤修复的作用。方法构建FVB/NJ小鼠博莱霉素诱导肺损伤模型,24 h或21 d后接受BMDCs或空培养基尾静脉注射,第7、14、21和28天取材,行HE染色、马森染色、羟脯氨酸含量检测和肿瘤细胞坏死因子-α(TNF-α)的Western blot检测。同时构建GFP骨髓嵌合小鼠模型,放射性肺损伤1个月后肺组织取材进行免疫荧光双标。结果早期输入BMDCs能明显缓解博莱霉素导致的肺组织炎细胞浸润和肺泡破坏等病理改变,降低各个时间点的羟脯氨酸含量至第21天达到最低值(P<0.05),在第7天明显下调肺内TNF-α的含量(P<0.05)。推迟BMDCs输入的肺组织病理改变与对照组无差异。放射性肺损伤后1月,骨髓嵌合鼠中可见绿色荧光蛋白(GFP)与广谱细胞角蛋白(PCK)双阳性的BMDCs来源支气管上皮细胞和GFP与表面蛋白C(SPC)双阳性的BMDCs来源Ⅱ型肺泡上皮。结论早期输入BMDCs能通过多途径明显缓解放化疗引起的肺损伤。晚期输入BMDCs没有加重肺纤维化,对肺损伤也无缓解作用。

关键词：骨髓来源细胞肺损伤小鼠

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鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化的防治作用

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世界华人消化杂志 2011年第1期19卷 13-18页

作者：艾志波张荣华闫国和中国人民解放军第三军医大学西南医院中西医结合科重庆市400038 中国人民解放军第三军医大学军事预防医学院全军复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆市400038

目的:研究鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化(HF)的防治作用及对TGF-β1和Sman3/7蛋白表达的影响,探讨其机制.方法:SD♂大鼠90只,随机取10只作为正常对照组(A组),其余大鼠用皮下注射40%CCl4橄榄油油剂3mL/kg诱导大鼠肝纤维化模型8wk,于第2周... 详细信息

目的:研究鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化(HF)的防治作用及对TGF-β1和Sman3/7蛋白表达的影响,探讨其机制.方法:SD♂大鼠90只,随机取10只作为正常对照组(A组),其余大鼠用皮下注射40%CCl4橄榄油油剂3mL/kg诱导大鼠肝纤维化模型8wk,于第2周时随机处死5只大鼠证实HF形成后,将剩下的大鼠随机分为肝纤维化模型组(B组)、鳖甲煎改良方高剂量组[C组,28.4g/(kg·d)]、中剂量组[D组,14.2g/(kg·d)]、低剂量组[E组,7.1g/(kg·d)]、复方鳖甲软肝片组[F组,0.6g/(kg·d)],每组15只.C、D、E、F组给予10mL/(kg·d)相应药液灌胃治疗,A、B组同时给予等剂量的生理盐水灌胃处理.8wk后采血测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、草氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白和球蛋白含量;取肝组织作HE染色观察肝纤维化程度变化;Westernblot方法检测TGF-β1、Smad3和Smad7蛋白的表达.结果:8wk后,与B组比较,C、D、E组和F组肝小叶结构破坏明显减轻,肝纤维化程度分级较B组明显好转;ALT和AST含量显著降低(P<0.01),白蛋白含量显著增加(37.85g/L±3.08g/L,38.25g/L±1.90g/L,38.13g/L±1.50g/L,38.09g/L±3.27g/Lvs27.05g/L±4.81g/L,均P<0.01);TGF-β1、Smad3蛋白表达显著减少(TGF-β1:0.127±0.014,0.122±0.051,0.126±0.027,0.119±0.020vs0.332±0.074,均P<0.01;Smad3:0.415±0.057,0.427±0.074,0.425±0.080,0.432±0.075vs0.527±0.054,均P<0.01),Smad7蛋白的表达明显增加(0.308±0.077,0.326±0.086,0.315±0.071,0.348±0.065vs0.185±0.059,均P<0.01),且C、D、E组和F组间疗效比较无明显差异.结论:鳖甲煎改良方能够显著减轻CCl4导致的大鼠肝纤维化程度,其作用机制可能与鳖甲煎改良方调控TGF-β1和Sman3/7信号转导蛋白表达有关.

关键词：鳖甲煎改良方肝纤维化转化生长因子β1 Smad3 Smad7

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鳖甲煎改良方对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1、Smad 3及Smad 7表达的影响

鳖甲煎改良方对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1、Smad 3及Smad 7表达...

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第二十次全国中西医结合肝病学术会议

作者：张荣华艾志波闫国和粟永萍艾国平第三军医大学西南医院中西医结合科第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室

目的:探讨鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化（hepatic fibrosis,HF）的作用及其机制。方法:SD雄性大鼠90只,随机分6组,每组15只,其中以40%CCl处理（3 ml/kg）8周复制中毒肝纤维化模型（A组）,复制模型的同时分别以鳖甲煎改良方高剂量组（B）2... 详细信息

目的:探讨鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化（hepatic fibrosis,HF）的作用及其机制。方法:SD雄性大鼠90只,随机分6组,每组15只,其中以40%CCl处理（3 ml/kg）8周复制中毒肝纤维化模型（A组）,复制模型的同时分别以鳖甲煎改良方高剂量组（B）28.4g/（kg·d）、中剂量组（C）14.2g/（kg·d）、低剂量组（D）7.1 g/（kg·d）灌胃治疗,并且以复方鳖甲软肝片灌胃（0.6 g/kg·d）作为阳性治疗对照（E组）,共6周。以复制模型同样方式与用量于右后腿皮下注射橄榄油及生理盐水灌胃（10ml/kg·d）作空白对照组（F组）。苏木素-伊红（HE）染色观察各组8周后肝纤维化变化程度,RT-PCR检测大鼠肝组织转化生长因子β1（transforming growthfactor beta one,TGF-β1）、Smad3及Smad7变化,免疫组化（SP法）观测大鼠肝组织TGF-β1、smad3、smad7表达情况。结果:8周后,与模型组比较,鳖甲煎改良方高、中、低剂量组和复方鳖甲软肝片组肝小叶结构破坏明显减轻部分肝细胞脂肪变性,炎性细胞浸润与少量胶原纤维形成;肝组织TGF-β1与Smad3的mRNA及蛋白表达显著减少（P<0.01）,smad7 mRNA及蛋白表达明显增加（P<0.01）且鳖甲煎改良方高、中、低剂量组和复疗鳖甲软肝片组疗效并无显著差异。结论:鳖甲煎改良方能显著改善大鼠肝纤维化,其作用机制可能与鳖甲煎改良方调控TGF-β/smad信号通路有关。

关键词：鳖甲煎改良方肝纤维化 TGF-β1 Smad3 Smad7

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BMDCs通过多途径参与肺损伤修复的实验研究

BMDCs通过多途径参与肺损伤修复的实验研究

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第11届全军呼吸内科专业委员会年会

作者：罗丹刘登群刘国祥第三军医大学西南医院呼吸科重庆 400038 第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室/全军复合伤研究所/创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆 400038

目的：观察骨髓来源细胞(bone marrow derived cells,BMDCs)通过多途径在不同时间点参与肺损伤修复的作用.方法：构建FVB/NJ小鼠博莱霉素诱导肺损伤模型,24小时或21天后接受BMDCs或空培养基尾静脉注射,第7天、14天、21天和28天取材,行H&... 详细信息

目的：观察骨髓来源细胞(bone marrow derived cells,BMDCs)通过多途径在不同时间点参与肺损伤修复的作用.方法：构建FVB/NJ小鼠博莱霉素诱导肺损伤模型,24小时或21天后接受BMDCs或空培养基尾静脉注射,第7天、14天、21天和28天取材,行H&E染色、马森染色、羟脯氨酸含量检测和TNF-α的Western Blot检测.同时构建GFP骨髓嵌合小鼠模型,放射性肺损伤1月后肺组织取材进行免疫荧光双标.结果：早期输入BMDCs能明显缓解博莱霉素导致的肺组织炎细胞侵润和肺泡破坏等病理改变,降低各个时间点的羟脯氨酸含量至第21天达到最低值(P＜0.05),在第7天明显下调肺内TNF-α的含量(P＜0.05).推迟BMDCs输入的肺组织病理改变与对照组无差异.放射性肺损伤后1月,骨髓嵌合鼠中可见绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)与广谱细胞角蛋白(pan cytokeratin,PCK)双阳性的BMDCs来源支气管上皮细胞和GFP与SPC(表面蛋白C,SPC)双阳性的BMDCs来源Ⅱ型肺泡上皮.结论：早期输入BMDCs能通过多途径明显缓解放化疗引起的肺损伤.晚期输入BMDCs没有加重肺纤维化,对肺损伤也无缓解作用.

关键词：骨髓来源细胞肺损伤小鼠

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