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第三军医大学学报 2013年第10期35卷 977-980页

作者：邹永杰黄宇星李雨泓陈渝杰傅楚华崔高宇冯华第三军医大学西南医院神经外科全军神经外科研究所全军神经创伤防治重点实验室重庆400038

目的研究高压氧预适应(hyperbaric oxygen preconditioning,HBOP)对小鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebralartery occlusion,MCAO)的保护作用及对其脑内P2X7受体(P2X7R)表达的影响。方法将72只雄性C57BL/6小鼠分为:假手术组(sham)、高压氧预适应假手术组(HBOP+sham)、单纯MCAO组(MCAO)、高压氧预适应MCAO组(HBOP+MCAO)。通过线栓法建立小鼠MCAO模型,术后24 h采用Longa法对小鼠进行神经功能学评分,氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法判断脑梗死情况,TUNEL法观察神经细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法观察P2X7受体mRNA的表达。结果 MCAO建模后24 h,HBOP+MCAO组神经功能学评分明显低于MCAO组(2.33±0.44 vs 2.89±0.59,P<0.05);HBOP+MCAO组脑梗死范围明显小于MCAO组[(44.08±8.46)%vs(63.00±5.25)%,P<0.05];HBOP+MCAO组凋亡阳性细胞数和P2X7R mRNA表达水平也明显低于MCAO组(P<0.05,P<0.01)。结论高压氧预适应可以减轻实验性MCAO小鼠的神经功能学损害,缩小梗死灶体积,减少细胞凋亡,具有明确的脑保护作用,其保护作用可能与延缓MCAO后P2X7R的表达升高有关。

关键词：高压氧预适应大脑中动脉闭塞 P2X7受体神经保护

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高压氧预适应对大鼠大脑中动脉闭塞后骨桥蛋白表达的影响

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第三军医大学学报 2013年第1期35卷 15-19页

作者：黄宇星胡胜利邹永杰陈图南李强李飞冯华第三军医大学西南医院神经外科全军神经外科研究所全军神经创伤防治重点实验室重庆400038

目的观察高压氧预适应(hyperbaric oxygen preconditioning,HBOP)对大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)后的神经保护作用并初步探讨其对骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达的影响。方法雄性SD大鼠72只,分为假手术组,HBOP+假手术组,单纯MCAO组、HBOP+MCAO组,每组18只。采用大脑中动脉线栓法建立大鼠MCAO模型。于术后12 h取材,观察大鼠神经功能和脑梗死变化情况;HE染色光镜下观察缺血区脑组织的病理形态学改变。Western blot检测缺血区OPN的表达变化。结果神经功能缺损评分:术后12 h假手术组及HBOP+假手术组评分均为0分,单纯MCAO组(3.80±0.79)分,HBOP+MCAO组(2.50±0.97)分;平衡能力评分:术后12 h假手术组及HBOP+假手术组大鼠平衡能力评分均为5分,单纯MCAO组(1.50±1.08)分,HBOP+MCAO组(2.70±2.95)分;脑梗死率:术后12 h假手术组及HBOP+假手术组大鼠梗死率均为0,单纯MCAO组(49.22±7.07)%,HBOP+MCAO组(41.96±3.15)%。可见与单纯MCAO组比较,HBOP+MCAO组在术后12 h神经功能缺损评分明显降低(P<0.05),平衡能力评分显著提高(P<0.05);脑梗死率明显小于单纯MCAO组(P<0.05);HE染色见缺血区脑组织病理损伤明显减轻;Western blot检测提示OPN的表达显著增强。结论高压氧预适应可以诱导大鼠MCAO后的神经保护作用,其机制可能与HBOP引起的OPN表达增高有关。

关键词：高压氧预适应大脑中动脉闭塞神经保护骨桥蛋白

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双氢青蒿素促进胶质瘤GL261细胞的凋亡

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第三军医大学学报 2013年第12期35卷 1179-1182页

作者：尹怡曹鎏李飞陈图南葛红飞傅楚华李钊兰川冯华第三军医大学西南医院神经外科全军神经外科研究所全军神经创伤防治重点实验室重庆400038

目的研究双氢青蒿素对胶质瘤GL261细胞凋亡的影响与作用机制。方法 0、30、60、90μmol/L双氢青蒿素处理GL261细胞,倒置显微镜下观察细胞形态改变,CCK-8法检测处理后GL261细胞活力的改变,Annexin V PI法检测双氢青蒿素对GL261细胞凋亡... 详细信息

目的研究双氢青蒿素对胶质瘤GL261细胞凋亡的影响与作用机制。方法 0、30、60、90μmol/L双氢青蒿素处理GL261细胞,倒置显微镜下观察细胞形态改变,CCK-8法检测处理后GL261细胞活力的改变,Annexin V PI法检测双氢青蒿素对GL261细胞凋亡的影响,免疫荧光显微镜观察双氢青蒿素处理后激活型Caspase-3的表达改变与亚细胞定位,Western blot检测激活型Caspase-3与抗凋亡蛋白Bcl-xL的表达变化。结果双氢青蒿素能有效诱导胶质瘤GL261细胞凋亡,抑制细胞活性,具有浓度依赖性(P<0.05);30μmol/L双氢青蒿素作用12 h即可诱导Caspase-3激活并与细胞核共定位;双氢青蒿素能够下调Bcl-xL、上调激活型Caspase-3的表达水平,且具有浓度依赖性(P<0.05)。结论双氢青蒿素通过抑制抗凋亡蛋白Bcl-xL、诱导Caspase-3激活途径介导胶质瘤GL261细胞凋亡。

关键词：双氢青蒿素胶质瘤 GL261 凋亡

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大鼠脑室出血后急性期脑损伤病理特点的初步探讨

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中华神经医学杂志 2013年第7期12卷 665-669页

作者：张建波陈志张渊唐俊杨云峰冯华朱刚第三军医大学西南医院神经外科全军神经外科研究所.全军神经创伤防治重点实验室重庆400038

目的初步探讨大鼠脑室出血后急性期脑损伤的病理特点。方法健康成年雄性SD大鼠38只按随机数字表法分为对照组和脑室出血组．分别采用立体定向技术向右侧脑室内注入生理盐水200μL或自体股动脉血200μL手术建模。术后24h观察大鼠体质量... 详细信息

目的初步探讨大鼠脑室出血后急性期脑损伤的病理特点。方法健康成年雄性SD大鼠38只按随机数字表法分为对照组和脑室出血组．分别采用立体定向技术向右侧脑室内注入生理盐水200μL或自体股动脉血200μL手术建模。术后24h观察大鼠体质量减轻情况，采用小动物Micro—CT扫描及大体标本脑室切面观察脑室铸型：采用干湿重法测定术后24h大鼠脑组织含水量；采用伊文思蓝染色法（24h时）和IgG免疫荧光染色法（48h时）观察大鼠血脑屏障损伤情况。结果术后24h时脑室出血组体质量减轻（5．29％±0．59％）明显高于对照组（3．36％±1．10％），差异有统计学意义沪〈0．05）。脑室出血组***扫描及脑室切面可见脑室积血铸型并明显扩张。脑室出血组双侧大脑半球脑组织含水量（左侧：78．25％±0．29％；右侧：78．46％±0．21％）均明显高于对照组（左侧：77．64％±0．25％；右侧：77．91％±0．10％），差异有统计学意义（P〈0．05）。术后24h时脑室出血组伊文思蓝脑组织渗出量明显高于对照组，48h时脑室出血组侧脑室脉络丛免疫球蛋白IgG表达明显高于对照组。结论脑室出血后脑损伤除脑积水外还存在急性脑水肿、血脑屏障损伤等病理损害，其可能是脑室出血后除继发脑积水外急性脑损伤的重要环节。

关键词：脑室出血脑水肿血脑屏障

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草麻黄中补体抑制单体防治大鼠脑冲击伤的研究

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第三军医大学学报 2012年第23期34卷 2360-2363页

作者：魏林节冯华陈志唐卫华杨云峰缪洪平牛胤李兰朱刚第三军医大学西南医院神经外科全军神经外科研究所全军神经创伤防治重点实验室重庆400038

目的探讨草麻黄中补体抑制单体(complement inhibiting component in Ephedra sinica,CICES)对大鼠脑冲击伤的保护作用。方法用改进的Feeney’s法制作大鼠脑冲击伤模型,分为正常组(A组)、颅脑创伤假手术组(B组)、颅脑创伤组(C组)、CICE... 详细信息

目的探讨草麻黄中补体抑制单体(complement inhibiting component in Ephedra sinica,CICES)对大鼠脑冲击伤的保护作用。方法用改进的Feeney’s法制作大鼠脑冲击伤模型,分为正常组(A组)、颅脑创伤假手术组(B组)、颅脑创伤组(C组)、CICES治疗组(D组),观察打击后生存时间及术后6 h、1、3、7 d神经功能改变,分别检测血清IL-1β、TNF-α、脑组织补体C3水平及脑组织含水量。结果 D组生存时间及神经功能评分(1、3 d)均优于C组(P<0.05),D组各检测时间点血清IL-1β、TNF-α浓度(6 h组IL-1β浓度除外)均低于C组(P<0.05,P<0.01),C3补体免疫组化染色结果显示:各检测时间点D组细胞膜外比C组有更少的补体附着(P<0.05),C组脑组织含水量(1、3、7 d)比D组更显著(P<0.05,P<0.01)。结论 CICES能够显著减轻脑损伤后的炎性反应,在继发性脑损伤中起到重要的保护作用。

关键词：草麻黄中补体抑制单体白细胞介素-1β 肿瘤坏死因子-α 补体C3 免疫组织化学

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瞬时受体电位通道6在大鼠大脑冲击伤后铁代谢中的作用

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第三军医大学学报 2012年第23期34卷 2353-2356页

作者：张礼均胡荣李飞孟辉林江凯朱刚王宪荣冯华第三军医大学西南医院神经外科全军神经外科研究所全军神经创伤防治重点实验室重庆400038

目的探讨瞬时受体电位通道6(transient receptor potential channels 6,TRPC6)在大鼠大脑冲击伤后铁代谢中的作用。方法健康成年雄性SD大鼠39只,分为假手术组、致伤组和DFO治疗组(n=13)。参照Feeney法致伤,假手术组只开颅,不打击,致伤组... 详细信息

目的探讨瞬时受体电位通道6(transient receptor potential channels 6,TRPC6)在大鼠大脑冲击伤后铁代谢中的作用。方法健康成年雄性SD大鼠39只,分为假手术组、致伤组和DFO治疗组(n=13)。参照Feeney法致伤,假手术组只开颅,不打击,致伤组和DFO治疗组开颅后,打击部位和打击量完全一致,2 h后予以生理盐水及去铁胺100 mg/kg,间隔12 h给药,持续28 d。于28 d取致伤灶周围脑组织进行脑铁含量检测,采用免疫荧光和Western blot检测方法,分别定性、定量检测瞬时受体电位通道6(TRPC6)在致伤灶周围的表达情况,并采用荧光双标检测TRPC6在神经元上的定位分布情况。结果与假手术组比较,致伤组脑组织铁离子显著增加(P<0.05),但DFO治疗组并未显著降低其含量(P>0.05);免疫荧光检测结果显示致伤组TRPC6显著上调,DFO治疗组显著下调其表达;Western blot检测结果显示,与假手术组比较,致伤组TRPC6显著上调(P<0.05),DFO治疗组显著下调其表达(P<0.05);免疫荧光双标检测TRPC6与NeuN共表达情况,结果显示假手术组仅少量细胞表达TRPC6,且密度低,NeuN染色阳性的细胞胞体形态呈椭圆形,仅部分细胞共表达;致伤组致伤灶周围TRPC6表达明显增强,但却未见NeuN染色阳性的细胞;DFO治疗组可见NeuN染色阳性的细胞数量多,形态欠规则,与TRPC6共表达细胞数量增多。结论大鼠TBI后铁离子具有神经毒性作用,能增加致伤灶周围神经元的损伤,而TRPC6可能在铁离子的神经毒性作用中扮演重要角色。

关键词：大脑冲击伤非血红蛋白铁离子瞬时受体电位通道6

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去铁胺对大鼠大脑冲击伤的治疗作用

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第三军医大学学报 2012年第23期34卷 2349-2352页

作者：张礼均胡荣李飞孟辉林江凯朱刚王宪荣冯华第三军医大学西南医院神经外科全军神经外科研究所全军神经创伤防治重点实验室重庆400038

目的探讨去铁胺对大鼠大脑冲击伤的治疗作用。方法健康成年雄性SD大鼠39只,分为假手术组、致伤组和去铁胺(deferoxamine,DFO)治疗组,每组13只。参照Feeney法致伤,假手术组只开颅,不打击,致伤组和DFO治疗组开颅后,打击部位和打击量完全一... 详细信息

目的探讨去铁胺对大鼠大脑冲击伤的治疗作用。方法健康成年雄性SD大鼠39只,分为假手术组、致伤组和去铁胺(deferoxamine,DFO)治疗组,每组13只。参照Feeney法致伤,假手术组只开颅,不打击,致伤组和DFO治疗组开颅后,打击部位和打击量完全一致,致伤后2 h分别予以等量生理盐水及去铁胺100 mg/kg腹腔注射,间隔12 h给药,持续28 d,并于1、3、7、14、28 d检测大鼠血红蛋白、肛温、血糖和死亡率,于处死前进行Morris水迷宫实验,处死后取大鼠大脑标本运用多田公式计算大鼠大脑缺损体积,并取致伤灶周围脑组织进行NeuN免疫荧光检测。结果各组大鼠同一时相点血红蛋白、肛温、血糖差异均无统计学差异(P>0.05),致伤灶和DFO治疗组病死率差异无统计学意义(P>0.05)。DFO治疗组大脑缺损体积(115.35±13.70)mm3较致伤组(209.99±16.70)mm3明显减小(P<0.05)。免疫荧光检测发现致伤组致伤灶周围难以见到神经元,而DFO治疗组则可见到大量神经元。Morris水迷宫实验发现DFO治疗组动物平台搜索策略(3.13±0.35)和搜索时间(36.15±26.63)s均较致伤组[分别为(2.13±0.64)、(110.00±47.34)s]显著改善(P<0.05)。结论大鼠大脑冲击伤后早期予以DFO治疗,能显著减轻大脑缺损体积和致伤灶周围神经元损伤,并改善大鼠空间学习记忆能力,提示DFO可能是改善颅脑创伤预后的有效药物。

关键词：去铁胺大脑冲击伤大脑缺损体积空间学习记忆能力

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蜕皮甾酮对大鼠脑组织自由基损伤的保护作用

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第三军医大学学报 2012年第23期34卷 2357-2359页

作者：高诗豪唐政恒陈图南李飞单佑安冯华第三军医大学西南医院神经外科全军神经外科研究所全军神经创伤防治重点实验室重庆400038

目的观察蜕皮甾酮(ecdysterone,EDS)对大鼠脑损伤的治疗作用。方法 SD雄性大鼠120只,按随机数字表法分6组,每组20只。采用Feeney法自由落体打击鼠脑造模。假手术组动物只开颅,不打击;治疗组:分别采用4、8、16 mg/kg的EDS腹腔注射模型动... 详细信息

目的观察蜕皮甾酮(ecdysterone,EDS)对大鼠脑损伤的治疗作用。方法 SD雄性大鼠120只,按随机数字表法分6组,每组20只。采用Feeney法自由落体打击鼠脑造模。假手术组动物只开颅,不打击;治疗组:分别采用4、8、16 mg/kg的EDS腹腔注射模型动物;阴性治疗对照组:模型动物腹腔注射生理盐水;阳性治疗对照组:模型动物腹腔注射3 mg/kg依达拉奉。伤后7 d计算各组动物死亡率;检测各组动物脑组织含水量及丙二醛(MDA)、羟自由基能力及超(过)氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)等。HE染色观测各组大鼠脑组织海马病变情况。结果伤后7 d,16 mg/kg EDS治疗组的死亡率、脑组织含水量MDA与羟自由基含量较阴性治疗对照组明显降低(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.01),脑细胞损害明显减轻,大鼠海马CA1区正常神经元数量明显优于阴性治疗组(P<0.01)。结论蜕皮甾酮对脑损伤具有保护治疗作用。

关键词：蜕皮甾酮脑损伤死亡率脑水肿自由基

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神经创伤救治的转化医学思考

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第三军医大学学报 2012年第23期34卷 2345-2348页

作者：冯华李飞第三军医大学西南医院神经外科全军神经外科研究所全军神经创伤防治重点实验室重庆400038

近年来，转化医学（translational medicine）已成为研究的热点。实际上，医学自始至终都是在小断地将经验、理论和研究成果向实际应用转化的过程中发展的。本述评将从理解当前提倡的转化医学的概念、定义和范畴出发，结合我国医学发展... 详细信息

近年来，转化医学（translational medicine）已成为研究的热点。实际上，医学自始至终都是在小断地将经验、理论和研究成果向实际应用转化的过程中发展的。本述评将从理解当前提倡的转化医学的概念、定义和范畴出发，结合我国医学发展的实际情况，分析转化医学在神经创伤救治中的应用。

关键词：神经创伤转化医学转化科学学科交叉

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脑缺血动物模型的研究进展

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国际神经病学神经外科学杂志 2012年第5期39卷 423-426页

作者：邹永杰崔高宇冯华第三军医大学西南医院神经外科全军神经外科研究所全军神经创伤防治重点实验室重庆市400038

脑缺血是当今世界上致死、致残率最高的疾病之一,其损伤机制及防治措施是当前研究热点。近年来随着实验目的不同,研究者设计出了不同类型的脑缺血模型,本文主要针对影响小鼠局灶性脑缺血模型建立的各种因素进行综述。

关键词：脑缺血 MCAO 模型

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