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第三军医大学学报 2019年第4期41卷 282-288页

作者：吴万江袁继超陈亚星倪飞陈欣王洁文泽贤张洪燕储卫华林江凯陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院神经外科全军神经外科研究所全军神经创伤防治重点实验室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院全军眼科中心重庆400038

目的探讨姜黄素(curcumin,cur)对TNF-α诱导人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSC)凋亡的作用及机制。方法体外培养人脐带间充质干细胞,给予5 ng/m L TNF-α诱导细胞凋亡,给予不同浓度cur干预,乳... 详细信息

目的探讨姜黄素(curcumin,cur)对TNF-α诱导人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSC)凋亡的作用及机制。方法体外培养人脐带间充质干细胞,给予5 ng/m L TNF-α诱导细胞凋亡,给予不同浓度cur干预,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞凋亡情况;选取4μmol/L作为干预剂量,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,进一步验证cur对TNF-α诱导的h UC-MSC凋亡的作用。Western blot检测肿瘤坏死因子-α受体(tumor necrosis factor receptor,TNFR)下游凋亡相关的MAPK家族信号通路(ERK、JNK、p38)激活情况及Bcl-2、Bax的表达。结果 LDH释放实验结果提示:当TNF-α浓度高于5 ng/m L时导致h UC-MSC凋亡。cur浓度在0. 5～4μmol/L时可抑制TNF-α诱导的hUC-MSC凋亡,且呈浓度依赖性。流式细胞仪检测结果也证实4μmol/L cur能显著抑制TNF-α诱导的h UC-MSC凋亡(P <0. 05)。Western blot检测结果显示:cur可以激活ERK,促进Bcl-2的表达,使Bcl-2/Bax的表达升高(P <0. 05),但不影响MAPK家族JNK、p38蛋白表达。结论姜黄素能抑制TNF-α诱导的hUC-MSC凋亡,其作用机制可能是通过激活ERK,促进Bcl-2表达而实现。

关键词：姜黄素人脐带间充质干细胞 TNF-α 细胞凋亡

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康莱特联合替莫唑胺对GL261荷瘤鼠的疗效观察

康莱特联合替莫唑胺对GL261荷瘤鼠的疗效观察

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第十四届中国医师协会神经外科医师年会

作者：兰川第三军医大学西南医院神经外科全军神经外科研究所全军神经创伤防治重点实验室

目的:观察康莱特联合替莫唑胺治疗对脑内种植GL261胶质瘤细胞系的C57小鼠生存期的影响;方法:C57小鼠按照SPSS 10.0统计软件进行完全随机分组,将GL261胶质瘤细胞系细胞悬液种植于小鼠右侧尾状核。分组:对照组、替莫唑胺组、康莱特组、替... 详细信息

目的:观察康莱特联合替莫唑胺治疗对脑内种植GL261胶质瘤细胞系的C57小鼠生存期的影响;方法:C57小鼠按照SPSS 10.0统计软件进行完全随机分组,将GL261胶质瘤细胞系细胞悬液种植于小鼠右侧尾状核。分组:对照组、替莫唑胺组、康莱特组、替莫唑胺联合康莱特组（联合组）,按照分组情况给予相应药物治疗,观察荷瘤鼠生存状态,记录生存期;结果:Kaplan-Meier生存曲线经log-rank比较差异显著,组间生存曲线比较结果提示:替莫唑胺组及联合组与对照组及康莱特组比较生存期均明显延长（P＜0.05）;康莱特组与对照组比较生存期无明显差异（P＞0.05）;联合组与替莫唑胺组比较生存期无明显差异（P＞0.05）,但平均生存时间比较,联合组（30.55±0.93天）较替莫唑胺组（27±1.42天）延长;结论:替莫唑胺可以明显延长荷瘤鼠的生存期;单用康莱特不能有效延长荷瘤鼠生存期,但与替莫唑胺联合应用有一定的增效作用。

关键词：替莫唑胺康莱特生存期

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莱菔硫烷抑制LPS诱导的小鼠星形胶质细胞增殖

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第三军医大学学报 2017年第5期39卷 407-412页

作者：陈亚星袁继超刘伟朱海涛廖小俊文泽贤李兰林江凯第三军医大学西南医院神经外科、全军神经外科研究所、全军神经创伤防治重点实验室重庆400038

目的探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对脂多糖(LPS)诱导的星形胶质细胞(astrocyte,AST)增殖的影响及其机制。方法体外培养小鼠原代星形胶质细胞,给予0.1μg/m L LPS刺激星形胶质细胞活化增殖;同时分别给予不同浓度的莱菔硫烷(10、15、20... 详细信息

目的探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对脂多糖(LPS)诱导的星形胶质细胞(astrocyte,AST)增殖的影响及其机制。方法体外培养小鼠原代星形胶质细胞,给予0.1μg/m L LPS刺激星形胶质细胞活化增殖;同时分别给予不同浓度的莱菔硫烷(10、15、20μmol/L)处理星形胶质细胞24 h后,CCK8法检测细胞增殖情况;选取20μmol/L作为干预剂量行GFAP、Ki67双标免疫荧光染色及流式细胞仪细胞周期检测,进一步验证莱菔硫烷对LPS诱导星形胶质增殖的作用;Western blot检测细胞周期相关蛋白P27kip1、Cyclin D1、PCNA的表达情况。结果 CCK8法检测显示0.1μg/m L LPS能显著促进星形胶质细胞增殖(P<0.01),而加入20μmol/L莱菔硫烷能显著抑制LPS诱导的星形胶质细胞增殖(P<0.01),并能减少LPS刺激下的Ki67阳性细胞(P<0.05);细胞周期分析提示20μmol/L莱菔硫烷可减少LPS诱导下的星形胶质细胞S期比例,增加G1期细胞比例(P<0.05);Western blot提示20μmol/L莱菔硫烷能下调LPS刺激下PCNA、Cyclin D1的表达,上调P27kip1表达(P<0.05)。结论莱菔硫烷可以通过调控星形胶质细胞细胞周期,抑制体外LPS诱导的星形胶质细胞增殖。

关键词：莱菔硫烷星形胶质细胞 LPS 细胞周期细胞增殖

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高氧促进胶质瘤干细胞分化致化疗增敏的体外研究

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中华神经外科杂志 2017年第3期33卷 293-298页

作者：万文武汪攀兰川吴南第三军医大学附属第一医院神经外科全军神经外科研究所全军神经创伤防治重点实验室重庆400038

目的通过体外研究初步探讨高氧诱导胶质瘤干细胞分化致化疗增敏的效应。方法干细胞培养基诱导胶质瘤干细胞（U87、GL261），免疫荧光染色鉴定肿瘤干细胞标记蛋白的表达。胶质瘤干细胞在不同氧浓度条件（高氧95％O2、常氧21％O2）处理后... 详细信息

目的通过体外研究初步探讨高氧诱导胶质瘤干细胞分化致化疗增敏的效应。方法干细胞培养基诱导胶质瘤干细胞（U87、GL261），免疫荧光染色鉴定肿瘤干细胞标记蛋白的表达。胶质瘤干细胞在不同氧浓度条件（高氧95％O2、常氧21％O2）处理后采用免疫印迹法、实时荧光定量PCR（qRT—PCR）检测干性标记蛋白、分化蛋白、耐药蛋白的表达情况。胶质瘤干细胞在不同氧浓度条件下预处理后添加替莫唑胺干预，行半数抑制浓度（IC50）及凋亡检测。结果荧光检测表明干细胞培养基诱导的胶质瘤细胞高表达干细胞标记蛋白CD133、Nestin，同时高表达耐药标记蛋白MGMT。qRT—PCR及Western blot结果提示，高氧干预胶质瘤干细胞后，其干细胞标记蛋白CD133、Nestin表达水平均低于常氧处理组（P〈0．05），分化标记蛋白GFAP表达水平增高（P〈0．05），而耐药标记蛋白MGMT则显著降低（P〈0．05）。胶质瘤干细胞不同氧浓度预处理后添加替莫唑胺干预，凋亡结果提示高氧组凋亡率显著高于常氧组（P〈0．05）；而IC50检测提示，高氧组IC50值显著低于常氧组（P〈0．05）。结论高氧通过抑制胶质瘤干细胞干性表达并促进其分化致化疗增敏，本研究为高压氧联合化疗治疗胶质瘤并改善胶质瘤患者的预后提供新的理论依据。

关键词：神经胶质瘤肿瘤干细胞高氧化疗增敏

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米诺环素介导小胶质细胞形态转换减轻缺血性脑卒中早期脑损伤的机制研究

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第三军医大学学报 2017年第11期39卷 1105-1111页

作者：张波唐俊张建波杨立铭陈志杨云峰朱刚第三军医大学西南医院神经外科全军神经外科研究所全军神经系统疾病微创诊治专科中心全军神经创伤防治重点实验室重庆400038 四川武警总队乐山医院神经外科四川乐山614000

目的观察大鼠缺血性脑损伤早期的病理生理特点,探讨米诺环素在缺血性脑损伤早期的神经保护效应及可能机制。方法线栓法制备大鼠缺血性脑损伤(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,在MCAO 6、24 h分别给予米诺环素腹腔注射,通过... 详细信息

目的观察大鼠缺血性脑损伤早期的病理生理特点,探讨米诺环素在缺血性脑损伤早期的神经保护效应及可能机制。方法线栓法制备大鼠缺血性脑损伤(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,在MCAO 6、24 h分别给予米诺环素腹腔注射,通过TTC染色观察脑梗死面积,TUNEL染色及尼氏染色检测神经元凋亡情况;免疫荧光染色了解小胶质细胞形态变化以及Western blot检测凋亡通路NF-κB表达情况。使用Morris水迷宫检测手术28 d后大鼠学习记忆能力。结果米诺环素减少MCAO 6 h后大鼠脑梗死面积[(43.0±5.3)cm^3vs(36.0±6.8)cm^3,P<0.01],减少脑神经元凋亡数量并促进M2型(神经保护型)小胶质细胞增殖,MCAO 24 h后米诺环素治疗不能改善脑梗死以及神经元细胞凋亡(P>0.05)。米诺环素显著减少MCAO 6 h诱导的凋亡信号通路蛋白NF-κB的表达(P<0.01)。MCAO 28 d后大鼠学习记忆能力较假手术组显著降低;米诺环素显著改善MCAO后学习记忆能力(P<0.05),而MCAO 24 h后米诺环素不能改善大鼠神经功能障碍,差异无统计学意义(P>0.05)。结论米诺环素能促进缺血性脑卒中早期活化小胶质细胞向M2型转化并抑制凋亡信号通路,减轻脑缺血诱导的神经炎症及细胞凋亡,改善大鼠学习记忆功能。

关键词：米诺环素缺血性脑卒中 M2型小胶质细胞细胞凋亡

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转运蛋白在脑出血模型中表达的实验研究

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中华神经外科杂志 2016年第4期32卷 409-415页

作者：冯阳刘伟赵恒立戴志强刘昕冯华第三军医大学西南医院神经外科全军神经外科研究所全军神经创伤防治重点实验室重庆400038

目的研究转运蛋白（TSPO）在小鼠脑出血模型中的表达情况。方法采用自体血注入法建立小鼠脑出血模型。应用28分法评价不同出血量的两组小鼠（平均出血量分别为15μl和25μl）在脑出血后1d的神经功能损伤情况，并采用Westernblot方法检... 详细信息

目的研究转运蛋白（TSPO）在小鼠脑出血模型中的表达情况。方法采用自体血注入法建立小鼠脑出血模型。应用28分法评价不同出血量的两组小鼠（平均出血量分别为15μl和25μl）在脑出血后1d的神经功能损伤情况，并采用Westernblot方法检测假手术组、出血量15μl组和出血量25出组的TSPO表达水平。以Westernblot方法及免疫荧光染色检测出血量25斗1组小鼠造模后12h，1、3及5dTSPO的表达情况。结果28分法评分结果显示，两组脑出血模型小鼠的神经功能评分较假手术组均有升高（均P〈0．05），且以出血量25μl组更为明显（P〈0．05）。Westernblot检测结果表明，两组脑出血模型小鼠TSPO的表达明显多于假手术组（均P〈0．05），且出血量25斗l组的TSPO表达高于出血量15μl组（P〈0．05）。在造模后12h内，出血量25μl组的TSPO表达水平与假手术组之间的差异无统计学意义（P〉0．05），造模后1、3及5dTSPO表达水平逐渐升高，且均高于假手术组（均P〈0．05）。免疫荧光染色结果表明，TSPO表达在造模后12h不明显，而在造模后1、3及5d逐渐增加，且多表达于血肿周围脑组织的小胶质细胞和星形胶质细胞。结论TSPO在小鼠脑出血后血肿周围脑组织中表达增多，其表达水平与出血后时间、出血量有关，提示可能与脑出血后继发性炎性反应及损伤相关。

关键词：脑出血转运蛋白神经胶质增生小鼠

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莱菔硫烷对小鼠脊髓损伤后后肢功能的作用

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第三军医大学学报 2016年第10期38卷 1066-1072页

作者：廖小俊袁继超朱海涛刘伟陈亚星胡胜利李兰林江凯第三军医大学西南医院神经外科全军神经外科研究所全军神经创伤防治重点实验室重庆400038

目的观察莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对小鼠脊髓损伤后炎症反应、胶质瘢痕、轴突再生的干预作用,探讨其在脊髓损伤中的作用机制。方法雌性ICR小鼠66只,按随机数字表法分为4组:假手术组(n=12)、单纯损伤组(n=18)、莱菔硫烷组[5 mg/(kg... 详细信息

目的观察莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对小鼠脊髓损伤后炎症反应、胶质瘢痕、轴突再生的干预作用,探讨其在脊髓损伤中的作用机制。方法雌性ICR小鼠66只,按随机数字表法分为4组:假手术组(n=12)、单纯损伤组(n=18)、莱菔硫烷组[5 mg/(kg·d)SFN,ip,n=18]、溶剂对照组(等体积玉米油腹腔注射,n=18)。假手术组仅咬除椎板,余各组行脊髓夹伤术,制备脊髓夹伤模型。建模后1、7、14、21、28 d进行小鼠后肢运动功能评分(BMS评分);Western blot检测建模后7 d各损伤组小鼠脊髓GFAP、CSPG、P65表达情况,28 d后各损伤组GAP-43表达情况;ELISA检测建模后7 d各组小鼠脊髓TNF-α、IL-1β表达情况;免疫荧光染色观察建模后7 d各损伤组小鼠脊髓GFAP、CSPG、P65表达情况。结果假手术组BMS评分9分,各脊髓损伤组术后后肢运动功能均有不同程度恢复,术后28 d时单纯损伤组评分为(2.17±0.41)分,溶剂对照组(2.33±0.52)分,莱菔硫烷组(3.33±0.52)分,后者与前二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。术后7 d行免疫荧光染色可见各脊髓损伤组星形胶质细胞活化,GFAP、CSPG、P65表达增加,单纯损伤组与溶剂对照组较莱菔硫烷组更明显。术后7 d莱菔硫烷组GFAP、CSPG、P65蛋白相对表达量均较单纯损伤组与溶剂对照组低(P<0.05),术后28 d莱菔硫烷组GAP-43蛋白相对表达量较单纯损伤组与溶剂对照组明显增加(P<0.05)。建模后7 d,莱菔硫烷组小鼠脊髓TNF-α、IL-1β表达较其余损伤组明显降低(P<0.05)。结论莱菔硫烷可减轻小鼠脊髓损伤后炎症反应,抑制胶质瘢痕形成,促进轴突再生,改善后肢运动功能。

关键词：莱菔硫烷脊髓损伤胶质瘢痕轴突再生

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基底节区脑出血并发肺部感染的危险因素分析

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重庆医学 2016年第7期45卷 890-892页

作者：冯阳张超文泽贤李荣伟胡荣冯华第三军医大学西南医院神经外科/全军神经外科研究所/全军神经创伤防治重点实验室重庆400038

目的研究基底节脑出血并发肺部感染的危险因素。方法回顾性分析2013年3月至2014年9月收治的152例基底节脑出血患者的临床资料,统计肺部感染率并分析感染发生的危险因素,并统计肺部感染病原菌构成。结果 152例基底节脑出血患者发生肺部感... 详细信息

目的研究基底节脑出血并发肺部感染的危险因素。方法回顾性分析2013年3月至2014年9月收治的152例基底节脑出血患者的临床资料,统计肺部感染率并分析感染发生的危险因素,并统计肺部感染病原菌构成。结果 152例基底节脑出血患者发生肺部感染106例,发生率为69.7%,治疗方式、吸烟史、昏迷史为引起基底节脑出血肺部感染的独立危险因素(P<0.05);肺部感染组106例患者共分离病原菌153株,其中革兰阴性菌132株,革兰阳性菌10株,真菌12株。结论基底节脑出血合并肺部感染发生率较高,应对引起肺部感染的相关危险因素引起重视,降低发生率,提高患者生存质量。

关键词：脑出血肺部感染危险因素

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两种实验性大鼠脑出血模型的对比研究

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第三军医大学学报 2016年第13期38卷 1494-1500页

作者：王哲刘震刘昕倪怀亮郑岩毛玉莹冯华解放军第537医院外科陕西宝鸡721006 北京军区总医院263临床部北京100000 第三军医大学西南医院神经外科全军神经外科研究所全军神经创伤防治重点实验室重庆400038

目的研究自体血和胶原酶两种脑出血造模方法对大鼠神经预后血脑屏障通透性及胶质瘢痕增生情况的影响。方法 144只成年健康雄性SD大鼠,分为自体血组和胶原酶组两组,并按预设时间点(3、7、14、21 d,n=6)观察大鼠Bederson评分、伊文思蓝渗... 详细信息

目的研究自体血和胶原酶两种脑出血造模方法对大鼠神经预后血脑屏障通透性及胶质瘢痕增生情况的影响。方法 144只成年健康雄性SD大鼠,分为自体血组和胶原酶组两组,并按预设时间点(3、7、14、21 d,n=6)观察大鼠Bederson评分、伊文思蓝渗透性、脑含水量、HE染色和免疫组化荧光染色。结果 Bederson评分、伊文思蓝渗透性和脑含水量结果显示,两组的神经预后及血脑屏障通透性均随时间恢复正常,而胶原酶组与自体血组相比,Bederson评分、伊文思蓝渗透量和脑含水量在第3、7、14天均明显升高(P<0.05);HE染色结果说明,两组均随时间增加存在血肿吸收,炎症渗出,胶质瘢痕形成情况,而在第14天和第21天,自体血组较胶原酶组相比,血肿基本吸收完毕,炎症渗出及胶质瘢痕形成较少;免疫组化染色结果表示,两组血肿周围的胶质细胞原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达随时间增加,但第7天和第14天胶原酶模型组GFAP表达水平更高。结论与自体血模型相比,胶原酶模型的神经功能损伤恢复过程更慢,同时血脑屏障破坏更严重,胶质瘢痕形成更明显,大鼠胶原酶注射模型更适合长时程的临床脑出血研究。

关键词：脑出血脑水肿血脑屏障胶质瘢痕胶质细胞原纤维酸性蛋白

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左旋龙脑促进血脑屏障短暂性开放及其化疗增敏作用研究

左旋龙脑促进血脑屏障短暂性开放及其化疗增敏作用研究

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第21届全军神经外科学学术年会

作者：尹怡曹鎏李飞冯华第三军医大学西南医院神经外科全军神经外科研究所全军神经创伤防治重点实验室

目的：1、研究左旋龙脑诱导血脑屏障通透性改变的时效、量效关系;2、探讨左旋龙脑是否能增加胶质瘤荷瘤小鼠肿瘤组织内的顺铂含量，延长其生存期。

关键词：

来源：评论

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