检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2008年第5期30卷 382-385页

作者：伏建峰曹红卫王宁刘鑫杨东郑新川鲁永玲郑江第三军医大学西南医院综合实验研究中心重庆400038

目的从黄芩中提取具有拮抗内毒素（LPS）活性的物质。方法采用大孔吸附树脂和高效液相色谱（HPLC）等技术将黄芩水提物分离成若干组分，应用生物传感器技术检测各组分与LPS的活性中心LipidA的结合活性，动态比浊法鲎试验检测各组分（2．... 详细信息

目的从黄芩中提取具有拮抗内毒素（LPS）活性的物质。方法采用大孔吸附树脂和高效液相色谱（HPLC）等技术将黄芩水提物分离成若干组分，应用生物传感器技术检测各组分与LPS的活性中心LipidA的结合活性，动态比浊法鲎试验检测各组分（2．0mg／L）对LPS（0．2μg／L）的中和作用，籍此筛选出活性组分；逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测所筛组分对LPS诱导的RAW264．7细胞的Toll样受体4（TLR4）mRNA表达的影响，ELISA法检测所筛组分对LPS（100μg／L）刺激的RAW264．7细胞释放肿瘤坏死因子α（TNF-α）的影响。结果获得5种HPLC产物S3K1-5，其中S3K1与LipidA结合活性最高，S3K1（2．0mg／L）可显著抑制LPS（0．2μg／L）介导的鲎试剂的凝结反应（P〈0．05）；以LPS（100μg／L）刺激RAW264．7细胞，其TLR4mRNA表达增强，给予40、80、160mg／L的S3K1预处理后能减弱LPS诱导RAW264．7细胞的TLR4mRNA表达（P〈0．05）；单纯LPS刺激RAW264．7细胞释放的TNF-α为（1757．61±207．25）ng／L（对照组），给予40、80、160mg／L的S3K1预处理后TNF-α浓度依次为（1324．53±149．73）、（893．87±140．77）、（799．97±124．21）ng／L，随S3K1剂量递增而减低，均显著低于对照组（P〈0．05）。结论从黄芩中提取到具有拮抗LPS活性的组分S3K1，S3K1在体外对LPS具有一定的中和作用，可抑制LPS诱导的RAW264．7细胞的TLR4mRNA表达，进而抑制LPS诱导的RAW264．7细胞活化。

关键词：黄芩内毒素生物传感器大孔吸附树脂

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荧光定量PCR技术检测尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒感染的结果分析

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第三军医大学学报 2005年第13期27卷 1366-1366,1369页

作者：冯文曦梅玲王宁郑红第三军医大学西南医院综合实验研究中心重庆400038

女性生殖道尖锐湿疣(condyloma acuminatum,CA)发病率高,危害性大,如能早期发现亚临床和潜伏性人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染,可控制病情向临床期发展,同时也防止疾病的播散[1]。我们采用荧光定量PCR(FQ-PCR)技术对485... 详细信息

女性生殖道尖锐湿疣(condyloma acuminatum,CA)发病率高,危害性大,如能早期发现亚临床和潜伏性人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染,可控制病情向临床期发展,同时也防止疾病的播散[1]。我们采用荧光定量PCR(FQ-PCR)技术对485例女性生殖道尖锐湿疣、疑尖锐湿疣患者进行了HPV-6、11DNA检测分析。1材料与方法1.1标本来源及采样标本来源于本院门诊妇产科共485例,其中被临床病理诊断为尖锐湿疣(CA)患者148例,疑为尖锐湿疣患者337例。可疑患者外观表现外阴为一般丘疹状突起,阴道壁可见扁平状突起,但表面光滑,无绒毛样感,无菜花样感

关键词：人乳头瘤病毒感染荧光定量 PCR技术检测女性生殖道尖锐湿疣患者 HPV-6 早期发现 PCR) 检测分析发病率危害性潜伏性亚临床临床期 DNA

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一种高效FITC标记LPS方法的建立及应用

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第三军医大学学报 2009年第9期31卷 822-824页

作者：李宇宁曹红卫郑江刘鑫鲁永玲王艳艳第三军医大学西南医院综合实验研究中心重庆400038

目的探索一种高效的荧光素示踪内毒素(lipopolysaccharide,LPS)的方法。方法将LPS解聚为单体后,加入表面活性剂,在37℃中性溶液中用FITC标记LPS18h,通过分子截留技术将小分子游离的FITC及其他杂质从FITC-LPS中除去,并用荧光分光光度计... 详细信息

目的探索一种高效的荧光素示踪内毒素(lipopolysaccharide,LPS)的方法。方法将LPS解聚为单体后,加入表面活性剂,在37℃中性溶液中用FITC标记LPS18h,通过分子截留技术将小分子游离的FITC及其他杂质从FITC-LPS中除去,并用荧光分光光度计分别测定标记反应液和纯化后的FITC-LPS溶液的荧光值,将两者进行比较,测定荧光标记率。结果本方法标记的FITC-LPS在激光共聚焦显微镜下能进行良好示踪。经荧光分光光度计检测其标记率为LPS∶FITC=1∶33.13(物质的量比值)。结论利用表面活性剂与超滤纯化相结合对LPS进行FITC标记的方法较传统方法效率高,操作简单可靠,为医药学实验中示踪LPS提供了一条有效的途径。

关键词：内毒素 FITC 标记方法

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氯喹通过上调泛素-蛋白酶体相关分子表达抑制LPS活化巨噬细胞的实验研究

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第三军医大学学报 2016年第10期38卷 1111-1115页

作者：丁长钰龙宇鹏杨永军郑江第三军医大学西南医院综合实验研究中心重庆400038

目的观察氯喹(chloroquine,CQ)对脂多糖/内毒素(lipopolysaccharide/endotoxin,LPS)刺激的巨噬细胞中泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)相关分子A20、TRIM33和USP28表达的影响。方法应用LPS刺激小鼠Raw264.7细胞,荧光定量PCR检测酸化抑制剂CQ对LPS诱导锌指蛋白A20、泛素连接酶TRIM33和泛素特异性蛋白酶USP28的mRNA表达,Western blot检测CQ对LPS诱导A20和TRIM33的蛋白表达。应用siRNA转染技术沉默A20,荧光定量PCR检测CQ对LPS诱导炎性细胞因子TNF的mRNA表达。结果与LPS对照组比较,经CQ预处理的Raw264.7细胞中,A20、TRIM33、USP28的mRNA表达均显著上调[(3.197±0.013)vs(1.292±0.009),(1.627±0.113)vs(0.797±0.083),(1.387±0.144)vs(0.742±0.061),P<0.05],A20和TRIM33的蛋白表达也同样上调。采用siRNA干扰A20基因表达,则CQ预处理组细胞中LPS诱导的TNF-αmRNA表达显著上调[(7.650±0.113)vs(4.145±0.120),P<0.01]。结论 CQ可显著上调LPS活化的巨噬细胞中泛素化相关分子A20、TRIM33和USP28的表达,而干扰A20基因表达可显著上调LPS活化Raw264.7细胞中TNF-α的mRNA表达,提示泛素-蛋白酶体系统及其相关分子参与CQ抑制LPS-TLR4信号通路的活化。

关键词：氯喹内毒素巨噬细胞泛素-蛋白酶体系统

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心导管留置术对大鼠脏器功能影响的实验研究

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第三军医大学学报 2006年第14期28卷 1473-1475页

作者：王宁郑江郭毅斌魏利召第三军医大学西南医院综合实验研究中心重庆400038

目的观察心导管留置术对大鼠血培养和脏器形态、功能的影响,为临床前药理研究制备稳定可靠的动物模型。方法采用改良的心导管留置术建立大鼠模型,每24小时定时采血作血培养并检测血白细胞(WBC)和丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(A... 详细信息

目的观察心导管留置术对大鼠血培养和脏器形态、功能的影响,为临床前药理研究制备稳定可靠的动物模型。方法采用改良的心导管留置术建立大鼠模型,每24小时定时采血作血培养并检测血白细胞(WBC)和丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌酸磷酸激酶(CK)等生化指标和血浆内毒素(LPS)水平,术后7 d取心、肝、肾作病理形态学观察。结果术后大鼠血培养均未检出细菌,血中WBC、ALT、AST、BUN、Cr及LPS基本在正常范围内,CK值变化较大但术后第7天恢复正常。心、肝、肾无病理学改变。结论此心导管留置术对大鼠感染和脏器功能影响小,动物模型稳定可靠。

关键词：心导管留置术大鼠器官功能

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应用荧光定量PCR技术检测淋球菌等性传播疾病病原微生物

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第三军医大学学报 2002年第11期24卷 1357-1357,1360页

作者：冯文曦曹红卫赵静怡郑红钟白玉第三军医大学附属西南医院综合实验研究中心重庆400038

在性传播疾病中，淋球菌（NG），沙眼衣原体（CT），解脲支原体（UU）的感染较为常见。我们采用的PCR方法结合了荧光探针的体外扩增和检测技术，不仅把假阳性率降低到最低限度，同时还保留了常规PCR的高灵敏性和特异性。通过对人生殖道... 详细信息

在性传播疾病中，淋球菌（NG），沙眼衣原体（CT），解脲支原体（UU）的感染较为常见。我们采用的PCR方法结合了荧光探针的体外扩增和检测技术，不仅把假阳性率降低到最低限度，同时还保留了常规PCR的高灵敏性和特异性。通过对人生殖道分泌物样本中以上3种病原体DNA的测定，检测了1 122例临床送检可疑标本，为上述3种病原体感染的早期诊断以及性病高危人群的初筛等，提供了核酸水平上的参考依据。现报告如下。

关键词：荧光定量PCR技术检测淋球菌性传播疾病病原微生物

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MP-1对脓毒症小鼠的保护作用及其机制

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中华创伤杂志 2004年第11期20卷 678-681页

作者：郭毅斌郑江吕根法卫国第三军医大学附属西南医院综合实验研究中心重庆400038

目的观察阳离子多肽MP-1对脓毒症小鼠腹腔巨噬细胞(PMφ)呼吸爆发的影响。方法观察MP-1(3mg/kg)对内毒素(LPS)(20mg/kg)攻击的脓毒症模型小鼠的保护作用;体外培养小鼠PMφ,将MP-1与PMφ在37℃下孵育2h后,用LPS400ng/ml刺激PMφ,采用紫... 详细信息

目的观察阳离子多肽MP-1对脓毒症小鼠腹腔巨噬细胞(PMφ)呼吸爆发的影响。方法观察MP-1(3mg/kg)对内毒素(LPS)(20mg/kg)攻击的脓毒症模型小鼠的保护作用;体外培养小鼠PMφ,将MP-1与PMφ在37℃下孵育2h后,用LPS400ng/ml刺激PMφ,采用紫外分光光度法检测并换算得到超氧阴离子(O-2)的量和还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶的活性,荧光法检测过氧化氢(H2O2)浓度。结果MP-1可显著抑制LPS刺激小鼠PMφ产生O-2、H2O2及细胞膜上NADPH氧化酶的活性。结论MP-1对LPS攻击的小鼠有显著的保护作用,其机制可能与MP-1对脓毒症小鼠巨噬细胞呼吸爆发的抑制作用有关。

关键词： MP PMφ 小鼠脓毒症保护作用 LPS 呼吸爆发辅酶 NADPH氧化酶超氧阴离子

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寡核苷酸骨架对CpG基元诱导人巨噬细胞释放细胞因子的影响

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中国抗生素杂志 2003年第2期28卷 115-118页

作者：周红郑江鲁永玲罗平第三军医大学基础医学部药理学教研室重庆400038 第三军医大学西南医院综合实验研究中心重庆400038

目的　探讨不同寡核苷酸骨架对GG 寡核苷酸CpGODNs导致小鼠死亡、诱导细胞因子释放能力的影响。方法　实验前 1h经腹腔注射 6 0 0mg/kgD 氨基半乳糖敏化小鼠 ,采用磷酸硫化CpG 寡核苷酸 (PsCpGODN)、Psnon CpGODN、磷酸二酯CpG 寡核苷酸... 详细信息

目的　探讨不同寡核苷酸骨架对GG 寡核苷酸CpGODNs导致小鼠死亡、诱导细胞因子释放能力的影响。方法　实验前 1h经腹腔注射 6 0 0mg/kgD 氨基半乳糖敏化小鼠 ,采用磷酸硫化CpG 寡核苷酸 (PsCpGODN)、Psnon CpGODN、磷酸二酯CpG 寡核苷酸 (PoCpGODN )和Ponon CpGODN腹腔注射小鼠 ,注射剂量为每只小鼠 10nmol ,观察 7d内小鼠死亡率的差异。体外培养THP 1细胞系 ,在THP 1细胞培养体系中加入上述制剂后 ,37℃、5 %CO2 孵箱中培养 2 0h后离心取上清 ,测定上清中TNF α、IL 6、IL 12的浓度。同时观察CpGODN刺激THP 1细胞 4h后TLR9的表达情况。结果　PsCpGODN可诱导小鼠的死亡以及细胞因子的大量释放 ,而其它三种制剂则无此能力 ;而且PsCpGODN诱导TNF α释放的能力随浓度的增加而增加 ;CpGODN导致的细胞TLR9的表达增加与细胞因子的释放密切相关。结论　磷酸硫代骨架的CpGODN具有导致动物死亡和诱导巨噬细胞大量释放细胞因子的作用 ,磷酸二酯骨架的CpGODN则无此能力。

关键词：寡核苷酸骨架磷酸硫化CpG-寡核苷酸 PsCpGODN 巨噬细胞细胞因子

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诺帝对体外内皮细胞三维成型的抑制作用

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第三军医大学学报 2007年第12期29卷 1190-1192页

作者：白家驷史景泉郑江卞修武第三军医大学西南医院综合实验研究中心重庆400038 第三军医大学西南医院病理学研究所重庆400038

目的观察自行研制的抗肿瘤制剂诺帝(Nordy)对三维胶原体外培养条件下恶性胶质瘤细胞诱导ECV304细胞血管生成的抑制作用。方法采用不同浓度、不同时相点给药;观测在恶性胶质瘤细胞系SHG-44诱导ECV304细胞生长和小管样结构形成的过程中,EC... 详细信息

目的观察自行研制的抗肿瘤制剂诺帝(Nordy)对三维胶原体外培养条件下恶性胶质瘤细胞诱导ECV304细胞血管生成的抑制作用。方法采用不同浓度、不同时相点给药;观测在恶性胶质瘤细胞系SHG-44诱导ECV304细胞生长和小管样结构形成的过程中,ECV304细胞增殖周期、凋亡率以及小管样结构形成数目、大小等指标。比较诺帝对SHG-44细胞诱导ECV304细胞形成小管样结构作用的差异。结果诺帝对SHG-44细胞诱导的体外三维培养ECV304细胞小管形成具有明显的抑制作用,主要表现在细胞增殖周期、凋亡率以及小管样结构形成数目、大小等指标都有不同程度的改变。结论诺帝通过对细胞核增殖的抑制和诱导部分凋亡作用来抑制小管结构的形成,是一种具有抗体外血管生成作用的良好制剂。

关键词：血管生成胶质瘤内皮细胞细胞周期凋亡

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氯喹抑制EC DNA、内毒素协同诱导的IL-6释放

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解放军医学杂志 2003年第3期28卷 203-205页

作者：周红罗平郑江鲁永玲第三军医大学药理学教研室重庆400038 第三军医大学西南医院综合实验研究中心

为明确氯喹抑制细菌DNA、内毒素协同诱导IL 6释放的作用机制 ,将小鼠于实验前 1h经腹腔注射D GalN敏化 ,观察氯喹对CpGODN或LPS攻击小鼠 7天内死亡率的影响 ;体外培养ANA 1细胞 ,观察氯喹对ECDNA和LPS共同诱导IL 6释放能力的影响 ;体外... 详细信息

为明确氯喹抑制细菌DNA、内毒素协同诱导IL 6释放的作用机制 ,将小鼠于实验前 1h经腹腔注射D GalN敏化 ,观察氯喹对CpGODN或LPS攻击小鼠 7天内死亡率的影响 ;体外培养ANA 1细胞 ,观察氯喹对ECDNA和LPS共同诱导IL 6释放能力的影响 ;体外培养THP 1细胞 ,观察氯喹对ECDNA和LPS刺激THP 1细胞后TLR 9、TLR4表达及NF κB活化的影响。结果发现 ,小鼠在CpGODN或LPS攻击后 4h内全部死亡 ,但预先给予氯喹 ( 3 0mg/kg)的CpGODN、LPS攻击小鼠仅分别有 4只和 5只死亡 (P <0 0 5 ) ;氯喹可明显降低ECDNA、LPS协同诱导的IL 6释放(P <0 0 1) ;ECDNA和LPS均可诱导TLR9、TLR4的表达和NF κBp65的活化 ,氯喹可显著抑制ECDNA和LPS诱导的TLR9表达以及LPS诱导的NF κB活化 ,对TLR4的表达抑制作用较弱 ,对CpGODN诱导的NF κB活化抑制作用亦较弱。提示氯喹能够明显降低ECDNA和LPS协同诱导的IL 6释放 ,该作用与氯喹对CpGODN。

关键词：氯喹大肠杆菌 DNA 细菌白细胞介素6 Toll样受体 NF-κB

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