检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理通讯 2005年第3期22卷 22-23页

作者：郭毅斌郑江第三军医大学西南医院综合实验研究中心重庆400038

目的：明确蜂毒肽Mastopamn-1（MP-1）的抗菌／抗内毒素（LPS）作用以及对脓毒症模型小鼠的保护作用，并探讨其可能的机制.方法采用LPS（20mg／kg）和大肠杆菌（***）ATCC25922活菌（1×10^11CFU／kg）静脉注射攻击小鼠，观察静脉注... 详细信息

目的：明确蜂毒肽Mastopamn-1（MP-1）的抗菌／抗内毒素（LPS）作用以及对脓毒症模型小鼠的保护作用，并探讨其可能的机制.方法采用LPS（20mg／kg）和大肠杆菌（***）ATCC25922活菌（1×10^11CFU／kg）静脉注射攻击小鼠，观察静脉注射MP-1（3mg／kg）对小鼠的保护作用；微量稀释法检测MP-1对18株细菌的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC），透射电镜观察MP-1（1001μg／ml）对***25922的形态的影响；应用生物传感器检测MP-1与LPS／LipidA结合的亲和力，通过动态比浊法鲎试验定量检测MP-1对LPS的中和作用，

关键词：抗内毒素作用蜂毒肽实验研究最小抑菌浓度(MIC) 抗菌体内外动态比浊法鲎试验 MP 模型小鼠

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部分性病病原体在重庆地区流行情况分析

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西南国防医药 2002年第6期12卷 524-525页

作者：罗平卫国龚小云郑江第三军医大学西南医院综合实验研究中心重庆400038

为了解淋球菌(NG)、解脲支原体(UU)、沙眼衣原体(CT)等性病病原体在重庆地区的感染率及在人群中的分布情况,随机收集我院2000-08～2001-04的门诊标本,采用荧光定量PCR方法检测上述病原体,并对这三种病原体的感染率以及感染者的性别差异... 详细信息

为了解淋球菌(NG)、解脲支原体(UU)、沙眼衣原体(CT)等性病病原体在重庆地区的感染率及在人群中的分布情况,随机收集我院2000-08～2001-04的门诊标本,采用荧光定量PCR方法检测上述病原体,并对这三种病原体的感染率以及感染者的性别差异、年龄差异分析如下:

关键词：性病病原体重庆流行情况

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地骨皮提取物CL-5拮抗内毒素的实验研究

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创伤外科杂志 2008年第3期10卷 260-263页

作者：伏建峰曹红卫龙宇鹏王宁刘鑫杨东鲁永玲郑江第三军医大学西南医院综合实验研究中心重庆400038

目的观察地骨皮提取物（CL-5）对内毒素（LPS）的体内外拮抗活性。方法应用生物传感器技术检测CL-5与LPS的活性中心类脂A（Lipid A）的结合活性,ELISA法检测不同浓度CL-5（50、100、200mg/L）对LPS（100μg/L）刺激RAW264.7细胞释放肿... 详细信息

目的观察地骨皮提取物（CL-5）对内毒素（LPS）的体内外拮抗活性。方法应用生物传感器技术检测CL-5与LPS的活性中心类脂A（Lipid A）的结合活性,ELISA法检测不同浓度CL-5（50、100、200mg/L）对LPS（100μg/L）刺激RAW264.7细胞释放肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响,进一步观察不同剂量（30、60、90mg/kg）的CL-5对致死剂量热灭活大肠杆菌（***）攻击小鼠的72小时存活率。结果10～640mg/L的CL-5,特异性结合值（RU）为36.5～481.2arc/s,随CL-5浓度递增而升高;单纯LPS刺激RAW264.7细胞（对照组）释放的TNF-α为（2 479.03±61.43）ng/L,给予50、100、200mg/L CL-5预处理后TNF-α浓度依次为（2 210.29±70.95）、（1 998.27±111.24）、（1 423.28±86.35）ng/L,随CL-5剂量递增而减少,均显著低于对照组（P〈0.05）;以1.30×1011CFU/kg热灭活***攻击小鼠（对照组）72小时动物死亡率为100%,而以30、60、90mg/kg CL-5处理后,小鼠72小时存活率分别为50%、60%和80%,随CL-5注射剂量的增加而升高,均显著高于对照组（P〈0.05）。结论CL-5与Lipid A有一定的结合活性,可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞活化,并对致死剂量热灭活***攻击的小鼠具有保护作用。

关键词：内毒素地骨皮脓毒症

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人趋化因子巨噬细胞炎性蛋白3α的克隆与原核表达

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重庆医学 2006年第4期35卷 335-338页

作者：顾涛罗福康沈大斌龚小云郑红第三军医大学西南医院综合实验研究中心重庆400038

目的克隆人趋化因子MIP-3 alpha基因,表达并初步纯化MIP-3 alpha融合蛋白。方法从人扁桃体中提取总RNA,再进行RT-PCR,扩增MIP-3 alpha成熟蛋白基因,并在5′和3′端分别添加NcoI和EcoRI酶切位点,通过与之对应的存在于pET32a(+)质粒上的... 详细信息

目的克隆人趋化因子MIP-3 alpha基因,表达并初步纯化MIP-3 alpha融合蛋白。方法从人扁桃体中提取总RNA,再进行RT-PCR,扩增MIP-3 alpha成熟蛋白基因,并在5′和3′端分别添加NcoI和EcoRI酶切位点,通过与之对应的存在于pET32a(+)质粒上的酶切位点重组于pET32a(+)载体上,转化*** BL21trxB(DE3),筛选阳性克隆,酶切鉴定,DNA测序检测插入序列的正确性,缺失突变MIP-3 alpha序列前端多余碱基,获得MIP-3 alpha天然蛋白表达载体pET32a(+)/MIP-3 al-pha,SDS-PAGE分析其表达,Western Blot验证融合蛋白。大量表达并初步纯化MIP-3 alpha融合蛋白。结果成功克隆了MIP-3 alpha基因,表达并初步纯化得到MIP-3 alpha融合蛋白。结论在大肠杆菌中成功构建的MIP-3 alpha硫氧还蛋白融合表达载体,以可溶性蛋白的方式表达MIP-3 alpha硫氧还蛋白。

关键词： MIP-3 alpha 融合表达 pET32a(+)质粒蛋白纯化

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细菌内毒素定量检测的影响因素分析及对策

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局解手术学杂志 2003年第3期12卷 215-216页

作者：卫国郑江第三军医大学西南医院综合实验研究中心重庆400038

细菌内毒素检查法(简称鲎试验)是利用鲎血变形细胞制成的鲎试剂与微量内毒素产生凝集反应的现象,作为判断样品中细菌内毒素含量是否符合规定的一种方法.

关键词：细菌内毒素定量检测影响因素鲎试剂灵敏度

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中药赤芍拮抗内毒素活性的实验研究

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四川生理科学杂志 2004年第4期26卷 190-191页

作者：魏利召郑江蒋栋能第三军医大学西南医院综合实验研究中心重庆400038

目的:从中药赤芍提取分离出具有拮抗内毒素(LPS)的有效成分并进行活性检测,探讨赤芍抗LPS作用的物质基础.方法:将LPS包被于生物传感器的疏水性样品池以测定赤芍提取物与LPS的亲合力为指导,通过硅胶柱层析技术和常规中药分离技术对中药... 详细信息

目的:从中药赤芍提取分离出具有拮抗内毒素(LPS)的有效成分并进行活性检测,探讨赤芍抗LPS作用的物质基础.方法:将LPS包被于生物传感器的疏水性样品池以测定赤芍提取物与LPS的亲合力为指导,通过硅胶柱层析技术和常规中药分离技术对中药赤芍拮抗LPS有效成分进行分离提取,应用鲎实验测定该成分对LPS的中和作用及其对LPS刺激小鼠RAW264.7细胞释放TNF-α的影响.

关键词：中药赤芍拮抗作用内毒素活性作用 LPS 有效成分

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人趋化因子受体CCR6的克隆、表达及其功能分析

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重庆医学 2006年第18期35卷 1663-1665页

作者：沈大斌龚小云顾涛罗福康郑红第三军医大学西南医院综合实验研究中心重庆400038

目的构建人趋化因子受体6(CCR6)cDNA序列的真核表达载体,并在HEK293细胞中表达,为研究CCR6生物学功能和筛选CCR6拮抗剂奠定基础。方法采用RT-PCR方法从人扁桃体克隆CCR6受体的DNA片段,并将该片段插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,构建重... 详细信息

目的构建人趋化因子受体6(CCR6)cDNA序列的真核表达载体,并在HEK293细胞中表达,为研究CCR6生物学功能和筛选CCR6拮抗剂奠定基础。方法采用RT-PCR方法从人扁桃体克隆CCR6受体的DNA片段,并将该片段插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-CCR6;将该质粒pcDNA3.1(+)-CCR6转染HEK293细胞,用流式细胞术检测转染pcDNA3.1(+)-CCR6质粒的HEK293细胞;采用体外趋化实验、钙流实验,验证转染pcDNA3.1(+)-CCR6质粒的HEK293细胞表面表达的CCR6的生物学活性。结果经RT-PCR获得了编码人CCR6受体的DNA片段,构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-CCR6;转染HEK293细胞,经流式细胞仪检测、趋化实验、钙流实验证实,表达CCR6的HEK293细胞具有趋化因子受体CCR6的生物学活性。结论重组人趋化因子受体CCR6克隆成功,并在HEK293细胞中获得了表达,为研究CCR6的生物学功能及筛选CCR6拮抗剂奠定了基础。

关键词：人趋化因子受体6 pcDNA3.1(+) 趋化实验钙流实验克隆

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以lipid A为靶点应用生物传感器技术筛选抗炎中药

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中国药业 2008年第7期17卷 4-6页

作者：龙宇鹏郑江第三军医大学西南医院综合实验研究中心重庆400038

目的应用生物传感器跟踪检测技术从传统抗炎中药中筛选具有拮抗内毒素作用的中药,并对其进行活性物质含量排序。方法将lipid A包被于生物传感器的非衍生板,建立靶点,测定22种去鞣质后的中药水煎液与lipid A的亲和力;选择具有较高亲和力... 详细信息

目的应用生物传感器跟踪检测技术从传统抗炎中药中筛选具有拮抗内毒素作用的中药,并对其进行活性物质含量排序。方法将lipid A包被于生物传感器的非衍生板,建立靶点,测定22种去鞣质后的中药水煎液与lipid A的亲和力;选择具有较高亲和力的药物与定量脂多糖(5ng/mL)于37℃混合孵育30min,再测定其与lipid A的亲和力,以评价药物水提液中活性物质的含量。结果22种中药均具有与lipid A较高的亲和力(大于100RU);侧柏叶、地骨皮、石榴皮等16种中药中与lipid A特异性结合的活性物质含量较高。结论应用生物传感器技术建立的筛选平台快速而客观,筛选出的16种中药均含有能与lipid A发生特异性结合作用的非鞣质类活性物质。

关键词： lipidA 内毒素生物传感器中药亲和力

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应用生物传感器技术筛选拮抗细菌肽聚糖的中药

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重庆医学 2007年第3期36卷 230-232页

作者：龙宇鹏和生琦陈益国张向武郭毅斌伏建峰郑江第三军医大学西南医院综合实验研究中心重庆400038

目的应用生物传感器技术从传统抗炎中药中筛选具有拮抗细菌肽聚糖(peptidoglycan,PGN)活性的中药并对其进行活性物质含量的排序。方法将可溶性PGN包被于生物传感器的生物素化样品池以建立靶点,测定114种中药水提液去鞣质后与PGN的亲和力... 详细信息

目的应用生物传感器技术从传统抗炎中药中筛选具有拮抗细菌肽聚糖(peptidoglycan,PGN)活性的中药并对其进行活性物质含量的排序。方法将可溶性PGN包被于生物传感器的生物素化样品池以建立靶点,测定114种中药水提液去鞣质后与PGN的亲和力;选择亲和力较高的26种药物与定量PGN(50ng/ml)37℃混合孵育30min,再测定其与PGN的亲和力,以评价药物水提液中活性物质的含量。结果114种中药中,侧柏叶、黄连、牡丹皮等26种中药与PGN具有较高亲和力(>100RU);侧柏叶、地骨皮、毛冬青等9种中药中与PGN特异性结合的活性物质含量较高。结论生物传感器跟踪技术快速、高效、客观,应用其筛选具有结合PGN作用的中药具有可行性,筛选出的9种中药均含有非鞣质类能与PGN发生特异性结合作用的活性物质。

关键词：肽聚糖生物传感器中药亲和力

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HPLC法测定黄芩中2′,5,6′,7-四羟基二氢黄酮醇的含量

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中国药房 2009年第36期20卷 2840-2841页

作者：伏建峰郑新川王宁史清海冉继华袁文常郑江兰州军区乌鲁木齐总医院全军临床检验诊断中心乌鲁木齐市830000 第三军医大学西南医院综合实验研究中心重庆市400038

目的:建立以高效液相色谱法测定黄芩药材中2′,5,6′,7-四羟基二氢黄酮醇(THF)含量的方法。方法:色谱柱为ODS C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为0.1%醋酸-甲醇(80∶20),柱温为35℃,流速为1.0mL·min-1,检测波长为287nm。结果:TH... 详细信息

目的:建立以高效液相色谱法测定黄芩药材中2′,5,6′,7-四羟基二氢黄酮醇(THF)含量的方法。方法:色谱柱为ODS C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为0.1%醋酸-甲醇(80∶20),柱温为35℃,流速为1.0mL·min-1,检测波长为287nm。结果:THF进样量在2～10μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9999);平均回收率为99.56%,RSD=1.82%(n=6)。结论:本方法线性、稳定性、重现性及回收率均较为理想,适于黄芩药材的质量控制。

关键词：黄芩 2',5,6',7-四羟基二氢黄酮醇高效液相色谱法含量测定

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