检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2015年第10期37卷 945-951页

作者：刘健侯天勇李志强陈贝克邓墨渊罗飞许建中第三军医大学西南医院骨科、全军矫形外科中心、组织工程国家地方联合工程实验室、重庆市再生重建医学工程技术研究中心、重庆市组织工程实验室全军骨组织工程重点实验室重庆400038

目的探讨功能化自组装纳米多肽DGEAmx水凝胶对小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的粘附、增殖和成骨分化的影响。方法原子力显微镜观察功能化自组装多肽形成的纳米级结构特征;用倒置显微镜对贴壁细胞拍照计数,对比细... 详细信息

目的探讨功能化自组装纳米多肽DGEAmx水凝胶对小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的粘附、增殖和成骨分化的影响。方法原子力显微镜观察功能化自组装多肽形成的纳米级结构特征;用倒置显微镜对贴壁细胞拍照计数,对比细胞粘附情况;用CCK-8法检测细胞增殖;激光共聚焦显微镜观察细胞在材料表面形貌;检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、成骨分化特异性基因Ⅰ型胶原(ICAM-1)和骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)的表达来评价成骨效果。结果原子力显微镜观察功能化自组装多肽DGEAmx可以形成纳米纤维网状结构;倒置显微镜对贴壁细胞拍照计数结果显示在30、60、90 min时DGEAmx组对比RADA16-Ⅰ组粘附细胞数差异有统计学意义(P<0.05);CCK-8法检测结果显示在培养第3、5、7天,DGEAmx组MSCs增殖较RADA16-Ⅰ组明显增高(P<0.05);DGEAmx组成骨诱导3、7、14 d后,ALP活性高于RADA16-Ⅰ组(P<0.05);Real-time PCR结果显示成骨诱导3、7、14 d后DGEAmx组较RADA16-Ⅰ组有更高的ICAM-1和OCN的表达(P<0.05)。结论功能化自组装多肽DGEAmx纳米纤维水凝胶支架能促进MSCs粘附、增殖和成骨分化,作为骨组织工程支架材料有良好的应用潜力。

关键词：自组装多肽水凝胶纳米纤维支架材料组织工程

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PMMA骨水泥与磷酸钙骨水泥诱导成膜及其对成骨活性的差异

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第三军医大学学报 2015年第10期37卷 973-977页

作者：魏富达汪小华谢肇第三军医大学西南医院骨科、全军矫形外科中心、组织工程国家地方联合工程实验室、重庆市再生重建医学工程技术研究中心、重庆市组织工程实验室重庆400038

目的比较PMMA骨水泥与磷酸钙骨水泥诱导周围形成膜的结构和成骨活性的差异。方法 32只健康成年新西兰大白兔按照随机数字表法分为PMMA组和磷酸钙组,每组16只,双侧桡骨制造15 mm骨缺损,分别植入PMMA和磷酸钙骨水泥,4、6周后每组选取2只... 详细信息

目的比较PMMA骨水泥与磷酸钙骨水泥诱导周围形成膜的结构和成骨活性的差异。方法 32只健康成年新西兰大白兔按照随机数字表法分为PMMA组和磷酸钙组,每组16只,双侧桡骨制造15 mm骨缺损,分别植入PMMA和磷酸钙骨水泥,4、6周后每组选取2只兔子取出骨水泥周围包裹的诱导膜比较膜厚度及血管密度;第4周取出骨水泥并在膜内植入自体松质骨,植骨后8、12周分别通过放射学和组织学评估新生骨形成的情况。结果 1 4、6周时PMMA骨水泥组诱导形成的膜厚度分别为(1 108±26)、(945±42)μm,磷酸钙骨水泥组诱导成膜厚度为(945±34)、(778±22)μm,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。PMMA骨水泥诱导的膜血管密度分别为6、3个/cm2,而磷酸钙骨水泥诱导形成的膜血管密度分别为2、2个/cm2。2放射学检测可见植骨后第8、12周PMMA组成骨按Lane-Sandhu X线评分(2.84±0.36)、(4.22±0.54)优于磷酸钙组(1.98±0.15)、(3.16±0.23),两组间差异有统计学意义(P<0.05).3第8、12周组织学观察PMMA组按Nilsson组织学评分标准进行评分(3.14±0.29)、(4.63±0.37),成骨优于磷酸钙组(2.10±0.18)、(3.59±0.21),两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论在新西兰兔桡骨骨缺损处PMMA骨水泥诱导形成的生物膜较磷酸钙骨水泥诱导形成的生物膜具有更强的促血管化和成骨活性。

关键词：诱导膜 PMMA骨水泥磷酸钙骨水泥骨重建

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个体化组织工程骨与同种异体骨修复骨纤维异常增殖症术后骨缺损的对比研究

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第三军医大学学报 2014年第9期36卷 945-949页

作者：吴治林侯天勇刘杰王序全许建中第三军医大学西南医院骨科全军矫形外科中心组织工程国家地方联合工程实验室重庆市再生重建医学工程技术研究中心重庆市组织工程实验室重庆400038

目的对比分析个体化组织工程骨和同种异体骨修复骨纤维异常增殖症术后骨缺损的长期临床疗效和生物安全性。方法回顾性分析10例个体化组织工程骨病例(组织工程骨组)和10例同种异体骨病例(异体骨组)移植修复重建骨纤维异常增殖症刮除术后... 详细信息

目的对比分析个体化组织工程骨和同种异体骨修复骨纤维异常增殖症术后骨缺损的长期临床疗效和生物安全性。方法回顾性分析10例个体化组织工程骨病例(组织工程骨组)和10例同种异体骨病例(异体骨组)移植修复重建骨纤维异常增殖症刮除术后骨缺损的临床资料。比较两种方法的愈合时间、骨性愈合评分、并发症发生率及植骨失败率,评价组织工程骨治疗骨纤维异常增殖症的临床疗效及其长期生物安全性。结果组织工程骨组随访(63.6±19.6)个月,1例术后2年出现病理骨折再次手术,其余9例术后骨缺损获得良好修复,愈合时间为(3.3±1.6)个月,骨性愈合评分为(2.6±0.5)分。异体骨组随访(55.1±15.4)个月,1例术后2年出现复发,3例出现骨移植区疼痛、局部肿胀等并发症,骨缺损均获得良好修复,愈合时间为(6.0±2.4)个月,骨性愈合评分为(2.4±0.8)分。2组之间在并发症发生率以及愈合评分方面差异无统计学意义(P>0.05);在愈合时间方面的差异有统计学意义(P<0.05)。结论个体化组织工程骨治疗骨纤维异常增殖症能获得优于同种异体骨的疗效且具有较高的生物安全性,是治疗骨纤维异常增殖症的一种新选择。

关键词：组织工程骨骨纤维异常增殖症同种异体骨骨移植

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Lysine-Cyclic RGD肽对骨髓间充质干细胞黏附、增殖和分化的影响

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第三军医大学学报 2015年第8期37卷 713-717页

作者：罗科宇梅铁牛邓墨渊李志强侯天勇罗飞许建中第三军医大学西南医院全军矫形外科中心组织工程国家地方联合工程实验室重庆市再生重建医学工程技术研究中心重庆市组织工程实验室重庆400038

目的研究物理电荷与生物配基两种因素相结合的新型表面修饰剂Lysine-Cyclic RGD(LcRGD)肽对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的黏附、增殖及分化的影响。方法以光学接触角仪衡量LcRGD肽修饰表面的亲水性;以离心黏附实验... 详细信息

目的研究物理电荷与生物配基两种因素相结合的新型表面修饰剂Lysine-Cyclic RGD(LcRGD)肽对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的黏附、增殖及分化的影响。方法以光学接触角仪衡量LcRGD肽修饰表面的亲水性;以离心黏附实验、震荡黏附实验评价LcRGD肽对MSCs的黏附性能;以CCK-8实验评价LcRGD表面改性DBM上MSCs的增殖活力;以Western blot法检测LcRGD表面改性脱钙骨基质(decalcified bone matrix,DBM)上MSCs的Runx2和OCN蛋白的表达。结果 LcRGD肽修饰表面接触角为(29.33±4.06)°,远低于普通cRGD肽修饰表面的接触角(63.72±8.65)°,提示LcRGD肽具有更好的亲水性(P<0.01);离心黏附实验和震荡黏附实验显示相对于普通cRGD肽,LcRGD肽从细胞黏附早期开始便具有更好的细胞黏附性能;CCK-8实验提示MSCs在LcRGD修饰的DBM支架材料上的增殖活力高于普通cRGD肽修饰的DBM支架材料(P<0.05);Western blot结果提示相对于普通cRGD肽修饰的DBM,MSCs在LcRGD修饰的DBM上表达更高的成骨标志蛋白水平,提示LcRGD肽具有更好的骨诱导性。结论相对于普通的cRGD肽,物理电荷与生物配基相结合的LcRGD肽具有更好的细胞黏附、促增殖和骨诱导性能。

关键词：组织工程支架材料细胞黏附生物材料表面修饰

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新型自组装多肽水凝胶对成骨细胞前体细胞作用的体外研究

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第三军医大学学报 2016年第8期38卷 817-823页

作者：陈贝克侯天勇刘健李志强邓墨渊罗飞许建中第三军医大学西南医院骨科全军矫形外科中心组织工程国家地方联合工程中心重庆市再生重建医学工程技术研究中心重庆市组织工程实验室全军骨组织工程重点实验室重庆400038

目的观察新型自组装肽TRSAWmx水凝胶对在体外小鼠成骨细胞前体细胞MC3T3-E1细胞粘附效果、增殖能力及成骨分化能力的影响。方法通过原子力显微镜观察新型水凝胶的自组装性能;以倒置显微镜对贴壁细胞计数,比较不同材料细胞的粘附;以CCK-... 详细信息

目的观察新型自组装肽TRSAWmx水凝胶对在体外小鼠成骨细胞前体细胞MC3T3-E1细胞粘附效果、增殖能力及成骨分化能力的影响。方法通过原子力显微镜观察新型水凝胶的自组装性能;以倒置显微镜对贴壁细胞计数,比较不同材料细胞的粘附;以CCK-8检测和评价不同材料上细胞的增殖;通过激光共聚焦显微镜观察细胞在材料表面的生长;茜素红-S染色观察钙结节形成;检测材料上培养的细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性以及细胞ALP、骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等基因的表达。结果 TRSAWmx能自组装成纳米纤维结构;在接种30、60、90 min时,TRSAWmx组细胞粘附数明显高于空白组(P<0.05);3、5、7 d时TRSAWmx组细胞有着更佳的增殖活力(P<0.05);在成骨诱导培养3、7、14 d时,TRSAWmx组ALP活性明显高于RADA16-Ⅰ组(P<0.05);培养14 d后,TRSAWmx组茜素红-S染色可见钙结节形成多,成骨相关基因ALP、OCN、VEGF表达水平更高(P<0.05)。结论新型自组装多肽纳米水凝胶TRSAWmx在体外能有效提高MC3T3-E1细胞粘附、增殖和成骨分化能力。

关键词：水凝胶 RADA16-TRSAW MC3T3-E1细胞骨组织工程成骨分化

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一期前路病灶清除同种异体骨移植病灶区内固定术治疗脊柱结核的随访观察

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第三军医大学学报 2015年第12期37卷 1267-1271页

作者：陈非凡张泽华李建华罗飞周强谢肇何清义代飞许建中第三军医大学西南医院骨科全军矫形外科中心组织工程国家地方联合工程实验室重庆市再生重建医学工程技术研究中心重庆市组织工程实验室全军骨组织工程重点实验室重庆400038

目的探讨经前路一期病灶清除椎间植骨融合内固定手术对脊柱结核患者的治疗效果,评价同种异体髂骨块的安全性和有效性。方法回顾性分析2008年1月至2012年12月在我科诊断为脊柱结核患者病例资料,严格按手术指征筛选出适合采用经前路一期... 详细信息

目的探讨经前路一期病灶清除椎间植骨融合内固定手术对脊柱结核患者的治疗效果,评价同种异体髂骨块的安全性和有效性。方法回顾性分析2008年1月至2012年12月在我科诊断为脊柱结核患者病例资料,严格按手术指征筛选出适合采用经前路一期病灶清除椎间植骨融合内固定手术的患者共60例,植骨材料选择同种异体髂骨块。术后继续标准化抗结核化疗方案12~18个月,同时佩戴支具3~6个月;随访9~36（22.80±7.71）个月,定期复查CRP、ESR,监测肝肾功;观察X线、CT、MRI等影像学改变。根据手术前后及末次随访影像学资料分析畸形矫正度数和植骨融合情况。结果所有患者均未出现脊髓血管损伤感染等并发症,切口均一期愈合。根据Bridwell标准,骨融合时间9个月至1年,达到Ⅰ级骨性融合标准56例,Ⅱ级骨性融合标准4例。术后半年内血沉逐渐恢复,末次随访ESR均在正常范围（0~20 mm/h）;术后融合节段Cobb’s角丢失2.38°±1.86°。结论在有效的抗结核化疗基础上,通过一期前路病灶清除椎间植骨融合内固定手术,应用同种异体髂骨块作为椎间植骨材料,可摆脱供骨区并发症困扰,有效矫正后凸畸形、重建脊柱稳定性。

关键词：同种异体骨脊柱结核前路内固定

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不同浓度的葡聚糖/明胶复合水凝胶支架性能表征及其对体外构建组织工程髓核的影响

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第三军医大学学报 2015年第8期37卷 707-712页

作者：甘翼搏李培周强莫秀梅宋磊徐源李松涛李素凯第三军医大学西南医院全军矫形外科中心组织工程国家地方联合工程实验室重庆市再生重建医学工程技术研究中心重庆市组织工程实验室重庆400038 东华大学化工与生物工程学院上海201620 第三军医大学新桥医院骨科重庆400037

目的研究不同浓度的葡聚糖/明胶复合水凝胶支架材料对体外构建组织工程髓核的影响,对其性能进行表征,探索适用于组织工程髓核的水凝胶浓度。方法通过Schiff交联反应制备葡聚糖/明胶复合水凝胶支架材料,对不同浓度（6%、8%、10%、12%、14... 详细信息

目的研究不同浓度的葡聚糖/明胶复合水凝胶支架材料对体外构建组织工程髓核的影响,对其性能进行表征,探索适用于组织工程髓核的水凝胶浓度。方法通过Schiff交联反应制备葡聚糖/明胶复合水凝胶支架材料,对不同浓度（6%、8%、10%、12%、14%）水凝胶的内部形态结构、孔径、孔隙率、杨氏模量和细胞相容性进行评估,分离培养猪原代髓核细胞,以P1代细胞在不同浓度的水凝胶内部进行三维培养,MTT染色观察细胞活性,Real-time PCR法检测髓核细胞特异性基因aggrecan和typeⅡcollagen表达。结果葡聚糖/明胶复合水凝胶在电镜扫描下呈现多孔网络结构,随着浓度的升高,水凝胶的孔径（38.182-82.675μm）和孔隙率（95.5%-98.3%）持续下降,杨氏模量不断升高（0.135-11.366 k Pa）;该水凝胶具有较好的细胞相容性,但是6%、8%的水凝胶分别在接种细胞后第4、7天后细胞的黏附和增殖显著下降（P〈0.05）。接种1周后,浓度为10%的水凝胶内部三维培养的髓核细胞活性显著高于其他浓度水凝胶（P〈0.05）,同时aggrecan、typeⅡcollagen基因表达显著高于其他各组（P〈0.05）。结论浓度为10%的葡聚糖/明胶复合水凝胶兼具有适宜的三维多孔网络结构、稳定的力学结构以及较好的细胞相容性,适用于构建组织工程髓核。

关键词：支架复合水凝胶浓度组织工程髓核

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聚乳酸-聚己内酯组织工程纤维环支架的制备及其性能研究

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第三军医大学学报 2014年第9期36卷 914-918页

作者：李玉东徐源周强宋磊刘威甘翼搏李培李松涛莫秀梅第三军医大学西南医院全军矫形外科中心组织工程国家地方联合工程实验室重庆市再生重建医学工程技术研究中心重庆市组织工程实验室重庆400038 东华大学化工与生物工程学院上海201620

目的探讨新的静电纺丝方法制备聚乳酸-聚己内酯[P(LLA-CL)]纳米纱作为组织工程纤维环支架的可行性,检测其理化性能及细胞相容性。方法在传统静电纺丝方法制备P(LLA-CL)纳米纤维支架的基础上,改用动态水流接收装置制备相同成分的纳米纱支... 详细信息

目的探讨新的静电纺丝方法制备聚乳酸-聚己内酯[P(LLA-CL)]纳米纱作为组织工程纤维环支架的可行性,检测其理化性能及细胞相容性。方法在传统静电纺丝方法制备P(LLA-CL)纳米纤维支架的基础上,改用动态水流接收装置制备相同成分的纳米纱支架,并对材料的表面形态、纤维直径、孔径、孔隙率、力学性能进行评估,分离培养兔纤维环细胞种植到支架上,观察细胞在材料上的生长形态、黏附、增殖、渗透情况。结果 P(LLA-CL)纳米纤维支架表面呈致密的网状结构,纤维排列无方向性,而P(LLA-CL)纳米纱支架表面呈疏松的网状结构,纤维排列有一定的取向;纳米纤维支架的孔径为(4.57±1.87)μm,孔隙率(74.2±1.5)%,纳米纱的孔径为(38.43±15.54)μm,孔隙率(86.7±9.3)%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);两者的力学性能相似。扫描电镜(SEM)显示纤维环细胞在纳米纤维支架上呈多边形生长,在纳米纱支架上呈长梭形生长;CCK-8结果显示细胞在两种支架材料上的黏附均很好,细胞在纳米纱上的增殖较纳米纤维支架明显增加;HE染色提示细胞虽然只能生长在纳米纤维支架表面,但却很好地渗透到纳米纱支架内部。结论静电纺丝方法制备的P(LLA-CL)纳米纱支架具有良好的三维孔隙结构和细胞相容性,有望成为较理想的组织工程纤维环支架。

关键词：纤维环组织工程支架聚乳酸-聚己内酯纳米纱

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碱性成纤维细胞生长因子和骨形态发生蛋白在Origami2体系中的可溶表达及二者促成骨的协同效应

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第三军医大学学报 2018年第10期40卷 882-888页

作者：涂兵叶吉星甘翼搏张立泰欧阳斌罗向东周强陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院全军矫形外科中心组织工程国家地方联合工程实验室重庆市再生重建医学工程技术研究中心重庆市组织工程实验室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院全军烧伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点试验室重庆400038

目的建立优化高效的碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein,BMP-2)蛋白重组方法,阐明二者在促成骨中的协同效应。方法优化bFGF和BMP-2成熟肽的基因序列密码子,获... 详细信息

目的建立优化高效的碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein,BMP-2)蛋白重组方法,阐明二者在促成骨中的协同效应。方法优化bFGF和BMP-2成熟肽的基因序列密码子,获得适用于大肠杆菌Origami2体系表达的bFGF及BMP-2成熟肽cDNA片段;利用PCR法将bFGF成熟肽cDNA片段插入原核表达质粒pColdⅡ中,构建重组原核表达质粒pColdⅡ-bFGF;利用PCR法将BMP-2成熟肽cDNA片段插入原核表达质粒pET-30a(+)中,构建重组原核表达质粒pET-30a(+)-BMP-2,转入大肠杆菌Origami2中表达纯化;运用双酶切、质粒测序及Western blot技术证明Origami2表达体系的构建效果;进行细胞增殖实验、碱性磷酸酶(alkaline phosphates,ALP)染色观察和体内成骨效率检测等,探索bFGF、BMP-2在促成骨中的协同效应。结果双酶切和质粒测序鉴定证明成功构建重组大肠杆菌pColdⅡ-bFGF/Origami2和pET30a(+)-BMP-2/Origami2表达体系,Western blot检测发现蛋白正确表达。经过Ni-NTA亲和层析纯化后bFGF及BMP-2纯度高达90%。通过对二者比例的优化筛选,发现40 ng/mL bFGF+40 ng/mL rh BMP-2时,大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖效率、ALP活性及体内成骨效率最高,是二者促成骨的最优效组合。结论成功构建高效表达的pColdⅡ-bFGF/Origami2和pET30a(+)-BMP-2/Origami2表达体系,实现了bFGF及BMP-2的高效表达。bFGF和BMP-2的优化联合应用具有促成骨协同效应。

关键词：碱性成纤维细胞生长因子骨形态发生蛋白2 基因重组协同效应成骨

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力生长因子通过调节BMP信号通路的式促进BMP2的成骨效能

力生长因子通过调节BMP信号通路的式促进BMP2的成骨效能

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第十一届全国再生医学(干细胞与组织工程)学术研讨会暨第七届全国组织工程与再生医学大会

作者：邓墨渊董世武侯天勇罗飞邢军超许建中第三军医大学西南医院全军矫形外科中心组织工程国家地方联合工程实验室重庆市再生重建医学工程技术研究中心重庆市组织工程实验室重庆400038

局部应用BMP2能促进大段骨缺损治疗,辅助的力学刺激则能放大BMP2的成骨效应.力生长因子的C端24肽(MGF24E),一个力敏感分子,已经被证实能促进成骨.在此,我们提出MGF24E能通过调节BMP信号途径的方式增强BMP2成骨效能的假说.为了证实这一猜... 详细信息

局部应用BMP2能促进大段骨缺损治疗,辅助的力学刺激则能放大BMP2的成骨效应.力生长因子的C端24肽(MGF24E),一个力敏感分子,已经被证实能促进成骨.在此,我们提出MGF24E能通过调节BMP信号途径的方式增强BMP2成骨效能的假说.为了证实这一猜想,对成骨细胞进行了Smad5siRNA的预处理,研究了在Smad5正常表达和沉默条件下MGF24E、BMP2以及BMP2/MGF24E等因子刺激对成骨细胞Smad1/5/8磷酸化、下游成骨相关分子表达和矿化等方面的影响.此外,制备了兔桡骨中段15mm的骨缺损模型,运用影像学、组织学和免疫组化等评价手段分析了细胞因子对缺损愈合的作用.显示,MGF24E能通过上调p-Smadl/5/8蛋白表达和下游成骨基因表达的方式增强BMP2活化的Smad信号途径强度.相对于5nM BMP2的单独作用,25nM MGF24E和5nM BMP2联合刺激能得到更高的ALP mRNA表达和细胞矿化水平.然而,对MGF24E调节的BMP途径的抑制却能完全阻断联合刺激引起的成骨分化.在体内实验中,MGF24E能上调内源性BMP2的表达.较之单一BMP2用药,联合了MGF24E的BMP2给药能显著性地增加再生骨组织的BMD值、影像学评分以及形态学修复,为BMP2的骨缺损治疗提供了一种新的策略.

关键词：骨缺损力生长因子骨形成蛋白成骨效能

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