检索结果-内蒙古大学图书馆

中国组织工程研究与临床康复 2010年第27期14卷 5071-5074页

作者：缪殿南梁宇佳闫国和董世武戴晓天熊玮解放军第三军医大学西南医院呼吸内科重庆市400038 解放军第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆市400038 解放军第三军医大学基础医学部解剖学教研室国家教育部生物力学与组织工程重点实验室生物力学研究室重庆市400038

背景:基于肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor,TNF)可溶性相关凋亡诱导配体(soluble related apoptosis inducing ligand,sTRAIL)抗瘤的生物特性,克隆sTRAIL基因,构建其真核表达载体,为肿瘤细胞凋亡的实验研究奠定基础。目的:构建真... 详细信息

背景:基于肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor,TNF)可溶性相关凋亡诱导配体(soluble related apoptosis inducing ligand,sTRAIL)抗瘤的生物特性,克隆sTRAIL基因,构建其真核表达载体,为肿瘤细胞凋亡的实验研究奠定基础。目的:构建真核表达载体pEGFP-N1/sTRAIL,并转染真皮干细胞,以探究sTRAIL基因导入真皮干细胞的表达情况。方法:采用RT-PCR二步法,以人胎盘组织总RNA为模板,扩增sTRAIL的cDNA序列,将其克隆入pMD18-T载体,随后亚克隆入载体pEGFP-N1中,构建其真核瞬时表达载体pEGFP-N1/sTRAIL,以Fugene6转染技术,将sTRAIL基因导入真皮干细胞。倒置显微镜下观测转染后真皮干细胞生长变化及sTRAIL在其中的表达等情况。RT-PCR法对目的基因转染的真皮干细胞进行鉴定。结果与结论:克隆到sTRAIL基因的cDNA序列,成功构建了其真核表达载体,该真核表达载体能携带sTRAIL基因在真皮干细胞中正常表达。倒置显微镜下观测到转染后真皮干细胞生长状态与未转染的真皮干细胞无差异。以经sTRAIL基因转染的真皮干细胞该基因组DNA为模板,用RT-PCR法能扩增到sTRAIL基因cDNA序列。

关键词：人sTRAIL基因克隆真核表达载体真皮干细胞绿色荧光

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锌指蛋白A20基因对内皮细胞缺氧损伤的保护作用

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中国临床解剖学杂志 2008年第2期26卷 163-165页

作者：张剑凯朱楚洪糜建红应大君广东医学院基础学院解剖学教研室广东湛江524023 第三军医大学解剖学教研室国家教育部生物力学与组织工程重点实验室生物力学研究室重庆400038

目的:探讨外源性锌指蛋白家族中A20基因对缺氧诱导内皮细胞凋亡的影响。方法:①培养原代人脐静脉内皮细胞,将细胞分组建立缺氧模型;②采用DOTAP脂质体介导pcDNA3.1EHA20质粒转染培养的内皮细胞,经G418筛选,免疫荧光检测A20基因的表达;③... 详细信息

目的:探讨外源性锌指蛋白家族中A20基因对缺氧诱导内皮细胞凋亡的影响。方法:①培养原代人脐静脉内皮细胞,将细胞分组建立缺氧模型;②采用DOTAP脂质体介导pcDNA3.1EHA20质粒转染培养的内皮细胞,经G418筛选,免疫荧光检测A20基因的表达;③TUNEL原位末端标记法检测转染前后缺氧诱导内皮细胞凋亡情况。结果:A20基因在内皮细胞中得到有效表达,正常对照组及转染A20基因组人脐静脉内皮细胞凋亡为(4±1)%,缺氧培养24h后对照组与转染A20基因组凋亡分别为(18±1)%、(8±1)%,两者相差有显著性意义(P<0.05)。结论:A20基因能够显著抑制缺氧诱导的内皮细胞凋亡,可能在缺氧所致内皮细胞损伤中具有保护作用。

关键词： A20基因内皮细胞缺氧凋亡

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人跖肌腱的力学性质测试与组织学观察

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第三军医大学学报 2007年第19期29卷 1889-1891页

作者：马双陶陈卫军第三军医大学基础医学部人体解剖学教研室国家教育部生物力学与组织工程重点实验室生物力学研究室重庆400038

目的探讨跖肌腱不同部分的力学性能差异,为临床选用跖肌腱作为自体移植材料提供生物力学依据。方法新鲜意外死亡成人尸体8具共计15侧跖肌腱,分别截成长约6cm的试件共56例,分为上段、中段、下段3组,对其中50例进行拉伸试验,其余6例在预... 详细信息

目的探讨跖肌腱不同部分的力学性能差异,为临床选用跖肌腱作为自体移植材料提供生物力学依据。方法新鲜意外死亡成人尸体8具共计15侧跖肌腱,分别截成长约6cm的试件共56例,分为上段、中段、下段3组,对其中50例进行拉伸试验,其余6例在预定应力分别为30、40、50Mpa的拉伸作用后进行组织学观测。结果跖肌腱的平均最大载荷、拉伸强度、弹性模量分别为(83.19±42.52)N,(60.32±21.80)、(714.83±285.44)MPa,其中下段的拉伸强度显著大于上、中段。结论跖肌腱的生物力学性能适应于自体移植材料的需要。

关键词：跖肌腱生物力学组织学

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雪旺细胞与脊髓前角运动神经元共培养对其功能的影响

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第三军医大学学报 2007年第23期29卷 2226-2229页

作者：陈建梅李兵仓王建民崔晓萍陈菁第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 第三军医大学基础医学部人体解剖学教研室国家教育部生物力学与组织工程重点实验室重庆市生物力学实验室重庆400038

目的探讨脊髓前角运动神经元在间接共培养情况下是否可以对雪旺细胞(Schwann cells,SCs)的功能产生影响。方法从孕15d的SD胎鼠的脊髓内分离培养脊髓前角运动神经元;从新生1d的SD大鼠的坐骨神经内分离培养SCs。将上述两种细胞分别种植于T... 详细信息

目的探讨脊髓前角运动神经元在间接共培养情况下是否可以对雪旺细胞(Schwann cells,SCs)的功能产生影响。方法从孕15d的SD胎鼠的脊髓内分离培养脊髓前角运动神经元;从新生1d的SD大鼠的坐骨神经内分离培养SCs。将上述两种细胞分别种植于Transwell培养板的上、下室内,通过细胞计数、3H-TdR掺入观察SCs的存活与增殖情况,Western blot检测SCs表达脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)情况。然后将经共培养处理和未经共培养处理的SCs分别与经1%低氧预处理4h的脊髓前角运动神经元共培养72h,通过细胞计数、MTT法检测脊髓前角运动神经元存活情况。结果共培养组SCs增殖指数为(24197.6±739.8),明显优于直接培养组的(17451.2±512.7)(P<0.05),共培养组SCs表达BDNF的水平明显高于直接培养组(P<0.05)。缺氧后处理组脊髓前角运动神经元存活数量及MTT分别为(89.6±2.3)、(0.2384±0.0067),分别优于对照组的(66.4±4.8)、(0.1962±0.0059)(P<0.05)。结论在间接共培养情况下,脊髓前角运动神经元可以促进SCs的增殖及分泌BDNF等功能;SCs对缺氧后的脊髓前角运动神经元具有更明显的保护作用。利用Transwell进行间接共培养,可以获得活化状态的SCs。

关键词：运动神经元雪旺细胞增殖共培养

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血流切应力调控内皮型一氧化氮合酶的分子机制

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国际生物医学工程杂志 2007年第4期30卷 255-256,I0001-I0004页

作者：马双陶陈卫军重庆第三军医大学解剖学教研室国家教育部生物力学与组织工程重点实验室生物力学研究室 400038

血流切应力（flowshear stress，rss）是生理或病理条件下调节血管内皮细胞产生一氧化氮的最重要的刺激因素。FSS对内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）的调控包括基因转录的调节、转录后的调节和翻译后的... 详细信息

血流切应力（flowshear stress，rss）是生理或病理条件下调节血管内皮细胞产生一氧化氮的最重要的刺激因素。FSS对内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）的调控包括基因转录的调节、转录后的调节和翻译后的调节。eNOS基因转录以及转录后mRNA的稳定性能被FSS诱导加强。FSS通过游离钙离子浓度、磷酸化、eNOS相关蛋白以及细胞内易位等途径调节eNOS的催化活性。此外，FSS还能调控eNOS催化反应的辅助因子。

关键词：内皮型一氧化氮合酶切应力动脉粥样硬化

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版纳小型猪脱细胞骨基质的抗原检测及力学性状

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生物医学工程学杂志 2006年第3期23卷 551-555页

作者：董世武应大君朱楚洪孙建森张伟曾养志第三军医大学解剖学教研室国家教育部生物力学与组织工程重点实验室生物力学研究室重庆400038 云南农业大学动物科学与技术学院昆明650201

制备版纳小型猪脱细胞骨基质,进行组织学和生物力学观察,并进行了异种抗原-αga l表达的检测,结果表明经脱细胞处理后,去除了骨组织的细胞成分,同时消除了抗原性,力学性质上与正常对照无明显差异,可以作为一种合适的骨组织工程支架材料。

关键词：脱细胞骨基质异种抗原生物力学

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Osf2/Cbfa1对间充质干细胞的促成骨效应

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中国临床康复 2004年第14期8卷 2655-2657页

作者：董世武应大君刘光久段小军解放军第三军医大学解剖学教研室国家教育部生物力学与组织工程重点实验室生物力学研究室重庆市400038 解放军第三军医大学西南医院骨科重庆市400038

目的:观察重组腺病毒介导Osf2/Cbfa1对间充质干细胞(MSCs)的促成骨效应。方法:分离培养兔MSCs,用重组Osf2/Cbfa1腺病毒感染MSCs,蛋白印迹检测目的基因表达,对硝基苯磷酸二钠法和放免法分别检测成骨细胞标志基因碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素... 详细信息

目的:观察重组腺病毒介导Osf2/Cbfa1对间充质干细胞(MSCs)的促成骨效应。方法:分离培养兔MSCs,用重组Osf2/Cbfa1腺病毒感染MSCs,蛋白印迹检测目的基因表达,对硝基苯磷酸二钠法和放免法分别检测成骨细胞标志基因碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素表达。结果:感染后MSCs检测到Osf2/Cbfa1表达,从第4天开始,ATP活性和骨钙素含量较单纯诱导组和对照组显著增高。结论:Osf2/Cbfa1可明显促进MSCs向成骨细胞定向分化。

关键词：干细胞骨钙素细胞分化

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绿色荧光蛋白小鼠骨髓间充质干细胞的体外培养及成骨诱导

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解剖学报 2004年第5期35卷 555-557页

作者：董世武应大君糜建红王廷华羊惠君第三军医大学解剖学教研室国家教育部生物力学与组织工程重点实验室生物力学研究室重庆400038 昆明医学院神经科学研究所昆明650031 四川大学华西医学中心解剖学教研室成都610041

目的　分离培养绿色荧光蛋白 (GFP)小鼠骨髓间充质干细胞 (MSCs)并成骨诱导分化。　方法　密度梯度离心法分离GFP小鼠MSCs,体外传代扩增 ,条件培养基成骨方向诱导 ,利用荧光显微镜、HE染色、细胞化学和免疫组织化学方法进行观察。　结果... 详细信息

目的　分离培养绿色荧光蛋白 (GFP)小鼠骨髓间充质干细胞 (MSCs)并成骨诱导分化。　方法　密度梯度离心法分离GFP小鼠MSCs,体外传代扩增 ,条件培养基成骨方向诱导 ,利用荧光显微镜、HE染色、细胞化学和免疫组织化学方法进行观察。　结果　MSCs在传代和诱导分化过程中稳定表达GFP ,经成骨方向诱导 10d后 ,出现大量碱性磷酸酶和骨钙素染色阳性细胞。　结论　成功分离了GFP小鼠MSCs,并体外向成骨方向诱导分化。

关键词：间充质干细胞体外培养绿色荧光蛋白小鼠

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在体种植后骨髓基质干细胞(BMSCs)的定位及成骨效应研究

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中华创伤骨科杂志 2004年第10期6卷 1164-1166,1174页

作者：董世武应大君糜建红刘光久王廷华羊惠君第三军医大学解剖学教研室国家教育部生物力学与组织工程重点实验室生物力学研究室重庆市400038 昆明医学院神经科学研究所昆明市650031 四川大学华西医学中心解剖学教研室成都市610041

目的探讨骨髓基质干细胞(BMSCs)与支架材料复合,并种植到动物体内后的定位及成骨情况。方法分离培养绿色荧光蛋白(GFP)小鼠BMSCs,体外扩增后与猪脱细胞骨基质材料复合,植入裸鼠背部作为实验组,并以单纯材料植入作为对照组,8周后进行大... 详细信息

目的探讨骨髓基质干细胞(BMSCs)与支架材料复合,并种植到动物体内后的定位及成骨情况。方法分离培养绿色荧光蛋白(GFP)小鼠BMSCs,体外扩增后与猪脱细胞骨基质材料复合,植入裸鼠背部作为实验组,并以单纯材料植入作为对照组,8周后进行大体观察、常规组织学检查及荧光检测。结果实验组移植物周围部成骨明显,GFP阳性细胞较多;中央部材料降解吸收,GFP阳性细胞少见。对照组成骨较少。结论BMSCs作为种子细胞参与了骨重建,同时GFP示踪是观测BMSCs的一种较好方法。

关键词：组织工程骨髓基质干细胞绿色荧光蛋白成骨效应

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小鼠Osf2/Cbfa1基因的重组腺病毒构建及鉴定

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第三军医大学学报 2003年第21期25卷 1947-1950页

作者：董世武应大君刘光久朱楚洪张伟第三军医大学基础医学部解剖学教研室国家教育部生物力学与组织工程重点实验室生物力学研究室重庆400038

目的构建小鼠Osf2/Cbfa1基因的重组腺病毒载体,并观察其对NIH3T3细胞的感染情况。方法采用基因工程技术,经过2次亚克隆将Osf2/Cbfa1基因片段克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,利用PAdEasy系统进行细菌内同源重组后,脂质体转染293T细胞包装... 详细信息

目的构建小鼠Osf2/Cbfa1基因的重组腺病毒载体,并观察其对NIH3T3细胞的感染情况。方法采用基因工程技术,经过2次亚克隆将Osf2/Cbfa1基因片段克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,利用PAdEasy系统进行细菌内同源重组后,脂质体转染293T细胞包装、扩增,将重组腺病毒对成纤维细胞株NIH3T3进行感染。采用PCR方法对重组体腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中带有绿色荧光蛋白GFP报告基因,对病毒滴度和感染效率进行监测。结果酶切鉴定及PCR结果证明Osf2/Cbfa1基因重组腺病毒载体成功,病毒滴度达(1.6×1012)pfu/ml,并对NIH3T3细胞有很强感染能力。结论应用细菌内同源重组法成功构建了含小鼠Osf2/Cbfa1基因的重组腺病毒载体。

关键词：腺病毒 Osf2/Cbfal基因同源重组

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