检索结果-内蒙古大学图书馆

木犀草素通过抑制Drp1活性改善自噬流过程减少脑缺血再灌注后氧化应激损伤

第三军医大学学报 2020年第18期42卷 1777-1786页

作者：曾雪王龙赖玉洁陈波蒋航段晨阳张云东重庆医科大学附属第三医院神经疾病中心重庆401120 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院神经外科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)野战外科研究所战伤休克与输血研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探究木犀草素(luteolin)对脑缺血再灌注氧化应激损伤的保护机制。方法通过靶向药物评分方法筛选出对脑缺血再灌注损伤具有潜在治疗效果的抗氧化剂并在大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)小鼠模型中验证木犀草... 详细信息

目的探究木犀草素(luteolin)对脑缺血再灌注氧化应激损伤的保护机制。方法通过靶向药物评分方法筛选出对脑缺血再灌注损伤具有潜在治疗效果的抗氧化剂并在大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)小鼠模型中验证木犀草素的保护效果;在缺氧缺糖/复氧复糖(oxygen/glucose deprivation and re-oxygen/glucose,OGD/R)诱导的神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中使用不同浓度(10和50μmol/L)木犀草素药物处理,检测MTT细胞活力及氧自由基ROS含量变化;通过免疫荧光、蛋白印迹等方法检测木犀草素处理后OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞自噬流情况及线粒体形态变化,观察木犀草素对OGD/R后ROS生成和清除过程的影响。结果木犀草素对脑缺血再灌注靶向药物评分为96.86分。TTC染色结果显示木犀草素明显减少MCAO小鼠脑梗死面积(P<0.05)。OGD/R后SH-SY5Y细胞MTT值约为正常对照组的50%,使用50μmol/L的木犀草素处理后MTT值增加至83%(P<0.05),并且木犀草素显著减弱OGD/R诱导的ROS的产生,且呈剂量依赖性(P<0.05)。激光共聚焦结果显示50μmol/L木犀草素处理OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞后自噬小体荧光强度增高64.6%(P<0.05),自噬小体与溶酶体共定位情况提高1.56倍(P<0.05)。Western blot结果显示木犀草素明显抑制OGD/R后Drp1 Ser616磷酸化水平及Drp1线粒体转位(P<0.05),改善OGD/R后SH-SY5Y细胞线粒体形态(P<0.05)。结论木犀草素对于脑缺血再灌注后氧化应激损伤具有明显保护作用,一方面它可以通过改善自噬流过程促进线粒体自噬小体的降解,加速ROS的清除效率;另一方面它还可以通过抑制Drp1活性保护线粒体形态,减少ROS的产生。

关键词：木犀草素脑缺血再灌注线粒体氧自由基 Drp1 自噬流

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Musculin KO-Foxp3-GFPKI小鼠模型的制备及在严重创伤介导Treg-Th17失衡中的初步应用

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第三军医大学学报 2018年第16期40卷 1435-1443页

作者：余静唐婉琦杨雪马娓严军梁华平陆军军医大学(第三军医大学)第三附属医院(野战外科研究所)第一研究室、创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的制备转录因子Musculin(MSC)敲除(knockout,KO)-叉状头转录因子家族成员3(forkhead box P3,Foxp3)-绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)敲入(knockin,KI)小鼠模型,并初步应用于严重创伤介导调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)-Th17失衡研究。方法通过MSCKO纯合子(homozygote,-/-)小鼠和Foxp3-GFPKI纯合子(homozygote,+/+)小鼠杂交,获取MSCKO(heterozygote,+/-)-Foxp3-GFPKI(+/-)杂合子小鼠,再按同笼兄妹近亲繁殖方法进行杂合子配对,直到获取MSCKO-Foxp3-GFPKI纯合子小鼠。将获得MSCKO-Foxp3-GFPKI小鼠连续交配5代以上,观察各代小鼠的基因型、表现型和遗传稳定性。对获取的MSCKO-Foxp3-GFPKI小鼠和Foxp3-GFPKI小鼠实施失血/骨折,3 h后取周围淋巴结(lymph nodes,LN)、肠系膜淋巴结(mesenteric lymph nodes,MLN)、肠道集合淋巴结(Peyer’s patches,PP)、脾(spleen,SP)、骨髓(bone marrow,BM)和胸腺(thymus,Thy)。流式细胞术检测机体免疫器官和组织Treg的分布变化,qPCR检测MSC、Foxp3、孤核受体-γt(orphan nuclear receptor-γt,ROR-γt)的表达水平,进一步验证MSCKO-Foxp3-GFPKI小鼠的实用性,并初步探讨MSC对严重创伤介导Treg-Th17失衡的影响。结果杂交获得的各代MSCKO-Foxp3-GFPKI纯合子小鼠均能表达各分子标志物,活力、体质量和繁育能力正常。流式细胞术检测结果显示,各免疫器官和组织中均存在不同强度的GFP信号;严重创伤3 h后,MSCKO-Foxp3-GFPKI小鼠Treg在LN、MLN、PP和SP中的百分比分别为5.81%、4.81%、1.41%和3.1%,较创伤前差异有统计学意义。qPCR检测结果显示,相对正常组而言,野生型创伤组MSC在外周淋巴器官MLN(6.154 9)和PP(7.789 7)中的相对表达量显著升高(P<0.05,P<0.01);Foxp3在MSCKO创伤组MLN(2.591 2)和PP(1.506 4)中的相对表达量上升(P<0.01),表明MSC缺失可使创伤后Treg-Th17平衡左移;而ROR-γt在同组MLN(0.5395)和PP(0.544 9)中的相对表达量下降(P<0.01),同样证实了Treg-Th17平衡发生了偏移。结论成功制备MSCKO-Foxp3-GFPKI小鼠,遗传性状稳定,分子标志物和表现型明确。严重创伤后MSC可以影响Treg的分布,并使Treg-Th17平衡发生偏移,提示MSC可能作为严重创伤后恢复机体内环境免疫稳态的潜在调节靶点。

关键词： Musculin Foxp3 小鼠模型严重创伤 Treg-Th17失衡

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靶向肝癌的GPC3-CAR-T细胞的构建与功能鉴定

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中国肿瘤生物治疗杂志 2017年第7期24卷 748-755页

作者：吴斯玮敖翔郭韡邢伟安天琛敖罗权胡雪停李战徐祥第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第一研究室重庆400042

目的:构建靶向GPC3阳性肝癌细胞的嵌合抗原受体修饰T细胞[chimeric antigen receptor-modified T cell,CAR-T cell],并评估其对GPC3阳性肝癌细胞的杀伤效能。方法:选择偏爱密码子技术改造基因序列,以增强CAR分子表达效率,设计靶向GPC3... 详细信息

目的:构建靶向GPC3阳性肝癌细胞的嵌合抗原受体修饰T细胞[chimeric antigen receptor-modified T cell,CAR-T cell],并评估其对GPC3阳性肝癌细胞的杀伤效能。方法:选择偏爱密码子技术改造基因序列,以增强CAR分子表达效率,设计靶向GPC3抗原的CAR分子基因并构建携带GPC3-CAR基因的慢病毒表达载体p CDH-GPC3-CAR,感染T细胞;采用Western blotting、流式细胞术、实时细胞监测和ELISA技术分别检测GPC3-CAR分子在CAR-T细胞的表达、慢病毒感染T细胞效率、GPC3-CAR-T细胞对GPC3阳性肝癌细胞的杀伤活性和特异性。结果:双酶切p CDH-GPC3-CAR重组慢病毒质粒可见分子质量和GPC3-CAR分子一致的基因片段,成功构建p CDH-GPC3-CAR慢病毒质粒。约54.38%的GPC3-T细胞表达GPC3-CAR分子,称为GPC3-CAR-T细胞。GPC3-CAR-T细胞对GPC3阳性的肝癌细胞Huh-7比GPC3阴性的肝癌细胞SK-HEP-1具有更高效的杀伤能力[(78.96±4.76)%vs(6.87±3.15)%,P<0.01]。与GPC3阳性Huh-7肝癌细胞共培养的肝癌GPC3-CAR-T细胞分泌IFN-γ水平比Mock组高效[(21 371.4±1 808.3)vs(152.8±12.5)pg/ml,P<0.01],这可能是其高效杀伤肝癌细胞的机制之一。结论:靶向肝癌的GPC3-CAR-T细胞具有高效分泌IFN-γ细胞因子并特异高效杀伤GPC3阳性肝癌细胞的能力,为进一步推进GPC3-CAR-T临床前和临床研究奠定基础。

关键词：磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3 嵌合抗原受体T细胞免疫治疗肝癌

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阿奇霉素粉-液双室袋与传统粉针配制的比较研究

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中国抗生素杂志 2017年第8期42卷 669-672页

作者：罗莉孙宇夏晚秋唐婉琦余静李子阳梁华平第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的通过实验系统评价新型阿奇霉素粉-液双室袋的便利性,安全性和准确性。方法采用计算配制时间来评价双室袋的便利性;通过对配制过程中出现的刺伤、划伤等伤害人次,和配制后不溶性微粒数来评价双室袋的安全性;通过高效液相色谱法检测... 详细信息

目的通过实验系统评价新型阿奇霉素粉-液双室袋的便利性,安全性和准确性。方法采用计算配制时间来评价双室袋的便利性;通过对配制过程中出现的刺伤、划伤等伤害人次,和配制后不溶性微粒数来评价双室袋的安全性;通过高效液相色谱法检测配制浓度和残留量来评价双室袋配制的准确性。结果双室袋配制时间明显少于粉针配制时间[(22.5±4.7)s vs(89.2±15.5)s,P<0.05];配制过程中不会造成人员伤害,配制后的不溶性微粒数明显少于粉针配制(P<0.05);由于双室袋配制过程中不产生药物残留,故其药物浓度更接近理论值。结论新型阿奇霉素粉-液双室袋在便利性、安全性和准确性上都明显优于粉针配制,具有显著的临床应用优势。

关键词：阿奇霉素粉-液双室袋传统粉针

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芳香烃受体调控调节性T细胞的研究进展

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中国细胞生物学学报 2017年第1期39卷 114-120页

作者：马娓黄文娟余静严军梁华平第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

T淋巴细胞在适应性免疫中发挥细胞免疫功能。调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)是重要的T淋巴细胞亚群,可有效维持免疫耐受和机体内环境稳定。深入挖掘能够影响Treg生物学特征的关键因子有助于干预Treg相关免疫性疾病和炎症反应的进... 详细信息

T淋巴细胞在适应性免疫中发挥细胞免疫功能。调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)是重要的T淋巴细胞亚群,可有效维持免疫耐受和机体内环境稳定。深入挖掘能够影响Treg生物学特征的关键因子有助于干预Treg相关免疫性疾病和炎症反应的进程,对于控制炎症发展、改善疾病预后具有潜在的临床应用价值。新近发现,芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,Ah R)与机体免疫性疾病和炎症反应密切相关,而且活化的Ah R可以影响Treg的生物学特征。该文就Ah R对Treg的分布、增殖、分化、凋亡、分泌的影响以及相关调控机制作一综述。

关键词：芳香烃受体调节性T细胞调控

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创伤脓毒症风险预警诊断和预后评估模型建立与评价

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中华创伤杂志 2017年第5期33卷 447-452页

作者：杨建华王旭张安强黄宏曾灵王枭陆红祥文大林蒋建新温州医科大学附属第一医院急诊科 325000 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室

目的联合临床常用的检测指标和生物评分构建脓毒症早期预警诊断和预后评估模型，并探讨模型预警及预后评估的价值。方法采用回顾性对照研究分析2010年1月-2016年5月收治的209例严重创伤患者的临床资料，采集入院当天、伤后3，5，7d患者... 详细信息

目的联合临床常用的检测指标和生物评分构建脓毒症早期预警诊断和预后评估模型，并探讨模型预警及预后评估的价值。方法采用回顾性对照研究分析2010年1月-2016年5月收治的209例严重创伤患者的临床资料，采集入院当天、伤后3，5，7d患者的白细胞计数、淋巴细胞计数及百分数、单核细胞计数及百分数、中性粒细胞计数及百分数、中性粒细胞计数与淋巴细胞计数的比值（N／L）以及入院当天的急性生理和慢性健康评估Ⅱ（APACHEⅡ）评分、感染相关序贯性脏器功能衰竭评分（SOFA）和改良早期预警评分（MEWS）、格拉斯哥昏迷评分（GCS）、多器官功能障碍综合征（MODS）评分、乳酸（LAC）等数据，构建早期预警的加权模型和预后评估的生物评分模型，并应用受试者工作特征（ROC）计算曲线下面积（AUC），评价其在脓毒症预警诊断和预后评估中的效果。结果人院当天，由APACHEⅡ评分、SOFA和MEWS联合的加权模型AUC为0．729。伤后3d炎性细胞联合加权诊断模型AUC为0．680，生物评分AUC为0．800，差异有统计学意义（P〈0．05）。伤后5d炎性细胞联合加权诊断模型AUC为0．789，生物评分AUC为0．812，差异有统计学意义（P〈0．05）。伤后7d炎性细胞联合加权诊断模型AUC为0．706，生物评分AUC为0．713，差异无统计学意义（P〉0．05）。伤后3，5d的生物评分AUC差异有统计学意义（P〈0．05）。由APACHEⅡ评分、MODS评分、GCS和LAC联合的加权模型应用于脓毒症预后评估时，入院当天的AUC为0．838，伤后3d的AUC为0．878，伤后5d的AUC为0．947，伤后7d的AUC为0．936。人院当天、伤后3，5，7d的AUC差异有统计学意义（P〈0．05）。结论伤后3d的生物评分对脓毒症有较好的早期预警效果。伤后5d由APACHEⅡ评分、MODS评分、GCS和LAC联合的加权模型能有效预测脓毒症患者的预后。

关键词：脓毒症诊断,鉴别预后

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吴茱萸碱对酵母多糖诱导急性腹膜炎小鼠的保护作用

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第三军医大学学报 2017年第2期39卷 163-168页

作者：陈浩范霞孙宇余静罗莉唐婉琦马娓杨雪梁华平龚建平重庆医科大学附属第二医院肝胆外科重庆400010 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室、创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对酵母多糖(zymosan,ZYM)诱导的小鼠腹膜炎中炎症反应及中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophil,PMN)浸润的影响。方法将54只成年雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组和EVO治疗组... 详细信息

目的探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对酵母多糖(zymosan,ZYM)诱导的小鼠腹膜炎中炎症反应及中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophil,PMN)浸润的影响。方法将54只成年雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组和EVO治疗组。模型组腹腔注射1 mg/m L ZYM溶液(1 m L)建立急性腹膜炎小鼠模型,EVO治疗组则同时腹腔注射10 mg/kg EVO及1 mg/m L ZYM溶液,正常对照组腹腔注射等量磷酸盐缓冲液。各组处理后2、6、12 h处死6只小鼠,收集眼眶血及腹腔灌洗液。采用酶联免疫吸附法检测血清及腹腔灌洗液中白介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、角化细胞来源趋化因子(keratinocyte-derived chemokine,KC)及巨噬细胞炎性蛋白2(macrophage inflammatory protein 2,MIP-2)的含量;通过血细胞计数板计数腹腔灌洗液中混合细胞总数;利用流式细胞仪检测腹腔灌洗液中PMN比例及PMN中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;采用Western blot检测6 h时腹腔灌洗液混合细胞中核转录因子-k B(nuclear factor-κB,NF-κB)p65入核情况。结果建模后2、6、12 h,模型组血清及腹腔灌洗液中IL-6、TNF-α、KC及MIP-2含量均高于正常对照组(P<0.05),EVO治疗组上述指标均较模型组明显降低(P<0.05),其中,血清中IL-6、KC及MIP-2均于2 h达高峰,随后逐渐下降,而TNF-α在2 h逐渐上升,6 h达到高峰,随后逐渐下降;腹腔灌洗液中TNF-α、KC及MIP-2均于2 h达高峰,随后逐渐下降,而IL-6在2 h逐渐上升,6 h达到高峰,随后逐渐下降。制模后6 h,EVO治疗组可显著降低腹腔混合细胞数与PMN数及其百分比(P<0.05),且PMN中ROS显著降低(P<0.05)。另EVO治疗可显著降低腹腔混合细胞中细胞核的NF-κB p65表达(P<0.05)。结论 EVO可抑制ZYM诱导急性小鼠腹膜炎模型中血清及腹腔灌洗液中炎症因子及趋化因子的分泌,减轻腹腔PMN的浸润,并抑制PMN中ROS的产生,该作用可能是通过抑制NF-k B p65入核实现的。

关键词：吴茱萸碱急性腹膜炎酵母多糖中性粒细胞浸润

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Mibefradil通过下调FoxO1表达改善HepG2细胞的胰岛素抵抗

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第三军医大学学报 2017年第20期39卷 1973-1979页

作者：马欢严军张克斌徐梓辉第三军医大学新桥医院内分泌科重庆400037 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 第三军医大学新桥医院中心实验室重庆400037 第三军医大学新桥医院中西医结合科重庆400037

目的探索Mibefradil在体外对胰岛素抵抗HepG2细胞的作用。方法将HepG2细胞分为对照组、棕榈酸盐(Palmitate,PA)诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗模型组、药物溶剂(DMSO)组、低剂量(0.025μmol/L)Mibefradil组、高剂量(0.05μmol/L)Mibefradil组,通过检测各组糖原合成及葡萄糖消耗,观察Mibefradil对胰岛素抵抗HepG2细胞的改善作用。用qRT-PCR、Western blot检测各组Fox O1,糖异生、糖原分解限速酶,即:磷酸烯醇式丙酮酸羧基激酶(PEPCK)、葡萄糖-6-磷酸激酶(G6Pase)的mRNA、蛋白相对表达量,明确转录因子Fox O1及其靶基因的表达水平。结果相比于对照组,HepG2细胞胰岛素抵抗模型组的糖原合成量[(3.28±0.74)μg/μL vs(9.14±0.33)μg/μL,P<0.01]及葡萄糖消耗量[(1.31±0.49)nmol/μg vs(5.87±2.26)nmol/μg,P<0.01]明显下降;经Mibefradil干预后,胰岛素抵抗HepG2细胞的糖原合成及葡萄糖消耗得到明显改善,且高剂量组的糖原合成[(7.09±0.60)μg/μL vs(5.73±0.16)μg/μL,P<0.01)]及葡萄糖消耗[(6.45±0.02)nmol/μg vs(5.61±0.29)nmol/μg,P<0.01]显著高于低剂量组,表明Mibefradil可改善HepG2细胞的胰岛素抵抗。qRT-PCR及Western blot检测结果表明,胰岛素抵抗HepG2细胞的Fox O1、PEPCK、G6Pase的表达量均显著增加(P<0.01);经Mibefradil干预后,其表达量呈剂量依赖性下降(P<0.05)。结论Mibefradil对胰岛素抵抗HepG2细胞具有改善作用,此作用可能与下调Fox O1的表达有关。

关键词： Mibefradil 胰岛素抵抗 HepG2细胞 FoxO1

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过表达KLF4对小鼠成骨细胞成骨分化的影响

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第三军医大学学报 2017年第7期39卷 628-634页

作者：杨佳佳刘苹徐倩刘志华李晓明汪超张波邓蔓菁第三军医大学大坪医院野战外科研究所口腔科重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 重庆医科大学附属儿童医院重症医学科儿童发育疾病研究教育部重点实验室重庆400014

目的探讨重组腺病毒介导的肠富集Krüppel样因子(Krüppel like factor 4,KLF4)基因转染后对小鼠成骨细胞成骨分化的影响。方法采用酶消化法分离培养小鼠原代成骨细胞,经成骨诱导培养21 d后行茜素红染色。利用pHBAd-EF1-MCS-GF... 详细信息

目的探讨重组腺病毒介导的肠富集Krüppel样因子(Krüppel like factor 4,KLF4)基因转染后对小鼠成骨细胞成骨分化的影响。方法采用酶消化法分离培养小鼠原代成骨细胞,经成骨诱导培养21 d后行茜素红染色。利用pHBAd-EF1-MCS-GFP系统构建携有KLF4的重组腺病毒载体(Ad-KLF4)。不同感染复数(multiplicity of infection,MOI)Ad-KLF4转染成骨细胞后流式细胞仪检测转染效率。将成骨细胞随机分为对照组(未转染组)、KLF4组(Ad-KLF4转染)和GFP组(Ad-GFP转染)。Western blot检测小鼠成骨细胞中KLF4蛋白的表达;MTT检测细胞增殖;Real-time PCR检测成骨相关基因碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)、核心蛋白结合因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)的表达。结果倒置显微镜下可见成骨细胞呈多边形、立方形等,茜素红染色示大量红色钙化结节的形成。经酶切鉴定、基因测序成功构建携带KLF4基因的重组腺病毒载体(Ad-KLF4)。成骨细胞经最佳MOI(100 PFU/m L)处理后,与对照组及GFP组比较,KLF4组可检测到KLF4蛋白及mRNA水平显著上升(P<0.01);成骨细胞增殖明显上升(P<0.05,P<0.01);成骨分化相关基因ALP、RUNX2、BSP的表达显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论腺病毒介导的KLF4基因转染成骨细胞后可促进成骨细胞增殖,抑制其成骨分化,从而抑制骨形成。

关键词： KLF4 过表达腺病毒载体成骨细胞小鼠

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小香猪放射性创面模型的制备

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中华创伤杂志 2017年第4期33卷 362-367页

作者：李晓明刘苹汪超杨佳佳张波第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室第四研究室重庆400042 重庆医科大学附属儿童重症医学科、儿童发育疾病研究教育部重点实验室

目的制备一种小香猪放射性创面的动物实验模型并观察病理变化，以期用于开展放射性创面相关疾病的在体研究。方法选取8头成年巴马小香猪，按随机数字表法均分为正常对照组、实验组，实验组又分为10，20及30Gy组，每组16个创面。实验组采... 详细信息

目的制备一种小香猪放射性创面的动物实验模型并观察病理变化，以期用于开展放射性创面相关疾病的在体研究。方法选取8头成年巴马小香猪，按随机数字表法均分为正常对照组、实验组，实验组又分为10，20及30Gy组，每组16个创面。实验组采用X射线直线加速器进行照射，并在照射部位使用打孔器制备边长4cm的全层皮肤缺损，制备小香猪放射性创面模型。每隔1周观察创面愈合情况；采用RT-PCR检测35d各组创面组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和转化生长因子-β（TGF-β）的表达变化；Westernblot方法检测35d后各组创面组织血小板-内皮细胞黏附分子（CD31）和Ⅰ型胶原的表达变化；HE染色观察35d后各组创面组织病理学变化。结果正常皮肤创面在35d达到愈合状态，但20Gy组和30Gy组在63d仍未愈合，随着射线剂量增加创面愈合程度逐渐减弱。RT—PCR检测结果显示，TNF-αmRNA表达水平正常对照组为0．315±0．007，10Gy组为0．984±0．211，20Gy组为1．140±0．088，30Cy组为0．471±0．030；TGF-βmRNA表达水平正常对照组为0．402±0．018，10Gy组为1．707±0．147，20Gy组为1．933±0．078，30Gy组为0．968±0．084。与正常对照组比较，20Gy组TNF-α和TGF-βmRNA表达水平明显升高（P〈0．05）。Westernblot检测结果显示，20Gy组与正常对照组比较，CD31和Ⅰ型胶原的表达均受到抑制（P〈0．05）。HE染色结果显示，35d后20Gy组创面组织上皮化和肉芽组织再生受到影响。结论经过20GyX射线局部照射后制备的小香猪皮肤全层缺损创面能真实有效地模拟放射性创面，可开展放射性创面相关疾病病理生理及治疗干预的在体实验研究。

关键词：辐射损伤实验性溃疡模型动物

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