检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2016年第13期38卷 1481-1486页

作者：刘中禄朱明卢汀郭韡邢伟安天琛李向云何骁赵榕森袁洪峰黄宏第三军医大学大坪医院野战外科研究所实验动物中心重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所眼科重庆400042

目的明确川芎嗪(Ligustrazine,TMP)对激素抵抗性前列腺癌(hormone-refractory prostate cancer,HRPC)细胞PC-3的促凋亡效应并探讨其分子机制,评价TMP对正常前列腺上皮细胞RWPE-1的影响。方法分别用不同终浓度的TMP处理PC-3细胞和RWPE-1... 详细信息

目的明确川芎嗪(Ligustrazine,TMP)对激素抵抗性前列腺癌(hormone-refractory prostate cancer,HRPC)细胞PC-3的促凋亡效应并探讨其分子机制,评价TMP对正常前列腺上皮细胞RWPE-1的影响。方法分别用不同终浓度的TMP处理PC-3细胞和RWPE-1细胞48、72 h后,行MTT实验及Annexin V/PI染色法评价TMP对这两种细胞活性及凋亡的影响;Western blot检测TMP对PC-3细胞中mTOR信号通路活化情况及凋亡相关蛋白表达的影响;pull-down及荧光素酶报告基因实验研究TMP对PC-3细胞中翻译起始复合物形成及帽依赖性翻译的影响。结果 TMP对RWPE-1细胞的活性及存活无显著影响,但以剂量依赖及时间依赖的方式抑制PC-3细胞的活性,当TMP浓度≥25μmol/L时,差异具有统计学意义(P<0.05);与0μmol/L处理组相比,50、100μmol/L TMP处理24 h即可显著上调PC-3细胞中Bax/Bcl-2比值及Caspase-3的表达,处理后48 h检测发现PC-3细胞发生明显的凋亡(P<0.01);与0μmol/L处理组相比,50、100μmol/L TMP显著抑制PC-3细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)及mTOR下游关键蛋白4EBP1和p70S6K的磷酸化,影响翻译起始复合物eIF4F的形成,进而抑制相关蛋白质的帽依赖性翻译及合成。结论 TMP可通过抑制mTOR信号通路的活化来降低HRPC细胞中增殖及抗凋亡相关蛋白的帽依赖性翻译,进而促进其凋亡。

关键词：川芎嗪激素抵抗性前列腺癌细胞凋亡帽依赖性翻译 mTOR信号通路

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家兔桡骨火器性骨缺损局部血流灌注变化的实验研究

家兔桡骨火器性骨缺损局部血流灌注变化的实验研究

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2017《中国医院药学杂志》学术年会

作者：王建忠李兵仓任宝李聪杰孙少松王晓冬高飞高文山河北大附属医院河北保定 071000 解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所第6研究室创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆 400042

目的通过墨汁灌注法观察家兔桡骨火器性骨缺损局部血流灌注的变化特点，并与手术致骨缺损动物局部血流灌注进行比较。方法 40只成年家兔随机分成手术致骨缺损组和火器性骨缺损组，分别于伤后1天、1周、2周和3周在光镜下观察局部血管的... 详细信息

目的通过墨汁灌注法观察家兔桡骨火器性骨缺损局部血流灌注的变化特点，并与手术致骨缺损动物局部血流灌注进行比较。方法 40只成年家兔随机分成手术致骨缺损组和火器性骨缺损组，分别于伤后1天、1周、2周和3周在光镜下观察局部血管的变化，并经主动脉弓墨汁灌注，制成脱钙切片，用图像处理软件计算血管面积，比较两组动物血管面积的大小。结果在各个时相点，火器性骨缺损局部骨和肌肉的血管面积和血管数目均明显少于手术骨缺损组。结论火器伤可以导致局部血流灌注下降，因此有可能影响骨折的愈合。

关键词：骨缺损火器伤血流灌注家兔

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脓毒症血管内皮损伤及调节策略的研究进展

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中国中西医结合急救杂志 2016年第1期23卷 108-110页

作者：杨霞李香琴马晓媛田李星梁华平第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

脓毒症是由全身性感染引起的机体过度炎症反应和凝血功能紊乱的疾病。内皮功能障碍是脓毒症进一步演变为多器官功能障碍的中心环节，因此早期诊断并逆转内皮损伤对于改善脓毒症预后具有重要意义。本研究主要针对脓毒症内皮功能障碍及其... 详细信息

脓毒症是由全身性感染引起的机体过度炎症反应和凝血功能紊乱的疾病。内皮功能障碍是脓毒症进一步演变为多器官功能障碍的中心环节，因此早期诊断并逆转内皮损伤对于改善脓毒症预后具有重要意义。本研究主要针对脓毒症内皮功能障碍及其调节策略作一综述。

关键词：脓毒症内皮损伤功能障碍

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胍丁胺对酵母多糖诱导急性腹膜炎炎症损伤及中性粒细胞浸润的影响

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中华危重病急救医学 2016年第3期28卷 225-229页

作者：邓佳田李星马晓媛范霞侯凤艳梁华平罗艳重庆医科大学附属第一医院检验科重庆400016 第三军医大学大坪医院野战外科研究所一室、创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的：观察胍丁胺（AGM）治疗对酵母多糖（ZYM）诱导的小鼠腹膜炎炎症反应及中性粒细胞（PMN）浸润的影响。方法将36只成年雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假手术（Sham）组、模型组、AGM治疗组。采用腹腔注射1mg/mLZYM溶液（0.5mL... 详细信息

目的：观察胍丁胺（AGM）治疗对酵母多糖（ZYM）诱导的小鼠腹膜炎炎症反应及中性粒细胞（PMN）浸润的影响。方法将36只成年雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假手术（Sham）组、模型组、AGM治疗组。采用腹腔注射1mg/mLZYM溶液（0.5mL）制备急性腹膜炎小鼠模型，Sham组腹腔注射等量磷酸盐缓冲液（PBS）；AGM治疗组同时腹腔注射AGM200mg/kg。各组分别于制模后2h和6h各处死6只小鼠，采集眼眶血及腹腔灌洗液，用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清和腹腔灌洗液中角化细胞来源趋化因子（KC）、巨噬细胞炎性蛋白-2（MIP-2）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）的含量，用血细胞计数板计数腹腔灌洗液中白细胞总数，流式细胞仪分析腹腔灌洗液PMN数量。结果制模后2h，模型组血清和腹腔灌洗液中KC、MIP-2、TNF-α、IL-6含量均明显高于Sham组；AGM治疗后血清和腹腔灌洗液中上述各指标均较模型组显著降低〔血清KC（ng/L）：990.7±137.9比2053.2±262.7，MIP-2（ng/L）：642.2±124.4比1369.7±146.5，TNF-α（ng/L）：608.6±38.1比1044.7±101.0，IL-6（ng/L）：1058.2±129.1比1443.3±190.1；腹腔灌洗液KC（ng/L）：7462.3±839.6比12723.5±1515.7，MIP-2（ng/L）：1570.8±193.4比3471.4±384.7， TNF-α（ng/L）：1115.8±156.7比1499.2±231.2，IL-6（ng/L）：2646.5±223.2比3126.7±291.4；均P＜0.05〕；与2h比较，模型组、AGM治疗组6h时血清和腹腔灌洗液中KC、MIP-2、TNF-α明显下降，IL-6进一步升高，其中模型组和AGM治疗组血清及腹腔灌洗液中KC、MIP-2均已降至Sham组水平。制模后6h，模型组腹腔炎性细胞总数与PMN计数均显著高于Sham组，AGM治疗可显著减少腹腔中炎性细胞总数与PMN计数〔炎性细胞总数（×109/L）：14.7±1.1比2.0±0.4、10.1±1.2比14.7±1.1，PMN计数（×109/L）：11.37±1.22比0.18±0.05、7.69±0.57比11.37±1.22，均P＜0.05〕。结论 AGM可显著抑制ZYM诱导急性腹膜炎小鼠趋化因子与炎性因子的分泌，并减轻腹腔炎性细胞的浸润，进而减轻腹腔炎症损伤。

关键词：胍丁胺酵母多糖腹膜炎,急性炎性因子趋化因子中性粒细胞

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胍丁胺对严重创伤所致肝损伤的保护作用

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中华危重病急救医学 2016年第4期28卷 319-323页

作者：何川侯凤艳王婷杨霞范霞梁华平龚建平重庆医科大学附属第二医院肝胆外科重庆400010 第三军医大学大坪医院野战外科研究所一室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的观察胍丁胺对肝脏库普弗细胞分泌炎性因子的影响，探讨其对严重创伤所致肝损伤的保护作用及其机制。方法将42只雄性BALB／c小鼠按随机数字表法分为假手术（Sham）组、模型组、胍丁胺干预组，每组14只。采用双后肢骨折联合眼眶放血3... 详细信息

目的观察胍丁胺对肝脏库普弗细胞分泌炎性因子的影响，探讨其对严重创伤所致肝损伤的保护作用及其机制。方法将42只雄性BALB／c小鼠按随机数字表法分为假手术（Sham）组、模型组、胍丁胺干预组，每组14只。采用双后肢骨折联合眼眶放血35％的方法制备小鼠创伤失血模型；Sham组仅麻醉小鼠不进行其他处理。胍丁胺干预组于制模后1h液体复苏时腹腔注射胍丁胺200mg／kg；模型组给予等量生理盐水。各组于制模后12h、24h分别处死7只小鼠取血和肝脏，并分离肝脏库普弗细胞。用全自动生化分析仪测定血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）及乳酸脱氢酶（LDH）水平；苏木素-伊红（HE）染色，光镜下观察肝组织病理学变化；用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清、肝组织及肝脏库普弗细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白细胞介素-6（IL-6）的含量；用实时荧光定量反转录一聚合酶链反应（RT-qPCR）检测库普弗细胞中TNF-α和IL-6的mRNA表达。结果①Sham组小鼠肝组织结构正常；模型组小鼠翩模后24h可见中性粒细胞浸润，肝细胞肿胀、充血、坏死，且肝功能指标明显异常；而胍丁胺能明显改善上述病理学变化，改善肝功能。②制模后12h3组血清和肝组织TNF—α、IL-6水平均无明显差异，24h模型组较12h时升高，且均显著高于Sham组[血清TNF-α（ng／L）：80．8±4．7比34．7±4．7，IL-6（ng／L）：104．0±9．0比55．4±3．3；肝组织TNF-α（ng／mg）：405．2±19．6比57．2±10．0，IL-6（ng／mg）：58．4±7．7比14．3±2．1，均P〈0.01]；胍丁胺能有效降低创伤小鼠血清和肝组织TNF—α、IL-6水平[血清TNF-α（ng／L）：58．2±3．1比80．8±4．7，IL-6（ng／L）：74．1±6．6比104．0±9．0；肝组织TNF-α（ng／mg）：248．7±22．5比405．2±19．6，IL-6（ng／mg）：22．5±3．1比58．4±7．7，均P〈0．01]。③模型组体外培养库普弗细胞上清液中TNF-α和IL-6水平均较Sham组明显升高，经脂多糖（LPS）诱导培养24h后，二者水平进一步升高；胍丁胺可显著降低TNF-α和IL-6水平[TNF-α（ng／L）：256．6±5．6比465．5±5．2，IL-6（ng／L）：1185．5±64．4比2018．8±53．2，均P〈0．01]，下调TNF—α和IL-6的mRNA表达[TNF-α mRNA（2^-△△Ct）：7．2±0．4比13．5±0．4，IL-6 mRNA（2^-△△Ct）：13．2±0．7比21．3±1．6，均P〈0.01]。结论胍丁胺可通过降低库普弗细胞炎性因子的分泌和表达，从而缓解严重创伤所致的肝损伤，改善肝功能。

关键词：胍丁胺创伤肝脏库普弗细胞炎性因子

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吴茱萸碱对脓毒症小鼠急性肺损伤的保护作用

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第三军医大学学报 2016年第21期38卷 2309-2314页

作者：张莹范霞杨雪梁华平罗艳重庆医科大学附属第一医院检验科重庆400016 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探究吴茱萸碱（evodiamine,EVO）对酵母多糖（zymosan）诱导的急性肺损伤的保护效应及其作用机制。方法 24只6-8周龄雄性C57BL/6小鼠,按随机数字表法分为正常对照组、EVO对照组、模型组、EVO治疗组,每组6只。各组分别于处理作用12 ... 详细信息

目的探究吴茱萸碱（evodiamine,EVO）对酵母多糖（zymosan）诱导的急性肺损伤的保护效应及其作用机制。方法 24只6-8周龄雄性C57BL/6小鼠,按随机数字表法分为正常对照组、EVO对照组、模型组、EVO治疗组,每组6只。各组分别于处理作用12 h后处死小鼠,收集眼眶血及肺组织。酶联免疫吸附法（ELISA）检测血液及肺组织中白介素-6（interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）水平及肺组织髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）活性及核转录因子NF-κB p65的DNA结合活性,TUNEL法检测肺组织细胞凋亡情况,HE染色观察肺组织病理改变并测量肺湿干质量比。结果酵母多糖作用12 h后,小鼠出现精神萎靡、活动减少等症状。EVO治疗组小鼠状态有所好转。EVO可明显改善酵母多糖所致的肺泡壁毛细血管扩张充血及炎性细胞浸润,降低肺湿干质量比,并显著下调酵母多糖刺激下血清和肺脏中IL-6和TNF-α的含量（P〈0.01）,同时抑制肺组织中MPO含量以及NF-κB p65的DNA结合活性（P〈0.01）。结论 EVO可缓解酵母多糖诱导的急性肺损伤。该作用可能是通过抑制NF-κB的活性以减少炎症介质释放实现。

关键词：吴茱萸碱脓毒症急性肺损伤酵母多糖

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姜黄素抗肾纤维化的分子生物学机制实验研究

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重庆医学 2016年第26期45卷 3601-3604页

作者：朱方强陈民佳朱明徐祥赵洪雯刘宏余荣杰吴雄飞黄宏第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室/创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 第三军医大学西南医院肾内科重庆400038

目的探讨姜黄素抗肾纤维化的分子生物学机制，为临床治疗提供可靠的实验依据。方法以人肾小管上皮细胞（HKC）为研究对象，采用不同浓度的姜黄素（0、0．780、1．563、3．125、6．250、12．500、25．000、50．000和***／L）刺激HKC72h... 详细信息

目的探讨姜黄素抗肾纤维化的分子生物学机制，为临床治疗提供可靠的实验依据。方法以人肾小管上皮细胞（HKC）为研究对象，采用不同浓度的姜黄素（0、0．780、1．563、3．125、6．250、12．500、25．000、50．000和***／L）刺激HKC72h，倒置相差显微镜下观察细胞形态变化，并应用MTT比色法检测姜黄素对HKC生长的影响；应用不同浓度TGF-β1（0、1、5、10ng／mL）单独或联合姜黄素（6．250、12．500、25．000、50．000μmol／L和100．000μmol／L）共同刺激HKC细胞72h，观察细胞形态变化，应用逆转录PCR（RT-PCR）检测TGF-β1、骨形态发生蛋白-7（BMP-7）和Ⅰ型胶原基因表达变化。结果HKC贴壁生长，呈铺路石样外观。姜黄素刺激对细胞形态无影响；TGF-β1刺激能明显促进细胞由上皮样形态向纤维样细胞形态转化，且发生形态转变的细胞数量和TGF-β1基因表达呈TGF-β1浓度依赖性增加（P〈0．05，P〈0．01）；MTT结果显示：姜黄素在3．125-25．000μmol／L浓度范围内，能显著促进HKC增殖（P〈0．05，P〈0．01）；姜黄素能对抗TGF-β1诱导的细胞形态转变，以12．500-50．000μmol／L的姜黄素作用最明显，同时，下调TGF-β1基因和蛋白的表达，相反上调BMP-7基因和蛋白表达，并伴随着Ⅰ型胶原基因和蛋白的表达下降（P〈0．05，P〈0．01）。结论姜黄素能促进HKC增殖并维持其表型，能对抗TGF-β1诱导的HKc向梭形细胞转化，抑制细胞上皮TGF-β1和Ⅰ型胶原的表达，而促进BMP-7表达。

关键词：肾疾病纤维化转化生长因子8 姜黄素骨形态发生蛋白-7 Ⅰ型胶原

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活性氧与细胞核共染影响因素的实验研究

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第三军医大学学报 2016年第6期38卷 539-544页

作者：罗莉侯凤艳严军梁华平第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 温州医科大学附属第一医院急诊科浙江温州325035

目的利用二氯荧光黄二乙酸酯(2',7'-Dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)探针和4',6'-二脒基-2-苯基吲哚(4',6'-diamidino-2-phenylindole,DAPI)探讨影响活性氧(reactive oxidative species,ROS)和细胞核共染的因素,以优化最佳的研究方案。方法以RAW 264.7细胞株为研究对象,首先采用不同浓度的多聚甲醛分别固定10、30 min,1、2、4 h,进行ROS和DAPI检测;再用不同的固定试剂分别在ROS检测前和后固定,检测ROS荧光强弱;将DAPI在DCFH-DA探针加入前12、4、2、1 h,20 min加入和两者同时加入,检测DAPI染色情况;最后,DAPI在ROS检测前12 h加入,以不加DAPI组为对照,分别用LPS和H_2O_2刺激产生ROS并检测,计算其荧光数和平均荧光强度,利用SPSS18.0软件进行t检验分析。结果不同固定浓度、固定试剂、固定顺序的结果均表明,固定虽然会增强DAPI的染色,但同时会减弱ROS的荧光强度;活细胞DAPI染色时,随着染色时间的延长,核着色强度和均匀度都更好;DAPI染色12 h后检测ROS,对ROS的荧光数和平均荧光强度都没有统计学影响(P>0.05)。结论 DCFH-DA探针法检测ROS荧光时不能与细胞固定连用;DAPI在DCFH-DA探针孵育前12 h加入,并不影响ROS荧光的产生和检测,该研究方案可有效实现ROS与DAPI的共染。

关键词：活性氧细胞核共染影响因素

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胍丁胺对脂多糖诱导RAW264.7细胞氧化应激损伤的保护作用

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第三军医大学学报 2016年第9期38卷 949-953页

作者：侯凤艳罗莉朱俊宇康文渊范霞柴鉴深卢中秋梁华平温州医科大学附属第一医院急诊科浙江温州325035 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨胍丁胺(agmatine,AGM)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7氧化应激的抑制作用及其机制。方法 RAW264.7细胞经LPS(10μg/m L)刺激发生氧化应激,同时AGM(1 mmol/L)对其进行干预。分为对照组、LPS组、LP... 详细信息

目的探讨胍丁胺(agmatine,AGM)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7氧化应激的抑制作用及其机制。方法 RAW264.7细胞经LPS(10μg/m L)刺激发生氧化应激,同时AGM(1 mmol/L)对其进行干预。分为对照组、LPS组、LPS+AGM组、AGM组。药物作用24 h,以2,7-二氢二氯荧光素二乙酸酯(2',7'-dichlorofluoresce in diacetate,DCFH-DA)为荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;Griess法检测细胞内一氧化氮(NO)水平;Western blot检测细胞内的iNOS蛋白及细胞质细胞核内Nrf2蛋白表达;RT-PCR检测Nrf2下游抗氧化酶血红素氧合酶(heme oxygenase-1,HO-1)mRNA的表达。结果与对照组相比,LPS可显著增加RAW264.7细胞中ROS、NO以及iNOS蛋白水平,而AGM干预后上述指标含量均明显降低(P<0.05)。AGM干预组中细胞核的Nrf2表达及其下游分子HO-1 mRNA表达水平较LPS单独刺激组显著升高,表明Nrf2信号通路在AGM的作用下被活化。结论 AGM可通过活化转录因子Nrf2促进抗氧化酶HO-1的表达,进而减轻细胞内的氧化应激损伤。

关键词：胍丁胺 RAW264.7细胞氧化应激 Nrf2

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创伤脓毒症多指标联合预警诊断模型的建立

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中华创伤杂志 2016年第5期32卷 453-457页

作者：李忠赟杨建华张安强王枭文大林蒋建新温州医科大学附属第一医院急诊科 325000 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室、创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室 325000

目的利用临床常用指标，建立创伤脓毒症的联合预警诊断模型，为创伤脓毒症的早期、快速、准确诊断提供依据。方法165例创伤患者根据是否发生脓毒症分成脓毒症组（45例）和非脓毒症组（120例）。采集体温、心率、C-反应蛋白（CRP）、急... 详细信息

目的利用临床常用指标，建立创伤脓毒症的联合预警诊断模型，为创伤脓毒症的早期、快速、准确诊断提供依据。方法165例创伤患者根据是否发生脓毒症分成脓毒症组（45例）和非脓毒症组（120例）。采集体温、心率、C-反应蛋白（CRP）、急性生理与慢性健康Ⅱ评分（APACHEⅡ）、感染相关的器官功能衰竭评分系统（SOFA）等指标，筛选出创伤脓毒症发生的独立预测指标，联合各独立指标构建创伤脓毒症非加权预警诊断模型（unwScore）和加权预警诊断模型（wScore）。绘制各独立预测指标及预警模型的受试者工作特征曲线（ROC），计算ROC曲线下面积（AUC）、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值，观察各独立预测指标及联合预警诊断模型的预警诊断效果。结果体温、呼吸、心率、CRP、APACHEⅡ和SOFA在两组间的差异有统计学意义（P〈0．05），进一步多因素分析筛选出的创伤脓毒症独立预测指标有体温、CRP、APACHEⅡ评分，AUC分别为0．855、0．761、0．884，敏感度分别为0．84、0．64、0．84，特异度分别为0．78、0．80、0．82，阳性预测值分别为59．38％、55．77％、64．41％，阴性预测值分别为93．07％、85．84％、93．40％；unwScore和wScore的AUC分别为0．915、0．931，敏感度分别为0，87、0．96，特异度分别为0．85、0．78，阳性预测值分别为69．64％、63．24％，阴性预测值分别为94．50％、97．85％。结论体温、CRP、APACHEⅡ是创伤脓毒症的独立危险指标，由体温、CRP、APACHEⅡ构建的模型对创伤脓毒症有较好的预警诊断效果。

关键词：脓毒症诊断,鉴别预后

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