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2014第十届全国中西医结合灾害医学学术大会江苏省中西医结合学会灾害医学、重症医学专业委员会成立大会暨健康产业成果展示洽谈会

作者：靳贺邱俊马迪辉刘政肖雅周继红易东严军梁华平第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第三军医大学军事预防医学院卫生统计学教研室

目的建立新型的创伤后脓毒症预测公式,并与生物标志物PCT的预测能力进行比较。方法利用中华创伤数据库中6542例创伤患者的临床资料计算出适用于中国人的损伤严重度计分（injury severity score,ISS）和新损伤严重度计分（new injury sev... 详细信息

目的建立新型的创伤后脓毒症预测公式,并与生物标志物PCT的预测能力进行比较。方法利用中华创伤数据库中6542例创伤患者的临床资料计算出适用于中国人的损伤严重度计分（injury severity score,ISS）和新损伤严重度计分（new injury severity score,NISS）的半数致死量(Lethal Dose 50,LD)。回顾性分析2010年1月—2013年12月重庆市大坪医院收入的105例伤后24h内入院且ICU时间大于48h的创伤患者临床资料。利用ISS,NISS,LD以及全身炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome,SIRS）计分建立不同的公式。采用建立的公式及入院第一天所测血液中降钙素原（procalcitonin,PCT）浓度分别对创伤患者的脓毒症发生进行预测,根据受试者特征曲线（receiver operating characteristic curve,ROC）比较其预测能力的大小。结果 ISS的LD在16～44岁,45～64岁和大于65岁三个年龄段的值分别为男性:54,50和31;女性:60,47和39。NISS的LD在16-44岁,45-64岁和大于65岁三个年龄段的值分别为男性:62,56和42;女性:65,53和48。在十三种公式中(ISS,NISS,SIRS计分,ISS/LD,NISS/LD,ISS×SIRS计分,NISS×SIRS计分,ISS/LD×SIRS计分,NISS/LD×SIRS计分,ISS+SIRS计分,NISS+SIRS计分,ISS/LD+SIRS计分和NISS/LD+SIRS计分),公式NISS/LDSIRS计分具有最大的ROC曲线下面积（area under curve,AUC）,为0.812,其预测能力最大。公式NISS/LD+SIRS计分与PCT进行比较（AUC:0.812 vs 0.631,P<0.01）,NISS/LD+SIRS计分预测能力优于PCT。采用公式NISS/LD+SIRS计分预测创伤后脓毒症的发生,其临界值（cut-off value）为2.46,灵敏度（sensitivity,Sen）为85.51%,特异度（specificity,Spe）为69.44%,阳性预测值（positive predict value,PV）为84.29%阴性预测值（negative predict value,PV）为71.43%,阳性似然比positive likelihood ratio,LR)为2.80,阴性似然比（negative likelihood ratio,LR）为0.21,Youden指数（Youden index,YI）为0.55,比值比（odds ratio,0R）为13.41,正确度（accuracy,Acc）为0.8。结论 NISS/LD+SIRS计分可作为创伤后脓毒症发生的新型预测公式,且其预测能力优于PCT

关键词： PCT 创伤后生物标志物预测能力

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芳香烃受体敲除小鼠的培育和生物学特征及其在严重创伤动物模型中的应用

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中国急救复苏与灾害医学杂志 2014年第8期9卷 687-691页

作者：杨雪唐婉琦范霞严军梁华平中国人民解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的探讨芳香烃受体敲除（AhRKO，AhR-／-）小鼠的饲养、繁育、基因分型和生物学特征，并初步应用于严重创伤研究。方法引进C57BU6背景的AhR杂合子（＋／-）小鼠；配对繁殖后提取仔鼠脚趾基因组脱氧核糖核酸（DNA），通过聚合酶链反应... 详细信息

目的探讨芳香烃受体敲除（AhRKO，AhR-／-）小鼠的饲养、繁育、基因分型和生物学特征，并初步应用于严重创伤研究。方法引进C57BU6背景的AhR杂合子（＋／-）小鼠；配对繁殖后提取仔鼠脚趾基因组脱氧核糖核酸（DNA），通过聚合酶链反应对仔鼠基因型进行鉴定；观察不同基因型仔鼠的生活状态、存活率和体重变化差异等生物学特征；制备AhR-／-和AhR野生型（WT，＋／＋）小鼠“骨折佚血”模型并收集骨髓细胞，采用粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）体外诱导培养骨髓来源树突状细胞（BMDC）7d，脂多糖（LPS）刺激24h后ELISA检测不同品系来源BMDC炎性因子分泌水平的差异。结果AhR-／-小鼠的饲养和繁殖均获得成功，子代小鼠基因型分布符合孟德尔分离定律；相对AhR＋／＋小鼠而言，AhR-／-小鼠发育迟缓，体型小，体重轻（P〈0．05），生活状态差，存活率偏低（P〈0．05）；严重创伤后AhR-／-小鼠来源的成熟BMDC分泌α型肿瘤坏死因子（TNFa）和白细胞介素（IL）-6的能力高于AhR＋／＋，（P〈0．05），而IL-10的分泌水平则低于AhR＋／＋（P〈0．05）。结论通过AhR＋／-繁育和适当的基因分型技术是获得表型稳定的AhR-／-的有效方法；严重创伤后AhR-／-来源的BMDC分泌炎性细胞因子的水平与AhR＋／＋来源BMDC存在显著差异，提示AhR与严重创伤后机体的炎性反应有关。

关键词：芳香烃受体敲除小鼠培育基因分型生物学特征严重创伤

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过氧化氢酶基因rs208679在重庆汉族人群中的分布及其与噪声性耳聋的关联性

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中华创伤杂志 2014年第3期30卷 250-254页

作者：杨俊慧王小明王朝永陈继川钱宇段朝霞第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所耳鼻咽喉一头颈外科重庆400042 重庆市涪陵区疾病预防控制中心职业病防治科重庆市涪陵区中心医院耳鼻咽喉科第六研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室

目的探讨过氧化氢酶（catalase，CAT）基因5’区-6411A／G（rs208679）多态性在重庆汉族人群中的分布及其与噪声性耳聋（noise—inducedhearingloss，NIHL）的关联研究。方法以重庆地区汉族无血缘关系的健康自愿者225例（健康对照组）... 详细信息

目的探讨过氧化氢酶（catalase，CAT）基因5’区-6411A／G（rs208679）多态性在重庆汉族人群中的分布及其与噪声性耳聋（noise—inducedhearingloss，NIHL）的关联研究。方法以重庆地区汉族无血缘关系的健康自愿者225例（健康对照组）、噪声接触者237例（噪声接触组）作为研究对象。噪声接触组根据有无NIHL又分为无耳聋组170例和耳聋组67例。采用iMLDR“分型技术，分别检测各组CAT基因5’区rs208679多态的基因型，并比较组间基因型、等位基因频率分布及临床耳聋发生率间的差异。结果在研究人群中检测到rs208679多态的3种基因型AA、AG和GG，两组人群的A等位基因频率均为0．76，G等位基因频率为0．24，健康对照组和噪声接触组基因型频率分布符合Hardy—Weinberg遗传平衡定律（P〉0．05）。健康对照组与噪声接触组、无耳聋组与耳聋组间，多态基因型（AA、AG及GG）和等位基因（A、G）频率分布差异均无统计学意义（P〉0．05）；但无耳聋组与耳聋组的隐性分析GG：AG＋AA差异有统计学意义（P〈0．05）。结论rs208679是NIHL的易感基因，可作为N1HL易感性的生物标志。

关键词：噪声听觉丧失过氧化氢酶单核苷酸多态性

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应激模型的生理学基础及其比较研究进展

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现代生物医学进展 2014年第21期14卷 4160-4163页

作者：高文婷杨策王海燕杜娟蒋建新第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室/全军交通医学研究所/全军交通伤重点实验室/创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 内蒙古科技大学第一附属医院内蒙古包头014010

各种外界因素如创伤、手术、感染、缺氧、强光、噪音等通过一定强度作用于机体可以引起机体特异性和非特异性反应,非特异性反应与刺激因素性质无直接关系,称为应激(stress)。近年来,随着社会的发展,生活节奏的加快、自然环境和生活环境... 详细信息

各种外界因素如创伤、手术、感染、缺氧、强光、噪音等通过一定强度作用于机体可以引起机体特异性和非特异性反应,非特异性反应与刺激因素性质无直接关系,称为应激(stress)。近年来,随着社会的发展,生活节奏的加快、自然环境和生活环境的恶化,应激已经成为威胁人类健康的重要因素,有关应激影响机体健康的研究备受国内外学者的重视,而合适的应激动物模型的建立对应激研究的顺利开展有着重要意义。本文就目前应激动物模型的病理生理特点、种类、制作和评价方法等进行综述,旨在为应激研究提供参考。

关键词：应激下丘脑肾上腺动物模型

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大鼠急性肺损伤病理变化的形态计量研究

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中华创伤杂志 2013年第4期29卷 364-367页

作者：王海燕赵玉金杜娟李海胜杨策詹俊岳彩黎蒋建新第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的用体视学方法定量研究大鼠经胸部撞击复合内毒素所致急性肺损伤（acutelunginjury，ALI）模型的组织病理学特点及变化规律。方法12只sD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、ALI致伤1，2，7d组，每组3只。各组取肺组织行HE染色，分别... 详细信息

目的用体视学方法定量研究大鼠经胸部撞击复合内毒素所致急性肺损伤（acutelunginjury，ALI）模型的组织病理学特点及变化规律。方法12只sD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、ALI致伤1，2，7d组，每组3只。各组取肺组织行HE染色，分别测试肺实质百分比、肺泡间隔厚度、肺泡截面积及肺泡腔内炎性细胞计数。结果Au致伤1，2d组肺泡腔内炎性细胞计数分别为（13．08±6．60）个、（26．81±16．86）个，正常对照组为（0．89±0．78）个，致伤组均较对照组明显增加（P〈0．01）。Au致伤1，2，7d组肺实质百分比分别为（23．77±3．91）％、（27．32±5．95）％、（44．57±6．46）％，正常对照组为（19．44±2．48）％，致伤组均较对照组明显增加（P〈0．01）。Au致伤1，2，7d组肺泡间隔分别为（3．50±2．18）μm、（7．67±7．14）μm、（17．23±13．08）μm，正常对照组为（2．87±1．75）μm，致伤组均较对照组逐渐增厚（P〈0．05）。ALI致伤1，2，7d组肺泡截面积分别为（1653．90±950．77）μm2、（1328．15±802．30）μm2、（1055．20±1002．75）μm2，正常对照组为（1641．30±906．60）μm2，致伤组均较对照组逐渐减少（P〈0．05）。结论大鼠经胸部撞击后复合静脉注射内毒素可建立病理形态上符合Au的动物模型。通过体视学方法定量检测可反映ALI的组织病理学特点及变化规律。

关键词：急性肺损伤模型动物形态计量

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舱室内爆炸伤复合失血致休克大鼠液体复苏的研究

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解放军医学杂志 2013年第6期38卷 512-515页

作者：崔红王丽丽周敏赖西南肖南第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 重庆医科大学附属第一医院麻醉科

目的比较高渗盐溶液与生理盐水用于舱室内爆炸伤复合失血致休克大鼠液体复苏的治疗效果。方法健康成年雄性SD大鼠147只,固定于模拟舱室内,点爆源距大鼠胸腹部中心11~12cm瞬时引爆,迅速抽离舱内烟雾。炸后将大鼠静置于实验台上测量炸后10... 详细信息

目的比较高渗盐溶液与生理盐水用于舱室内爆炸伤复合失血致休克大鼠液体复苏的治疗效果。方法健康成年雄性SD大鼠147只,固定于模拟舱室内,点爆源距大鼠胸腹部中心11~12cm瞬时引爆,迅速抽离舱内烟雾。炸后将大鼠静置于实验台上测量炸后10min平均动脉压（MAP）并以此为零时相点,由股动脉导管匀速放血造成中度休克。将108只大鼠随机分为无复苏组（对照组）、生理盐水组（NS组）及高渗盐溶液组（HSD组）,每组36只。对照组致伤后不予治疗;NS组于伤后90min由股静脉匀速输入失血量3倍的NS,30min输注完毕;HSD组以4ml/kg匀速输入7.5%高渗氯化钠/6%右旋醣酐高渗盐溶液,5min输注完毕。各组分别于150、210、270min时点在存活大鼠中随机处死8只大鼠,测量血气指标,并收集肺、脑组织标本检测含水量。另39只大鼠同上分组,每组13只,致伤复苏方法同前,记录30、90、150、210、270min时点各组血压变化及死亡状况。结果对照组13只大鼠有6只死亡,NS组有3只死亡,HSD组大鼠全部存活至270min时点,组间存活率比较差异有统计学意义（P〈0.05）。伤后150min时点,NS组及HSD组大鼠MAP显著增高,210、270min时点NS组MAP逐渐降低,而HSD组降低不明显,270min时点各组间比较差异显著（P〈0.05）。在150、210、270min时点,HSD组大鼠肺、脑含水量逐渐下降,而NS组则有上升趋势,组间比较差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。与对照组比较,HSD与NS对血气指标均有一定的改善作用,且在210min及270min时间点,HSD组pH值、PO2高于NS组,乳酸水平低于NS组（P〈0.05或P〈0.01）。结论 HSD可维持爆炸伤复合失血致休克大鼠血流动力学稳定,且在改善血气指标及肺、脑水肿方面的作用优于NS。

关键词：舱室爆炸伤休克,出血性盐水,高渗液体复苏

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多发伤病历与诊断:专家共识意见(2013版)

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创伤外科杂志 2014年第2期16卷 192-193页

作者：张连阳黄显凯姚元章郭庆山宗兆文孙士锦谭浩白祥军帕尔哈提·拜合提赵晓东张旭鸣高劲谋都定元胡平中华医学会创伤学分会创伤急救与多发伤学组第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军战创伤中心创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室华中科技大学同济医学院附属同济医院新疆医科大学第一附属医院解放军304医院福建省省立医院重庆市急救中心

多发伤病历书写争议颇多,国际疾病分类(ICD)-10不能满足其诊断要求。本文系统阐述了多发伤病历书写要点,提出其诊断包括损伤诊断、损伤并发症诊断和并存疾病诊断三部分,损伤诊断排列应遵循由上而下、从内向外、先重后轻及左右前后的原则。

关键词：多发伤病历诊断专家

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mTOR及其下游信号通路在骨髓间充质干细胞氧化应激损伤中的变化及作用

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第三军医大学学报 2013年第2期35卷 114-118页

作者：黄文秋黄宏徐祥韩娇艳代卉崔文慧蒋建新王莎莉重庆医科大学神经科学研究中心重庆400046 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的研究小鼠骨髓间充质干细胞(mouse bone marrow stem cells,mBMSCs)在氧化应激损伤中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammaliatargetofrapamycin,mTOR)及其下游信号通路的变化及其作用。方法从30只雄性健康昆明小鼠的股骨中分离、培养和扩增... 详细信息

目的研究小鼠骨髓间充质干细胞(mouse bone marrow stem cells,mBMSCs)在氧化应激损伤中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammaliatargetofrapamycin,mTOR)及其下游信号通路的变化及其作用。方法从30只雄性健康昆明小鼠的股骨中分离、培养和扩增BMSCs。H2O2刺激mBMSCs建立氧化应激损伤模型。实验分为对照组(不予H2O2处理)、不同浓度H2O2(100、200、300、400、500、800、1 000μmol/L处理mBMSCs)损伤组(n=5)。采用MTT法检测24、48、72 h各组的细胞活力;倒置显微镜观察BMSCs的形态学改变;采用细胞核Hoechst33342染色观察凋亡细胞核形态;Western blot检测各组Bcl-2、Bax、mTOR及其下游蛋白以及蛋白的磷酸化的表达。结果 100～1 000μmol/L浓度的H2O2作用mBMSCs24 h后,其形态学和病理学发生浓度依赖性的改变。H2O2浓度在100～300μmol/L时,随着H2O2浓度的增高,mBMSCs的mTOR、p70S6K、S6的表达水平有增高的趋势,磷酸化水平明显增高(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达增高(P<0.01),凋亡蛋白Bax表达不明显(P>0.05)。H2O2浓度在400μmol/L以上时,随着H2O2浓度的增高,p-mTOR、p-p70S6K、p-S6、BCL-2的表达水平降低(P<0.05,P<0.01),而mTOR、p70S6K、S6蛋白变化不明显,同时Bax的表达水平明显增高(P<0.01)。结论一定强度的氧化应激可以降低mBMSCs存活率,促进细胞凋亡,其机理可能与抑制mTOR及其下游信号通路的活性和抗凋亡蛋白Bcl-2表达,促进凋亡蛋白Bax表达有关。

关键词：氧化应激骨髓间充质干细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白细胞凋亡

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人SUMO-2 shRNA干扰表达载体构建及其对细胞增殖的影响

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中国现代医学杂志 2013年第28期23卷 1-5页

作者：李向云黄宏邢伟郭韡何静孙志亚徐祥第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所(创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第一研究室) 重庆400042

目的构建干扰人SUMO-2表达的shRNA重组质粒载体,并筛选下调人SUMO-2表达的稳定细胞株。方法设计并合成针对人SUMO-2的shRNA寡核苷酸,并将其克隆至pLKO.1质粒载体上,转染HCT116细胞后经嘌呤霉素筛选获稳定表达细胞株,并通过免疫印迹鉴定S... 详细信息

目的构建干扰人SUMO-2表达的shRNA重组质粒载体,并筛选下调人SUMO-2表达的稳定细胞株。方法设计并合成针对人SUMO-2的shRNA寡核苷酸,并将其克隆至pLKO.1质粒载体上,转染HCT116细胞后经嘌呤霉素筛选获稳定表达细胞株,并通过免疫印迹鉴定SUMO-2的表达。结果成功构建干扰人SUMO-2表达的pLKO.1质粒载体,可在HCT116细胞中稳定表达,且能有效抑制SUMO-2蛋白质的表达。功能研究初步证明干扰SUMO-2表达可抑制细胞增殖并使处于细胞周期G1期的细胞比例上升。结论获得了干扰人SUMO-2表达的pLKO.1-shRNA质粒载体,以及下调SUMO-2表达的HCT116稳定细胞株。

关键词： shRNA干扰 SUMO-2 下调稳定细胞株细胞增殖细胞周期

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川芎嗪通过Akt信号通路影响前列腺癌PC3细胞的增殖和凋亡

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第三军医大学学报 2013年第2期35卷 105-108页

作者：韩娇艳朱方强徐祥黄宏黄文秋崔文慧代卉蒋建新王莎莉重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016 第三军医大学西南医院肾内科重庆400038 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400042

目的研究盐酸川芎嗪对前列腺癌PC3细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法 0、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mg/mL盐酸川芎嗪处理雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞,MTT法检测各组细胞的增殖能力,荧光显微镜观察细胞核形态学改变... 详细信息

目的研究盐酸川芎嗪对前列腺癌PC3细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法 0、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mg/mL盐酸川芎嗪处理雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞,MTT法检测各组细胞的增殖能力,荧光显微镜观察细胞核形态学改变,Western blot检测Akt以及下游相关蛋白mTOR、p70S6蛋白及蛋白磷酸化的表达,以及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果盐酸川芎嗪能有效抑制前列腺癌PC3细胞增殖,且显示浓度时间依赖性(P<0.05)。1.5、2.5 mg/mL的盐酸川芎嗪能够降低Akt和p-Akt的表达,进而下调mTOR、p-mTOR、p70S6及p-p70S6的表达(P<0.05);同时下调Bcl-2、上调Bax蛋白的表达(P<0.05)。结论 Akt及其下游信号通路介导了盐酸川芎嗪抑制前列腺癌PC3细胞增殖及促凋亡作用。

关键词：川芎嗪前列腺肿瘤肿瘤细胞,培养的 Akt

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