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中华心血管病杂志 2018年第5期46卷 390-395页

作者：包庞刘焕云王玉清谭亚军李禄丰徐春馨黄岚赵晓辉陆军军医大学(第三军医大学)附属新桥医院心血管内科全军心血管病研究所重庆400037 解放军第一八0医院心血管内科

目的探讨锌离子对人脐静脉内皮细胞生物学功能的影响.方法体外原代培养人脐静脉内皮细胞后,传代培养并将细胞分为8组：对照组（常规培养,n=3）;20.μmol/L组（细胞培养液中加入氯化锌溶液20 μmol/L,n=3）;40 μmol/L组（细胞培养液... 详细信息

目的探讨锌离子对人脐静脉内皮细胞生物学功能的影响.方法体外原代培养人脐静脉内皮细胞后,传代培养并将细胞分为8组：对照组（常规培养,n=3）;20.μmol/L组（细胞培养液中加入氯化锌溶液20 μmol/L,n=3）;40 μmol/L组（细胞培养液中加入氯化锌溶液40μ mol/L,n=3）;80 μmol/L组（细胞培养液中加入氯化锌溶液80 μmol/L,n=3）;100 μmol/L组（细胞培养液中加入氯化锌溶液100 μmol/L,n=3）;200 μmol/L组（细胞培养液中加入氯化锌溶液200μmol/L,n=3）;300 μmol/L组（细胞培养液中加入氯化锌溶液300 μmol/L,n=3）;500 μmol/L组（细胞培养液中加入氯化锌溶液500 μmol/L,n=3）.采用实时无标记细胞分析仪检测内皮细胞增殖情况,采用CCK-8法检测内皮细胞活性,采用细胞划痕实验检测内皮细胞迁移能力,同时采用实时无标记细胞分析仪检测细胞黏附功能的变化.结果（1）18 h后,20、40、80、100和200 μmol/L组的细胞增殖指数分别为4.5±0.6、3.7±0.4、3.6±0.3、2.5±0.4和2.5±0.4,与对照组的3.5±0.3比较,差异均有统计学意义（P均＜0.05）;300和500μmol/L组的细胞增殖指数均为0.（2）96 h后,20、40、80、100、200、300和500 μmol/L组的细胞活性分别为1.21±0.05、1.10±0.03、0.99±0.05、0.62±0.02、0.45±0.04、O.11±0.01和0.12±0.06,与对照组的0.75±0.05比较,差异均有统计学意义（P均＜0.05）.（3）12 h后,20、40、80和100 μmol/L组的细胞迁移距离分别为（0.56±0.11）、（0.96±0.07）、（0.49±0.02）和（0.29±0.01）mm,与对照组的（0.24±0.04） mm比较,差异均有统计学意义（P均＜0.05）.（4）18 h后,20、40、80和100 μmol/L组的细胞黏附指数分别为0.40±0.05、0.31±0.01、0.38±0.05和0.40±0.03,与对照组的0.35±0.02比较,差异均无统计学意义（P均〉0.05）.结论低浓度锌离子（≤80 μμmol/L）对入脐静脉内皮细胞的增殖、活性和迁移功能有促进作用,对黏附功能无明显影响,而较高浓度锌离子（≥200 μmol/L）对细胞功能有抑制作用.

关键词：内皮细胞脐静脉锌

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抑制糖原合酶激酶活性对老龄大鼠内皮祖细胞增殖的作用机制

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西部医学 2018年第10期30卷 1426-1429,1433页

作者：崔斌刘曦秦浙学陈剑飞李佳蓓于世勇黄岚第三军医大学新桥医院全军心血管内科研究所重庆400037

目的探讨抑制糖原合酶激酶3β(GSK3β)活性对老龄大鼠内皮祖细胞(EPC)增殖的作用机制。方法密度梯度离心法分离培养老龄大鼠骨髓源性EPC,取对数生长期的EPC,分别加入表达催化GSK3β失活的GSK3β-KM基因的重组缺陷型腺病毒pMSCV-GSK3β-... 详细信息

目的探讨抑制糖原合酶激酶3β(GSK3β)活性对老龄大鼠内皮祖细胞(EPC)增殖的作用机制。方法密度梯度离心法分离培养老龄大鼠骨髓源性EPC,取对数生长期的EPC,分别加入表达催化GSK3β失活的GSK3β-KM基因的重组缺陷型腺病毒pMSCV-GSK3β-KM(基因转染组)或空病毒pMSCV-GFP(对照组)。采用镜下计数法及四氮唑溴盐比色法(MTT)测定EPC增殖能力,荧光激活细胞分离仪(FACS)分析各组EPC细胞周期变化。采用蛋白印迹法测定Wnt信号通路中磷酸化糖原合酶激酶3β(pGSK-3β)、β-连环蛋白(β-catenin)及细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的蛋白表达。结果与对照组比较,基因转染组EPC数量显著增加(P<0.01);MTT法检测基因转染组EPC在490nm吸光度值与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);FACS分析显示基因转染组细胞周期S期比例较对照组显著增加(P<0.01);蛋白印迹法测定显示,与对照组比较,基因转染组pGSK-3β、β-catenin及cyclinD1的蛋白表达显著增加(P<0.01)。结论抑制EPC的GSK-3β活性可通过激活Wnt信号通路促进老龄大鼠EPC的增殖能力。

关键词：糖原合酶激酶3β 内皮祖细胞增殖老龄大鼠基因转染

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促甲状腺激素对冠心病患者行经皮冠状动脉介入术预后的影响

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第三军医大学学报 2017年第6期39卷 568-573页

作者：张玉琳宋耀明第三军医大学新桥医院心血管内科全军心血管病研究所重庆400037

目的研究正常范围内不同浓度梯度的促甲状腺激素(thyroid-stimulating hormone,TSH)对冠心病患者行经皮冠状动脉介入术(percutaneous coronary interventions,PCI)预后的影响及其临床意义。方法回顾性纳入1 002例行PCI且TSH处于正常范围... 详细信息

目的研究正常范围内不同浓度梯度的促甲状腺激素(thyroid-stimulating hormone,TSH)对冠心病患者行经皮冠状动脉介入术(percutaneous coronary interventions,PCI)预后的影响及其临床意义。方法回顾性纳入1 002例行PCI且TSH处于正常范围内(0.30~4.20μIU/m L)的冠心病患者,将受试者分为3组:TSH正常低值组(0.30~1.60μIU/m L,387例)、TSH正常中值组(1.61~2.90μIU/m L,413例)、TSH正常高值组(2.91~4.20μIU/m L,202例),随访时间1年,终点事件是全因死亡,并统计出血事件和再入院事件。结果正常低值组全因死亡事件6例,全因死亡率1.55%;正常中值组全因死亡事件8例,全因死亡率1.94%;正常高值组全因死亡事件10例,全因死亡率4.95%;各组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。正常低值组再出血事件13例,再出血率3.36%;正常中值组再出血事件14例,再出血率3.39%;正常高值组再出血事件16例,再出血率7.92%;各组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。正常低值组再入院事件38例,再入院率9.82%;正常中值组再入院事件27例,再入院率6.54%;正常高值组再入院事件15例,再入院率7.43%;各组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析显示正常高值的TSH(OR=1.48)是PCI术后全因死亡的危险因素,同时正常高值的TSH(OR=1.47)是PCI术后出血的危险因素。生存分析也进一步证明正常高值的TSH是PCI术后全因死亡的危险因素(P<0.05)。结论 TSH水平越高,全因死亡事件、再出血事件的发生率越高;正常高值的TSH是经皮冠状动脉介入治疗的全因死亡和出血事件的危险因素。

关键词：促甲状腺激素冠心病经皮冠状动脉介入术

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兔腹主动脉分叉双支架术模型的建立

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第三军医大学学报 2017年第10期39卷 971-976页

作者：肖寒谭亚军王玉清包庞李佑美周登禄赵晓辉第三军医大学新桥医院心血管内科全军心血管病研究所重庆400037

目的建立兔腹主动脉分叉双支架术模型。方法雄性新西兰兔5只(体质量3.0~3.5 kg),麻醉消毒后,经颈动脉途径于腹主动脉-髂动脉血管分叉处采用边支支架微突T支架技术(T-stenting and small protrusion,TAP)实施双支架植入术,利用数字减影... 详细信息

目的建立兔腹主动脉分叉双支架术模型。方法雄性新西兰兔5只(体质量3.0~3.5 kg),麻醉消毒后,经颈动脉途径于腹主动脉-髂动脉血管分叉处采用边支支架微突T支架技术(T-stenting and small protrusion,TAP)实施双支架植入术,利用数字减影血管造影(digital subtraction angi-ography,DSA)、血管内超声(intravascular ultrasound,IVUS)和显微CT扫描(micro computed tomography,micro-CT)进行术后即刻评价及术后6个月复查。结果可通过兔颈动脉放置6F鞘管,于腹主动脉分叉处成功实施TAP双支架术,术后即刻DSA提示支架位置满意,血流TIMI 3级,IVUS提示支架贴壁良好,术后6个月复查DSA提示无支架内再狭窄及血栓形成,血流TIMI 3级,IVUS提示支架贴壁良好,无支架内再狭窄,micro-CT可见边支开口处支架覆盖完全,无支架内血栓,右侧髂动脉支架下缘微突入腹主动脉管腔[(0.49±0.08)mm]。结论成功建立了兔腹主动脉分叉双支架术模型,为冠脉分叉病变的临床前期研究提供了依据。

关键词：微突T支架技术冠状动脉分叉腹主动脉动物模型

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核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性体在2型糖尿病并发冠心病过程中的作用

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第三军医大学学报 2017年第8期39卷 801-806页

作者：曹运兰胡龙江宋耀明第三军医大学新桥医院心血管内科、全军心血管病研究所重庆400038 重庆市涪陵中心医院心血管内科重庆408000

目的探究核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎性体在2型糖尿病并发冠心病过程中的作用。方法选取第三军医大学新桥医院心血管内科的住院患者共130例,分为... 详细信息

目的探究核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎性体在2型糖尿病并发冠心病过程中的作用。方法选取第三军医大学新桥医院心血管内科的住院患者共130例,分为单纯冠心病组(n=40)、单纯2型糖尿病组(n=20)、2型糖尿病并发冠心病组(n=40)及正常对照组(n=30)。分离外周血单个核细胞及血浆。采用RT-q PCR、Western blot分别检测各组外周血单个核细胞中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosisassociated speck-like protein,ASC)、半胱天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)mRNA及蛋白表达情况,ELISA法检测各组血浆中IL-1β含量。结果单纯冠心病组、单纯2型糖尿病组及2型糖尿病并发冠心病组外周血单个核细胞中NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA及蛋白表达水平均较正常对照组显著增高(P<0.05),其中,2型糖尿病并发冠心病组ASC、Caspase-1 mRNA在外周血单个核细胞中的表达显著高于单纯冠心病组及单纯2型糖尿病组(P<0.05),而2型糖尿病并发冠心病组NLRP3蛋白在外周血单个核细胞中的表达显著高于单纯冠心病组及单纯2型糖尿病组(P<0.05)。同时,测得单纯冠心病组、单纯2型糖尿病组及2型糖尿病并发冠心病组血浆中IL-1β含量分别为(24.05±1.00)、(22.86±1.66)、(26.85±1.45)ng/L,较正常对照组(12.53±2.79)ng/L均显著升高(P<0.05),其中,2型糖尿病并发冠心病组血浆中IL-1β含量显著高于单纯冠心病组及单纯2型糖尿病组(P<0.05)。结论 NLRP3炎性体的异常激活可促进2型糖尿病并发冠心病病理过程的发生、发展,其可能成为防治2型糖尿病并发冠心病的新靶点。

关键词：核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 炎性体冠心病 2型糖尿病 IL-1β

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IABP与ECMO在严重冠状动脉病变中的应用进展

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重庆医学 2017年第30期46卷 4285-4288页

作者：陈国柱傅彪黄岚第三军医大学新桥医院心血管内科/全军心血管病研究所重庆400037

中国心血管病患病率处于持续上升阶段,冠心病的病死率呈上升的趋势.针对冠心病、缺血性心脏病,经皮冠状动脉介入治疗（percutaneous coronary intervention,PCI）是冠心病患者明确诊断和血运重建的重要手段。中国大陆PCI病例数稳定增长,... 详细信息

中国心血管病患病率处于持续上升阶段,冠心病的病死率呈上升的趋势.针对冠心病、缺血性心脏病,经皮冠状动脉介入治疗（percutaneous coronary intervention,PCI）是冠心病患者明确诊断和血运重建的重要手段。中国大陆PCI病例数稳定增长,2014年达到500946例。严重冠状动脉病变患者,临床特点主要包括：高龄、既往心肌梗死病史、

关键词：主动脉内球囊反搏体外膜肺氧合经皮冠状动脉介入治疗心脏辅助装置进展

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氯化锂通过激活Wnt信号通路促进内皮祖细胞的增殖能力

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中国动脉硬化杂志 2017年第10期25卷 985-988,1001页

作者：崔斌刘曦李佳蓓秦浙学于世勇黄岚第三军医大学新桥医院全军心血管内科研究所重庆市400037

目的探讨糖原合酶激酶3β(GSK-3β)抑制剂氯化锂对内皮祖细胞增殖的作用机制。方法密度梯度离心法分离大鼠骨髓源性内皮祖细胞,体外培养7天后分别给予不同浓度氯化锂(5、10、20、40 mmol/L)以抑制内皮祖细胞的GSK-3β活性。分别采用镜... 详细信息

目的探讨糖原合酶激酶3β(GSK-3β)抑制剂氯化锂对内皮祖细胞增殖的作用机制。方法密度梯度离心法分离大鼠骨髓源性内皮祖细胞,体外培养7天后分别给予不同浓度氯化锂(5、10、20、40 mmol/L)以抑制内皮祖细胞的GSK-3β活性。分别采用镜下计数法及四氮唑溴盐比色法测定内皮祖细胞增殖能力,荧光激活细胞分离仪分析各组内皮祖细胞的细胞周期变化。采用蛋白印迹法测定Wnt信号通路中磷酸化GSK-3β、β-连环蛋白及细胞周期蛋白D1的蛋白表达。结果氯化锂在一定浓度范围内可剂量依赖性地增加内皮祖细胞数量。与对照组比较,不同浓度氯化锂组(5、10、20 mmol/L)内皮祖细胞数量显著增加(P<0.05,n=5)。四氮唑溴盐比色法检测氯化锂各浓度组内皮祖细胞在490 nm处吸光度值与对照组比较差异有显著性(P<0.05,n=5)。荧光激活细胞分离仪分析显示氯化锂组细胞周期S期较对照组显著增加(P<0.05,n=3)。蛋白印迹法测定表明,与对照组比较氯化锂可显著增加磷酸化GSK-3β、β-连环蛋白及细胞周期蛋白D1的蛋白表达(P<0.05,n=3)。结论 GSK-3β抑制剂氯化锂可通过激活Wnt信号通路显著促进内皮祖细胞的增殖能力。

关键词：糖原合酶激酶3β 内皮祖细胞氯化锂细胞增殖 Wnt信号通路

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左心超负荷导致肺血管重构时BMP信号分子的变化

左心超负荷导致肺血管重构时BMP信号分子的变化

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第二十届全军心血管内科学术会议、第七届渤海-天津夏季心脏学术会议、天津市医学会心血管病学分会年会、武警部队第十二届心血管病学术会议

作者：顾文竹靳鹏赖亚宇郑薇邓梦杨武晓静第三军医大学新桥医院全军心血管内科研究所重庆400037

目的：骨形成蛋白(BMP)信号与心肌重构和特发性肺动脉高压两个过程均相关，但其是否参与左心疾病导致肺血管重构的过程目前尚不清楚。本实验通过建立大鼠主动脉弓缩窄模型，观察左心负荷增高导致肺血管重构时BMP信号分子的变化，探讨左... 详细信息

目的：骨形成蛋白(BMP)信号与心肌重构和特发性肺动脉高压两个过程均相关，但其是否参与左心疾病导致肺血管重构的过程目前尚不清楚。本实验通过建立大鼠主动脉弓缩窄模型，观察左心负荷增高导致肺血管重构时BMP信号分子的变化，探讨左心疾病相关肺高压的发生机制。

关键词：肺血管重构肺高血压左心超负荷 BMP信号

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兔腹主动脉分叉双支架术模型的建立

兔腹主动脉分叉双支架术模型的建立

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第二十届全军心血管内科学术会议、第七届渤海-天津夏季心脏学术会议、天津市医学会心血管病学分会年会、武警部队第十二届心血管病学术会议

作者：肖寒谭亚军王玉清包庞李佑美周登禄赵晓辉第三军医大学新桥医院心血管内科全军心血管病研究所重庆400037

目的：建立兔腹主动脉分叉双支架术模型。方法：健康新西兰兔5只,麻醉消毒后,经颈动脉途径于腹主动脉-髂动脉血管分叉处采用边支支架微突T支架技术(T-stenting and small protrusion,TAP)实施双支架植入术,利用数字减影血管造影(digital... 详细信息

目的：建立兔腹主动脉分叉双支架术模型。方法：健康新西兰兔5只,麻醉消毒后,经颈动脉途径于腹主动脉-髂动脉血管分叉处采用边支支架微突T支架技术(T-stenting and small protrusion,TAP)实施双支架植入术,利用数字减影血管造影(digital subtraction angiography,DSA)、血管内超声(intravascular ultrasound,IVUS)和显微 CT 扫描(micro computed tomography,micro-CT)进行术后即刻评价及术后6个月后随访。

关键词：兔腹主动脉分叉双支架术

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血管内皮生长因子通过缝隙连接蛋白43调节内皮祖细胞增殖迁移

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第三军医大学学报 2016年第2期38卷 136-140页

作者：李禄丰刘焕云邓梦杨徐春馨赵晓辉第三军医大学新桥医院心血管内科全军心血管研究所重庆400037

目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial groth factor,VEGF)是否通过缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)调控内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)增殖迁移。方法分离培养原代大鼠脾源性EPCs,不同浓度VEPF(0、10、50 ng/m L)刺激细胞,Western blot检测Cx43的表达。实验分3组:对照组、VEGF组、VEGF+si Cx43组。荧光漂白恢复实验(fluorescence redistribution after photobleaching,FRAP)分别检测3 min内各组选定细胞荧光强度变化情况。CCK-8检测干扰Cx43蛋白表达对EPCs增殖的影响;Transwell小室迁移实验检测干扰Cx43蛋白表达对EPCs迁移的影响。结果 (1)VEGF促进EPCs中Cx43的表达(P<0.05),且有浓度依赖性。(2)与对照组相比,VEGF组缝隙连接功能明显增强(P<0.05);与VEGF组相比,VEGF+si Cx43组缝隙连接功能明显降低(P<0.05)。(3)与对照组相比,VEGF组促进EPCs增殖及迁移,差异有统计学意义(P<0.05);与VEGF组相比,VEGF+si Cx43组EPCs增殖及迁移活性明显降低(P<0.05)。结论 VEGF可以通过上调EPCs中Cx43的表达,引起缝隙连接功能增强,从而促进内皮祖细胞的增殖及迁移。

关键词：内皮祖细胞缝隙连接蛋白43 细胞增殖细胞迁移

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