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第八届中国眼科学和视觉科学研究大会

作者：徐海伟高笠雄陈曦曾玉晓第三军医大学西南医院视觉损伤与再生修复重庆市重点实验室

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TO901317对RD1小鼠变性视网膜的保护作用及其免疫调节机制

TO901317对RD1小鼠变性视网膜的保护作用及其免疫调节机制

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第八届中国眼科学和视觉科学研究大会

作者：何枭吴倩徐海伟第三军医大学西南眼科医院视觉损伤与再生修复重庆市重点实验室

目的观察肝脏X受体(LXRs)激动剂TO901317 对遗传性视网膜变性小鼠RD1 视网膜感光细胞的保护作用及其免疫调节机制。方法取7 天龄RD1 小鼠和C57BL/6J 小鼠各10 只,随机分成处理组与对照组,分别给予TO(50mg/kg/d)和Vehicle(2％DMSO)腹... 详细信息

目的观察肝脏X受体(LXRs)激动剂TO901317 对遗传性视网膜变性小鼠RD1 视网膜感光细胞的保护作用及其免疫调节机制。方法取7 天龄RD1 小鼠和C57BL/6J 小鼠各10 只,随机分成处理组与对照组,分别给予TO(50mg/kg/d)和Vehicle(2％DMSO)腹腔注射,每天1 次,持续7 天;第8 天处死动物并提取全网膜RNA、蛋白质、冰冻包埋眼球,qPCR 检测LXRs 的mRNA 表达量,视网膜冰冻切片免疫荧光染色、TUNEL、Western-blot 检测小鼠视网膜感光细胞的丢失以及小胶质细胞、Müller 细胞的激活状态。

关键词：视网膜变性肝脏X受体小胶质细胞 Muller细胞

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嗅鞘细胞对大鼠急性视网膜光损伤的保护作用及机制研究

嗅鞘细胞对大鼠急性视网膜光损伤的保护作用及机制研究

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第八届中国眼科学和视觉科学研究大会

作者：薛琅月徐海伟阴正勤第三军医大学西南眼科医院视觉损伤与再生修复重庆市重点实验室

目的初步探讨嗅鞘细胞(Olfactory Ensheathing Cells,OECs)对大鼠急性视网膜光损伤的保护作用及机制。方法将原代培养的大鼠OECs 细胞移植至持续光照24 小时的Long Evans 大鼠视网膜下腔,在移植后2 周、4 周、8 周进行ERG 检测、免疫... 详细信息

目的初步探讨嗅鞘细胞(Olfactory Ensheathing Cells,OECs)对大鼠急性视网膜光损伤的保护作用及机制。方法将原代培养的大鼠OECs 细胞移植至持续光照24 小时的Long Evans 大鼠视网膜下腔,在移植后2 周、4 周、8 周进行ERG 检测、免疫组化染色进行外核层厚度统计以及ROS 荧光染色,并通过RT-PCR 检测视网膜SOD1 相对表达量。

关键词：大鼠急性视网膜光损伤嗅鞘细胞 ERG 氧化应激 SOD1

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白藜芦醇预处理对酒精暴露大鼠神经干细胞的保护作用及机制研究

白藜芦醇预处理对酒精暴露大鼠神经干细胞的保护作用及机制研究

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第八届中国眼科学和视觉科学研究大会

作者：黎其友高笠雄徐海伟第三军医大学西南眼科医院视觉损伤与再生修复重庆市重点实验室

目的研究白藜芦醇预处理对酒精暴露大鼠皮层来源的神经干细胞(L2.3)增殖与凋亡的影响及机制.方法常规采用无血清培养基培养大鼠神经干细胞L2.3,分别采用不同浓度(0,0.5uM,5uM,50uM)的白藜芦醇对神经干细胞进行预处理,然后将L2.3 暴露... 详细信息

目的研究白藜芦醇预处理对酒精暴露大鼠皮层来源的神经干细胞(L2.3)增殖与凋亡的影响及机制.方法常规采用无血清培养基培养大鼠神经干细胞L2.3,分别采用不同浓度(0,0.5uM,5uM,50uM)的白藜芦醇对神经干细胞进行预处理,然后将L2.3 暴露于酒精(1000uM)处理12h 或24h,采用流式细胞仪检测白藜芦醇对暴露于酒精的神经干细胞的细胞周期和凋亡的影响.

关键词：白藜芦醇酒精损伤神经干细胞增殖凋亡

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兔角膜缘干细胞三种体外培养方法的比较

兔角膜缘干细胞三种体外培养方法的比较

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第八届中国眼科学和视觉科学研究大会

作者：李沂键杨于力徐海伟阴正勤视觉损伤与再生修复重庆市重点实验室重庆400038 第三军医大学西南眼科医院重庆400038 第三军医大学西南眼科医院重庆400038 视觉损伤与再生修复重庆市重点实验室重庆400038

目的比较研究兔角膜缘干细胞组织块培养法、中性蛋白酶消化法和胶原酶消化法三种培养方法所得角膜缘细胞的细胞生物学特性.方法取6 月龄新西兰大白兔角膜,剪取约2mm 宽的角膜缘组织以用于角膜缘干细胞的培养.组织块培养法,剪取0.4-0.5... 详细信息

目的比较研究兔角膜缘干细胞组织块培养法、中性蛋白酶消化法和胶原酶消化法三种培养方法所得角膜缘细胞的细胞生物学特性.方法取6 月龄新西兰大白兔角膜,剪取约2mm 宽的角膜缘组织以用于角膜缘干细胞的培养.组织块培养法,剪取0.4-0.5mm 的角膜缘组织碎片,将其移入培养板中,培养箱内放置5-10 分钟,在角膜缘组织块上滴加一滴FBS,过夜加入生长培养液.

关键词：兔角膜缘干细胞体外培养方法角膜缘干细胞缺失

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低视力视网膜变性患者的视功能精准评估的初步临床研究

低视力视网膜变性患者的视功能精准评估的初步临床研究

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第一届北京视觉科学会议(Beijing Vision Science Conference(BVSC)2016)

作者：李世迎王刚王敏王青刘波孟晓红刘勇赵从建阴正勤第三军医大学附属西南医院眼科重庆 400038 视觉损伤与再生修复重庆市重点实验室重庆 400038

目的：目前对低视力的视功能评定标准中主要依靠视力和视野,而视力表检查在低视力患者中不够精确、视野受患者主观配合度影响,这些都妨碍了对低视力患者视功能的精准评估和可能疗效的客观检测。本研究旨在探讨视觉电生理检查、黄斑微视... 详细信息

目的：目前对低视力的视功能评定标准中主要依靠视力和视野,而视力表检查在低视力患者中不够精确、视野受患者主观配合度影响,这些都妨碍了对低视力患者视功能的精准评估和可能疗效的客观检测。本研究旨在探讨视觉电生理检查、黄斑微视野仪(microperimeter,MP)和瞳孔对光反射测量仪(pupillometer,PLR)在低视力视网膜变性患者的视功能精准评估中的价值。

关键词：低视力视网膜变性视觉电生理检查黄斑微视野仪瞳孔光反射

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中国人群Bietti's结晶样视网膜变性患者CYP4V2致病突变筛查

中国人群Bietti's结晶样视网膜变性患者CYP4V2致病突变筛查

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第八届中国眼科学和视觉科学研究大会

作者：孟晓红徐海伟李世迎刘勇阴正勤第三军医大学西南眼科医院重庆市视觉损伤和再生修复重庆市重点实验室

目的发现138 例中国人群Bietti's 结晶样视网膜变性(Bietti's crystalline dystrophy,BCD)先证者CYP4V2 致病突变.方法 138 例BCD 先证者进行了致病基因CYP4V2 突变筛查.92 例行一代测序：设计并合成10 对引物,通过聚合酶链反... 详细信息

目的发现138 例中国人群Bietti's 结晶样视网膜变性(Bietti's crystalline dystrophy,BCD)先证者CYP4V2 致病突变.方法 138 例BCD 先证者进行了致病基因CYP4V2 突变筛查.92 例行一代测序：设计并合成10 对引物,通过聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)扩增CYP4V2 的11 个外显子并对其产物进行直接测序;46 例行二代测序.

关键词：遗传性视网膜变性疾病基因致病突变 Sanger测序二代测序

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基于二代测序的视网膜变性疾病的遗传方式及致病基因分析

基于二代测序的视网膜变性疾病的遗传方式及致病基因分析

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第八届中国眼科学和视觉科学研究大会

作者：孟晓红李世迎刘勇徐海伟阴正勤第三军医大学西南眼科医院重庆市视觉损伤和再生修复重庆市重点实验室

目的分析视网膜变性疾病的遗传方式，筛查其致病基因。方法从2013 年1 月至2016 年2 月到第三军医大学第一附属医院眼科就诊的358 例视网膜色素变性病例进行二代测序，通过生物信息学分析、突变数据库比对、家系验证及其遗传方式确立... 详细信息

目的分析视网膜变性疾病的遗传方式，筛查其致病基因。方法从2013 年1 月至2016 年2 月到第三军医大学第一附属医院眼科就诊的358 例视网膜色素变性病例进行二代测序，通过生物信息学分析、突变数据库比对、家系验证及其遗传方式确立致病基因。

关键词：遗传性视网膜变性疾病致病基因异质性遗传方式二代测序

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飞秒激光板层切削的角膜层面质量与角膜材料的相关性研究

飞秒激光板层切削的角膜层面质量与角膜材料的相关性研究

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第八届中国眼科学和视觉科学研究大会

作者：张辰星唐茂龙李燕 David Huang 第三军医大学附属西南医院眼科视觉损伤与再生修复重庆市重点实验室重庆 Casey eye institute Oregon Health & Science UniversityPortlandOR

目的量化对比分析飞秒激光在新鲜尸眼角膜和Gamma 射线预处理角膜材料(VisionGraft Sterile Cornea;Tissue Bank International,Baltimore,MD,USA)上进行不同深度板层切削所产生的基质层面质量状况。方法对19 只新鲜尸眼和14 只Vision... 详细信息

目的量化对比分析飞秒激光在新鲜尸眼角膜和Gamma 射线预处理角膜材料(VisionGraft Sterile Cornea;Tissue Bank International,Baltimore,MD,USA)上进行不同深度板层切削所产生的基质层面质量状况。方法对19 只新鲜尸眼和14 只VisionGraft 角膜材料进行飞秒激光板层切削。

关键词：飞秒激光板层角膜移植 VisionGraft 角膜

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神经干细胞与RPE细胞的线粒体交换及其对RPE细胞增生和能量代谢的影响

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中华实验眼科杂志 2015年第5期33卷 424-429页

作者：孙荣莎徐海伟阴正勤第三军医大学西南医院全军眼科中心重庆市视觉损伤与再生修复重点实验室重庆400038

背景研究表明,干细胞可通过与损害靶细胞进行线粒体交换的方式修复受损细胞.视网膜色素变性疾病是以视网膜色素上皮（RPE）细胞凋亡为病理基础的眼病,干细胞是否能够通过上述机制进行治疗尚不清楚. 目的研究神经干细胞（NSCs）能否通... 详细信息

背景研究表明,干细胞可通过与损害靶细胞进行线粒体交换的方式修复受损细胞.视网膜色素变性疾病是以视网膜色素上皮（RPE）细胞凋亡为病理基础的眼病,干细胞是否能够通过上述机制进行治疗尚不清楚. 目的研究神经干细胞（NSCs）能否通过线粒体交换机制改善RPE细胞的增生和能量代谢功能.方法分离Long-Evans大鼠的视网膜进行RPE细胞的培养和传代,取第3代细胞用于实验,采用荧光显微镜检测RPE细胞中RPE65和Bestrophin蛋白的表达.小鼠NSCs C17.2细胞系和带绿色荧光蛋白（GFP）的C17.2细胞（GFP-C17.2细胞）进行培养和传代.分别采用线粒体特异性染色剂Mitotracker-green和Mitotracker-red标记RPE细胞和NSCs线粒体.将RPE细胞与小鼠NSCs进行共培养,用麦胚凝集素（WGA）标记隧道纳米管（TNT）,于激光扫描共焦显微镜下观察共培养的RPE细胞与小鼠NSCs间TNT中线粒体交换方式;采用流式细胞术检测RPE细胞与NSCs共培养前后的细胞周期改变;采用高效液相色谱（HPLC）技术检测共培养前后RPE细胞中ATP、ADP和AMP的质量分数. 结果培养的第3代RPE细胞生长良好,RPE65和Bestrophin表达阳性细胞均＞85％.NSCs和RPE细胞中线粒体对Mitotracker-red标记的阳性率均＞95％.2种细胞共培养后24 h可见RPE细胞与NSCs间形成的膜性TNT结构,WGA染色呈蓝色荧光.随着时间的推移,NSCs中呈红色荧光的线粒体通过TNT进入呈绿色荧光的RPE细胞中.接受TNT线粒体后,处于G1期的RPE细胞比例较未进行线粒体交换的RPE细胞明显下降,差异有统计学意义（P=0.016）,S期细胞和G2/M期细胞比例分别增加了5％和2％,差异均无统计学意义（P=0.114、0.189）.HPLC检测结果显示,与NSCs共培养后,RPE细胞中ATP、ADP和AMP质量分数分别为（8.77 ±3.68）、（2.76±0.92）和（1.07±0.65） μg/mg,较共培养前的（11.29±2.29）、（3.12±0.95）和（1.59±1.22） μg/mg均有所下降,但差异均无统计学意义（P=0.370、0.668、0.553）.结论 NSCs通过建立的TNT能将线粒体单向传递给共培养的RPE细胞,线粒体交换可能是NSCs改善RPE细胞增生和代谢能力的机制之一.

关键词：干细胞眼色素上皮/细胞学视网膜变性/治疗细胞培养共培养技术线粒体/代谢隧道纳米管动物

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