检索结果-内蒙古大学图书馆

陆军军医大学学报 2025年第7期47卷 629-638页

作者：王泽泽杨学森王英谭雨龙罗珍李萍何根林刘晓倩申婷婷刘怡杉罗雪陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系热带医学教研室重庆陆军军医大学(第三军医大学)极端环境医学教育部重点实验室(培育) 重庆

目的探究热习服对电磁辐射所致海马神经损伤的保护作用及机制。方法40只雄性BALB/c小鼠(体质量18~22 g,7周龄)按随机数字表法分为4组(n=10):对照(Con)组、热习服(HA)组(34℃,30 d)、电磁辐射(EMF)组(2450 MHz,20 min/d,4周)、热习服+电... 详细信息

目的探究热习服对电磁辐射所致海马神经损伤的保护作用及机制。方法40只雄性BALB/c小鼠(体质量18~22 g,7周龄)按随机数字表法分为4组(n=10):对照(Con)组、热习服(HA)组(34℃,30 d)、电磁辐射(EMF)组(2450 MHz,20 min/d,4周)、热习服+电磁辐射(HA+EMF)组。采用糖水偏好实验检测各组小鼠蔗糖偏好程度,悬尾实验和强迫游泳实验观察各组不动时间,Morris水迷宫检测各组学习记忆能力。采用HE染色观察各组小鼠海马组织病理变化;分别使用小胶质细胞标志物Iba1、促炎表型标志物CD68及抗炎表型标志物CD206进行免疫荧光标记,检测各组海马内小胶质细胞数量及小胶质细胞表型变化;采用ELISA检测各组海马内TNF-α、IL-1β、TGF-β和IL-10水平;采用Western blot检测各组海马内HSP70的蛋白表达水平。结果与Con组相比,EMF暴露小鼠对蔗糖的偏好降低(P<0.05),悬尾不动时间延长(P<0.01),强迫游泳不动时间延长(P<0.01),第7天的逃避潜伏期延长(P<0.01),穿越平台次数减少(P<0.05);海马区细胞排列较紊乱、结构较松散、存在细胞形态不规则、肿胀,细胞核固缩、着色深,小胶质细胞水肿;海马区小胶质细胞数量增加(P<0.01),CD68相对荧光强度升高(P<0.01)、CD206相对荧光强度差异无统计学意义(P=0.885),提示此时活化小胶质细胞主要呈促炎型M1表型;海马中TNF-α、IL-1β含量显著升高,IL-10和TGF-β含量显著下降(P<0.01)。与EMF组相比,HA+EMF组小鼠对蔗糖的偏好增加(P<0.01),悬尾不动时间减少(P<0.05),强迫游泳不动时间减少(P<0.01),第7天的逃避潜伏期缩短(P<0.01);小鼠海马区细胞损伤程度改善,细胞固缩减轻。与Con组相比,HA+EMF组海马区小胶质细胞数量增加(P<0.01),抗炎型M2表型标志物CD206相对荧光强度升高(P<0.01),此时CD68相对荧光强度相较EMF组显著下降(P<0.01)。与EMF组相比,HA+EMF组小鼠海马中TNF-α、IL-1β水平下降(P<0.01),TGF-β和IL-10水平升高(P<0.01)。HA+EMF组小鼠海马内HSP70蛋白表达量相较于EMF组显著升高(P<0.01)且显著高于HA组(P<0.01)。结论热习服可能通过改变小胶质细胞表型调节炎症反应,改善电磁辐射诱导的神经损伤。

关键词：热习服电磁辐射海马神经损伤神经炎症热休克蛋白70

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普通病房护士安宁疗护基本能力评估量表的研制及信效度检验

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陆军军医大学学报 2024年第20期46卷 2337-2345页

作者：吴昱齐雷蕾马会娟王鹏宇罗羽陆军军医大学(第三军医大学)护理系重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)陆军特色医学中心胸外科重庆400042 陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系军队卫生统计学教研室重庆400038

目的研制普通病房护士安宁疗护基本能力量表,并检测其信效度。方法通过文献回顾、小组讨论、专家咨询、小样本预调查等方法募集、筛选条目初步形成测试量表;于2021年1-3月用该量表对1000名来自各内科、各外科、急诊科、妇产科及重症监... 详细信息

目的研制普通病房护士安宁疗护基本能力量表,并检测其信效度。方法通过文献回顾、小组讨论、专家咨询、小样本预调查等方法募集、筛选条目初步形成测试量表;于2021年1-3月用该量表对1000名来自各内科、各外科、急诊科、妇产科及重症监护室等科室的护士进行调查;使用SPSS和AMOS软件对数据进行项目分析、探索性因子分析和验证性因子分析,以验证量表的信效度,最终形成正式量表。结果经因子分析提取5个公因子,37个条目,累计方差贡献率71.031%,量表整体Cronbach’sα系数为0.953,折半信度为0.772,重测信度为0.963,验证性因子分析模型拟合良好,χ^(2)/df=2.57,近似误差均方根(root mean square error of approximation,RMSEA)=0.059,比较拟合指数(comparative fit index,CFI)=0.909,增量拟合指数(incremental fit index,IFI)=0.910,非规范拟合指数(Tucker-Lewis index,TLI)=0.901。结论本研究构建的普通病房护士安宁疗护基本能力评估量表信效度良好,可以用于评价普通病房护士安宁疗护基本能力。

关键词：普通病房护士安宁疗护基本能力量表研制信度效度

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基于转录组学数据和堆叠监督自编码器的肺腺癌预后预测研究

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陆军军医大学学报 2023年第6期45卷 579-585页

作者：李鹏鹏陈锡程黄金羽伍亚舟陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系军队卫生统计学教研室重庆400038

目的基于转录组学数据构建堆叠监督自编码器(stacked supervised autoencode,SSAE)模型,旨在提高肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)预后预测的能力。方法收集癌症基因组图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库的转录组学数据(包含475例样本和25481个基因),对LUAD患者进行生存预后分析和基因差异表达分析,方法包括SSAE、随机生存森林(random survival forest,RSF)和DeepSurv,使用一致性指数(concordance index,CI)和Log-rank检验以P值评估各方法性能。结果相较于RSF(CI=0.54,P=0.15)和DeepSurv(CI=0.55,P=0.10),SSAE获得了更高的一致性指数(CI=0.58)和更低的Log-rank检验P值(P=0.05)。在生存分析上,高危组和低危组的生存结局有显著差异(HR:2.841,95%CI:1.907~4.232,Log-rank检验P<0.001)。生信分析选出了IGFBP1、ANXA13、MUC2、CIDEC、NTSR1、DSG3等21个上调的代表性差异基因。结论相较于既往研究,利用组学数据构建的SSAE可有效提高LUAD预后预测的能力。深度学习和组学研究的交叉融合可为癌症相关的诊断、治疗、预后研究提供新的方案。

关键词：肺腺癌转录组学预后预测 Cox回归自编码器

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1-硝基芘通过线粒体损伤致卵巢颗粒细胞功能障碍

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陆军军医大学学报 2023年第9期45卷 947-956页

作者：崔浩楠何世军王立宏杨望杨彬伟凌曦邹鹏张国伟敖琳曹佳陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系毒理学研究所重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系环境卫生学教研室重庆400038

目的探讨1-硝基芘(1-nitropyrene,1-NP)通过诱导线粒体损伤对人卵巢颗粒细胞KGN的增殖、周期进展及性激素合成的影响。方法采用不同浓度(0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L)1-NP染毒KGN细胞48 h,EdU掺入法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细... 详细信息

目的探讨1-硝基芘(1-nitropyrene,1-NP)通过诱导线粒体损伤对人卵巢颗粒细胞KGN的增殖、周期进展及性激素合成的影响。方法采用不同浓度(0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L)1-NP染毒KGN细胞48 h,EdU掺入法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,ELISA检测细胞培养上清中雌二醇及孕烯醇酮浓度,DCFH-DA探针检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,MitoSOX探针检测线粒体超氧化物(mitochondrial superoxides,MitoSOX)水平,JC-1探针检测线粒体膜电位,ATP试剂盒检测细胞内ATP含量,Western blot检测细胞增殖、周期进展、DNA损伤反应以及性激素合成相关蛋白的表达。采用线粒体抗氧化剂IDE、1-NP单独和联合处理细胞,再次检测上述指标。结果不同浓度1-NP染毒后KGN细胞增殖显著降低(P<0.05)。2.5、5、10μmol/L的1-NP处理细胞后,细胞增殖标志物PCNA蛋白表达显著降低,5、10μmol/L的1-NP处理后G2/M期细胞比例显著升高(P<0.05)。1-NP(10μmol/L)处理3 h即可诱导γ-H2AX表达增加(P<0.01);不同浓度1-NP处理后,DNA损伤反应通路蛋白p-ATM、p53和p21cip1表达明显升高(P<0.05),G2/M期阻滞相关蛋白CDK-1和CyclinB1表达明显降低(P<0.05)。此外,1-NP处理后KGN细胞的雌二醇、孕烯醇酮浓度显著下降(P<0.05),性激素合成相关蛋白CYP19、CYP11A1的表达也受到抑制(P<0.05)。线粒体及氧化应激相关指标检测结果显示,1-NP导致KGN细胞中ROS、MitoSOX水平显著升高,线粒体膜电位和ATP水平呈剂量依赖性下降。与10μmol/L 1-NP单独染毒组相比,IDE与1-NP联合处理组G2/M期细胞比例显著下降,雌二醇、孕烯醇酮水平出现一定程度升高,DNA损伤反应、细胞周期进展以及性激素合成相关蛋白的表达也出现明显恢复。同时,IDE与1-NP联合处理显著改善1-NP诱导的线粒体损伤,包括降低细胞ROS和MitoSOX水平,提高线粒体膜电位和ATP水平。结论1-NP可诱导线粒体损伤,造成卵巢颗粒细胞KGN的增殖抑制、周期阻滞、性激素合成障碍,而提高线粒体功能则能部分缓解1-NP诱导的KGN细胞功能障碍。

关键词： 1-硝基芘人卵巢颗粒细胞系周期阻滞性激素线粒体

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罗沙司他通过上调HIF-1α减轻热打击诱导的肾小管上皮细胞凋亡与衰老

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陆军军医大学学报 2024年第10期46卷 1092-1099页

作者：宋用为王玲陈文婷张明洋杨学森戴欢子陆军特色医学中心风湿免疫科重庆400042 陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系热带医学教研室重庆400038

目的探讨罗沙司他对热打击诱导的肾小管上皮细胞(HK-2细胞)凋亡与衰老的影响及其机制。方法体外培养HK-2细胞,用不同浓度(10、20、30、40、50μmol/L)的罗沙司他处理24 h,通过CCK-8法确定罗沙司他的最佳干预浓度。将HK-2细胞分为4组(n=... 详细信息

目的探讨罗沙司他对热打击诱导的肾小管上皮细胞(HK-2细胞)凋亡与衰老的影响及其机制。方法体外培养HK-2细胞,用不同浓度(10、20、30、40、50μmol/L)的罗沙司他处理24 h,通过CCK-8法确定罗沙司他的最佳干预浓度。将HK-2细胞分为4组(n=3):对照组、罗沙司他组(30μmol/L、24 h)、热打击组(43℃、2 h)、热打击+罗沙司他组(30μmol/L罗沙司他处理24 h后热打击2 h)。通过CCK-8检测细胞活力;Western blot检测缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1α)、Cleaved Caspase-3、p16、p21蛋白表达量;免疫荧光检测HIF-1α分布;细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测SA-β-Gal活性;TUNEL染色检测细胞凋亡情况。结果用30μmol/L罗沙司他处理的细胞活力最高。与对照组比较,热打击组细胞活力显著降低(P<0.05);HIF-1α、Cleaved Caspase-3、p16、p21蛋白表达量显著增加(P<0.05);SA-β-Gal活性显著增加(P<0.05);TUNEL阳性细胞占比显著增加(P<0.05)。与热打击组比较,热打击+罗沙司他组Cleaved Caspase-3、p16、p21蛋白表达量显著降低(P<0.05);SA-β-Gal活性显著降低[(65.44±5.00)%vs(77.15±2.61)%,P<0.05];TUNEL阳性细胞占比显著降低[(16.73±2.20)%vs(46.40±13.87)%,P<0.05],细胞活力显著增加[(86.33±4.51)%vs(66.33±8.50)%,P<0.05];HIF-1α蛋白表达量进一步增加(P<0.05)。免疫荧光结果显示HIF-1α主要分布在细胞核及细胞核周围。结论罗沙司他通过上调HIF-1α减轻热打击诱导的肾小管上皮细胞凋亡和衰老。

关键词：热打击罗沙司他 HIF-1α 细胞凋亡细胞衰老

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罗沙司他调控线粒体分裂与融合减轻热射病小鼠脑损伤

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陆军军医大学学报 2024年第19期46卷 2208-2217页

作者：周欢黄雪妍申婷婷张伯翼何根林罗雪杨学森陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系热带医学教研室极端环境医学教育部重点实验室重庆400038

目的探究缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor, HIF)脯氨酰羟化酶(prolyl hydroxylase, PHD)抑制剂罗沙司他(FG-4592)对热射病(heat stroke, HS)导致的脑损伤的保护作用及其机制。方法选取140只6~8周龄的雄性C57BL/6J小鼠,体质量为18~22 g。其中40只按随机数字表法分为热射病(HS)组,罗沙司他低剂量(LD,5 mg/kg)组、中剂量(MD,10 mg/kg)组、高剂量(HD,20 mg/kg)组,每组10只,进行热打击实验,观察各组小鼠24 h生存情况,确定最佳给药剂量。另外100只小鼠按随机数字表法分为正常对照(Control)组、罗沙司他(FG-4592)组、热射病(HS)组、罗沙司他+热射病(FG-4592+HS)组,每组25只,进行热打击实验,建立HS动物模型。采用改良神经功能缺损评分(modified neurological severity score, mNSS)评价神经功能,脑切片HE染色观察病理损伤情况;Fluoro-Jade C染色观察神经元变性;测定脑组织总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量评价氧化应激情况;透射电镜观察线粒体损伤;Western blot检测大脑皮层中Caspase-3、Cleaved Caspase-3、Mfn1、Mfn2、Opa1、Drp1、p-Drp1(Ser616)、Fis1、HIF-1α、HO-1蛋白表达水平。结果与HS组比较,FG-4592可以显著提高热射病小鼠24 h内的生存率,且MD组生存率最高。与Control组比较,HS组小鼠mNSS评分增加(P<0.05),大脑皮层MDA含量增加(P<0.05),总SOD活性降低(P<0.05),且大脑皮层组织出现显著病理损伤和神经元变性,大脑皮层组织线粒体结构明显损伤,Caspase-3、Cleaved Caspase-3、Fis1、HIF-1α、HO-1蛋白表达和p-Drp1(Ser616)/Drp1比值升高(P<0.05),Mfn1、Mfn2、Opa1蛋白表达降低(P<0.05)。经FG-4592预处理后显著降低HS小鼠的mNSS评分(P<0.05),降低了组织MDA含量(P<0.05),增加了总SOD活性(P<0.05);同时FG-4592预处理改善了大脑皮层组织病理损伤、减轻了神经元变性和线粒体结构损伤,并降低了Caspase-3、Cleaved Caspase-3、Fis1蛋白表达和p-Drp1(Ser616)/Drp1比值(P<0.05),增加了Mfn1、Mfn2、Opa1、HIF-1α、HO-1蛋白表达(P<0.05)。结论罗沙司他调控线粒体分裂融合平衡,减轻线粒体结构损伤,减少氧化应激和细胞凋亡,减轻热射病脑损伤。

关键词：罗沙司他热射病氧化应激线粒体缺氧诱导因子1-α

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内镜超声检查对十二指肠乳头癌术前分期的诊断价值及影响因素分析

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陆军军医大学学报 2024年第22期46卷 2561-2568页

作者：杨佳王梓义陈磊张耀陈静高莉萍冯晓峰陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院消化内科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系军队流行病学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院整形外科重庆400038

目的评估内镜超声检查(endoscopic ultrasonography,EUS)在十二指肠乳头癌术前分期和导管扩张中的诊断价值,分析其诊断准确度的影响因素。方法采用横断面研究设计,收集2018年1月至2023年8月于本院消化内科就诊且经病理诊断为十二指肠乳... 详细信息

目的评估内镜超声检查(endoscopic ultrasonography,EUS)在十二指肠乳头癌术前分期和导管扩张中的诊断价值,分析其诊断准确度的影响因素。方法采用横断面研究设计,收集2018年1月至2023年8月于本院消化内科就诊且经病理诊断为十二指肠乳头癌并接受EUS的患者,采用灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度评价EUS对十二指肠乳头癌术前分期的诊断价值。单因素和多因素分析确定影响EUS诊断准确度的因素。结果本研究共纳入102例经病理诊断确诊为十二指肠乳头癌的患者,其中男性59例,女性43例。患者平均年龄为62岁。患者确诊前均接受EUS,EUS对肿瘤T分期的准确度为86.27%,对T1、T2、T3、T4病变的灵敏度和特异度分别是84.21%、92.31%、85.00%、60.00%和95.31%、88.89%、96.34%、98.97%。T1、T2、T3、T4病变T分期的阳性预测值分别为91.43%、83.72%、85.00%、75.00%,阴性预测值分别为91.04%、94.92%、96.34%、97.96%。有14例患者的T分期被EUS错误分期。EUS评估导管内扩张的准确度为75.49%,对导管扩张的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为96.97%、66.67%、98.97%、40.00%。EUS对胰管扩张诊断准确度的独立预测因素为神经浸润、肿瘤大小和T分期;而对胆管扩张诊断准确度的独立危险因素为神经浸润和碱性磷酸酶。结论EUS对十二指肠乳头癌术前分期诊断价值高,神经浸润、肿瘤大小、T分期、碱性磷酸酶可能是其诊断准确度的影响因素。

关键词：内镜超声检查十二指肠乳头癌准确度影响因素

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肺腺癌相关tsRNA的筛选和验证

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陆军军医大学学报 2025年第2期47卷 122-131页

作者：陆春利单亦凡谢薇佳夏婷婷向颖邬娜吴龙白莉李亚斐陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系军队流行病学教研室重庆陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院呼吸内科研究所全军呼吸病研究重点实验室重庆

目的通过分析tsRNA在肺腺癌中的差异表达情况及其表达水平与患者预后的关系,进一步筛选并验证肺腺癌相关tsRNA,以了解其在肺腺癌发生和进展中的相关机制。方法基于计算医学中心数据库筛选出在肺腺癌组织和正常组织中差异表达的tsRNA;基... 详细信息

目的通过分析tsRNA在肺腺癌中的差异表达情况及其表达水平与患者预后的关系,进一步筛选并验证肺腺癌相关tsRNA,以了解其在肺腺癌发生和进展中的相关机制。方法基于计算医学中心数据库筛选出在肺腺癌组织和正常组织中差异表达的tsRNA;基于癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分析tsRNA表达水平对肺腺癌患者预后的影响;基于TRFtarget2.0和tRFTar数据库预测靶基因;基于DAVID、KOBA KEGG在线网站进行基因本体论(Gene Ontology,GO)富集分析和京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路分析;基于阿拉巴马大学伯明翰分校癌症数据分析门户(the University of Alabama at Birmingham CANcer data analysis Portal,UALCAN)分析靶基因在肺腺癌组织和正常组织中的表达水平。采用增殖实验、迁移实验、侵袭实验验证tRF-19-69M8LOJX在肺腺癌细胞中的生物学功能。结果与正常组织相比,tRF-19-69M8LOJX在肺腺癌组织中表达上调(log2FC=4.28,FDR<0.05)。高表达水平的tRF-19-69M8LOJX预示着更短的无进展生存期(HR=1.565,95%CI=1.142~2.145,P=0.005);过表达tRF-19-69M8LOJX促进A549细胞的增殖、迁移(P<0.001)和侵袭(P=0.009);COL1A1(P=0.002)和VCAN(P=0.022)在tRF-19-69M8LOJX过表达细胞模型中显著上调。结论tRF-19-69M8LOJX在肺腺癌组织的表达水平上调,与患者不良预后密切相关,可能在肺腺癌的发生发展中起着重要作用。

关键词：转移RNA衍生的小RNA 肺腺癌预后

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诊断试验准确性研究的设计类型和选择

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中华流行病学杂志 2024年第12期45卷 1705-1714页

作者：刘晓龙邬娜李亚斐陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系军队流行病学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)临床流行病学和循证医学中心重庆400038

诊断试验是临床工作中不可或缺的工具,在将诊断试验引入临床实践之前,要经由科学设计的准确性研究进行严格评价,其准确性直接关系到诊断的正确性和治疗决策的合理性。本文介绍了诊断试验准确性研究的设计类型及其特点,包括单组设计、诊... 详细信息

诊断试验是临床工作中不可或缺的工具,在将诊断试验引入临床实践之前,要经由科学设计的准确性研究进行严格评价,其准确性直接关系到诊断的正确性和治疗决策的合理性。本文介绍了诊断试验准确性研究的设计类型及其特点,包括单组设计、诊断性病例对照研究设计、单组配对设计以及平行组设计,并根据研究问题所处阶段、诊断试验在临床诊断路径中的作用和实际临床应用场景推荐合适的设计类型,为进一步规范当前临床诊断试验准确性研究设计提出建议。本文旨在帮助临床研究者更好地了解和选择合适的诊断试验准确性研究设计类型,以期提高诊断试验准确性研究的质量。

关键词：诊断试验准确性设计类型单个诊断试验准确性研究诊断试验准确性比较研究

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低氧联合辐照对小鼠骨髓造血细胞的影响作用研究

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陆军军医大学学报 2025年第7期47卷 681-690页

作者：杨欣海陈芳全勇胡梦佳芦玉凯陈乃成许杨王崧王军平陆军军医大学(第三军医大学):军事预防医学系防原医学教研室全军复合伤研究所创伤与化学中毒全国重点实验室重庆

目的探究高原低氧环境联合辐照损伤对小鼠骨髓造血细胞的影响。方法165只C57BL/6雄性小鼠(10~12周,体质量20~25 g)按随机数字表法进行分组:正常对照组(Control组,n=33)、6 Gy单纯辐照组(6 Gy组,n=43)、6 Gy低氧辐照组(Hy-7 d+6 Gy组,n=4... 详细信息

目的探究高原低氧环境联合辐照损伤对小鼠骨髓造血细胞的影响。方法165只C57BL/6雄性小鼠(10~12周,体质量20~25 g)按随机数字表法进行分组:正常对照组(Control组,n=33)、6 Gy单纯辐照组(6 Gy组,n=43)、6 Gy低氧辐照组(Hy-7 d+6 Gy组,n=43),7 Gy单纯辐照组(7 Gy组,n=12)、7 Gy低氧辐照组(Hy-7 d+7 Gy组,n=12)、7 Gy持续低氧治疗组(Hy-7 d+7 Gy+Hy组,n=12)、6 Gy持续低氧治疗组(Hy-7 d+6 Gy+Hy,n=10);Hy-7 d+6 Gy组、Hy-7 d+7 Gy组、Hy-7 d+7 Gy+Hy组、Hy-7 d+6 Gy+Hy组于常压低氧舱内进行7 d预处理(氧浓度12%),其余组小鼠在正常氧环境中饲养;6 Gy、Hy-7 d+6 Gy组、Hy-7 d+6 Gy+Hy组小鼠在低氧预处理结束后进行^(60)COγ射线全身一次性辐照6 Gy;7 Gy、Hy-7 d+7 Gy组、Hy-7 d+7 Gy+Hy组小鼠在低氧预处理结束后进行^(60)COγ射线全身一次性辐照7 Gy;Control组、6 Gy组、7 Gy组小鼠全程正常氧环境饲养,Hy-7 d+7 Gy组、Hy-7 d+6 Gy组小鼠辐照损伤后继续低氧饲养24 h后恢复正常氧环境饲养,Hy-7 d+7 Gy+Hy组、Hy-7 d+6 Gy+Hy组小鼠辐照后持续低氧环境饲养。Control、6 Gy、Hy-7 d+6 Gy组小鼠制备骨髓细胞悬液,采用全自动细胞计数仪计数小鼠骨髓有核细胞数量,采用HE染色观察小鼠骨髓腔病理形态改变,采用流式细胞术检测造血干/祖细胞(Lin^(-)Sca1^(+)c-Kit^(+),LSK)、髓系祖细胞(myeloid progenitor,MP)以及成熟T/B髓系细胞数量;7 Gy、Hy-7 d+7 Gy、Hy-7 d+7 Gy+Hy组小鼠从低氧预处理后开始持续监测30 d的生存率;6 Gy、Hy-7 d+6 Gy、Hy-7 d+6 Gy+Hy组小鼠采取尾血,使用全自动血液分析仪检测红细胞(red blood cell,RBC)、白细胞(white blood cell,WBC)、血红蛋白(hemoglobin,HGB)、血小板(platelet,PLT)等的动态变化;Control、6 Gy、Hy-7 d+6 Gy组小鼠于辐照后17 d处死后获取骨髓细胞悬液并进行单细胞测序及分析。结果①与Control组相比,6 Gy组小鼠辐照后全骨髓有核细胞数量显著减少(P<0.01),HE染色显示骨髓血窦扩张明显、红细胞溢出;与6 Gy组比较,Hy-7 d+6 Gy组小鼠骨髓腔内细胞密度增加,有核细胞数减少程度明显减轻(P<0.01);②流式细胞术检测结果显示与Control组比较,6 Gy组骨髓LSK、MP与成熟T/B/髓系细胞数量均显著降低(P<0.05);与6 Gy组比较,Hy-7 d+6 Gy组单纯辐照造成的LSK、MP的数量减少能得到显著抑制(P<0.01);③与7 Gy组相比,Hy-7 d+7 Gy组经过低氧辐照后24 h复常氧治疗显著提高了小鼠生存率(P<0.01);与7 Gy组相比,Hy-7 d+7 Gy+Hy组小鼠经持续低氧治疗未能显著改善小鼠生存率;Hy-7 d+7 Gy组与Hy-7 d+7 Gy+Hy组之间的生存率差异虽未达到统计学显著性(P=0.12),但在整个观察周期内Hy-7 d+7 Gy组始终表现出存活数量优势;④血常规检测结果显示,Hy-7 d+6 Gy组小鼠较6 Gy组和Hy-7 d+6 Gy+Hy组WBC水平得到更快的恢复(P<0.05);经低氧预处理后,Hy-7 d+6 Gy组和Hy-7 d+6 Gy+Hy组辐照前RBC及HGB水平更高;而相比于6 Gy组及Hy-7 d+6 Gy+Hy组,Hy-7 d+6 Gy组PLT恢复更显著且迅速(P<0.05);⑤通过单细胞转录组数据分析进行细胞亚群比例推测,相比于6 Gy组Hy-7 d+6 Gy组小鼠长期造血干细胞(long-term hematopoietic stem cell,LT-HSC)、短期造血干细胞(short-term hematopoietic stem cell,ST-HSC)数量减少得到抑制,与流式细胞术结果一致;拟时序分析显示,Hy-7 d+6 Gy组小鼠数据与Control组相似,表现出分化程度低且自我更新能力强的LSK较多;差异基因分析及KEGG通路富集表明,6 Gy组氧化磷酸化通路活跃度显著高于其他组,而Hy-7 d+6 Gy组则富集于染色质重塑和mRNA监视等通路。结论低氧预处理可减轻小鼠骨髓造血细胞放射损伤,辐照后恢复常氧治疗有助

关键词：低氧预处理骨髓造血干/祖细胞急性放射损伤造血功能单细胞转录组技术

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