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第三军医大学学报 2007年第14期29卷 1399-1401页

作者：周人杰廖卫公杨镇洲闵家新肖颖彬第三军医大学新桥医院胸外科重庆400037 第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室全军高原医学重点实验室重庆400038 第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心重庆400042 第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心重庆400037

目的探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对A549人肺腺癌细胞株增殖、细胞周期的影响及其可能的分子机制。方法ATRA处理人肺腺癌细胞株A549,观察A549细胞生长情况并运用MTT法检测其生长抑制情况,流式细胞仪进行细胞周期分析... 详细信息

目的探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对A549人肺腺癌细胞株增殖、细胞周期的影响及其可能的分子机制。方法ATRA处理人肺腺癌细胞株A549,观察A549细胞生长情况并运用MTT法检测其生长抑制情况,流式细胞仪进行细胞周期分析,Western blot检测CDK4、Rb、p-ERK1/2蛋白的表达,荧光定量PCR法检测CyclinD1mRNA水平。结果ATRA具有抑制A549细胞增殖、使细胞周期阻滞于G0/G1期,并下调p-ERK1/2蛋白表达及CyclinD1mRNA水平的作用。结论ATRA可能通过下调A549细胞p-ERK1/2蛋白表达及CyclinD1mRNA水平,使细胞周期阻滞于G0/G1期,从而影响其DNA的合成,抑制其恶性增殖。

关键词： ATRA 肺癌细胞增殖细胞周期

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Ca/CaM与缺氧肺动脉平滑肌细胞增殖的关系研究

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现代生物医学进展 2007年第2期7卷 172-174,178,F0003页

作者：李雪辉许蜀闽王培勇第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室全军高原生理与高原病研究重点实验室重庆400038

目的:探讨缺氧时钙内流、钙调素、NF□κB与肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)增殖的关系。方法:组织块贴壁法培养成年大鼠PASMCs,细胞分组处理后,分别应用四甲基偶氮唑(MTT)检测细胞数量、流式细胞术... 详细信息

目的:探讨缺氧时钙内流、钙调素、NF□κB与肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)增殖的关系。方法:组织块贴壁法培养成年大鼠PASMCs,细胞分组处理后,分别应用四甲基偶氮唑(MTT)检测细胞数量、流式细胞术检测细胞周期分布和增殖指数、免疫荧光检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达。结果:2%O_2条件下培养12h显著刺激PASMCs增殖,与常氧组相比,细胞活力增加40%,增殖指数(proliferation index,PI)是常氧组的1．46倍, PCNA表达增强。L-型钙通道阻滞剂硝苯吡啶(nifedipine,NFD,10μM)、钙调素拮抗剂三氟拉嗪(trifluoperazine,TFP,10μM)、核转录因子NF□κB抑制剂PDTC(20μM)均抑制了缺氧诱导的PASMCs的增殖,其抑制作用的强度依次为NFD＜PDTC＜TFP。结论:钙信号转导参与缺氧诱导的PASMCs增殖,涉及通过L-型钙通道的钙内流、钙调素以及转录因子NF-κB激活等环节。

关键词：缺氧钙信号肺动脉平滑肌增殖

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高原缺氧时的能量代谢特点及其底物调节机制

高原缺氧时的能量代谢特点及其底物调节机制

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第七次全国缺氧和呼吸病理生理学术会议

作者：高钰琪陈建高文祥黄庆愿第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室，全军高原生理与高原病研究重点实验室重庆 400038

机体的能量主要来源于食物中的糖、脂肪和蛋白质，不同的能源物质对于相同量的氧分子而言，产生ATP的数量及速度存在较大的差异。在缺氧习服过程中，为适应环境氧的变化，机体在能源物质的选择性利用方面发生相应的改变。这种改变对能... 详细信息

机体的能量主要来源于食物中的糖、脂肪和蛋白质，不同的能源物质对于相同量的氧分子而言，产生ATP的数量及速度存在较大的差异。在缺氧习服过程中，为适应环境氧的变化，机体在能源物质的选择性利用方面发生相应的改变。这种改变对能量代谢的调整具有非常重要的意义，是机体多种习服性改变的重要环节。根据缺氧程度(海拔高度)、时间、劳动强度、种族、性别、年龄等的不同，机体的能量代谢及其调整有其相应特点。本文介绍了缺氧习服时能量代谢的特点和调整机制，并就缺氧习服时糖和脂肪酸的选择性利用进行了分析。

关键词：高原缺氧能量代谢调节机制

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缺氧对大鼠软脑膜微循环白细胞流变特性的影响

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微循环学杂志 2007年第4期17卷 20-22页

作者：张钢高钰琪刘福玉中国人民解放军第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室全军高原生理与高原病研究重点实验室邮政编码重庆400038

目的:探讨急、慢性缺氧对大鼠软脑膜微循环白细胞流变性的影响。方法:低压氧舱模拟大鼠急、慢性缺氧模型,开放式颅骨窗、活体显微镜观察和图像处理系统分析其白细胞的流变性。结果:急性缺氧大鼠白细胞沿血管壁滚动个数明显增多(P<0.0... 详细信息

目的:探讨急、慢性缺氧对大鼠软脑膜微循环白细胞流变性的影响。方法:低压氧舱模拟大鼠急、慢性缺氧模型,开放式颅骨窗、活体显微镜观察和图像处理系统分析其白细胞的流变性。结果:急性缺氧大鼠白细胞沿血管壁滚动个数明显增多(P<0.05),与血管壁发生粘附数目显著增加(P<0.05),白细胞-内皮细胞接触时间(TLECT)明显延长(P<0.05);慢性缺氧大鼠白细胞粘附数目减少和TLECT缩短比较明显。结论:急性缺氧使白细胞流变性显著改变,可能是导致缺氧血管内皮细胞损伤的重要机制;慢性缺氧可使白细胞流变性一定程度恢复,对研究习服适应可能有重要意义。

关键词：细胞流变特性软脑膜微循环白细胞活化高原脑水肿大鼠缺氧脑微循环障碍内皮细胞粘附

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低压缺氧对大鼠脑线粒体腺苷酸转运体特性的影响

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生理学报 2006年第1期58卷 29-33页

作者：陈丽芬柳君泽李兵第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室全军高原生理和高原病研究重点实验室重庆400038

本文探讨低压缺氧对大鼠脑线粒体内膜腺苷酸转运体(adenine nucleotide translocator,ANT)转运特性的影响。实验将雄性Wistar大鼠随机分为常氧对照组和缺氧组,后者分别连续暴露于模拟5 000 m高原1、5、15、30 d(23 h/d)。分别于平原和模... 详细信息

本文探讨低压缺氧对大鼠脑线粒体内膜腺苷酸转运体(adenine nucleotide translocator,ANT)转运特性的影响。实验将雄性Wistar大鼠随机分为常氧对照组和缺氧组,后者分别连续暴露于模拟5 000 m高原1、5、15、30 d(23 h/d)。分别于平原和模拟4 000 m高原断头处死动物,分离脑线粒体,用抑制剂终止法测定线粒体对3H-ADP的转运效率,抑制剂滴定法测定ANT密度,HPLC测定线粒体内腺苷酸含量。结果显示:缺氧后ANT转运活性均明显低于常氧组,缺氧不同天数线粒体内膜ANT分布密度无显著改变,线粒体内(ATP+ADP)含量下降与转运活性变化一致。以上观察结果表明, 低压缺氧暴露可显著抑制ANT转运活性,降低能量产生和利用的周转率,但不改变ANT密度,提示ANT活性改变是低压缺氧时细胞能量代谢障碍的重要机制。

关键词：缺氧线粒体腺苷酸转运体

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高原肺水肿动物模型的初步研究

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第三军医大学学报 2006年第11期28卷 1176-1177页

作者：陈有高钰琪李素芝赵忠诚刘福玉牟信兵第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室全军高原医学重点实验室重庆400038 西藏军区总医院全军高山病研究中心拉萨850003

目的通过模拟高原环境,研究大鼠在复合缺氧寒冷运动时诱发高原肺水肿（high altitude pulmonary edema, HAPE）的可能性.方法利用低压氧舱减压大鼠,观察大鼠在复合缺氧寒冷运动条件下的肺血流动力学、肺组织病理形态学改变.结果在模拟... 详细信息

目的通过模拟高原环境,研究大鼠在复合缺氧寒冷运动时诱发高原肺水肿（high altitude pulmonary edema, HAPE）的可能性.方法利用低压氧舱减压大鼠,观察大鼠在复合缺氧寒冷运动条件下的肺血流动力学、肺组织病理形态学改变.结果在模拟高原海拔4 000 m、白昼10 ℃、夜间4 ℃、适度运动条件下,PaO2、SaO2、PaCO2均显著降低,24、48、72 h之间无显著差异;肺动脉压在72 h时显著升高,这与临床观察到HAPE通常在进入高原2～5 d发病相符.病理切片结果：缺氧寒冷运动组70.2%可见肺间质增厚、肿大,大量多核细胞,肺泡腔变小,肺泡腔内无液体渗出,呈间质性肺水肿改变,未见肺泡型肺水肿发生.结论可采用该实验模型复制间质性HAPE动物模型,而肺泡型HAPE有待进一步研究.

关键词：高原肺水肿缺氧寒冷运动 SD-大鼠动物模型

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缺氧致大鼠心肺组织中apelin的表达降低

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第三军医大学学报 2006年第11期28卷 1188-1190页

作者：龚永生范小芳高钰琪吴小脉毛孙忠吴洲第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室全军高原医学重点实验室重庆400038 温州医学院肺心病研究室温州325027

目的观察缺氧大鼠心肺组织中新发现的小分子活性肽apelin的变化,探讨其在缺氧性肺动脉高压发生发展中的病理生理学意义.方法雄性SD大鼠20只,分为对照组和缺氧组（9%～11% O2,9 h/d,6 d）.导管法测定平均肺动脉压（mPAP）、平均颈动脉压... 详细信息

目的观察缺氧大鼠心肺组织中新发现的小分子活性肽apelin的变化,探讨其在缺氧性肺动脉高压发生发展中的病理生理学意义.方法雄性SD大鼠20只,分为对照组和缺氧组（9%～11% O2,9 h/d,6 d）.导管法测定平均肺动脉压（mPAP）、平均颈动脉压（mCAP）,称重法测定右心室与左心室加室间隔重量比（RV/LV＋S）.放免法测定血浆、右室心肌及肺组织匀浆apelin水平,RT-PCR检测右室心肌及肺组织apelin mRNA表达的变化.结果①缺氧组大鼠mPAP较对照组高26.06%（P〈0.05）,RV/LV＋S较对照组高10.83%（P〈0.01）.mCAP两组间差异无统计学意义.②缺氧组大鼠右心室肌、肺组织apelin浓度（pg/mg）较对照组分别低16.33%（P〈0.05）和14.10%（P〈0.01）,血浆apelin浓度（pg/ml）两组间差异无统计学意义.③缺氧组大鼠心肌和肺组织apelin mRNA 表达水平较对照组分别低22.95%和22.82%（均P〈0.05）. 结论缺氧大鼠右室心肌及肺组织局部apelin蛋白和基因表达的显著下降,可能是导致大鼠缺氧性肺动脉高压发生、发展的重要因素之一.

关键词： apelin 缺氧高血压肺大鼠

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急性高原反应相关因素的多元线性回归分析

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第三军医大学学报 2006年第12期28卷 1269-1272页

作者：黄庆愿高钰琪刘福玉牟信兵周其全蒋春华翟羽第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室全军高原医学重点实验室重庆400038 西藏军区总医院全军高山病防治研究中心拉萨850003

目的建立急性高原反应（acute mountain sickness，AMS）相关因素的多元线性回归模型，以预测AMS的发生。方法在平原，对进藏人员用V max229D型肺功能仪测试肺功能；定量饮水后不同时间点测定累计尿量进行饮水试验；吸入低氧气体（10... 详细信息

目的建立急性高原反应（acute mountain sickness，AMS）相关因素的多元线性回归模型，以预测AMS的发生。方法在平原，对进藏人员用V max229D型肺功能仪测试肺功能；定量饮水后不同时间点测定累计尿量进行饮水试验；吸入低氧气体（10％　O2，90％　N2）10min进行低氧反应试验。空运进藏后，对AMS进行症状学评分。用逐步回归分析法建立多元线性回归模型。结果经相关分析，初选出受试者胸廓体积、用力肺活量、1s用力呼气容积、最大呼气流量（peak expiratory flow，PEF）和饮水1000 ml后1．5h内尿量、2h内尿量、2．5h内尿量及低氧反应7min时的心率是与AMS相关的危险因素，进一步经逐步回归，消除自变量间的共线性后，筛选出4个重要指标，得多元线性回归方程为：AMS评分=16．108－0．00304×（饮水1000 ml后2．5h内尿量）－0．441×PEF－0．0487×（低氧反应7min时的心率）－0．240×胸廓体积。回归效果检验的F值=5．889（P〈0．01）。结论肺功能、饮水1000 ml后1．5－2．5h排出的尿量、低氧反应7min时的心率及胸廓体积可作为预测AMS发生与否的重要参考指标。

关键词：高原低氧反应急性高原反应预测模型线性回归

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人HIF-1α基因重组腺病毒的构建与鉴定

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第三军医大学学报 2006年第20期28卷 2040-2043页

作者：蒋春华高钰琪黄庆愿黄缄贺伟峰段小军第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室全军高原医学重点实验室重庆400038 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038 第三军医大学西南医院骨关节中心全军矫形外科中心重庆400038

目的构建人缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因的重组腺病毒载体,并观察其对HepG2细胞的转染情况。方法采用基因工程技术,经过亚克隆将人HIF-1α基因片段克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,利用pAdEasy系统进行细菌内同源重组后,经脂质体转染HEK... 详细信息

目的构建人缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因的重组腺病毒载体,并观察其对HepG2细胞的转染情况。方法采用基因工程技术,经过亚克隆将人HIF-1α基因片段克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,利用pAdEasy系统进行细菌内同源重组后,经脂质体转染HEK293细胞,进行重组腺病毒的包装、扩增。采用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中带有绿色荧光蛋白GFP报告基因,进行病毒滴度的测定和对HepG2细胞感染效率的监测。结果酶切鉴定及PCR结果证明重组腺病毒载体成功,人HIF-1α重组腺病毒滴度达1.15×1010pfu/ml,阴性对照腺病毒的滴度为8×1010pfu/ml,并对HepG2细胞具有很强的感染力。结论应用细菌内同源重组法成功构建了含人HIF-1α基因的重组腺病毒载体。

关键词：腺病毒 HIF-1α基因同源重组

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全反式维甲酸联合三羟异黄酮对肺癌细胞增殖及凋亡的影响

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第三军医大学学报 2006年第11期28卷 1198-1200页

作者：周人杰廖卫公杨镇洲戴纪纲肖颖彬第三军医大学新桥医院胸外科重庆400037 第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室全军高原医学重点实验室重庆400038 第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤科重庆400042 第三军医大学新桥医院心血管外科重庆400037

目的探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic ac id,ATRA)联合三羟异黄酮(Gen iste in)抑制肺癌细胞的增殖和促进其凋亡的作用。方法采用不同剂量ATRA、Gen iste in及两者联合处理人肺腺癌细胞株A549,观察A549细胞生长情况并运用MTT法检... 详细信息

目的探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic ac id,ATRA)联合三羟异黄酮(Gen iste in)抑制肺癌细胞的增殖和促进其凋亡的作用。方法采用不同剂量ATRA、Gen iste in及两者联合处理人肺腺癌细胞株A549,观察A549细胞生长情况并运用MTT法检测其生长抑制情况,流式细胞仪进行细胞周期分析及凋亡率检测。结果A549肺癌细胞经ATRA、Gen iste in及两者联合处理后,细胞增殖能力明显下降,更多的细胞被阻滞于G2/M期,细胞凋亡明显增加,其中以两者联合用药最为显著。结论ATRA联合Gen iste in能协同抑制肺癌A549细胞的恶性增殖并促进其凋亡。

关键词： ATRA Genistein 肺癌细胞增殖凋亡

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