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第三军医大学学报 2011年第7期33卷 653-657页

作者：单发波蔡明春徐刚杨涛殷骏黄庆愿第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室教育部高原医学重点实验室全军高原生理和高原病研究重点实验室重庆400038

目的研究急性缺氧对大鼠心肌组织AMPK磷酸化和糖原含量的影响,探讨急性缺氧时心肌组织的能量代谢状况。方法用随机数字表将16只健康雄性SD大鼠分为平原对照组(n=8)和急性缺氧组(n=8)。急性缺氧组大鼠置于模拟海拔5 000 m高原的低压舱中... 详细信息

目的研究急性缺氧对大鼠心肌组织AMPK磷酸化和糖原含量的影响,探讨急性缺氧时心肌组织的能量代谢状况。方法用随机数字表将16只健康雄性SD大鼠分为平原对照组(n=8)和急性缺氧组(n=8)。急性缺氧组大鼠置于模拟海拔5 000 m高原的低压舱中。24 h后测定2组大鼠血糖、血乳酸以及心肌组织糖原含量,用心导管技术测定大鼠心脏功能,Western blot法检测心肌组织AMPK、磷酸化AMPK(pAMPK)水平以及葡萄糖转运体-4(GLUT4)的表达。结果与平原对照组相比较,急性缺氧组大鼠肺动脉压显著升高,右心室功能显著增强,左心室功能无明显变化;血糖含量显著升高[(5.6±0.6)mmol/Lvs(7.5±0.5)mmol/L,P<0.05];左、右心室心肌组织GLUT4表达显著增强,糖原含量显著增加[右心室心肌:(4.78±1.29)mg/gvs(6.55±1.20)mg/g,P<0.05;左心室心肌:(4.15±0.77)mg/gvs(5.73±1.57)mg/g,P<0.05];左、右心室心肌组织AMPK含量无明显变化,但pAMPK含量显著降低,pAMPK/AMPK比值显著降低(P<0.05)。结论模拟高原5 000 m急性缺氧静息状态下心肌组织AMPK磷酸化水平降低,说明心肌能量供求处于平衡状态,心肌糖原含量增加可能是AMPK磷酸化水平降低的机制之一。

关键词：缺氧心肌糖原腺苷酸活化蛋白激酶

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低氧对大鼠睾丸组织死亡受体5和FLIP抑制蛋白表达的影响

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中华男科学杂志 2013年第7期19卷 588-592页

作者：殷骏刘福玉高钰琪廖卫公第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室高原医学教育部重点实验室全军高原生理与高原病研究重点实验室重庆400038

目的:检测常氧与模拟海拔4 000 m低氧条件下大鼠睾丸组织中死亡受体5(DR5)和FLIP抑制蛋白(c-FLIP)表达水平,以及c-FLIP在睾丸组织中的分布。方法:40只10周龄雄性SD大鼠随机分为常氧组,低氧3、15、30 d组。低氧各组分别置模拟海拔4 000 ... 详细信息

目的:检测常氧与模拟海拔4 000 m低氧条件下大鼠睾丸组织中死亡受体5(DR5)和FLIP抑制蛋白(c-FLIP)表达水平,以及c-FLIP在睾丸组织中的分布。方法:40只10周龄雄性SD大鼠随机分为常氧组,低氧3、15、30 d组。低氧各组分别置模拟海拔4 000 m低压舱中减压3、15、30 d;常氧组在平原(海拔300 m)喂养;减压结束后取睾丸组织,Western印迹检测睾丸组织中DR5与c-FLIP蛋白表达,免疫荧光法检测睾丸组织中c-FLIP分布。结果:低氧3、15、30 d组大鼠睾丸DR5表达量分别为2.04±0.11、1.97±0.12、2.34±0.11,均显著高于常氧组DR5的表达(1.78±0.09,P均<0.05)。低氧15、30 d组大鼠睾丸c-FLIP表达量分别为0.87±0.03、0.74±0.07,均显著低于常氧组c-FLIP的表达(1.03±0.02,P均<0.05)。结论:模拟海拔4 000 m低氧促进睾丸组织凋亡蛋白DR5表达,抑制睾丸组织抗凋亡蛋白c-FLIP表达。

关键词：低氧死亡受体5 FLIP抑制蛋白睾丸大鼠

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缺氧诱导因子-1α基因转染对缺氧损伤HepG2细胞的保护作用

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中国病理生理杂志 2010年第1期26卷 1-6页

作者：蒋春华罗勇军黄庆愿高钰琪第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室重庆400038 高原医学教育部重点实验室重庆400038 全军高原生理与高原病研究重点实验室重庆400038 第三军医大学高原军事医学系高原疾病学教研室重庆400038

目的:观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因转染对HepG2细胞缺氧损伤的影响并初步探讨其作用机制。方法:腺病毒转染的人HepG2细胞常氧培养24h后分为4组:Ad-GFP转染常氧培养组(Ad-GFP transfected-normoxia组)、Ad-HIF转染常氧培养组(Ad-HI... 详细信息

目的:观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因转染对HepG2细胞缺氧损伤的影响并初步探讨其作用机制。方法:腺病毒转染的人HepG2细胞常氧培养24h后分为4组:Ad-GFP转染常氧培养组(Ad-GFP transfected-normoxia组)、Ad-HIF转染常氧培养组(Ad-HIF transfected-normoxia组)、Ad-GFP转染低氧培养组(Ad-GFP transfected-hypoxia组)和Ad-HIF转染低氧培养组(Ad-HIF transfected-hypoxia组)。观察各组细胞的细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)释放率、细胞内活性氧(ROS)、一氧化氮(NO)含量和诱导型一氧化氮合酶(iN-OS)活力。结果:Ad-HIF转染的HepG2细胞可高效表达HIF-1α。Ad-GFP transfected-hypoxia组的细胞活力显著低于Ad-GFP transfected-normoxia组(P<0.05);Ad-HIF transfected-hypoxia组的细胞活力与Ad-HIF transfected-normoxia组比较无显著差异。Ad-GFP transfected-hypoxia组细胞内ROS含量显著高于Ad-GFP transfected-normoxia组(P<0.05);Ad-HIF transfected-hypoxia细胞内ROS含量与Ad-HIF transfected-normox-ia组或Ad-GFP transfected-hypoxia组比较均无显著差异。Ad-HIF transfected-normoxia组和Ad-GFP trans-fected-hypoxia组细胞内NO含量和iNOS活力均显著高于Ad-GFP transfected-normoxia组(P<0.05);Ad-HIFtransfected-hypoxia组细胞内NO含量和iNOS活力与Ad-GFP transfected-hypoxia组和Ad-HIF transfected-nor-moxia组比较无显著差异。结论:基础性HIF-1高表达可显著减轻缺氧时HepG2细胞的损伤程度,其机制可能与HIF-1高表达提高HIF-1调控的缺氧相关基因的基础表达水平和其产物含量有关;也可能与HIF-1高表达防止缺氧时ROS的过度增加有关。

关键词：缺氧缺氧诱导因子-1 基因转染腺病毒载体

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急性低氧加重氰化钠对大鼠离体肝线粒体能量代谢的抑制作用

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第三军医大学学报 2009年第10期31卷 898-901页

作者：卢国守刘福玉高钰琪杨晓红罗勇军高文祥第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室高原医学教育部重点实验室全军高原生理与高原病研究重点实验室重庆400038 第三军医大学高原军事医学系军事医学地理学教研室重庆400038 第三军医大学高原军事医学系高原疾病学教研室重庆400038

目的通过观察不同浓度的NaCN对模拟高原急性低氧大鼠离体肝脏线粒体呼吸氧耗、膜电位和复合酶Ⅳ活性的影响,探讨急性低氧条件下氰化物中毒大鼠线粒体能量代谢变化特点。方法16只SD大鼠按简单完全随机分组法分为对平原照组和急性低氧组,... 详细信息

目的通过观察不同浓度的NaCN对模拟高原急性低氧大鼠离体肝脏线粒体呼吸氧耗、膜电位和复合酶Ⅳ活性的影响,探讨急性低氧条件下氰化物中毒大鼠线粒体能量代谢变化特点。方法16只SD大鼠按简单完全随机分组法分为对平原照组和急性低氧组,急性低氧组大鼠暴露于低压舱内,模拟海拔5000m高原,23h/d,连续3d;对照组大鼠于常压和常氧环境中同时喂养。用差速离心法提取肝线粒体,分别在0、0.01、0.1、0.25mmol/L NaCN条件下采用Clark氧电极法测定线粒体呼吸氧耗和复合酶Ⅳ活性并计算Ⅲ态呼吸(state3respiration,ST3)、Ⅳ态呼吸(state4respiration,ST4)、呼吸控制率(respiratory control rate,RCR)、氧化磷酸化效率(oxidative phosphorylation,OPR)和复合酶Ⅳ耗氧率,用Rhodamine123法测定线粒体膜电位(the mitochondrial membrane potential,MMP)。结果0.01、0.1、0.25mmol/L NaCN均可显著抑制线粒体呼吸功能,降低线粒体膜电位,且呈剂量依赖关系。与相应NaCN浓度的对照组比较,急性低氧组线粒体功能受抑制程度显著增加。结论急性低氧加重NaCN对大鼠肝脏线粒体能量代谢的抑制作用,其机制可能与急性缺氧大鼠线粒体氧化磷酸化脱偶联、呼吸链复合体Ⅳ功能降低及线粒体膜电位改变有关。

关键词： NaCN 低氧线粒体呼吸氧耗膜电位复合酶Ⅳ

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模拟高原缺氧对慢性牙周炎大鼠血清中MMP-2表达的影响

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第三军医大学学报 2010年第4期32卷 324-326页

作者：孔耀刘鲁川周霞刘福玉杨苏平张海元第三军医大学大坪医院野战外科研究所口腔科重庆400042 三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室高原医学教育部重点实验室全军高原生理与高原病研究重点实验室重庆400038

目的研究常氧与缺氧条件下慢性牙周炎大鼠血清中基质金属蛋白酶2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)的表达变化,探讨MMP-2与高原牙周病的关系。方法模拟高原缺氧建立大鼠慢性牙周炎模型,采用ELISA法测定正常对照组、常氧牙周炎组、缺氧... 详细信息

目的研究常氧与缺氧条件下慢性牙周炎大鼠血清中基质金属蛋白酶2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)的表达变化,探讨MMP-2与高原牙周病的关系。方法模拟高原缺氧建立大鼠慢性牙周炎模型,采用ELISA法测定正常对照组、常氧牙周炎组、缺氧对照组、缺氧牙周炎组大鼠血清中MMP-2表达。结果正常对照组、常氧牙周炎组、缺氧对照组、缺氧牙周炎组血清中MMP-2浓度分别为(92.00±21.78)、(118.09±25.01)、(102.03±21.30)、(159.19±34.13)ng/ml,常氧牙周炎组与正常对照组、缺氧牙周炎组与缺氧对照组、缺氧对照组与正常对照组、缺氧牙周炎组与常氧牙周炎组比较均有统计学意义(P<0.01)。其中缺氧牙周炎组血清中MMP-2浓度升高最为显著(P<0.01)。结论缺氧上调血清中MMP-2的表达,进而促进大鼠牙周组织的破坏。

关键词：缺氧基质金属蛋白酶2 血清牙周炎大鼠

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茶多酚对移居高原人群视听觉认知功能的改善作用

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中国药理学通报 2009年第11期25卷 1473-1476页

作者：李晓莉蒋春华刘福玉廖卫公周其全崔建华马勇高钰琪第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室重庆400038 第三军医大学高原医学教育部重点实验室重庆400038 全军高原生理与高原病研究重点实验室重庆400038 解放军军事经济学院营养食品研究所湖北武汉430035 第三军医大学高原军事医学系高原疾病学教研室重庆400038 解放军第十八医院新疆叶城844900

目的观察茶多酚对移居高原人群视听觉认知功能的改善作用。方法38名移居高原(海拔高度为3700m,移居时间为90d)的健康男性青年随机分为2组:①对照组(安慰剂,40mg/d,30d)、②茶多酚组(茶多酚,300mg/d,30d)。应用视听整合连续测试系统(inte... 详细信息

目的观察茶多酚对移居高原人群视听觉认知功能的改善作用。方法38名移居高原(海拔高度为3700m,移居时间为90d)的健康男性青年随机分为2组:①对照组(安慰剂,40mg/d,30d)、②茶多酚组(茶多酚,300mg/d,30d)。应用视听整合连续测试系统(integrated visual and auditory continuous performancetest,IVA-CPT)检测以上各组服用试验品前后的认知功能,通过前后比较评价茶多酚对移居高原人群视听觉认知功能的改善作用。结果与服用前比较,服用茶多酚后,听觉反应控制谨慎商数(auditory prudence quotient,PruA)明显升高(P<0.05);服用试验品后,茶多酚组PruA明显高于对照组(P<0.05),其余各指标组间比较差异无显著性。结论茶多酚能提高移居高原人群部分视听觉认知功能。

关键词：高原缺氧移居高原人群认知功能视听整合连续测试系统茶多酚

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RNA干扰沉默STIM1表达对低氧下大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

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第三军医大学学报 2011年第5期33卷 437-440页

作者：后显华陈建罗勇军刘福玉杨晓红袁志兵徐刚陈德伟高钰琪第三军医大学高原军事医学系病理生理与高原生理学教研室重庆400038 第三军医大学教育部高原医学重点实验室全军高原生理与高原病研究重点实验室重庆400038 第三军医大学高原疾病学教研室重庆400038

目的应用RNA干扰抑制肺动脉平滑肌细胞(pulmonary aretery smooth muscle cells,PASMCs)基质交感分子1(stromal interaction molecule 1,STIM1)基因表达,探讨STIM1表达抑制后对PASMCs缺氧增殖反应的影响。方法采用离体培养大鼠肺动脉平滑肌细胞,设对照组、阴性siRNA组(SiNT)及阳性siRNA组(SiSTIM1),低氧(3%O2)培养24 h,Western blot法检测PASMCs中STIM1基因表达变化,MTT比色法及[3H]-TdR掺入法检测PASMCs的增殖情况,流式细胞仪检测PASMCs的细胞周期变化。结果 Western blot检测SiSTIM1组STIM1蛋白相对灰度值为(0.355±0.008),显著低于对照组(0.624±0.017)和SiNT组(0.618±0.021)(P<0.05)。MTT比色实验及[3H]-TdR掺入实验显示低氧培养24 h后,对照组和SiNT组PASMCs较常氧组增殖显著(P<0.05),而SiSTIM1组PASMCs增殖活性较对照组和SiNT组显著降低(P<0.05)。流式细胞仪检测结果表明低氧培养24 h后,对照组和SiNT组PASMCs G0/G1期细胞比例较常氧组显著降低(P<0.05),而SiSTIM1组G0/G1期细胞比例则显著高于对照组和SiNT组(P<0.05)。结论 RNA干扰介导STIM1基因沉默可明显抑制低氧下大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖。

关键词：基质交感分子1 RNA干扰肺动脉平滑肌细胞缺氧细胞增殖

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胍基丁胺在成年大鼠组织中的表达和分布

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中国组织化学与细胞化学杂志 2009年第6期18卷 696-700页

作者：蒋春华项德坤黄庆愿高钰琪第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室重庆400038 第三军医大学高原军事医学系高原医学教育部重点实验室重庆400038 第三军医大学高原军事医学系全军高原生理与高原病研究重点实验室重庆400038

目的观察胍基丁胺(agmatine,AGM)在成年Wistar大鼠全身组织的表达和分布。方法采用免疫组织化学法,用自制的抗胍基丁胺多克隆抗体检测胍基丁胺在成年Wistar大鼠全身组织中的表达分布情况。结果胍基丁胺在胃、十二指肠、空肠、回肠、结... 详细信息

目的观察胍基丁胺(agmatine,AGM)在成年Wistar大鼠全身组织的表达和分布。方法采用免疫组织化学法,用自制的抗胍基丁胺多克隆抗体检测胍基丁胺在成年Wistar大鼠全身组织中的表达分布情况。结果胍基丁胺在胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠的粘膜腺上皮细胞胞质内呈强阳性表达;胍基丁胺在大脑皮层、丘脑、海马、延髓的神经元胞质和神经轴突内呈强阳性表达;胍基丁胺在子宫、输卵管、前列腺的腺上皮细胞和睾丸的生精细胞胞质内呈强阳性表达;胍基丁胺在肝细胞、肾上腺皮髓质细胞胞质内呈阳性表达,在肾脏、脾脏呈弱阳性表达;胍基丁胺在肺、阴茎的微血管平滑肌细胞胞质内呈强阳性表达,但在心脏、骨骼肌、食道、主动脉的肌细胞内未见其表达。结论胍基丁胺在成年Wistar大鼠体内广泛分布,可能具有重要的生理作用。

关键词：胍基丁胺免疫组织化学

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梯度氧浓度下多形核白细胞的趋化特性与机制

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免疫学杂志 2015年第4期31卷 293-296,301页

作者：宓保梅黄瑊李晓栩官立彬崔宇梁潇杨诚忠沈宜重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室干细胞与组织工程研究室 400016 第三军医大学高原军事医学系高原生理学与高原生物学教研室高原医学教育部重点实验室全军高原医学重点实验室重庆400038

目的探讨梯度氧浓度下大鼠多形核白细胞的趋化特性与机制。方法用ibidi 6通道细胞趋化板观察白细胞在梯度下氧浓度的趋化方向。用48孔趋化小室趋化板观察趋化因子作用于白细胞后在缺氧条件下的趋化能力以及白细胞缺氧培养上清的趋化能力... 详细信息

目的探讨梯度氧浓度下大鼠多形核白细胞的趋化特性与机制。方法用ibidi 6通道细胞趋化板观察白细胞在梯度下氧浓度的趋化方向。用48孔趋化小室趋化板观察趋化因子作用于白细胞后在缺氧条件下的趋化能力以及白细胞缺氧培养上清的趋化能力,结合甲酰肽受体拮抗剂,分析缺氧白细胞上清中甲酰肽受体激动剂水平。用免疫印迹检测多形核白细胞不同缺氧时间(0、3、6、12、24 h)或趋化因子作用后葡萄糖转运体1的表达。结果在梯度氧浓度下,白细胞趋化呈现明显的方向性,白细胞向梯度氧浓度的低氧侧迁移。细胞缺氧培养上清诱导的趋化反应显著高于常氧培养上清,用甲酰肽受体特异性拮抗剂可显著削弱这一反应。用甲酰肽受体激动剂预处理或缺氧预处理显著增强白细胞在缺氧条件下对血清的趋化反应,并剂量依赖性地上调白细胞葡萄糖转运体1表达,显著增强在缺氧条件下的葡萄糖摄取率。结论多形核白细胞逆梯度氧浓度趋化,其机制可能与低氧促进靠近低氧侧的细胞释放甲酰肽受体激动剂等趋化因子有关。这些趋化因子在诱导趋化的同时提高白细胞葡萄糖摄取能力,从而提高白细胞无氧代谢能力或省氧能力。

关键词：缺氧白细胞趋化甲酰肽受体

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TGF-β与CTGF在大鼠低压缺氧时右心室心肌纤维化中的作用

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第三军医大学学报 2016年第9期38卷 927-931页

作者：梁潇黄缄官立彬崔宇李晓栩宓保梅沈宜重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程研究室病理生理学教研室重庆400016 第三军医大学高原军事医学系高原生理学与高原生物学教研室、高原医学教育部重点实验室、全军高原医学重点实验室重庆400038

目的探讨转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在低压缺氧条件下发生右心室心肌纤维化与肥大中的作用。方法将50只8周龄雄性SD大鼠[体质量(188.6±19.3)g... 详细信息

目的探讨转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在低压缺氧条件下发生右心室心肌纤维化与肥大中的作用。方法将50只8周龄雄性SD大鼠[体质量(188.6±19.3)g]随机分为常氧喂养对照组与低压缺氧喂养3、7、14和28 d实验组(n=10),低压缺氧大鼠置于模拟海拔6 000 m的低压舱内饲养。分离右心室,称量法计算右心室肥厚指数。采用荧光定量PCR与免疫印迹法分别检测右心室心肌组织中Ⅰ型胶原、TGF-β和CTGF的mRNA与蛋白表达水平,并分析低压缺氧相同天数TGF-β和CTGF与Ⅰ型胶原表达水平、右心室肥厚指数的相关性。结果与常氧组相比,右心室心肌组织中低压缺氧各组右心室肥厚指数均升高,其中低压缺氧7、14、28 d组右心室肥厚指数显著升高(P<0.05)。与常氧组相比,右心室心肌组织中低压缺氧各组Ⅰ型胶原水平均升高,其中低压缺氧7、14、28 d组水平显著升高(P<0.05)。与常氧组相比,低压缺氧3 d组右心室心肌组织中TGF-β(3.68±0.17)、CTGF(8.73±0.96)蛋白表达量均显著升高(P<0.05),低压缺氧28 d组右心室心肌组织中TGF-β(0.93±0.15)、CTGF(12.62±0.14)蛋白水平均显著升高(P<0.05),而低压缺氧7、14 d组两细胞因子表达量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。随低压缺氧时间增加,右心室心肌组织中两生长因子mRNA表达水平与右心室肥厚指数呈显著正相关(P<0.05),与Ⅰ型胶原的mRNA水平也呈显著正相关(P<0.05,低压缺氧28 d组除外);随低压缺氧时间增加,TGF-β的mRNA水平与CTGF的mRNA水平呈显著正相关(P<0.05)。结论随低压缺氧时间增加,右心室心肌组织中TGF-β、CTGF先增加后降低再增加的表达变化,参与了低压缺氧时右心室心肌纤维化、心肌肥大的过程。

关键词：低压缺氧右心室心肌纤维化心肌肥大转化生长因子β 结缔组织生长因子

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