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现代预防医学 2012年第6期39卷 1497-1498+1501页

作者：周思敏王锐军张钢黄庆愿李晓莉高钰琪田怀军第三军医大学高原军事医学系高原军队卫生学教研室第三军医大学高原医学教育部重点实验室第三军医大学全军高原生理与高原病研究重点实验室解放军军事经济学院营养食品研究所第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室

目的探讨蚕蛹蛋白对缺氧小鼠的抗疲劳作用,为其抗疲劳作用在高原的应用提供实验室依据。方法雄性昆明种小鼠80只(n=20),按体重随机分为4组,分别为缺氧对照组、蚕蛹蛋白低剂量组(0.5g/kg)、中剂量组(2.5g/kg)和高剂量组(5g/kg)。各组小... 详细信息

目的探讨蚕蛹蛋白对缺氧小鼠的抗疲劳作用,为其抗疲劳作用在高原的应用提供实验室依据。方法雄性昆明种小鼠80只(n=20),按体重随机分为4组,分别为缺氧对照组、蚕蛹蛋白低剂量组(0.5g/kg)、中剂量组(2.5g/kg)和高剂量组(5g/kg)。各组小鼠均在模拟5000m高原环境中饲养,连续灌胃10d后测小鼠力竭游泳时间、肝糖原含量、血乳酸及血糖水平。结果与缺氧对照组比较,蚕蛹蛋白显著延长了小鼠力竭游泳时间、增加肝糖原含量和降低血乳酸曲线下面积(P﹤0.01),其中以中剂量组效果最佳,而蚕蛹蛋白对血糖水平没有显著影响。结论蚕蛹蛋白对缺氧小鼠具有延缓疲劳产生和加速疲劳消除的作用。

关键词：蚕蛹蛋白低氧抗疲劳

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OMT对模拟高原缺氧大鼠脑线粒体呼吸氧耗与能量生成的影响及抗缺氧效应研究

OMT对模拟高原缺氧大鼠脑线粒体呼吸氧耗与能量生成的影响及抗缺...

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作者：鄢卫华第三军医大学

学位级别：硕士

目的机体各组织和器官因缺氧而受到不同程度的损伤和功能低下，这是机体初次暴露在高原低氧环境下面临的主要威胁，降低高原病的发生和提高机体在高原的生存及劳动能力是高原医学的重要课题。线粒体作为机体用氧的主要场所，其功能损害... 详细信息

目的机体各组织和器官因缺氧而受到不同程度的损伤和功能低下，这是机体初次暴露在高原低氧环境下面临的主要威胁，降低高原病的发生和提高机体在高原的生存及劳动能力是高原医学的重要课题。线粒体作为机体用氧的主要场所，其功能损害在缺氧性疾病的病理生理发展中起到关键作用，而氧化磷酸化脱偶联引起的用氧效率降低和能量生成减少是线粒体功能受损的主要特征。脱偶联蛋白（Uncoupling Proteins，UCPS）所介导的质子漏是导致氧化磷酸化脱偶联的重要机制。高原缺氧时线粒体UCPs活性和表达增加，脱偶联程度增强，线粒体膜电位降低，ATP生成减少，从而导致机体功能和代谢障碍。中医药学博大精深，中药具有广泛应用和开发前景，许多中药已广泛应用于临床。中药单体结构明确，成份单一，效果对应，是理想的实验室研究对象。氧化苦参碱（Oxymatrane, OMT）是中草药苦参中提取的有效生物碱，具有多种药理作用。本实验利用中药（单体）体外干预缺氧大鼠脑线粒体氧化磷酸化，从十余种中药（单体）中初步筛选出3种具有降低缺氧大鼠脑线粒体脱偶联、改善呼吸氧耗的药物，进一步重点观察了OMT在体外对缺氧大鼠脑线粒体能量生成及UCPs在其中的作用，在此基础上进而探讨了OMT在体内对小鼠的抗缺氧效应，为高原病的防治和提高机体在高原的生存和劳动能力提供实验依据。方法 1.健康雄性SD大鼠随机分为平原对照组和高原缺氧组，后者暴露于模拟海拔5000米高原低压舱内，23h/d，持续3d。分别在平原和模拟高原低压舱断头处死，分离大鼠脑线粒体。用不同浓度的12种中药（单体）体外干预线粒体后，Clark氧电极法测定线粒体氧化呼吸活性，Rhodamine123法测定线粒体膜电位，初步筛选影响缺氧大鼠脑线粒体氧化呼吸的中药（单体）。 2.大鼠随机分为正常对照组，正常干预组，缺氧对照组和缺氧干预组。分别建立脑组织及离体脑线粒体体外干预模型，经2mmol/LOMT分别干预1h和5min，进一步观察OMT对缺氧大鼠脑线粒体氧化磷酸化的影响及UCPs在其中的作用。Clark氧电极法测定线粒体氧化呼吸活性，Rhodamine123法测定线粒体膜电位，高压液相色谱法分析脑组织线粒体内腺苷酸含量，[3H]-GTP结合法测定脑组织UCPs的活性，实时荧光定量RT-PCR和Western blot分别测定UCP4、UCP5mRNA和蛋白表达。 3.健康雄性昆明小鼠，利用常压密闭缺氧模型，通过腹腔注射不同剂量的OMT或人参皂苷Rg1，观察标准耐受时间，探讨其抗缺氧能力及其量效和时效关系。结果 1.通过对12种中药（单体）成份作用的观察发现，OMT和人参皂苷Rg1均能通过降低缺氧大鼠脑线粒体ST4来提高氧化磷酸化效率，同时增加线粒体膜电位，且具有量效关系，1.5mmol/L的OMT和人参皂苷Rg1分别能使缺氧大鼠脑线粒体RCR升高33.04%和34.25%，线粒体膜电位分别增加18.13%和16.15%（2mmol/L）。 2.与正常对照组比较，缺氧对照组大鼠脑线粒体UCPs活性和含量明显升高，Kd值降低40.39%，Bmax提高105.26%，同时脑组织中UCP4和UCP5的mRNA和蛋白质表达也明显升高，其中UCP4和UCP5的mRNA量分别升高2.87倍和2.54倍，而蛋白表达量分别提高70.13%和116.67%；与缺氧对照组相比，缺氧干预组脑线粒体kd提高44.08%，Bmax值降低20.90%，UCP4和UCP5mRNA分别降低至0.46和0.48，且UCP4和UCP5蛋白表达也显著降低（34.35%和55.77%）。 3.与正常对照组比较，缺氧对照组大鼠脑线粒体ST3、RCR和MMP显著降低（分别降低18.44%、42.06%和18.78%），而ST4则显著升高（40.38%）；与缺氧对照组相比，2mmol/L OMT体外干预可显著改善线粒体氧化磷酸化效能，主要表现为ST4降低26.03%，RCR与MMP分别提高47.10%和18.13%。 4.与正常对照组比较，缺氧对照组大鼠脑线粒体ATP含量、ATP/ADP、能荷和ATP/总腺苷酸比值显著降低，AMP和ADP含量显著上升，其中ATP含量、ATP+ADP池、ATP/ADP、能荷以及ATP/总腺苷酸比值分别降低37.80%，24.59%，48.34%，29.79%和39.02%，AMP和ADP分别提高29.51%和18.51%；与缺氧对照组相比，2mmol/LOMT体外干预可显著升高ATP含量、ATP/ADP、能荷和ATP/总腺苷酸比值，降低ADP含量，其中ATP、ATP/ADP、能荷和ATP/总腺苷酸比值分别升高30.63%、120.47%，18.18%和36.00%，ADP降低40.

关键词：氧化苦参碱脱偶联蛋白缺氧线粒体氧耗能量合成

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基因组学研究在藏族高原适应遗传机制研究中的实践与运用

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国际遗传学杂志 2012年第4期35卷 213-216页

作者：陈郁高钰琪第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室高原医学教育部重点实验室全军高原医学重点实验室

世居高原藏族在长期的高原低氧适应过程中,其多项生理特征显著不同于世居平原民族,这些指标变化可能与特殊环境所导致的基因组序列变异相关。近年来随着高通量测序以及全基因组关联分析等新型研究平台的迅猛发展,它们广泛应用到藏族高... 详细信息

世居高原藏族在长期的高原低氧适应过程中,其多项生理特征显著不同于世居平原民族,这些指标变化可能与特殊环境所导致的基因组序列变异相关。近年来随着高通量测序以及全基因组关联分析等新型研究平台的迅猛发展,它们广泛应用到藏族高原适应的遗传机制的研究中。此文就基因组学领域藏族高原适应的遗传机制进展进行综述,为进一步探索高原适应机制和高原病发病机制提供参考,并为高原病的防治寻找新的思路和靶点。

关键词：藏族高原适应全基因组关联研究基因

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舒缩血管物质对肺动脉平滑肌细胞膜电位、胞浆及线粒体Ca^(2+)的作用效应

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青海医药杂志 2012年第2期42卷 2-6页

作者：何秀娟黄庆愿武警青海总队医院内科 810000 第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室 400038

目的:观察血管紧张素II(AngⅡ)和一氧化氮(NO)对肺动脉平滑肌细胞膜电位、胞浆钙离子浓度([Ca2+]i)和线粒体钙离子浓度([Ca2+]mit)的影响。方法:肺动脉平滑肌细胞(pulmona-ry arterysmooth muscle cells,PASMCs)分别负载相应的荧光探针... 详细信息

目的:观察血管紧张素II(AngⅡ)和一氧化氮(NO)对肺动脉平滑肌细胞膜电位、胞浆钙离子浓度([Ca2+]i)和线粒体钙离子浓度([Ca2+]mit)的影响。方法:肺动脉平滑肌细胞(pulmona-ry arterysmooth muscle cells,PASMCs)分别负载相应的荧光探针:胞浆钙荧光指示剂(Fluo-4/AM)、细胞膜荧光指示剂(Di-8-ANEPPS)、细胞线粒体钙荧光指示剂(Rhod-5F),然后给予一定浓度的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和一氧化氮(NO),在激光共聚焦扫描显微镜下,测定[Ca2+]i荧光、细胞膜电位、[Ca2+]mit荧光。结果:AngⅡ基本不影响细胞膜电位,但可一过性引起[Ca2+]i升高,这种[Ca2+]i的升高可导致[Ca2+]mit小幅升高,进而启动线粒体钙离子的释放和[Ca2+]mit的大幅度降低;NO可迅速减弱PASMCs膜电位荧光强度,使细胞处于明显的超极化状态,同时,[Ca2+]i迅速下降,300s时达到最低,并维持在这一水平,[Ca2+]mit也迅速降低,形成低谷平台后迅速回升,并基本稳定于、稍低于初始值的水平。结论:AngⅡ收缩血管可能与线粒体钙释放和[Ca2+]mit的大幅降低有关;NO舒张血管可能与细胞超极化、[Ca2+]i、[Ca2+]mit降低有关。

关键词：血管紧张素Ⅱ 一氧化氮线粒体钙肺动脉平滑肌

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低压舱内大鼠游泳运动模型的建立

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高原医学杂志 2012年第1期22卷 1-4页

作者：杨涛黄庆愿第三军医大学高原军事医学系病理生理学与高原生理学教研室 400038 高原医学教育部重点实验室 400038 全军高原医学重点实验室 400038

目的:大鼠在低压舱内进行游泳时,皮毛上会附着大量气泡,严重影响对大鼠运动能力的判断。本实验旨在建立低压舱内稳定可靠的大鼠游泳运动模型。方法:SD大鼠分平原组和高原组,每组大鼠又分为A、B、C、D四组。A组大鼠为对照组;B组大鼠在游... 详细信息

目的:大鼠在低压舱内进行游泳时,皮毛上会附着大量气泡,严重影响对大鼠运动能力的判断。本实验旨在建立低压舱内稳定可靠的大鼠游泳运动模型。方法:SD大鼠分平原组和高原组,每组大鼠又分为A、B、C、D四组。A组大鼠为对照组;B组大鼠在游泳用水中加入去污剂;C组大鼠实验前1天用脱毛剂脱去头部以下被毛;D组大鼠用实验前1天沸腾后自然冷却的水游泳。大鼠分别置于平原和5 000m低压舱内饲养,24h后各组在其饲养环境下进行负重2.5%体重的游泳运动。观察大鼠游泳运动情况,并记录游泳力竭时间。结果:在平原,往游泳用水中加入吐温20(B组)或去除大鼠被毛(C组)可减轻大鼠身上附着的气泡,而在低压舱中使用这两种方法无效。无论是在舱内还是在舱外,使用实验前1天沸腾后自然冷却的水(D组)可完全消除大鼠游泳时皮毛上附着的气泡。D组大鼠在平原力竭时间为(56±11)min,显著长于高原力竭时间(25±17)min。结论:通过实验前煮沸游泳用水,可消除大鼠在低压舱中游泳时皮毛上附着的气泡,建立稳定可靠的低压舱内大鼠游泳运动模型。

关键词：低压舱游泳模型大鼠

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野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺组织apelin及其受体的变化

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中国应用生理学杂志 2013年第2期29卷 101-105,I0001页

作者：王青王桂芹庞玲霞薛峰陈醒言陈然孔晓霞龚永生范小芳温州医学院低氧医学研究所机能实验教学中心浙江温州325035

目的:探讨新的小分子活性肽apelin及其受体(APJ)在野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺组织中的变化及意义。方法:雄性SD大鼠25只,随机分为对照组(n=10)和野百合碱组(n=15)。野百合碱组大鼠一次性腹部注射野百合碱60 mg/kg,对照组注射相同... 详细信息

目的:探讨新的小分子活性肽apelin及其受体(APJ)在野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺组织中的变化及意义。方法:雄性SD大鼠25只,随机分为对照组(n=10)和野百合碱组(n=15)。野百合碱组大鼠一次性腹部注射野百合碱60 mg/kg,对照组注射相同剂量的溶媒。注射野百合碱后第21天时,测定大鼠平均肺动脉压,HE染色观察肺组织病理学变化,Masson三色染色检测肺血管重建指标,放射免疫法及Western blot法测定肺组织中apelin和APJ的蛋白,RT-PCR法观察肺组织apelin和APJ的基因。结果:野百合碱组的平均肺动脉压、右心室肥大指数、肺血管重建指标、肺组织中apelin蛋白含量均明显高于对照组,而肺组织中APJ蛋白及基因表达显著低于对照组(P<0.05,P<0.01);但肺组织apelin基因表达两组间无显著统计学差别。免疫组化定位发现,野百合碱组大鼠apelin及APJ蛋白在肺组织内的炎症细胞胞膜及胞浆内呈强阳性表达。结论:内源性apelin及其受体的表达异常可能在野百合碱诱发的肺动脉高压的发生发展中起重要作用。

关键词：野百合碱肺动脉高血压 apelin 炎症改建

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Apelin及其受体和一氧化氮合酶在氧诱导的新生小鼠增生性视网膜病变中表达上调

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中国病理生理杂志 2013年第6期29卷 1081-1085页

作者：伍蒙爱陈婕灵王维陈惠惠刘园园杨姗姗胡良冈范小芳龚永生温州医学院低氧医学研究所浙江温州325035 温州医学院附属眼视光学院浙江温州325003

目的:通过观察apelin及其受体APJ和一氧化氮合酶(NOS)在氧诱导的新生小鼠增生性视网膜病变中的表达,探讨apelin/APJ和一氧化氮(NO)是否参与了早产儿视网膜病变新生血管的发生。方法:36只7日龄C57BL/6J新生小鼠随机均分为高氧组和对照组... 详细信息

目的:通过观察apelin及其受体APJ和一氧化氮合酶(NOS)在氧诱导的新生小鼠增生性视网膜病变中的表达,探讨apelin/APJ和一氧化氮(NO)是否参与了早产儿视网膜病变新生血管的发生。方法:36只7日龄C57BL/6J新生小鼠随机均分为高氧组和对照组。高氧组暴露在75%±2%的氧浓度下5 d后,在正常空气环境下饲养5 d;对照组小鼠在正常氧环境下饲养10 d。两组均在17日龄处死,取左眼眼球做石蜡切片,HE染色计数突破内界膜的血管内皮细胞核数,以判断造模是否成功。实时荧光定量PCR检测右眼视网膜组织apelin和APJmRNA的表达,免疫荧光组织化学法检测视网膜apelin、APJ、eNOS和iNOS蛋白的表达。结果:高氧组视网膜平均每个切面突破内界膜的血管内皮细胞核数(35.13±10.13)明显高于对照组(0.30±0.21,P<0.01),说明造模成功。高氧组apelin和APJ mRNA水平显著高于对照组,分别为对照组的32.2倍和17.6倍(均P<0.01)。组织免疫荧光结果显示高氧组apelin和APJ蛋白表达明显强于对照组,并且主要强表达于新生血管周围;高氧组eNOS和iNOS蛋白表达明显强于对照组,但主要强表达于新生血管下方视网膜组织,在突破内界膜的血管内皮细胞核周围未见表达明显增强。结论:Apelin/APJ及NOS可能与氧诱导的新生小鼠增生性视网膜病变新生血管的发生有关。

关键词： Apelin 视网膜新生血管形成氧诱导的视网膜病变早产儿视网膜病变

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新兵乘火车入藏途中血氧饱和度及急性高原病发生情况的动态研究

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第三军医大学学报 2011年第8期33卷 863-865页

作者：唐红英张民汪涛舒勤谭静柏维尧朱京慈第三军医大学护理系基础护理学教研室第三军医大学护理系心理学教研室第三军医大学护理系野战护理学教研室西藏军区77619部队卫生队

目的动态观测新兵乘火车入藏途经不同海拔高度的血氧饱和度、心率等生理指标变化及急性高原病(acute mountain sickness,AMS)的发生情况。方法 60名从重庆乘火车去拉萨的新兵,分别在重庆(300 m)、德令哈(2 980 m)、那曲(4 507 m)、拉萨(... 详细信息

目的动态观测新兵乘火车入藏途经不同海拔高度的血氧饱和度、心率等生理指标变化及急性高原病(acute mountain sickness,AMS)的发生情况。方法 60名从重庆乘火车去拉萨的新兵,分别在重庆(300 m)、德令哈(2 980 m)、那曲(4 507 m)、拉萨(3 658 m)进行动脉血氧饱和度(SaO2)、心率、血压测量及AMS发生情况调查。结果火车入高原后,新兵SaO2明显下降(P<0.01),心率显著增快(P<0.01),血压变化无统计学意义(P>0.05)。4 500 m以上区段SaO2下降最明显。急性高原反应为轻至中度,发生率为20.00%(2 980 m),36.67%(4 507 m),30.00%(3 658 m)。青藏线上,出现症状多为头昏(71名)、其次是胸闷(61名)、头痛(57名)、失眠(50名)、气短(49名)等。结论新兵乘火车急进高原生理改变以动脉血氧饱和度下降及心率增快为主,急性高原反应以轻至中度为主,无重型高原病发生。

关键词：高原血氧饱和度青藏铁路急性高原病

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采用遗传学新技术研究高原习服适应的遗传机制

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国际遗传学杂志 2011年第2期34卷 68-70+106页

作者：罗勇军王锐军高钰琪第三军医大学高原疾病学教研室病理生理与高原生理学教研室教育部高原医学重点实验室

高原医学主要的研究内容包括高原习服适应机制及促习服措施,高原病发病机制及防治措施,提高高原劳动能力的措施。目前随着外显子测序、全基因组关联分析等遗传学新技术的发展,并广泛渗透到高原医学的各项科研工作中,逐步揭示着高原习服... 详细信息

高原医学主要的研究内容包括高原习服适应机制及促习服措施,高原病发病机制及防治措施,提高高原劳动能力的措施。目前随着外显子测序、全基因组关联分析等遗传学新技术的发展,并广泛渗透到高原医学的各项科研工作中,逐步揭示着高原习服适应的遗传机制。

关键词：高原医学遗传学新技术

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基因组多态性与急性高原反应易感性的关联研究进展

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西南军医 2011年第1期12卷 106-107页

作者：罗勇军高钰琪第三军医大学高原军事医学系高原疾病学教研室病理生理和高原生理学教研室高原医学教育部重点实验室400038

急性高原反应是由于高原低氧环境诱发的一种高原特发病,该病有明显的易感倾向。研究表明基因多态性与大量复杂疾病的易感性密切相关。本文就近年来基因多态性与急性高原反应易感性的关联研究进展进行综述。

关键词：急性高原反应易感性多态性

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