检索结果-内蒙古大学图书馆

第十三届全国肿瘤生物治疗学术会议

作者：蒋正平第二军医大学免疫学研究所医学免疫学国家重点实验室上海 200433

1990年美国Cornell大学的Denk等人首次将双光子技术与共焦显微镜技术相结合,研制了世界上第一台双光子共焦激光扫描显微镜.相较于单光子显微镜而言,双光子显微镜具有更大的成像深度、较低的光漂白与光毒性、高信噪比等优点,从而被广泛...

1990年美国Cornell大学的Denk等人首次将双光子技术与共焦显微镜技术相结合,研制了世界上第一台双光子共焦激光扫描显微镜.相较于单光子显微镜而言,双光子显微镜具有更大的成像深度、较低的光漂白与光毒性、高信噪比等优点,从而被广泛应用于神经生物学、细胞生物学、免疫学等研究领域.在免疫学研究中,已有多篇文献报道运用该技术实时在体观察T、B淋巴细胞、树突状细胞及其他免疫细胞的分化发育、迁移、相互作用等,加深了人们对免疫细胞的细胞学行为及免疫应答过程和机制的认识.在肿瘤免疫研究中,利用双光子技术不仅可以研究上述免疫细胞的动态行为,并且可以实时在体研究肿瘤微环境中免疫细胞与肿瘤之间的相互作用、宿主细胞对肿瘤发生发展的作用及肿瘤的血管、淋巴管的变化发展.此外,利用某些肿瘤内部成分的自发荧光,双光子显微镜技术还可对某些肿瘤进行早期无创诊断,并且随着双光子技术的微型化、简便化,相信该技术将会在临床诊断和治疗发挥更大的作用.

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脾脏基质微环境诱导新型调节性树突状细胞调控B细胞和NK细胞功能的机制研究

脾脏基质微环境诱导新型调节性树突状细胞调控B细胞和NK细胞功能...

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中国免疫学会第十届全国免疫学学术大会

作者：钱程钱莉白易林妘曹雪涛第二军医大学医学免疫学国家重点实验室暨第二军医大学免疫学研究所 200433

B细胞的分化发育是一个连续的过程，经历了从主要淋巴组织中产生，继而到在脾脏等次级淋巴组织功能成熟这些阶段。自然杀伤(NK)细胞也在脾脏富集。目前，关于调节性DC对B细胞和NK细胞的调控的大部分证据，都是从DC单独体外培养的实验体...

B细胞的分化发育是一个连续的过程，经历了从主要淋巴组织中产生，继而到在脾脏等次级淋巴组织功能成熟这些阶段。自然杀伤(NK)细胞也在脾脏富集。目前，关于调节性DC对B细胞和NK细胞的调控的大部分证据，都是从DC单独体外培养的实验体系中获得的，而这些体系忽视了次级淋巴器官微环境对细胞功能的重要影响和作用。

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MSI-H/S结直肠癌差异表达分子的筛选及其在免疫治疗中的意义

MSI-H/S结直肠癌差异表达分子的筛选及其在免疫治疗中的意义

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第十三届全国肿瘤生物治疗学术会议

作者：黄晓辉方宏亮吴艳峰曹雪涛万涛第二军医大学免疫研究所暨医学免疫学国家重点实验室上海 200433

目的:本研究拟通过建立微卫星稳定及不稳定的结直肠癌细胞模型,筛选重要的差异分子,探讨其与免疫治疗的内在机理及关系.方法:根据肿瘤的异质性的特征,利用单克隆化技术,成功从体外构建了同一细胞来源的MSIH/S结直肠癌细胞模型.利用基因... 详细信息

目的:本研究拟通过建立微卫星稳定及不稳定的结直肠癌细胞模型,筛选重要的差异分子,探讨其与免疫治疗的内在机理及关系.方法:根据肿瘤的异质性的特征,利用单克隆化技术,成功从体外构建了同一细胞来源的MSIH/S结直肠癌细胞模型.利用基因、蛋白芯片技术对MSI-H/S模型(LS174t、LS180、HCT116)进行了分析,筛选出差异表达分子,并进行了验证.最后通过免疫组化的方法分析了临床样本中差异分子的表达情况以及其与预后的关系.结果:成功构建MSI-H/S结直肠癌细胞模型基础上,筛选并确证了Fas、肿瘤相关抗原基因NY-ESO-2等基因在MSI-H细胞中表达上调.进一步通过体内和体外实验证实了这些肿瘤抗原其能诱导产生更强针对MSI-H肿瘤的细胞免疫应答,MSI-H的细胞由于其表面Fas分子表达的水平更高,使其可能对于机体免疫系统中效应细胞的杀伤更为敏感.同时在临床样本中,验证了肿瘤抗原NY-ESO-2在MSI-H结直肠癌患者中表达显著高于MSS患者,发现NY-ESO-2阳性的MSI-H患者预后较好的现象.结论:MSI-H这类特殊结直肠癌可能由于其表达Fas以及肿瘤抗原NY-ESO-2水平升高,更有效地促进了体内免疫系统的效应作用,最终改善了这类患者的预后.为临床治疗这类特殊的结直肠癌患者提供了可能的治疗靶标及方案.

关键词：微卫星不稳定肿瘤抗原 Fas 免疫治疗树突状细胞结直肠癌

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MLH1缺失结直肠癌差异表达分子的筛选及其在化疗抵抗中的作用

MLH1缺失结直肠癌差异表达分子的筛选及其在化疗抵抗中的作用

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第十三届全国肿瘤生物治疗学术会议

作者：方宏亮黄晓辉吴艳峰曹雪涛万涛第二军医大学免疫研究所暨医学免疫学国家重点实验室上海 200433

目的:本课题拟构建合适的MMR的缺失和过表达的细胞模型,通过高通量筛选出MMR改变后关键差异表达分子,探讨这些差异分子在结直肠癌发生发展以及化疗治疗中发挥的功能,为提高MMR缺失患者的临床治疗疗效提供理论基础.方法:首先构建了重要的... 详细信息

目的:本课题拟构建合适的MMR的缺失和过表达的细胞模型,通过高通量筛选出MMR改变后关键差异表达分子,探讨这些差异分子在结直肠癌发生发展以及化疗治疗中发挥的功能,为提高MMR缺失患者的临床治疗疗效提供理论基础.方法:首先构建了重要的MMR分子MLH1 shRNA干扰慢病毒和过表达慢病毒载体,通过抗性筛选出MLH1稳定干扰SW480细胞株和MLH1过表达的HCT-116细胞株.再通过mRNA表达基因芯片和双向电泳分析MLH1干扰和过表达的细胞模型中的差异表达分子,进一步在CRC细胞模型和患者临床样本上验证差异表达分子与MLH1表达之间的关系以及它们对于5-FU为基础的化疗作用的影响.结论:本课题结果表明MLH1缺失伴随DKK4表达阳性是MLH1缺失的CRC患者产生对5-FU为基础化疗抵制的原因之一.而在MLH1缺失患者中,仍然有部分患者如DKK4表达阴性患者可能在5-FU为基础的化疗中受益.因此,检测MLH1缺失患者中DKK4的表达情况,对CRC患者的后续治疗具有重要的指导意义.

关键词：错配修复基因结直肠癌化疗抵抗生物学标志 DKK4

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新型趋化因子MIP-2γ的趋化功能及其对放射线损伤的治疗作用与机制

新型趋化因子MIP-2γ的趋化功能及其对放射线损伤的治疗作用与机制

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第十三届全国肿瘤生物治疗学术会议

作者：于益芝郑月娟杨阳徐红梅钱程李楠曹雪涛第二军医大学免疫研究所暨医学免疫学国家重点实验室上海 200433

近年来本室开展了从树突状细胞中克隆免疫新分子的工作,通过大规模随机测序从人树突状细胞基因文库中发现了一种新的趋化因子基因.该新型趋化因子属于CXC趋化因子亚家族,与MIP-2α/β同源,命名为MIP-2γ,在GenBank中登录号为AF106911.... 详细信息

近年来本室开展了从树突状细胞中克隆免疫新分子的工作,通过大规模随机测序从人树突状细胞基因文库中发现了一种新的趋化因子基因.该新型趋化因子属于CXC趋化因子亚家族,与MIP-2α/β同源,命名为MIP-2γ,在GenBank中登录号为AF106911.初步的研究表明,重组MIP-2γ体外对中性粒细胞和树突状细胞具有很强的趋化活性,对淋巴细胞、单核细胞等无明显趋化作用.研究还表明,MIP-2γ具有比较独特的造血调控功能,单独应用时作用不明显,但与粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子具有非常好的协同效应.基于对MIP-2γ功能的认识,首次提出并证实了MIP-2γ与低剂量GM-CSF联合应用能够对放射线照射后造血及免疫功能损伤小鼠具有明显的治疗作用,通过该方面工作,发现MIP-2γ在体外能够维持造血干/祖细胞的存活,但不能促进其增殖,但能促进骨髓前体细胞的存活,其作用与MIP-2γ快速诱导PI3K和MAPK途径的活化有关;动物体内实验研究表明,MIP-2γ对造血干细胞的趋化和体内动员作用,而且MIP-2单独应用对于放疗后骨髓移植小鼠具有一定的治疗作用,与GMCSF联合应用治疗效果更明显.该分子具有应用价值.

关键词：放射线损伤趋化因子基因免疫功能临床治疗

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免疫识别和免疫调节研究进展

免疫识别和免疫调节研究进展

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中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议

作者：曹雪涛上海第二军医大学免疫学研究所医学免疫学国家重点实验室

免疫细胞对病原相关模式分子及抗原等外源物质的识别是机体针对外源物质发生免疫应答的基础。机体的免疫应答包括固有性免疫应答和适应性免疫应答两种类型,而这两种免疫应答都必须通过免疫识别来触发。固有性免疫细胞(如皮肤粘膜上皮细... 详细信息

免疫细胞对病原相关模式分子及抗原等外源物质的识别是机体针对外源物质发生免疫应答的基础。机体的免疫应答包括固有性免疫应答和适应性免疫应答两种类型,而这两种免疫应答都必须通过免疫识别来触发。固有性免疫细胞(如皮肤粘膜上皮细胞、吞噬细胞、NK细胞、NK1．1+T细胞、γδT细胞和B-1 B细胞

关键词：免疫识别 MHC 特异性抗原提呈细胞免疫应答免疫调节

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脾脏基质微环境诱导新型调节性树突状细胞调控B细胞和NK细胞功能的机制研究

脾脏基质微环境诱导新型调节性树突状细胞调控B细胞和NK细胞功能...

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第十届全国免疫学学术大会

作者：钱程钱莉白易林妘曹雪涛第二军医大学医学免疫学国家重点实验室暨第二军医大学免疫学研究所

B细胞的分化发育是一个连续的过程,经历了从主要淋巴组织中产生,继而到在脾脏等次级淋巴组织功能成熟这些阶段。自然杀伤(NK)细胞也在脾脏富集。目前,关于调节性DC对B细胞和NK细胞的调控的大部分证据,都是从DC单独体外培养的实验体系中... 详细信息

B细胞的分化发育是一个连续的过程,经历了从主要淋巴组织中产生,继而到在脾脏等次级淋巴组织功能成熟这些阶段。自然杀伤(NK)细胞也在脾脏富集。目前,关于调节性DC对B细胞和NK细胞的调控的大部分证据,都是从DC单独体外培养的实验体系中获得的,而这些体系忽视了次级淋巴器官微环境对细胞功能的重要影响和作用。我们以前的研究表明,脾脏基质细胞能够模仿次级淋巴器官微环境,可以诱导成熟树突状细胞(DC)的进一步增殖和分化为一类新型调节性DC(DCreg)亚群,具有独特的细胞表型,即CD11b(高)Ia(低)。在次级淋巴器官内必然存在DCreg和淋巴细胞之间的相互作用。然而,关于DCreg和B细胞或NK细胞等淋巴细胞,在这些局部是否相互作用以及这些相互作用的结果尚不明了。我们前期的研究建立的脾脏基质细胞共培养体系有利于我们更清楚地了解DC在递呈抗原后或接受了病原体刺激后从外周迁移到脾脏之后的对B细胞和NK细胞的影响。我们的研究发现,DCreg可诱导脾脏T1,T2,MZ,和B1 B细胞分化为一类CD19(高)Fcgamma RIIb(高)的调节性细胞B细胞亚群,该亚群在体外和体内均能大量分泌IL–10并发挥调节功能。IFN-β和CD40配体是参与了调节性B细胞的分化。此外,DCreg可部分地通过IL-10激活脾脏的静息NK细胞,增强其IFN-γ的生成和细胞毒性继而获得杀伤DCreg的能力。我们的研究结果为淋巴细胞的相互作用提供了新方式,发现了免疫反应精密调控的新途径,有助于我们更深入地理解机体的负向免疫调节功能,并为研究感染,自身免疫性疾病,移植排斥,肿瘤等发病机制提供线索。

关键词：调节性树突状细胞微环境 B细胞 NK细胞免疫调节

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科研与创新能力培养在医学免疫学教学中的探索

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基础医学教育 2012年第4期14卷 247-249页

作者：占贞贞刘星光张林杰安徽医科大学免疫学教研室合肥230032 第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室

医学免疫学作为生命科学研究的重要支持学科,其内容在基础医学研究及临床科研研究中应用极为广泛。为适应快速发展的生命科学研究需要,如何在医学免疫学教学中培养学生的科研能力和创新性思维是目前医学免疫学教学中需要注重的问题。分... 详细信息

医学免疫学作为生命科学研究的重要支持学科,其内容在基础医学研究及临床科研研究中应用极为广泛。为适应快速发展的生命科学研究需要,如何在医学免疫学教学中培养学生的科研能力和创新性思维是目前医学免疫学教学中需要注重的问题。分别从理论教学、实验教学、科研文献学习以及考核制度四方面对医学免疫学教学进行改革,以期从学生的科研兴趣和科研能力出发,培养出有潜力的科研型人才。

关键词：医学免疫学教学方法创新能力

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小G蛋白RBJ致瘤模型的建立及其分子机制的临床标本验证

小G蛋白RBJ致瘤模型的建立及其分子机制的临床标本验证

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第三届免疫学博士生论坛

作者：俞宙陈涛涌杨明金曹雪涛第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室浙江大学免疫学研究所

背景:RAS相关的小GTP酶在肿瘤的发生发展过程中发挥着很重要的作用,我们实验室最先发现的分子RBJ,作为第六种新的RAS相关的小GTP酶家族成员,它在肿瘤发生、发展过程中的作用还不清楚,我们课题组前期实验结果提示RBJ可以在细胞水平通过限... 详细信息

背景:RAS相关的小GTP酶在肿瘤的发生发展过程中发挥着很重要的作用,我们实验室最先发现的分子RBJ,作为第六种新的RAS相关的小GTP酶家族成员,它在肿瘤发生、发展过程中的作用还不清楚,我们课题组前期实验结果提示RBJ可以在细胞水平通过限制MEK出核活化ERK1/2,促进肿瘤的发生发展,但还需要在动物模型中验证其促瘤功能以及在临床标本中验证其发挥作用的分子机制。目的 :探讨RBJ在动物模型及临床标本中对肿瘤发生发展的影响及作用机制。方法 :在人胃肠道标本(包括对照、不同分期肿瘤)中通过免疫组化、定量PCR的方法,测定RBJ表达水平,并分析RBJ表达水平与肿瘤的发生以及肿瘤不同分期的相关性。用AOM-DSS诱导小鼠结肠癌的方法,诱导野生型小鼠、RBJ转基因小鼠、RBJ基因敲除小鼠结肠癌模型,分析RBJ在此模型中发挥的作用。利用免疫组化、组织芯片等方法,分析RBJ表达水平与磷酸化MEK、ERK表达水平之间的相互关系,进一步验证RBJ促进肿瘤发生发展的分子机制。利用基因组DNA测序的方法,检测在动物模型及临床标本中RAS、BRAF等基因突变的情况。结果 :RBJ在胃肠道肿瘤组织中的表达相较于正常组织要明显升高,而且RBJ的表达水平与肿瘤严重程度呈正相关。成功建立AOM-DSS诱导小鼠结直肠癌模型,并且发现在小鼠诱导结直肠癌模型中,RBJ的表达与小鼠结直肠癌的发生和发展呈正相关关系。在后续免疫组化和组织芯片的结果中我们发现,肿瘤组织中RBJ的表达水平与磷酸化MEK及磷酸化ERK的表达水平也呈正相关。通过对样本进行基因组DNA测序,我们发现RBJ的表达量不受RAS/BRAF基因突变的影响,并且在有或没有RAS/BRAF基因突变的样本中,RBJ的高表达都伴随着更多的磷酸化MEK和磷酸化ERK。以上结果与之前RBJ在细胞水平促进肿瘤细胞发生发展的分子机制是一致的。结论 :RBJ可以通过限制MEK的出核,继而加强MEK和ERK的磷酸化水平在体外细胞、动物模型及临床标本中促进肿瘤的发生和发展。这也提示我们在肿瘤治疗过程中,RBJ有可能成为一种潜在的治疗靶标。

关键词： RBJ MEK AOM-DSS诱导结直肠癌模型

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E3泛素连接酶Fbxo21在天然免疫中的功能及其分子机制研究

E3泛素连接酶Fbxo21在天然免疫中的功能及其分子机制研究

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第九届全国免疫学学术大会

作者：俞宙陈涛涌王建莉曹雪涛医学免疫学国家重点实验室暨第二军医大学免疫学研究所浙江大学免疫学研究所

研究背景:F-box蛋白是一类广泛存在于真核生物中,含有F-box结构域的蛋白家族,在泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pathway,UPP)中因特异识别底物蛋白而参与细胞周期调控、转录调控、细胞凋亡、细胞信号转导等生命活动。我们课题... 详细信息

研究背景:F-box蛋白是一类广泛存在于真核生物中,含有F-box结构域的蛋白家族,在泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pathway,UPP)中因特异识别底物蛋白而参与细胞周期调控、转录调控、细胞凋亡、细胞信号转导等生命活动。我们课题组通过siRNA技术筛选影响VSV病毒诱导的Ⅰ型干扰素或炎症因子的泛素连接酶,发现了F-box家族的成员Fbxo21可能在天然免疫中发挥重要作用,但是其在天然免疫过程的功能还未见报道。因此我们深入探讨了Fbxo21在天然免疫反应中的功能,可能为一些免疫相关性疾病的治疗的研究提供新的参考和方向。研究目的:明确FBXO21调控天然免疫的效应及其机制。研究方法:利用TLR配体,RLR配体及双链DNA病毒刺激RAW264.7细胞及腹腔巨噬细胞后,用定量PCR检测Fbxo21的表达量是否存在变化。利用RNA干扰技术降低Fbxo21的表达水平后,观察TLRs及各种病毒受体信号通路配体刺激后各个受体的表达水平是否存在异常,并检测细胞因子的表达水平。利用western blot技术研究信号通路变化。利用免疫共沉淀及质谱分析技术来研究Fbxo21的相互作用蛋白,并且体外验证靶蛋白,阐明其作用靶点及其泛素化修饰方式。结果:TLR配体及RLR配体VSV病毒刺激RAW264.7细胞及腹腔巨噬细胞后,细胞内Fbxo21的表达水平明显降低。在腹腔巨噬细胞中利用RNA干扰技术降低Fbxo21表达水平后,用VSV刺激细胞,干扰组细胞分泌的IL-6水平明显高于对照组,但TLR配体刺激组未发现明显差异。在VSV刺激后的干扰了Fbxo21的腹腔巨噬细胞中,产生了更强的NF-KB及JNK的活化。在免疫共沉淀后的质谱结果中,我们筛选出与Fbxo21可能的相互作用蛋白ASK1,并且在细胞中验证了两者的相互结合。Western blot实验发现,在干扰了Fbxo21的腹腔巨噬细胞中,ASK1的表达量有明显升高。我们的研究提示Fbxo21可能通过泛素化降解ASK1负向调控IL-6的表达。结论:Fbxo21可以负向调控VSV刺激后NF-KB及JNK的活化以及IL-6的表达,Fbxo21可以与ASK1相互结合,并且与其表达水平呈负相关关系,提示我们Fbxo21可能通过泛素化降解ASK1负向调控IL-6的表达。

关键词： Fbox21 RLR TLR IL-6 ASK1

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