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第十一届全国免疫学学术大会

作者：郭猛张铭健刘芳鲍蕾蕾展洋洋丁国善曹雪涛王全兴第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室第二军医大学长征医院器官移植研究所

研究背景和目的:免疫细胞的甲基化调控成为关注的热点。前期实验中,利用CRISPR/Cas9敲除小鼠腹腔巨噬细胞中的甲基化相关结合蛋白2(Methyl-CpG Binding Domain,MBD2)分子后,可显著降低LPS诱导的IL-8产生(0.127±0.011v.s.1.086±... 详细信息

研究背景和目的:免疫细胞的甲基化调控成为关注的热点。前期实验中,利用CRISPR/Cas9敲除小鼠腹腔巨噬细胞中的甲基化相关结合蛋白2(Methyl-CpG Binding Domain,MBD2)分子后,可显著降低LPS诱导的IL-8产生(0.127±0.011v.s.1.086±0.121),但其在炎症性疾病中的作用和机制不明确。本研究拟采用DSS诱导小鼠溃疡性肠炎损伤模型,阐明MBD2在DSS诱导小鼠溃疡性肠炎损伤中的作用机制。方法:采用3%DSS口服建立小鼠诱导性肠炎模型,观察并记录体重变化等指标,并以大便情况作为疾病活动度(DAI)评价;小鼠处死后进行结肠病灶病理组织显微镜检查评分(CMDI);利用FACS和免疫组化检测模型小鼠肠道粒细胞与单核/巨噬细胞浸润情况;qPCR检测肠道组织中细胞因子与趋化因子的表达情况;dispase消化法获取小鼠肠道上皮细胞,ChIP-Seq检测DSS处理前后MBD2所结合DNA片段的差异。结果:DSS诱导小鼠后,MBD2缺陷小鼠体重下降较对照组明显减弱;MBD2-/-小鼠DAI评分为1.35±0.50,对照组全部出现血便并伴随腹泻,DAI评分为3.00±1.00;小鼠处死后进行CMID评分,MBD2-/-为2.76±0.82,对照组为4.88±0.23;采用FACS和免疫组化检测模型小鼠肠道免疫细胞侵润情况,MBD2-/-小鼠中性粒细胞远低于对照组;qPCR检测肠道组织中细胞因子与趋化因子的表达情况,发现MBD2-/-小鼠肠道IL-8 mRNA水平远低于对照组(P<0.01),此外CXCL1和CXCL2的mRNA水平及TNF-α、IL-1β等细胞因子水平与对照组相比也明显下降;dispase消化法获取小鼠肠道上皮细胞,Ch IP-Seq检测DSS处理前后MBD2所结合DNA片段的差异,发现MBD2在IL-8上游非编码区域存在一段结合序列,推测这一序列可能是IL-8的顺式调控元件。进一步的调控IL-8的机制研究仍在进行中。结论:MBD2可调控免疫细胞IL-8的产生影响肠道炎症反应,在肠炎的形成中发挥重要作用。

关键词： MBD2 免疫细胞肠炎

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miR-199a/b-5p调控肝癌恶性生物学表型及其作用机制

miR-199a/b-5p调控肝癌恶性生物学表型及其作用机制

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第十一届全国免疫学学术大会

作者：展洋洋郑楠薪腾飞郭文渊郭猛鲍蕾蕾丁国善王全兴第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室第二军医大学长征医院器官移植研究所

研究背景:miRNAs在肝癌发生发展中具有重要的生物学功能,可以作为治疗和诊断潜在靶点。本研究中,通过分析TCGA数据库中肝细胞肝癌miRNA-Seq数据,发现miR-199a/b-5p在肝癌中显著的下调,而其生物学功能在肿瘤中尚未报道。方法:(1)利用TCG... 详细信息

研究背景:miRNAs在肝癌发生发展中具有重要的生物学功能,可以作为治疗和诊断潜在靶点。本研究中,通过分析TCGA数据库中肝细胞肝癌miRNA-Seq数据,发现miR-199a/b-5p在肝癌中显著的下调,而其生物学功能在肿瘤中尚未报道。方法:(1)利用TCGA临床随访数据,进行miR-199a/b-5p表达量与患者生存期间的COX回归分析;(2)采用qPCR在我器官移植中心40例肝癌样本和肝癌细胞系HepG2、SMMC-7721中验证miR-199a/b-5p的表达模式;(3)肝癌细胞系中过表达miR-199a/b-5p,检测肿瘤细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的变化;(4)预测的miR-199a/b-5p靶点并利用荧光报告系统进行验证;(5)在临床样本与肝癌细胞系中验证miR-199a/b-5p表达量与靶基因蛋白量的关联性;(6)建立miR-199a/b-5p高表达细胞株后裸鼠脾脏内注射,建立肝内转移模型,30天后检测肝内转移灶数目。结果:miR-199a/b-5p在肝癌组织和细胞系中显著(P<0.01);生存分析发现miR-199a/b-5p高表达提示预后良好(P<0.01);细胞系中过表达miR-199a/b-5p可显著抑制HepG2及SMMC-7721的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.01)。miRWalk预测miRNA靶点并结合双荧光报告结果,发现ROCK1为miR-199a/b-5p的靶点。临床样本与细胞系中的结果提示miR-199a/b-5p表达与ROCK1蛋白水平呈现负相关。miR-199a/b-5p过表达的SMMC-7721细胞脾内注射建立肝内转移模型,发现该miRNA过表达可显著抑制肝内转移灶的形成(P<0.01)。结论:miR-199a/b-5p可以通过负调控ROCK1表达抑制肝癌的生长与转移,miR-199a/b-5p可以作为治疗肝癌潜在靶点。

关键词： miR-199a/b-5p ROCK1 增殖迁移肝细胞肝癌

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miR-29影响B细胞的功能及其在抗体介导的排斥反应中的作用和机制研究

miR-29影响B细胞的功能及其在抗体介导的排斥反应中的作用和机制...

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第十一届全国免疫学学术大会

作者：张铭健郭猛郑楠薪展洋洋刘芳鲍蕾蕾丁国善曹雪涛王全兴第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室第二军医大学长征医院器官移植研究所

抗体介导的排斥反应(antibody-mediated rejection,AMR),又称体液性排斥,主要由B细胞产生的供体特异性抗体(donor specific antibody,DSA)所引发。大量的证据表明,AMR是影响移植物长期存活的重要原因,但目前对于AMR的防治手段较少且效... 详细信息

抗体介导的排斥反应(antibody-mediated rejection,AMR),又称体液性排斥,主要由B细胞产生的供体特异性抗体(donor specific antibody,DSA)所引发。大量的证据表明,AMR是影响移植物长期存活的重要原因,但目前对于AMR的防治手段较少且效果不佳。在前期的研究中,我们通过构建mi R-29-sponge小鼠(GS29),

关键词： miR-29 B细胞 AMR

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MicroRNA与肝癌诊治:新的机遇和挑战

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中国肿瘤生物治疗杂志 2015年第1期22卷 1-7页

作者：侯晋曹雪涛第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室上海200433

MicroRNA(miRNA)广泛参与机体各项生理和病理过程,近年来受到广泛关注且研究进展迅速。肝癌尤其是乙型肝炎相关肝癌是我国的重大疾病,miRNA在肝癌发生、发展过程中发挥着重要作用,在肝癌发生、肿瘤进展、预后判断和生物治疗等方面,miRN... 详细信息

MicroRNA(miRNA)广泛参与机体各项生理和病理过程,近年来受到广泛关注且研究进展迅速。肝癌尤其是乙型肝炎相关肝癌是我国的重大疾病,miRNA在肝癌发生、发展过程中发挥着重要作用,在肝癌发生、肿瘤进展、预后判断和生物治疗等方面,miRNA均能通过调控其靶基因的表达参与其中。由于大规模平行测序等miRNA组学研究的新技术进展迅速,肝脏与肝癌miRNA组的研究进一步加深了科研工作者对肝癌相关miRNA的理解。在肝脏中富集表达的miRNA在肝癌组织中均出现表达失调,这些表达失调的重要miRNA已被证明是肝癌基因治疗的潜在靶点。此外,肝癌患者血清中存在的游离miRNA被证实是肝癌诊断和个体化治疗的潜在生物标志物。笔者简要阐述肝癌相关miRNA的表达和作用机制及其在临床肝癌诊断和干预中的潜在意义与价值,并对miRNA给肝癌诊治带来新的机遇和挑战作一展望。

关键词：肝细胞癌 microRNA microRNA组标志物诊断治疗

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NY-ESO-1抗原的基础与临床研究进展

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中国肿瘤生物治疗杂志 2015年第1期22卷 104-111页

作者：虞淦军万涛第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室上海200433

NY-ESO-1是癌-睾丸抗原家族中的重要一员,在多种肿瘤组织中广泛表达,但在正常组织中几乎不表达。目前已经发现了20多个抗原表位,并在多种肿瘤患者体内检测到自发性免疫反应,包括体液和细胞免疫反应,NY-ESO-1的表达及体内自发性免疫应答... 详细信息

NY-ESO-1是癌-睾丸抗原家族中的重要一员,在多种肿瘤组织中广泛表达,但在正常组织中几乎不表达。目前已经发现了20多个抗原表位,并在多种肿瘤患者体内检测到自发性免疫反应,包括体液和细胞免疫反应,NY-ESO-1的表达及体内自发性免疫应答被证实与肿瘤的诊断和预后有重要关联。NY-ESO-1被认为是肿瘤免疫治疗的理想靶抗原,以NY-ESO-1抗原为靶点的肿瘤治疗性疫苗、TCR基因修饰的T细胞、CAR修饰的T细胞等临床研究相继开展,展示了良好的前景。

关键词： NY-ESO-1 表位肿瘤疫苗 TCR CAR 肿瘤免疫治疗

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模式识别受体与肿瘤微环境研究进展

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中国肿瘤生物治疗杂志 2015年第2期22卷 143-150页

作者：顾炎曹雪涛第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室上海200433

肿瘤微环境的组成与肿瘤发生发展的关系备受瞩目,免疫系统参与肿瘤微环境形成并在其中发挥重要作用,天然免疫细胞对肿瘤的免疫监视以及免疫耐受的形成具有双向功能。模式识别受体(pattern recognition receptors,PRRs)是天然免疫细胞识... 详细信息

肿瘤微环境的组成与肿瘤发生发展的关系备受瞩目,免疫系统参与肿瘤微环境形成并在其中发挥重要作用,天然免疫细胞对肿瘤的免疫监视以及免疫耐受的形成具有双向功能。模式识别受体(pattern recognition receptors,PRRs)是天然免疫细胞识别病毒、细菌等病原体以启动免疫与炎症过程的受体,在肿瘤免疫中也发挥双向的调控功能,其既能维持宿主寄生菌群平衡、清除死亡或突变细胞以抑制肿瘤发生,又能诱导慢性炎症、形成炎性微环境以促进肿瘤发生;既能识别危险信号启动天然免疫杀伤及后续的获得性免疫应答以抑制肿瘤进程,又能识别肿瘤释放的内源性配体以促进抑制性细胞亚群和细胞因子的产生,进而诱导肿瘤的免疫耐受与免疫抑制。此外,多种肿瘤细胞亦表达多种PRRs,肿瘤细胞本身PRR通路参与了肿瘤的发生、发展。本文将阐述肿瘤微环境中PRRs及其配体表达的特点,重点分析PRRs在肿瘤免疫调控中发挥的双向调控功能,以期为肿瘤免疫微环境形成的认识及肿瘤免疫治疗的设计提供新的视角。

关键词：肿瘤肿瘤微环境模式识别受体天然免疫免疫调控免疫治疗

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B细胞自噬在过敏性哮喘发生发展中的作用及调节机制研究

B细胞自噬在过敏性哮喘发生发展中的作用及调节机制研究

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第十一届全国免疫学学术大会

作者：夏福灿郭振红姜岩岩邓常文屈玉兰邓捷文蔡志坚曹雪涛王建莉浙江大学医学院免疫学研究所医学免疫学国家重点实验室暨第二军医大学免疫学研究所第二军医大学附属长海医院呼吸与危重症医学科

研究背景:过敏性哮喘是一类常见的慢性呼吸系统疾病,在全球范围内具有较高的发病率和致死率,世界卫生组织(WHO)2015年度报告显示,目前全球有将近3亿人口患有不同程度的哮喘。大量不同类型的免疫细胞在肺脏内浸润和气道炎症反应是过敏性... 详细信息

研究背景:过敏性哮喘是一类常见的慢性呼吸系统疾病,在全球范围内具有较高的发病率和致死率,世界卫生组织(WHO)2015年度报告显示,目前全球有将近3亿人口患有不同程度的哮喘。大量不同类型的免疫细胞在肺脏内浸润和气道炎症反应是过敏性哮喘的病理生理学基础。B细胞作为一类重要的获得性免疫细胞,主要通过分泌抗体,介导抗原加工和提呈和分泌细胞因子参与哮喘的发生发展。新近研究发现,自噬在B细胞发育分化和免疫记忆的形成中发挥关键作用;而且最新研究发现,自噬水平在哮喘患者的支气管上皮细胞和肺脏浸润细胞内明显增加,上述研究提示B细胞自噬可能在哮喘发病中发挥重要的调节作用。目的:探讨B细胞自噬在过敏性哮喘发病过程中所发挥的潜在作用及其调节机制。方法:使用野生型小鼠制备OVA特异的哮喘模型并检测肺脏浸润B细胞内自噬水平的改变;使用野生型小鼠和B细胞自噬基因特异性缺乏的小鼠制备OVA特异的哮喘模型,并通过HE染色,PAS染色和ELISA等技术手段观察模型鼠的病理改变情况;利用流式细胞术,ELISA和Q-PCR等手段检测在哮喘病理状态下自噬对B细胞生物学功能的影响;利用细胞信号通路抑制剂和Co-IP等策略探讨哮喘病理状态下诱导B细胞自噬的可能机制。结果:我们发现:相比于对照组小鼠,哮喘小鼠肺脏浸润的B细胞内自噬水平明显升高;相比于野生型小鼠哮喘模型,B细胞自噬基因特异性缺乏的小鼠哮喘模型的病理改变明显减轻,表现为肺脏炎性细胞浸润减少,气道粘性分泌物产生减少,肺泡灌洗液Th2细胞因子产生降低,血清OVA特异性Ig E产生减少等;哮喘病理条件下,自噬主要调节B细胞对抗原的加工提呈能力而影响肺脏浸润T细胞的活化和细胞因子分泌,同时也影响B细胞的抗体分泌功能,但并不影响B细胞的细胞因子分泌状态;进一步研究发现,哮喘病理状态主要通过活化B细胞内JAK1/3信号通路,并进一步促进胞内自噬特异性ATG14-Beclin1-p150-PI3-Kinase复合体的形成和活化而促进自噬的起始和发展。结论:B细胞自噬可能通过增强B细胞抗原加工和提呈能力而促进过敏性哮喘的发生发展。

关键词：过敏性哮喘 B细胞自噬抗原加工和提呈

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2014年国内外免疫学研究重要进展

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中国免疫学杂志 2015年第1期31卷 1-11页

作者：刘娟曹雪涛第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室上海200433

转眼间已到与各位免疫学同仁共同回顾年度免疫学研究新热点新进展的第六个年头。总体而言,2014年,国际免疫学界在天然免疫识别与应答、T细胞免疫应答、免疫细胞分化发育、新型免疫细胞亚群鉴定与功能、免疫应答的表观遗传学调控机制、... 详细信息

转眼间已到与各位免疫学同仁共同回顾年度免疫学研究新热点新进展的第六个年头。总体而言,2014年,国际免疫学界在天然免疫识别与应答、T细胞免疫应答、免疫细胞分化发育、新型免疫细胞亚群鉴定与功能、免疫应答的表观遗传学调控机制、感染、炎症与肿瘤等疾病的免疫学机理等方面出现了许多令人兴奋的研究成果。国内免疫学者在传统优势领域如天然免疫信号调控、T细胞分化和功能、感染与肿瘤的免疫学机制等方向也均有令人瞩目的新成果。本文中,作者将遴选2014年国内外免疫学前沿热点领域一些有代表性的研究成果进行总结梳理,疏漏之处,请大家批评指正。

关键词：免疫学机理国内外 T细胞免疫应答天然免疫识别细胞分化发育免疫细胞亚群信号调控表观遗传学

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天然免疫受体RIG-Ⅰ的翻译后修饰及其功能调控

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中国免疫学杂志 2015年第7期31卷 1002-1007页

作者：张华韩超峰曹雪涛第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室上海200433

RIG-Ⅰ样受体（RIG-Ⅰ-like receptors,RLRs）属于DEx D/H box RNA解旋酶家族,在胞浆中感知RNA病毒相关分子模式（Pathogen-associated molecular patterns,PAMPs）,介导下游信号转导和转录因子的活化,启动机体抗病毒天然免疫应答。

关键词：抗病毒天然免疫翻译后修饰 RIG 免疫受体分子模式泛素化 Pathogen 结构域 RNA 维甲酸

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TBK1的磷酸化修饰与抗病毒天然免疫调控

TBK1的磷酸化修饰与抗病毒天然免疫调控

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第十一届全国免疫学学术大会

作者：李雪莲俞宙杨明金黄佳颖曹雪涛陈涛涌医学免疫学国家重点实验室暨第二军医大学免疫学研究所中国医学科学院医学分子生物学国家重点实验室

目的 :TBK1通过活化IRF3促进I型干扰素产生的作用在抗病毒天然免疫过程中发挥非常重要的功能。磷酸化和去磷酸化修饰作为蛋白质修饰的经典方式最为受到人们关注,但是TBK1的上游蛋白激酶的发现与研究却进步有限,直接介导TBK1磷酸化的蛋... 详细信息

目的 :TBK1通过活化IRF3促进I型干扰素产生的作用在抗病毒天然免疫过程中发挥非常重要的功能。磷酸化和去磷酸化修饰作为蛋白质修饰的经典方式最为受到人们关注,但是TBK1的上游蛋白激酶的发现与研究却进步有限,直接介导TBK1磷酸化的蛋白激酶(除GSK3β外)却未有报道。方法 :首先通过制备VSV病毒刺激的RAW264.7巨噬细胞全细胞裂解液利用TBK1抗体进行免疫共沉淀,

关键词：天然免疫 TBK1 磷酸化修饰蛋白激酶抗病毒 I型干扰素

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