检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 1996年第5期23卷 413-417页

作者：黄长晖傅继梁第二军医大学医学分子生物学开放实验室

ＤＮＡ损伤是引起基因突变，导致细胞恶性转化的重要原因．ＤＮＡ损伤的修复过程非常复杂，是与细胞周期调节、ＤＮＡ复制和ＤＮＡ转录等生命活动紧密相连的．首先ＤＮＡ修复需要细胞周期停滞，避免ＤＮＡ损伤进入子代细胞．其次，参与... 详细信息

ＤＮＡ损伤是引起基因突变，导致细胞恶性转化的重要原因．ＤＮＡ损伤的修复过程非常复杂，是与细胞周期调节、ＤＮＡ复制和ＤＮＡ转录等生命活动紧密相连的．首先ＤＮＡ修复需要细胞周期停滞，避免ＤＮＡ损伤进入子代细胞．其次，参与ＤＮＡ转录的某些基因产物参与ＤＮＡ损伤的识别，有利于转录链的优先修复．最后，ＤＮＡ修复系统ＮＥＲ、ＭＭＲ参与损伤修复．上述ＤＮＡ修复过程任何环节的异常，都将造成ＤＮＡ修复功能减弱，导致某些功能基因突变，从而导致细胞的恶性转化．

关键词：肿瘤细胞癌 DNA修复病理

来源：评论

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诱导免疫应答的一种新手段──基因免疫

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生物化学与生物物理进展 1996年第4期23卷 318-322页

作者：雷章恒潘星华傅继梁第二军医大学医学分子生物学开放实验室

近年来，一种诱导免疫应答的新手段─—基因免疫，正在引起人们越来越多的关注．所谓基因免疫，是将含有编码序列及必要表达调控元件的质粒ＤＮＡ，直接导入动物组织，经诱导动物免疫系统对编码序列所表达的蛋白质发生免疫应答，达到免... 详细信息

近年来，一种诱导免疫应答的新手段─—基因免疫，正在引起人们越来越多的关注．所谓基因免疫，是将含有编码序列及必要表达调控元件的质粒ＤＮＡ，直接导入动物组织，经诱导动物免疫系统对编码序列所表达的蛋白质发生免疫应答，达到免疫的目的．文章介绍了基因免疫的基本方法，综述了这一新兴领域中涉及传染病、肿瘤、移植等方面的研究成果及存在的问题。

关键词：免疫学基因免疫免疫应答

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MAPPING重组噬菌体中插入片段的“分/合”策略

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生物化学与生物物理进展 1998年第5期25卷 454-459页

作者：戴旭明薛红杨桦胡以平傅继梁第二军医大学医学分子遗传学开放实验室

随着胚胎干细胞基因打靶技术不断推广应用，如何有效地从小鼠基因组ＤＮＡ文库中筛选得到基因组ＤＮＡ并进行结构分析（如限制性内切酶酶切图谱分析，即ｍａｐｐｉｎｇ等）已成为一个被普遍关心的问题．设计应用了“分／合”的策略，即... 详细信息

随着胚胎干细胞基因打靶技术不断推广应用，如何有效地从小鼠基因组ＤＮＡ文库中筛选得到基因组ＤＮＡ并进行结构分析（如限制性内切酶酶切图谱分析，即ｍａｐｐｉｎｇ等）已成为一个被普遍关心的问题．设计应用了“分／合”的策略，即先对重组噬菌体插入片段制备一套亚克隆，在对亚克隆进行详细的ｍａｐｐｉｎｇ的基础上，再对完整的大分子噬菌体ＤＮＡ进行酶切分析，将两者相结合，可以分析得到完整的酶切图谱．应用此策略，简便准确地对所克隆的含有小鼠凝血因子ＩＸ基因组ＤＮＡ的大分子插入片段进行了限制性内切酶酶切图谱分析，结果得到了ＤＮＡ印迹等的验证．

关键词：重组噬菌体 “分/合”策略基因打靶 mapping

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联合治疗复发性肝癌血液循环性肝癌细胞的变化及意义

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中华肝脏病杂志 2001年第1期9卷 40-41页

作者：刘扬吴孟超钱光相张柏和陈汉傅继梁黄长辉第二军医大学东方肝胆外科医院上海200433 第二军医大学生物学教研室第二军医大学分子生物开放实验室

目的　探讨联合经肝动脉插管化疗栓塞术（ＴＡＣ）及无水酒精瘤内注射术（ＰＥＩ）治疗复发性肝癌周围静脉血液循环性肝癌细胞的变化及其意义。方法应用巢式ＲＴ－ＰＣＲ检测１９例复发性肝癌患者血液循环性肝癌细胞，并经ＴＡＣＥ及Ｐ... 详细信息

目的　探讨联合经肝动脉插管化疗栓塞术（ＴＡＣ）及无水酒精瘤内注射术（ＰＥＩ）治疗复发性肝癌周围静脉血液循环性肝癌细胞的变化及其意义。方法应用巢式ＲＴ－ＰＣＲ检测１９例复发性肝癌患者血液循环性肝癌细胞，并经ＴＡＣＥ及ＰＥＩ联合治疗观察其血液循环性肝癌细胞的变化。结果　血液循环性肝癌细胞表达阳性的７例复发性肝癌患者（３６８％），经ＴＡＣＥ及ＰＥＩ联合治疗后其血液循环性肝癌细胞均转为阴性（１００％，Ｐ＜０．０１）。结论　联合ＴＡＣＥ及ＰＥＩ治疗复发性肝癌可有效地杀灭血液中播散的循环性肝癌细胞，可预防肝癌再复发和转移的发生。

关键词：肝癌细胞聚合酶链反应药物联合治疗复发生肝癌血液循环性

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LIF受体α亚基和gp130细胞内区与U937细胞内信号分子Stat3的关系

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中华血液学杂志 1999年第12期20卷 621-623页

作者：刘厚奇汤淑萍刘善荣胡世杰杨玲朱奎傅继梁第二军医大学组织胚胎教研室上海200433 第二军医大学分子遗传学开放实验室

目的　探讨人白血病细胞系Ｕ９３７的白血病抑制因子（ＬＩＦ）受体α亚基和ｇｐ１３０亚基细胞内区与转录活性因子Ｓｔａｔ３的活性关系，旨在研究白血病细胞增殖和分化的机制。方法　用基因重组技术将２个基因在细胞内区截除（ｇ... 详细信息

目的　探讨人白血病细胞系Ｕ９３７的白血病抑制因子（ＬＩＦ）受体α亚基和ｇｐ１３０亚基细胞内区与转录活性因子Ｓｔａｔ３的活性关系，旨在研究白血病细胞增殖和分化的机制。方法　用基因重组技术将２个基因在细胞内区截除（ｇｐ１９０ＥＸ、ｇｐ１３０ＥＸ），并分别在Ｕ９３７细胞中表达，因其可与野生型受体竟争性结合ＬＩＦ，故可用免疫印迹法分析受体细胞内区截除后Ｓｔａｔ３的表达水平及该信号分子酪氨酸磷酸化。结果　转染ｇｐ１９０ＥＸ和ｇｐ１３０ＥＸ的Ｕ９３７细胞Ｓｔａｔ３表达量增加；Ｓｔａｔ３酪氨酸磷酸化水平下降。结论　ＬＩＦ受体α亚基和ｇｐ１３０的细胞内区均参与了Ｓｔａｔ３的激活和Ｕ９３７细胞的分化。

关键词：白血病细胞株 U937 LIF受体 gp130细胞

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肝癌患者血液AFPmRNA与不同临床参数的关系

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中华肝脏病杂志 1998年第3期6卷 139-140页

作者：刘扬张柏和钱光相陈汉吴孟超傅继梁黄长辉第二军医大学东方肝胆外科医院上海200438 第二军医大学分子生物开放实验室

目的探讨血液 AFP mRNA 与肝癌分期、门静脉癌栓、卫星结节、肿瘤大小、血清 AFP 浓度及远处转移的关系。方法应用巢式 RT-PCR 检测78例肝癌患者周围静脉血液中 AFP mRNA。结果 35例肝癌患者周围静脉血液中检出 AFP mRNA(44.87%)。结论... 详细信息

目的探讨血液 AFP mRNA 与肝癌分期、门静脉癌栓、卫星结节、肿瘤大小、血清 AFP 浓度及远处转移的关系。方法应用巢式 RT-PCR 检测78例肝癌患者周围静脉血液中 AFP mRNA。结果 35例肝癌患者周围静脉血液中检出 AFP mRNA(44.87%)。结论血液 AFP mRNA 与肝癌分期、门静脉癌栓、肝内卫星结节、肿瘤大小,血清 AFP 浓度及远处转移有显著的相关性(P<0.01),可能成为判断肝癌术后复发或转移的有效指标。

关键词：肝细胞癌甲脂蛋白肝癌 mRNA

来源：评论

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基于pSPORT1质粒的转基因小鼠家系的建立

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第二军医大学学报 1998年第1期19卷 9-12页

作者：黎怀星李建秀杨桦王新民胡以平王肖鹏孙伟郝光荣傅继梁第二军医大学基础医学部医学分子遗传学开放实验室第二军医大学实验动物中心

目的：建立在基因组中整合有ｐＳＰＯＲＴ１质粒的转基因小鼠家系，为体内基因突变研究提供有效的动物模型。

关键词：转基因动物小鼠家系质粒 pSORT1 基因突变

来源：评论

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中国人遗传性高铁血红蛋白血症NADH-细胞色素b5还原酶基因L72P突变

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中华血液学杂志 1998年第4期19卷 195-197页

作者：吴玉水黄长晖朱忠勇王瑶唐玉钗郑培蒸南京军区福州总医院医学检验中心第二军医大学分子遗传学开放实验室

目的：鉴定导致中国人遗传性高铁血红蛋白血症（ＲＣＭ）的ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶（ｂ５Ｒ）基因突变类型，探讨ＲＣＭ发病的分子基础。方法：逆转录－聚合酶链反应产物直接测序和ｃＤＮＡ克隆测序分析先证者的ｂ５Ｒ编码基因；... 详细信息

目的：鉴定导致中国人遗传性高铁血红蛋白血症（ＲＣＭ）的ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶（ｂ５Ｒ）基因突变类型，探讨ＲＣＭ发病的分子基础。方法：逆转录－聚合酶链反应产物直接测序和ｃＤＮＡ克隆测序分析先证者的ｂ５Ｒ编码基因；限制性酶切分析其基因组ＤＮＡ。结果：发现一例ＲＣＭ患者ｂ５Ｒ基因第７２密码子存在新的错义突变（ＣＴＣ→ＣＣＣ）。结论：该突变导致ｂ５Ｒ蛋白第７２位亮氨酸被脯氨酸替换（Ｌ７２Ｐ）是该先证者致病的分子基础；进一步证实Ⅰ型ＲＣＭ患者的ｂ５Ｒ基因突变多发生在近５′端部分。

关键词： RCM 血红蛋白血症细胞色素b5 还原酶基因突变

来源：评论

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外源性野生型P16^(ink4a)基因在兔损伤动脉壁的表达

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中国病理生理杂志 2000年第11期16卷 1159-1162,2002页

作者：张亚文张国元黄长晖邹祝英第二军医大学附属长征医院心内科上海200003 第二军医大学分子遗传学开放实验室上海200433

目的 :研究转染外源性野生型P16 ink4a基因逆转录病毒重组质粒对兔颈总动脉壁损伤后再狭窄形成的抑制作用。方法 :构建野生型P16 ink4a基因的复制缺陷型逆转录病毒重组质粒 ,经包装细胞包装后取得高滴度病毒液 ,并以此病毒转染损伤后即... 详细信息

目的 :研究转染外源性野生型P16 ink4a基因逆转录病毒重组质粒对兔颈总动脉壁损伤后再狭窄形成的抑制作用。方法 :构建野生型P16 ink4a基因的复制缺陷型逆转录病毒重组质粒 ,经包装细胞包装后取得高滴度病毒液 ,并以此病毒转染损伤后即刻的兔颈总动脉。应用膜杂交和原位杂交技术检测损伤动脉壁的外源性P16 ink4a基因表达 ,并通过病理学等方法观察动脉内膜增生情况及管腔狭窄程度。结果 :逆转录病毒重组质粒可有效地将外源基因P16 ink4a转入兔体内动脉壁并在其中表达。P16 ink4a基因转染组动物的损伤动脉壁内膜平滑肌细胞增生 (11 80± 3 5 4vs 2 5 2 0± 5 12 ,P <0 0 5 )和管腔狭窄程度 (5 0 2 %± 9 6 0 %vs 82 2 %±12 83% ,P <0 0 5 )均显著低于对照组。结论 :体内转染外源性野生型抑癌基因P16

关键词：颈总动脉壁损伤 P16^ink4a基因基因表达

来源：评论

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重组人白血病抑制因子受体α亚基细胞外区的分子克隆

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第二军医大学学报 1997年第2期18卷 105-108页

作者：刘厚奇朱奎傅继梁第二军医大学基础医学部医学分子生物学开放实验室法国波尔多大学免疫学实验室第二军医大学基础医学部生物学教研室

目的：纯化可溶性白血病抑制因子（ＬＩＦ）受体，获得特异性免疫原并利用衰变加速因子（ＤＡＦ）的附膜特性探讨ＬＩＦ受体的生物特性和功能。方法：采用基因重组技术，将ＬＩＦ受体α亚基（ｇｐ１９０）细胞外区（ｇｐ１９０ｓｏｌ）... 详细信息

目的：纯化可溶性白血病抑制因子（ＬＩＦ）受体，获得特异性免疫原并利用衰变加速因子（ＤＡＦ）的附膜特性探讨ＬＩＦ受体的生物特性和功能。方法：采用基因重组技术，将ＬＩＦ受体α亚基（ｇｐ１９０）细胞外区（ｇｐ１９０ｓｏｌ）的Ｃ端与ＤＡＦＣ端３７个氨基酸连接，再将该重组基因载入ｐＧＥＸ５Ｔ表达系统。结果：在Ｅ．ｃｏｌｉＸＬ１中可高度表达一种Ｎ端为谷胱甘肽Ｓ转移酶和Ｃ端为１９０ｓｏｌＤＡＦ的融合重组蛋白。此蛋白在ＸＬ１中表达产物为不溶性包涵体，以变性剂８ｍｏｌ／Ｌ尿素溶解并复性后，可与交联在亲和层析柱上的谷胱甘肽（Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ）结合，从而一次性分离ＬＩＦ受体α亚基细胞外区。结论：大分子糖蛋白也能采用ｐＧＥＸ５Ｔ系统在大肠杆菌中表达，并通过谷胱甘肽亲和法纯化而作为免疫原。

关键词：白血病抑制因子受体分子克隆重组蛋白 GST

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