检索结果-内蒙古大学图书馆

中华骨科杂志 2002年第3期22卷 176-178页

作者：宋海涛贾连顺陈坚陈哲宇路长林田万成解放军第一七中心医院济南军区创伤骨科中心烟台264002 第二军医大学长征医院骨科第二军医大学分子遗传教研室第二军医大学神经生物教研室

目的探讨大鼠坐骨神经切断后,GDNFmRNA在两侧断端的表达变化及其意义。方法切断SD大鼠左侧坐骨神经,在不同时间、应用半定量RT-PCR方法观察两侧断端GDNFmRNA的表达变化。结果坐骨神经切断前,GDNFmRNA在两侧坐骨神经微量表达,坐骨神经切... 详细信息

目的探讨大鼠坐骨神经切断后,GDNFmRNA在两侧断端的表达变化及其意义。方法切断SD大鼠左侧坐骨神经,在不同时间、应用半定量RT-PCR方法观察两侧断端GDNFmRNA的表达变化。结果坐骨神经切断前,GDNFmRNA在两侧坐骨神经微量表达,坐骨神经切断后远断端表达逐渐增加(1、7、14、28d分别增加20%、60%、85%、90%),近断端表达逐渐减少(1、7、14、28d分别减少10%、38%、45%、52%)。结论坐骨神经切断后断端GDNFmRNA表达变化是由于“胞体-轴突-靶器官”轴中断造成的。此结论为应用外源性GDNF治疗脊髓损伤提供了理论依据。

关键词：神经生长因子坐骨神经脊神经根切断术运动神经元基因表达

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联合治疗复发性肝癌血液循环性肝癌细胞的变化及意义

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中华肝脏病杂志 2001年第1期9卷 40-41页

作者：刘扬吴孟超钱光相张柏和陈汉傅继梁黄长辉第二军医大学东方肝胆外科医院上海200433 第二军医大学生物学教研室第二军医大学分子生物开放实验室

目的　探讨联合经肝动脉插管化疗栓塞术（ＴＡＣ）及无水酒精瘤内注射术（ＰＥＩ）治疗复发性肝癌周围静脉血液循环性肝癌细胞的变化及其意义。方法应用巢式ＲＴ－ＰＣＲ检测１９例复发性肝癌患者血液循环性肝癌细胞，并经ＴＡＣＥ及Ｐ... 详细信息

目的　探讨联合经肝动脉插管化疗栓塞术（ＴＡＣ）及无水酒精瘤内注射术（ＰＥＩ）治疗复发性肝癌周围静脉血液循环性肝癌细胞的变化及其意义。方法应用巢式ＲＴ－ＰＣＲ检测１９例复发性肝癌患者血液循环性肝癌细胞，并经ＴＡＣＥ及ＰＥＩ联合治疗观察其血液循环性肝癌细胞的变化。结果　血液循环性肝癌细胞表达阳性的７例复发性肝癌患者（３６８％），经ＴＡＣＥ及ＰＥＩ联合治疗后其血液循环性肝癌细胞均转为阴性（１００％，Ｐ＜０．０１）。结论　联合ＴＡＣＥ及ＰＥＩ治疗复发性肝癌可有效地杀灭血液中播散的循环性肝癌细胞，可预防肝癌再复发和转移的发生。

关键词：肝癌细胞聚合酶链反应药物联合治疗复发生肝癌血液循环性

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乙肝核酸疫苗安全性的初步研究

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中国新药杂志 2005年第9期14卷 1141-1144页

作者：佘佳红袁伯俊陆国才胡振林陈黛影第二军医大学医学遗传教研室第二军医大学新药评价中心第二军医大学新药评价中心上海200433

目的:研究乙肝核酸疫苗对小鼠和豚鼠的长期毒性。方法:健康小鼠和豚鼠分别按体重随机分为低、中、高剂量组(小鼠剂量分别为0·5,1·5,4·5mg·kg-1,豚鼠剂量分别为0·1,0·4,0·8mg·kg-1)和溶媒对照组... 详细信息

目的:研究乙肝核酸疫苗对小鼠和豚鼠的长期毒性。方法:健康小鼠和豚鼠分别按体重随机分为低、中、高剂量组(小鼠剂量分别为0·5,1·5,4·5mg·kg-1,豚鼠剂量分别为0·1,0·4,0·8mg·kg-1)和溶媒对照组。2种动物均每周后肢肌内注射2次,共8周。末次给药后24h和停药后30d分别测血液学、血液生化、病理检查和小鼠的各项免疫指标(包括IgG1和IgG2a亚型血清水平、血清抗核抗体、血清抗体总水平、γ-干扰素(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)血清水平、外周血中各淋巴细胞亚群的分布情况和染色体整合检测)。结果:两种动物各剂量组的各项常规检测指标均未见有任何异常变化,与空白及溶媒对照组相比均无显著性差异。小鼠免疫指标未出现与治疗目的无关的改变。结论:受试疫苗在两种动物未观察到明显的生化、病理学、免疫学指标异常。小鼠和豚鼠肌内注射乙肝核酸疫苗的安全剂量分别为4·5和1·2mg·kg-1。

关键词：乙肝核酸疫苗小鼠豚鼠长期毒性

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人巨核白血病细胞诱导分化后差异表达基因的mRNA差别显示和克隆

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第二军医大学学报 1999年第1期20卷 14-17页

作者：韩建中戴建新林文李川晟童书鹏程涛陆德如第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室第二军医大学药学院药理学教研室第二军医大学长海医院

目的：克隆巨核白血病细胞诱导分化后表达变化的ｍＲＮＡ，从中寻找对诱导分化起关键作用的基因，最终揭示巨核白血病细胞诱导分化的分子机制。方法：人巨核白血病细胞ＨＩＭｅｇ经１３－顺式维甲酸处理４ｄ后，收集细胞总ＲＮＡ，进行... 详细信息

目的：克隆巨核白血病细胞诱导分化后表达变化的ｍＲＮＡ，从中寻找对诱导分化起关键作用的基因，最终揭示巨核白血病细胞诱导分化的分子机制。方法：人巨核白血病细胞ＨＩＭｅｇ经１３－顺式维甲酸处理４ｄ后，收集细胞总ＲＮＡ，进行ｍＲＮＡ差别显示、ｃＤＮＡ片段克隆和序列分析。结果：获得５个差示ｃＤＮＡ片段，经ＲＮＡ点杂交分析后发现其中３个为假阳性，１个因没有杂交信号而无法确定，只有１个ｃＤＮＡ片段得到证实，其对应的ｍＲＮＡ在诱导分化后表达下降。该ｃＤＮＡ片段的核苷酸序列已在ＧｅｎＢａｎｋ中登录，登录号为ＡＦ０２６５２６。结论：克隆到一个未知基因的ｃＤＮＡ片段，其全长ｃＤＮＡ序列。

关键词：巨核细胞白血病诱导分化克隆基因表达 mRNA

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结直肠癌患者预后与膜联蛋白A2高磷酸化的关系

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中华实验外科杂志 2014年第3期31卷 630-633页

作者：郝立强傅传刚薛赓洪永刚张艳第二军医大学附属长海医院肛肠外科上海200433 第二军医大学医学遗传教研室第二军医大学附属长海医院妇产科上海200433

目的探讨膜联蛋白A2在结直肠癌中的磷酸化水平及其与临床病理特征及肿瘤预后的相关性.方法分析2006年8月至2007年7月在第二军医大学附属长海医院肛肠外科进行治疗的183例散发性结直肠癌患者的临床及随访资料.建立患者肿瘤标本组织芯片... 详细信息

目的探讨膜联蛋白A2在结直肠癌中的磷酸化水平及其与临床病理特征及肿瘤预后的相关性.方法分析2006年8月至2007年7月在第二军医大学附属长海医院肛肠外科进行治疗的183例散发性结直肠癌患者的临床及随访资料.建立患者肿瘤标本组织芯片,对磷酸化膜联蛋白A2的水平进行免疫组织化学检测并对结果进行统计分析.结果肿瘤组织中磷酸化膜联蛋白A2的水平高于非恶性的对照组织（P＜0.01）.患者肿瘤组织中较高的磷酸化膜联蛋白A2水平与T分期（P＜0.01）、N分期（P＜0.05）、肝转移（P＜0.01）、TNM分期（P＜0.01）、Duke分期（P＜0.01）、复发（P＜0.01）、肿瘤致死（P＜0.05）密切相关.生存曲线分析显示肿瘤组织中磷酸化膜联蛋白A2水平较低的患者其未复发率（P＜0.01）和总体生存率（P＜0.05）均高于磷酸化膜联蛋白A2水平较高的患者.多因素分析显示肿瘤组织中磷酸化膜联蛋白A2的水平可以作为衡量患者未复发率（P＜0.05）和总体生存率（P＜0.05）的独立因素.结论结直肠癌患者肿瘤组织中磷酸化膜联蛋白A2的水平与肿瘤分期和临床特征密切相关.

关键词：膜联蛋白A2 结直肠肿瘤磷酸化预后

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诱导活化的外周血单个核细胞THANK表达的初步研究

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细胞与分子免疫学杂志 2001年第4期17卷 304-306页

作者：吴东沈锋娄永华焦炳华吴孟超第二军医大学东方肝胆外科医院上海200438 第二军医大学分子毒理学教研室上海200433

目的分析不同刺激下外周血单个核细胞(PBMC)中THANK基因的表达，并克隆全长的人THANK基因。方法采用将常规方法分离的外周血单个核细胞(PBMC)培养于含100ml/L FCS的RPMI 1640中，并以不同浓度的LPS、TNF-α、IL-2、IFN-γ、PHA及PMA刺... 详细信息

目的分析不同刺激下外周血单个核细胞(PBMC)中THANK基因的表达，并克隆全长的人THANK基因。方法采用将常规方法分离的外周血单个核细胞(PBMC)培养于含100ml/L FCS的RPMI 1640中，并以不同浓度的LPS、TNF-α、IL-2、IFN-γ、PHA及PMA刺激不同时间。以RT-PCR法，分析PMBC中THANK基因的转录表达，并克隆相应的全长人THANK基因。结果RT-PCR分析表明，当用IFN-γ刺激PMBC 72h后，可诱导THANK基因明显表达;而IL-2、LPS、TNF-α、PHA和PMA则不能诱导其表达。采用PCR产物克隆的方法，克隆了人THANK基因，并经DNA序列测定证实。结论克隆得到了人THANK基因，为进一步研究THANK的功能打下了基础。

关键词：外周血单个核细胞 THANK 基因克隆基因表达肿瘤 TNF超家族

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卵清白蛋白特异性T辅助细胞1/T辅助细胞2细胞系的建立

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上海医学 2005年第12期28卷 1000-1003页

作者：修清玉王桂芳杨丹榕施柯黎怀星孙树汉第二军医大学附属长征医院呼吸内科上海200003 第二军医大学基础医学部医学遗传教研室

目的体外建立可长期培养的抗原特异性的T辅助细胞(Th)1/Th2克隆及细胞系,并分析其对抗原的反应情况及其产生细胞因子的情况。方法采用卵清白蛋白(OVA)免疫BALB/c小鼠,取淋巴结细胞在体外用同系脾细胞和OVA反复刺激,然后分别用白介素(IL... 详细信息

目的体外建立可长期培养的抗原特异性的T辅助细胞(Th)1/Th2克隆及细胞系,并分析其对抗原的反应情况及其产生细胞因子的情况。方法采用卵清白蛋白(OVA)免疫BALB/c小鼠,取淋巴结细胞在体外用同系脾细胞和OVA反复刺激,然后分别用白介素(IL)-2、γ干扰素(IFN-γ)及IL-2I、L-4共同培养,并同时加入同系脾细胞和OVA,进行Th1和Th2克隆的诱导,然后通过有限稀释法进行克隆化培养。对克隆化的细胞用酶联免疫吸附试验(ELISA)和流式细胞仪分别检测其分泌细胞因子的情况及细胞的表面标志。结果各获得2株Th1/Th2细胞系,它们分泌的细胞因子分别为IL-2、IFN-γ和IL-4I、L-5I、L-10等。结论成功建立抗原特异性Th1/Th2细胞系。

关键词： Th1/Th2细胞系克隆化培养卵蛋白

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定点突变小鼠凝血因子Ⅸ胚胎干细胞基因打靶载体的构建

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云南大学学报（自然科学版） 1999年第S3期21卷 255-256页

作者：李坚戴旭明杨松傅继梁第二军医大学医学遗传教研室上海200433

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1，25（OH）_2D_3及其类似物调节人原始巨核白血病细胞系增殖分化的机制

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第二军医大学学报 1995年第6期16卷 507-512页

作者：宋亮年郭嘉程涛第二军医大学基础医学部病理生理学教研室第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室第二军医大学长海医院血液内科

１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３及其两种新型类似物（ＭＣ９０３和ＥＢ１０８９）对人原始巨核白血病细胞系ＨＩＭｅｇ的增殖分化过程有重要调节作用。本研究利用分子杂交及逆转录－聚合酶链反应首次证明，ＨＩＭｅｇ细胞中有１，２５（ＯＨ... 详细信息

１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３及其两种新型类似物（ＭＣ９０３和ＥＢ１０８９）对人原始巨核白血病细胞系ＨＩＭｅｇ的增殖分化过程有重要调节作用。本研究利用分子杂交及逆转录－聚合酶链反应首次证明，ＨＩＭｅｇ细胞中有１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３受体（ＶＤＲ）ｍＲＮＡ的表达，强烈提示１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３对ＨＩＭｅｇ细胞的作用是由ＶＤＲ介导的。同时还发现，１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３及其类似物、维甲酸在调节ＨＩＭｅｇ细胞增殖分化过程中，Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达水平迅速降低，６ｈ时已基本达到最低水平，提示这些作用因子对ＨＩＭｅｇ细胞的抑制增殖和诱导分化作用是和Ｃ－ｍｙｃ癌基因的表达改变密切相关的。

关键词： 1,25(OH)2D3 白血病巨核系诱导分化

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rhG-CSF cDNA高表达质粒的构建及其在COS7细胞中的表达

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第二军医大学学报 1997年第4期18卷 313-315页

作者：陈坚曹韫旭陆德如第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室第二军医大学基础医学部生物学教研室

目的：构建一个能在哺乳动物细胞中高表达人粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）ｃＤＮＡ的重组质粒。方法：利用化学合成引物，进行ＰＣＲ，对人Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ５＇ＡＵＧ侧翼序列进行翻译优化突变。测序确证后，重组入表达载体ｐＥ... 详细信息

目的：构建一个能在哺乳动物细胞中高表达人粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）ｃＤＮＡ的重组质粒。方法：利用化学合成引物，进行ＰＣＲ，对人Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ５＇ＡＵＧ侧翼序列进行翻译优化突变。测序确证后，重组入表达载体ｐＥＤ，构建成质粒ｐＥＤ－ＧＣＳＦ，用ＤＥＡＥ－Ｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ７细胞，ＥＬＩＳＡ法定量测定ｒｈＧ－ＣＳＦ表达水平。结果：转染ＣＯＳ７细胞后４８ｈ收集的上清ｒｈＧ－ＣＳＦ表达量为５２ｎｇ／ｍｌ，７２ｈ为２３０ｎｇ／ｍｌ，显示ｒｈＧ－ＣＳＦ获得了暂时性高表达。结论：ｐＥＤ－ＧＣＳＦ是一个能在哺乳动物细胞中高效表达ｒｈＧ－ＣＳＦ的真核表达质粒。

关键词：基因重组 G-CSF 多肽生长因子

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