检索结果-内蒙古大学图书馆

中华内分泌代谢杂志 2006年第1期22卷 49-51页

作者：陶弢邹大进张嘉陈蕊雯曲伸张军第二军医大学附属长海医院内分泌代谢科第二军医大学遗传教研室长海医院中心实验室

目的确定蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)基因1484插入G(insG)变异是否与中国人肥胖相关。方法选取上海地区中国人305例,用PCR/SacII酶解法检测1484insG突变,突变的样本全部进行DNA序列分析。结果正常对照组、单纯性肥胖、肥胖合并2型糖尿病... 详细信息

目的确定蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)基因1484插入G(insG)变异是否与中国人肥胖相关。方法选取上海地区中国人305例,用PCR/SacII酶解法检测1484insG突变,突变的样本全部进行DNA序列分析。结果正常对照组、单纯性肥胖、肥胖合并2型糖尿病组各发现8例、10例、16例PTP1B1484insG突变,正常对照组的1484insG突变率与单纯肥胖组、肥胖总组比较差异无统计学意义。但正常对照组与肥胖合并2型糖尿病组比较差异有统计学意义(P<0.05),单纯肥胖组与肥胖合并2型糖尿病组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论PTP1B基因1484insG突变与中国人肥胖伴2型糖尿病有相关性,可能是中国肥胖人群发生2型糖尿病的遗传因素之一。

关键词：肥胖症基因突变蛋白酪氨酸磷酸酶1B

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肝细胞癌患者血液AFP mRNA检测的临床意义

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第二军医大学学报 1999年第2期20卷 121-123页

作者：刘扬张柏和钱光相陈汉吴孟超傅继梁黄长辉第二军医大学东方肝胆外科医院第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室

目的：探讨肝细胞癌患者血液甲胎蛋白（ＡＦＰ）ｍＲＮＡ检测的临床意义。方法：取９３例肝癌患者、１５例肝炎后肝硬化患者、１２例慢性肝炎患者及１０例健康人静脉血各５ｍｌ，应用巢式ＲＴ－ＰＣＲ检测其周围静脉血中ＡＦＰｍＲＮＡ... 详细信息

目的：探讨肝细胞癌患者血液甲胎蛋白（ＡＦＰ）ｍＲＮＡ检测的临床意义。方法：取９３例肝癌患者、１５例肝炎后肝硬化患者、１２例慢性肝炎患者及１０例健康人静脉血各５ｍｌ，应用巢式ＲＴ－ＰＣＲ检测其周围静脉血中ＡＦＰｍＲＮＡ。结果：在５０个肝癌血标本中检测到ＡＦＰｍＲＮＡ（５３．８％），而对照组中未检测到１例。ＡＦＰｍＲＮＡ检出率与肝癌分期、血清ＡＦＰ浓度、肝内转移、门静脉癌栓、肿瘤大小及远处转移有明显相关（Ｐ＜０．０５）。２１例伴有肝外远处转移的原发性肝癌血标本均被检测到ＡＦＰｍＲＮＡ（１００％），没有远处转移的７２例肝癌血标本中有２９例检测到ＡＦＰｍＲＮＡ（４０．３％）。结论：ＡＦＰｍＲＮＡ可以作为肝癌细胞血液转移的标志。

关键词：肝肿瘤 mRNA 甲胎蛋白类肝细胞癌

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转基因动物研究的现状与展望

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中国科学基金 2000年第1期14卷 23-26页

作者：戴旭明李坚傅继梁第二军医大学医学遗传教研室医学分子遗传学开放实验室上海200433

简要评述了国内外转基因动物研究的现状,归纳了目前常用的几种转基因动物遗传修饰的策略,比较分析了几种转基因动物建立途径的特点以及存在的问题。在此基础上介绍了国家自然科学基金重点项目“医学转基因动物模型研究”的研究内容,并... 详细信息

简要评述了国内外转基因动物研究的现状,归纳了目前常用的几种转基因动物遗传修饰的策略,比较分析了几种转基因动物建立途径的特点以及存在的问题。在此基础上介绍了国家自然科学基金重点项目“医学转基因动物模型研究”的研究内容,并对转基因动物研究的未来发展作了展望。

关键词：转基因动物遗传修饰基因组修饰

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差别显示mRNA法的改良

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第二军医大学学报 1996年第4期17卷 383-385页

作者：戴建新王易伦刘宇健郭嘉陆德如第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室

差别显示ｍＲＮＡ法的改良戴建新，王易伦，刘宇健，郭嘉，陆德如分析一对细胞或组织在不同状态下基因表达的差异，是分子生物学研究领域的热点之一。目前，研究方法主要是：递减杂交［１］和差示杂交［２］；但这些方法技术难度大、重... 详细信息

差别显示ｍＲＮＡ法的改良戴建新，王易伦，刘宇健，郭嘉，陆德如分析一对细胞或组织在不同状态下基因表达的差异，是分子生物学研究领域的热点之一。目前，研究方法主要是：递减杂交［１］和差示杂交［２］；但这些方法技术难度大、重复率低且工作量大。差别显示ｍＲＮＡ...

关键词： mRNA 基因筛选聚合酶链反应

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绿色荧光蛋白在大肠杆菌中的克隆及高效表达

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第二军医大学学报 1997年第5期18卷 406-408页

作者：陆惠萍周凤娟孙树汉第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室

目的：在大肠杆菌中克隆及高效表达绿色荧光蛋白基因（ＧＦＰ－Ｓ６５Ｔ）。方法：ＰＣＲ法克隆ＧＦＰ－Ｓ６５ＴｃＤＮＡ并改造其两端的限制性内切酶位点，构建重组原核表达载体ｐＲＳＥＴ－ＧＦＰＳ６５Ｔ。结果：在ＩＰＴＧ诱导条件... 详细信息

目的：在大肠杆菌中克隆及高效表达绿色荧光蛋白基因（ＧＦＰ－Ｓ６５Ｔ）。方法：ＰＣＲ法克隆ＧＦＰ－Ｓ６５ＴｃＤＮＡ并改造其两端的限制性内切酶位点，构建重组原核表达载体ｐＲＳＥＴ－ＧＦＰＳ６５Ｔ。结果：在ＩＰＴＧ诱导条件下，ＧＦＰ－Ｓ６５Ｔ的表达量占细菌总蛋白量的１５％以上。细菌培养物及其超声上清在长波紫外线的照射下，发出明亮的绿色荧光。结论：ＧＦＰ－Ｓ６５Ｔ可以作为原核细胞中的报告基因，用标准的长波紫外线即可检测其表达。

关键词：基因表达大肠杆菌绿色荧光蛋白克隆

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人促红细胞生成素在大肠杆菌中融合高表达：稀有密码子对外源蛋白翻译速率的影响

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第二军医大学学报 1995年第4期16卷 323-325页

作者：郭瀛军王易伦陆惠萍陆德如第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室

本实验分别用两种融合表达载体（ｐＧＥＸ－２Ｔ及ｐＤＳ－６Ｈ）在大肠杆菌ＸＬ１－Ｂｌｕｅ中表达人促红细胞生成素（ｈ－ＥＰＯ）。结果发现，虽然ｈ－ＥＰＯ基因中大肠杆菌使用频率为０％或１％的密码子占密码子总量的１４．３％，... 详细信息

本实验分别用两种融合表达载体（ｐＧＥＸ－２Ｔ及ｐＤＳ－６Ｈ）在大肠杆菌ＸＬ１－Ｂｌｕｅ中表达人促红细胞生成素（ｈ－ＥＰＯ）。结果发现，虽然ｈ－ＥＰＯ基因中大肠杆菌使用频率为０％或１％的密码子占密码子总量的１４．３％，但实验中却取得了较高的蛋白表达量。ｐＧＥＸ－２Ｔ和ｐＤＳ－６Ｈ中表达的融合蛋白（分子量：４４４００和２３８００）分别占细菌总蛋白的２９．７％和１７．５％。从而提示，一个基因中的密码子使用频率与翻译延长速率之间可能不是一种简单的对应关系。表达载体ｐＧＥＸ－２Ｔ中５＇融合基因长度达１３００ｂｐ，而ｐＤＳ－６Ｈ中仅为３６ｂｐ，而ｐＤＳ－６Ｈ但两者表达水平却无显著差异，因此作为翻译起始限制因素的翻译起始区的ＡＴＧ下游顺序仅需长约３６个核苷酸。

关键词：促红细胞生成素密码子翻译基因表达大肠杆菌

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重组人促红细胞生成素cDNA在CHO-dhfr^-细胞中的高效表达

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第二军医大学学报 1998年第6期19卷 530-532页

作者：陈坚刘小萍曹韫旭陆德如第二军医大学基础医学部分子遗传学教研室

目的：使重组人促红细胞生成素（ｒｈＥＰＯ）在ＣＨＯ细胞中获得高效表达。方法：利用基因重组构建了两个人促红细胞生成素ｃＤＮＡ重组表达质粒ｐＥＤ－ＥＰＯ和ｐＥＦ－ＥＰＯ，分别用ＤＥＡＥ－ｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ７细胞，... 详细信息

目的：使重组人促红细胞生成素（ｒｈＥＰＯ）在ＣＨＯ细胞中获得高效表达。方法：利用基因重组构建了两个人促红细胞生成素ｃＤＮＡ重组表达质粒ｐＥＤ－ＥＰＯ和ｐＥＦ－ＥＰＯ，分别用ＤＥＡＥ－ｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ７细胞，作瞬时高表达，选ｐＥＦ－ＥＰＯ用磷酸钙共沉淀法转染ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－细胞，加入氨甲喋呤（ＭＴＸ）扩增、选择，作稳定性高表达。结果：ｐＥＤ－ＥＰＯ和ｐＥＦ－ＥＰＯ转染ＣＯＳ７细胞后７２ｈ表达量分别为１７．８和２１．０ｎｇ／ｍｌ，ｐＥＦ－ＥＰＯ转染ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－细胞，随着ＭＴＸ浓度的增加，ＣＨＯ－ｄｈｆｒ＋的克隆数减少，而混合克隆的ＥＰＯ表达量逐渐升高。筛选了一株稳定性高表达ｒｈＥＰＯ的细胞株，其３ｄ表达量为１６μｇ／ｍｌ。

关键词：红细胞生成素基因重组真核表达

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囊虫病诊断用抗原编码cDNA的分子克隆

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1997年第1期15卷 15-20页

作者：孙树汉王俊霞陈蕊雯陆惠萍彭郁葱王朝霞第二军医大学分子遗传学教研室上海200433 河北医科大学分子生物学教研室石家庄050017

目的 :克隆与分析囊虫病诊断用抗原及其编码基因。方法 :采用基因重组技术 ,构建来源于猪囊尾蚴 m RNA的 c DNA文库。以囊虫病患者、囊虫病病猪的血清为探针从 c DNA文库中筛选出目的克隆。结果 :获得人、猪共同抗原 2个 (分子量分别为 ... 详细信息

目的 :克隆与分析囊虫病诊断用抗原及其编码基因。方法 :采用基因重组技术 ,构建来源于猪囊尾蚴 m RNA的 c DNA文库。以囊虫病患者、囊虫病病猪的血清为探针从 c DNA文库中筛选出目的克隆。结果 :获得人、猪共同抗原 2个 (分子量分别为 2 8k Da和 18k Da) ,人特异性抗原和猪特异性抗原各 1个 (分子量为 34 k Da、 14k Da)。这些抗原的编码克隆分别命名为λc C1、λc C2、λc H1及 λc P1。c C1c DNA含有编码 2 8k Da的人、猪共同抗原的完整基因 ,全长 10 70 bp,起始密码 ( ATG)从自 2 2 bp,终止密码 ( TGA)结于 74 7bp,长为 74 7bp的开放阅读框架编码由 2 4 9个氨基酸组成的多肽 ,其理论推导分子量为 2 7.36k Da。结论 :以 c C1等融合蛋白为诊断用抗原 ,具有高度的特异性和较理想的敏感性。

关键词：囊尾蚴病猪囊尾蚴抗原多肽分子克隆

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乙型肝炎病毒(ayw型)转基因小鼠的建立

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第二军医大学学报 1997年第3期18卷 201-204页

作者：雷章恒李建秀余宏宇王新民孙伟潘星华郝光荣王肖鹏傅继梁胡以平第二军医大学基础医学部生物学教研室和医学分子遗传学开放实验室第二军医大学基础医学部病理解剖学教研室第二军医大学实验动物中心

目的：建立遗传上稳定的、带有乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ａｙｗ亚型的转基因小鼠品系。方法：通过对受精卵显微注射进行基因转移的途径制备转基因小鼠，以ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、ＥＬＩＳＡ、组织切片免疫组化和透射电镜等方法，... 详细信息

目的：建立遗传上稳定的、带有乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ａｙｗ亚型的转基因小鼠品系。方法：通过对受精卵显微注射进行基因转移的途径制备转基因小鼠，以ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、ＥＬＩＳＡ、组织切片免疫组化和透射电镜等方法，分析所导入ＤＮＡ在转基因小鼠体内的功能情况。结果：得到２１只建立者小鼠，在它们的血清中检测到了ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的存在，还在肝细胞中观察到了ＨＢＶ样病毒颗粒。结论：ＨＢＶ基因组ＤＮＡ已经整合至小鼠的基因组，其中的基因能够表达，整个基因组ＤＮＡ还能复制，并被有效地包装。

关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠动物模型

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根癌土壤杆菌接合转移和生物型特性的遗传学研究

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微生物学报 1989年第3期29卷 187-194页

作者：苏鸿声相望年戴秀玉陆德如中国科学院微生物研究所第二军医大学分子遗传学教研室

用转座子Tn5-Mob和辅助诱动转移质粒R 68.45将根癌土壤杆菌(Agrobactcrium tumefaciens)生物型(Biotype)Ⅱ和Ⅲ接合转移到具三重缺陷的生物型Ⅰ的菌株中,获得了七组转移接合子。通过对其中六组转移接合子生物型分类的主要生理生化特性(3... 详细信息

用转座子Tn5-Mob和辅助诱动转移质粒R 68.45将根癌土壤杆菌(Agrobactcrium tumefaciens)生物型(Biotype)Ⅱ和Ⅲ接合转移到具三重缺陷的生物型Ⅰ的菌株中,获得了七组转移接合子。通过对其中六组转移接合子生物型分类的主要生理生化特性(3-酮基乳糖反应、石蕊牛奶反应、赤藓糖醇产酸、乙醇产酸、松三糖产酸、粘酸产碱及在New和Keer的选择性生长培养基上能否生长等)测试,发现这些性状通过接合转移而被转移到受体菌中。

关键词：根癌土壤杆菌接合转移生物型

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