检索结果-内蒙古大学图书馆

生物工程学报 2001年第5期17卷 553-556页

作者：郭瀛军吴丹颜宏利孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

在已获得的囊尾蚴膜联蛋白 (Annexin) 32cDNA的基础上 ,以PCR的方法在cDNA两端加上酶切位点 ,插入原核表达载体pJLA 5 0 3,热诱导表达后 ,外源蛋白大部分以可溶形式表达 ,表达量占菌体总蛋白的 35 %。经(NH4) 2 SO4分级沉淀、DEAE阴离... 详细信息

在已获得的囊尾蚴膜联蛋白 (Annexin) 32cDNA的基础上 ,以PCR的方法在cDNA两端加上酶切位点 ,插入原核表达载体pJLA 5 0 3,热诱导表达后 ,外源蛋白大部分以可溶形式表达 ,表达量占菌体总蛋白的 35 %。经(NH4) 2 SO4分级沉淀、DEAE阴离子交换层析及Sephacry1S 2 0 0凝胶过滤层析得到电泳单一条带。

关键词：膜联蛋白基因表达分离纯化大肠杆菌囊尾蚴寄生虫

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人癌胚抗原与新城疫病毒HN基因共表达载体的构建及表达

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生物工程学报 2000年第5期16卷 641-644页

作者：魏林戴建新孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

The eukaryotic expression plasmid (pcDNA3 CEA)containing with the gene coding for the Carcinoembryonic antigen(CEA) had been gotten with RT PCR and gene recombination *** enzymolysis,ligation and other techniques,an eukaryotic coexpression plasmid(pcDNA3 CEA/HN)containing two expression unites of CEA and Newcastle disease virus HN gene that may have the function of immunoenhancement had been *** plasmid will lay a foundation for further researching CEA nucleiotide vaccine,adjuvant and their effect of special antitumor immune.

关键词：癌胚抗原新城疫病毒HN-基因共表达质粒疫苗

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猪囊尾蚴抗原cC1与γ-干扰素融合蛋白在大肠杆菌中的表达

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1999年第4期17卷 215-217页

作者：郭瀛军吴丹孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

目的：构建含猪囊尾蚴抗原ｃＣ１ｃＤＮＡ与猪γ干扰素（ＩＦＮγ）的融合表达载体。方法：从已克隆的含人猪囊尾蚴共通抗原ｃＣ１的质粒中，用ＰＣＲ方法扩增出含酶切位点及接头的ｃＣ１和ＩＦＮγｃＤ... 详细信息

目的：构建含猪囊尾蚴抗原ｃＣ１ｃＤＮＡ与猪γ干扰素（ＩＦＮγ）的融合表达载体。方法：从已克隆的含人猪囊尾蚴共通抗原ｃＣ１的质粒中，用ＰＣＲ方法扩增出含酶切位点及接头的ｃＣ１和ＩＦＮγｃＤＮＡ，两ｃＤＮＡ经接头融合后构建成融合形式的原核表达载体转入大肠杆菌ＸＬ Ｂｌｕｅ。结果：经酶切分析，表明重组载体中含１５ｋｂ插入片段。ＳＤＳ ＰＡＧＥ显示一５２ｋＤａ的诱导产物。结论：猪ＩＦＮγ和猪囊尾蚴抗原ｃＣ１融合ｃＤＮＡ在大肠杆菌中获得表达。

关键词：囊尾蚴病融合蛋白 γ-干扰素

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猪囊尾蚴抗原cC1在大肠杆菌中的克隆及高效表达

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2000年第1期18卷 37-39页

作者：陈蕊雯林懿孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

[目的 ]在大肠杆菌中克隆及高效表达猪囊尾蚴抗原cC1。 [方法 ]将cC1cDNA片段以BamHI和PstI克隆到pGEM 3Z载体 ,改换限制性内切酶位点成BamHI和PstI,加上人工接头PstI BamHI XhoI后 ,克隆到pGEX 5T ,构建重组原核表达载体pGE X5T cC1。 ... 详细信息

[目的 ]在大肠杆菌中克隆及高效表达猪囊尾蚴抗原cC1。 [方法 ]将cC1cDNA片段以BamHI和PstI克隆到pGEM 3Z载体 ,改换限制性内切酶位点成BamHI和PstI,加上人工接头PstI BamHI XhoI后 ,克隆到pGEX 5T ,构建重组原核表达载体pGE X5T cC1。 [结果 ]培养 3h、IPTG诱导 6h ,cC1表达量最高 ,表达量占细菌总量的 5 7% ,Westernblotting结果表明猪囊尾蚴抗原cC1蛋白与囊尾蚴病猪血清有特异性的结合条带。 [结论 ]猪囊尾蚴抗原cC1在大肠杆菌中获得高效表达。

关键词：囊尾蚴抗原基因表达克隆大肠杆菌

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人IL-2真核表达质粒对副肌球蛋白核酸疫苗的免疫调节作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2002年第6期22卷 622-624页

作者：王庆敏陈蕊雯吴丹孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

目的　观察IL 2表达质粒对副肌球蛋白 (AgB)核酸疫苗的免疫调节作用。方法　将人的IL 2全长cDNA插入到真核表达质粒pcDNA3中构建成pcDNA3 IL 2重组质粒 ;然后接种C5 7BL 6小鼠 (分为pcDNA3组、AgB组、联合免疫组 ) ,ELISA法检测小鼠血... 详细信息

目的　观察IL 2表达质粒对副肌球蛋白 (AgB)核酸疫苗的免疫调节作用。方法　将人的IL 2全长cDNA插入到真核表达质粒pcDNA3中构建成pcDNA3 IL 2重组质粒 ;然后接种C5 7BL 6小鼠 (分为pcDNA3组、AgB组、联合免疫组 ) ,ELISA法检测小鼠血清中的IgG和IgG2a的水平 ;用MTT法检测小鼠脾细胞增殖反应 ,用ELISA法检测其分泌的IL 2和IL 4的水平。最后在仔猪中进行攻击实验 ,观察pcDNA3 IL 2质粒的免疫刺激作用。结果　注射疫苗后 ,pcDNA3 IL 2协同注射组增强了副肌球蛋白特异性的IgG和IgG2a的水平 ,增强了脾细胞的增殖反应 ,提高了其分泌IL 2的水平 ,但对IL 4的水平产生轻微影响。仔猪攻击实验中 ,共同注射IL 2基因组提高了仔猪的相对保护率。结论对于副肌球蛋白核酸疫苗而言 ,人的IL

关键词：副肌球蛋白猪囊尾蚴人IL-2 核酸疫苗免疫保护 ELISA法囊虫病

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猪γ干扰素基因的克隆、表达及其纯化

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生物工程学报 2001年第2期17卷 183-186页

作者：郭瀛军吴丹陈蕊雯孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

以RT PCR方法 ,从经丝裂原诱导的猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增出编码猪IFNγ的基因。经测序证实后插入载体pJLA 5 0 3 ,并实现在大肠杆菌中的高表达。表达产物以包涵体形式存在 ,经 7mol/L盐酸胍变性及精氨酸存在的情况下复性。再经DEAE... 详细信息

以RT PCR方法 ,从经丝裂原诱导的猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增出编码猪IFNγ的基因。经测序证实后插入载体pJLA 5 0 3 ,并实现在大肠杆菌中的高表达。表达产物以包涵体形式存在 ,经 7mol/L盐酸胍变性及精氨酸存在的情况下复性。再经DEAE Sepharose离子交换柱、Sephdex 2 0 0凝胶过滤柱分离获得电泳单一纯猪IFN γ蛋白 ,细胞病变抑制实验检测纯化产物有干扰素活性。

关键词： γ干扰素基因表达分离纯化大肠杆菌

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小鼠锌指蛋白基因ZF-12基因剔除的ES细胞系的建立

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Acta Genetica Sinica 2002年第10期29卷 860-864页

作者：厉建中杨桦傅继梁第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

利用小鼠锌指蛋白ZF 12基因组DNA片段 ,构建了针对小鼠ZF 12基因座的替换型打靶载体pSSC TV 10 .5。经限制性核酸内切酶酶切及部分测序鉴定其结构正确后 ,通过电穿孔将线性化打靶载体导入ES细胞内 ,经G4 18/GANC双药筛选和分子鉴定 ,获... 详细信息

利用小鼠锌指蛋白ZF 12基因组DNA片段 ,构建了针对小鼠ZF 12基因座的替换型打靶载体pSSC TV 10 .5。经限制性核酸内切酶酶切及部分测序鉴定其结构正确后 ,通过电穿孔将线性化打靶载体导入ES细胞内 ,经G4 18/GANC双药筛选和分子鉴定 ,获得 4个ZF 12 + /-基因的ES细胞杂合子克隆 ,其生长状态良好 ,为进一步建立ZF 12基因剔除的小鼠动物模型创造了条件。

关键词：小鼠锌指蛋白基因 ZF-12 基因剔除 ES细胞系基因打靶胚胎干细胞

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基于凝血因子IX基因剔除小鼠建立血友病乙转基因动物模型

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Acta Genetica Sinica 2002年第7期29卷 594-598页

作者：车文良贺艳姚真真李坚傅继梁第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

为在凝血因子IX基因剔除小鼠基础上建立基因组中整合有含特定点突变的人凝血因子IX基因表达载体的转基因小鼠家系 ,为血友病乙的研究提供更接近临床实际的动物模型。利用体外定点突变技术 ,构建含有特定点突变的人凝血因子IX基因表达载... 详细信息

为在凝血因子IX基因剔除小鼠基础上建立基因组中整合有含特定点突变的人凝血因子IX基因表达载体的转基因小鼠家系 ,为血友病乙的研究提供更接近临床实际的动物模型。利用体外定点突变技术 ,构建含有特定点突变的人凝血因子IX基因表达载体 ,该载体包括由人凝血因子IX编码区及第一内含子构成的人凝血因子IX基因(hFIXml)、4个拷贝的MCK增强子 (MCKe)、鸡 β -肌动蛋白启动子 (bA)及PolyA ,命名为pMe4bAIXml质粒。将其线性化后 ,用显微注射法注射入 817只凝血因子IX基因剔除小鼠受精卵雄原核 ,再将它们分别回输 4 5只假孕受体母鼠的输卵管中 ,共产仔 6 9只 ,存活 6 3只。采用PCR与基因组Southern杂交筛选法鉴定小鼠 ,证实 6只小鼠基因组中整合有含特定点突变的pMe4bAIXml质粒 ,并对 1只小鼠的PCR产物进行测序。

关键词：血友病乙转基因小鼠模型点突变人凝血因子IX基因

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组蛋白脱乙酰化酶及其与基因转录的关系

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生物化学与生物物理进展 2000年第6期27卷 609-612页

作者：陈坚张晓琴傅继梁上海第二军医大学军队卫生教研室上海200433 上海第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所上海200433

含有组蛋白脱乙酰化酶活性的分子有两类 :一类是与酵母RPD3同源的分子 ,另一类是与RPD3不同源的分子 .它们各有其不同的来源 ,存在于各自的复合物中 ,催化不完全相同的组蛋白或其他蛋白质脱乙酰化 ;这些脱乙酰化酶与基因转录的调控存在... 详细信息

含有组蛋白脱乙酰化酶活性的分子有两类 :一类是与酵母RPD3同源的分子 ,另一类是与RPD3不同源的分子 .它们各有其不同的来源 ,存在于各自的复合物中 ,催化不完全相同的组蛋白或其他蛋白质脱乙酰化 ;这些脱乙酰化酶与基因转录的调控存在着密切的关系。

关键词：组蛋白脱乙酰化酶基因转录组蛋白脱乙酰化

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五例^(60)Co源辐射事故受照者心理行为随访观察

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中华放射医学与防护杂志 1998年第1期18卷 68-71页

作者：朱德增卢峰峰江晓滨第二军医大学长海医院第二军医大学医学教育教研室

五例６０Ｃｏ源辐射事故受照者心理行为随访观察朱德增卢峰峰江晓滨核辐射事故对受照者不仅会引起机体损伤，对心理行为也可能产生影响。在上海“６．２５”６０Ｃｏ源辐射事故所致５例骨髓型急性放射病临床治愈后，我们采用心理行为测... 详细信息

五例６０Ｃｏ源辐射事故受照者心理行为随访观察朱德增卢峰峰江晓滨核辐射事故对受照者不仅会引起机体损伤，对心理行为也可能产生影响。在上海“６．２５”６０Ｃｏ源辐射事故所致５例骨髓型急性放射病临床治愈后，我们采用心理行为测试方法对他们进行了随访，现将结果报...

关键词：钴60 急性放射病心理行为随访

来源：评论

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